甲壳纲(Crustacea)十足目(Decapoda)动物消化系统研究进展

综述国内外甲壳纲十足目动物成体消化道、消 化腺结构以及幼体消化系统发育等方面的研究成果，并对该领域与国外的差距及今后的研究 方向进行了探讨。

东海浮游十足类(Decapods)多样性研究

根据1997～2000年对东海23°30'～33°N、118°30'～128°E海域4个季节海洋调查资料,运用定量、定性方法, 探讨了东海浮游十足类的种类组成、时空分布、多样性及与环境的关系.结果显示:东海4季共出现浮游十足类9种,其中秋季4种,冬季5种,夏春季各7种;中型莹虾、细鳌虾、汉森莹虾、刷状莹虾和正型莹虾是常见种,其余4个为稀有种.春季转至冬季,夏季转至秋季、秋季转至冬季,其种类随着季节的变换而出现更替.种数分布在冬春季主要受温度的影响,夏秋季的主要影响因子是盐度.冬春季种类变化主要与台湾暖流与黄海冷水团季节性的进退以及东海气温季节性变化有关,夏季种类分布特征与沿岸流和暖流势力强弱有关.常见种对不同季节的环境适应性较强,其出现频率和个体丰度远大于稀有种.中型莹虾的大量出现是影响东海浮游十足类多样性指数值较低的主要原因.

快速检测十足目虹彩病毒1 RPA-LFD方法的建立及初步应用

为建立一种高效、快速、简便的十足目虹彩病毒1(DIV1)检测方法,本研究以DIV1 ATPase基因为检测靶标,设计特异性引物和探针,采用方阵法优化反应温度和时间,结果显示,重组酶聚合酶扩增技术(RPA)最优反应温度为37℃,时间为15 min,结果观察时间为5 min,检测过程总时长为20 min,初步建立了DIV1的重组酶聚合酶扩增技术结合侧向流试纸条方法(RPA-LFD)。提取其他7种常见虾类病原基因组与DIV1基因组,采用该方法检测,分析其特异性;构建重组质粒标准品p UC57-DIV1,10倍倍比稀释后采用该方法检测,分析其灵敏性;以3种不同浓度的重组质粒标准品为模板进行批间、批内重复性试验。结果显示,该方法能特异性检测DIV1,与虾类其他常见易感病原均无交叉反应;其对重组质粒标准品的检测限为1×10^(1)拷贝/μL;批内和批间重复性试验的检测结果均一致,重复性好。利用该方法与已发表的荧光定量PCR(qPCR)同时检测15份感染DIV1的罗氏沼虾样品及40份临床样品,结果显示,该方法的阳性检测率为69.09%(38/55),阴性率为30.91%(17/55),与q PCR检测结果一致,二者的阳性符合率、阴性符合率、总符合率均为100%。综上所述,本研究建立的RPA-LFD方法检测DIV1具有快速、简便、灵敏度高且特异性强的特点,且不需要精密昂贵的仪器设备,为基层实验室及现场检测提供了可行技术手段。

IL GAMBERO AMERICANO Orconectes limosus(Rafinesque),UN NUOVO DECAPODE NEARTICO NELLE ACQUE DOLCI DEL NORD ITALIA(Crustacea Decapoda Cambaridae)

The American Striped Cray Orconectes limosus(Rafinesque),a nearctic crustacean new in theitalian freshwaters(Crustacea Decapoda Cambaridae).The American Striped Cray Orconectes limosus,introduced in several countries of Central Europe,is also reported for the first time for Italy.This crayfishseems to become well established in the Iseo Lake(Northern Italy).The Author underlines the risk of a possibleterritorial expansion of this species in the Po river drainage.

凡纳滨对虾HMIT基因的克隆与表达分析

为了解H+/肌醇转运蛋白(H+/myoinositol transporter,HMIT)基因在肌醇跨膜转运中发挥的作用,克隆了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的HMIT基因,命名为Lv-HMIT,并分析了Lv-HMIT的结构和表达特征。Lv-HMIT的开放阅读框为1 650 bp,编码549个氨基酸。物理性质显示,它是一种不稳定的亲水性蛋白质,二级结构与三级结构预测都显示其主要由α螺旋和无规则卷曲为主;跨膜结构分析显示,Lv-HMIT存在11个跨膜螺旋结构;亚细胞定位显示,它分布于质膜、内质网和线粒体。多重比对发现,Lv-HMIT的跨膜结构和糖基化位点都比较保守。系统进化显示,Lv-HMIT与雪蟹(Chionoecetes opilio)的HMIT先聚为一支,再与其他节肢动物聚类。实时荧光定量PCR结果显示,Lv-HMIT mRNA在肝胰腺中表达量最高,其次是鳃,在心、胃、眼柄、肠、肌肉和血细胞等组织中有少量表达。Lv-HMIT mRNA从无节幼体期检测到表达,在变态至蚤状幼体、糠虾幼体和仔虾各阶段时都呈现上调表达,说明它可能与幼体变态发育过程有关。十足目虹彩病毒(decapod iridescent virus 1, DIV1)感染24 h后,Lv-HMIT mRNA在肝胰腺中表达显著下调,而鳃中表达量显著上调,显示它参与了对虾对病毒的免疫响应过程。研究结果可为深入了解凡纳滨对虾HMIT的结构功能及在对虾幼体发育、病毒免疫的调控机制提供基础数据。

凡纳滨对虾LvML1基因克隆与表达分析

髓样分化蛋白2相关脂质识别(ML)蛋白是无脊椎动物先天免疫与脂质代谢方面具有重要功能的一类蛋白。克隆凡纳滨对虾1个新的ML基因cDNA全序列,命名为LvML1,包含254 bp的5′非编码区、913 bp的3′非编码区和462 bp的开放阅读框,开放阅读框共编码153个氨基酸。LvML1蛋白具有7个半胱氨酸残基,预测可形成3对二硫键,且具有1个典型ML家族结构域。多重序列对比发现,ML结构域和半胱氨酸残基位置均相对保守。系统进化显示,LvML1蛋白与斑节对虾、日本囊对虾、美洲螯龙虾等甲壳动物的ML蛋白聚为一支。实时荧光定量PCR结果显示,LvML1基因在所有检测组织中均有表达,在心脏中表达量最高。发育表达结果显示,LvML1基因自无节幼体期已有表达,在变态至溞状幼体期、糠虾幼体期及仔虾的每次转换均上调表达,表明其参与了对虾幼体的发育过程。十足目虹彩病毒1人工感染24 h后,LvML1基因在肝胰腺和鳃中表达量下降,差异极显著(P<0.01),说明其参与了对虾抗病毒的先天免疫过程。本试验结果可为了解凡纳滨对虾ML蛋白家族的结构功能及其在对虾先天免疫和幼体发育中的重要作用提供基础资料。

上海主养区凡纳滨对虾8种流行病病原监测及分析

为进一步掌握上海地区养殖凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)病原的流行趋势及特点,定期对上海主养区的凡纳滨对虾开展了8种流行病病原监测及分析工作。51份样品的分子检测和细菌分离鉴定结果显示,有4种病原检测出阳性,其中虹彩病毒1(DIV1)阳性检出率为29.41%,传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)为3.92%,致急性肝胰腺坏死病副溶血弧菌(Vp AHPND)为1.96%,副溶血弧菌(Vp)为19.61%;而白斑综合征病毒(WSSV)、桃拉综合征病毒(TSV)、偷死野田村病毒(CMNV)、虾肝肠胞虫(EHP)等4种病原未检出。408项病原检测结果中,4种病原的阳性总样本数量为28份,总体阳性率为6.86%。结果表明,上海地区养殖凡纳滨对虾的病原携带率处于较低水平,DIV1、副溶血弧菌(Vp)是携带的主要病原。在实际生产中应根据病原流行特点,从苗种选购、养殖过程管理、药物选用等方面进行综合防控,减少病害发生。

四种十足目甲壳动物遗传差异的RAPD分析

采用RAPD技术，对分类阶元不同的四种十足目甲壳动物：克氏原螯虾、汉水华溪蟹、日本绒螯蟹合浦亚种和中华绒螯蟹，进行了遗传多态性的研究。四个物种DNA库的扩增结果表明，随着亲缘关系由近变远，物种间的相似率依次减小，由56．1％下降到22．3％。用UPGMA方法作聚类分析构建出物种的系统树图，反映出四个物种对应的种、科间、科间以上遗传差异逐步增大，这与以形态标记为主的分类结果相一致。在同工酶分析难以揭示差异的两种绒螯蟹中，用RAPD分析观察到明显的种间差异。两种绒螯蟹个体的扩增图谱分析结果为，中华绒螯蟹个体间的平均相似率为56．9％，日本绒螯蟹合浦亚种个体间为661％，两种绒螯蟹个体间的平均相似率则为51.9％。日本绒螯蟹合浦亚种个体间的平均相似率显著高于中华绒螯蟹个体间的平均相似率，异种绒螯蟹个体间的平均相似率显著低于同种个体间的平均相似率．

几种环境因子对虾蟹类非特异性免疫的影响

综述了近10a国内外有关重金属、氨态氮、亚硝酸盐、有机污染物等几种环境因子对虾蟹类非特异性免疫影响的研究成果,以期为通过改善养殖环境条件提高虾蟹类自身免疫抗病力提供理论依据。同时,为进一步深入开展该领域的研究工作积累资料。

十足目甲壳动物促雄性腺研究概述

YE Hai Hui\ LI Shao Jing\ WANG Gui Zhong (Department of Oceanography, Xiamen University\ Xiamen\ 361005,China)

虾蟹类卵黄蛋白原的研究进展

简述了十足目动物中重要虾蟹类卵黄蛋白原(vitellogenin)的基因克隆及分子相关研究进展。分别从分子的合成转运、分子结构特征、分子进化、表达和激素调控、生物学功能等几个方面展开介绍,整理回顾了目前已被克隆鉴定的十足目动物Vg分子特征;指出了同源蛋白间存在的结构和功能的相似性;分析了分子间的系统进化关系;归纳了十足目Vg种间蛋白的主要特征,并且提出一些区别于其它物种的独特之处。以期为进一步深入开展卵黄蛋白分子研究积累资料,同时为虾蟹类卵巢发育机制研究提供理论依据。

虾蟹精子发育的营养及代谢研究概况

对雄性虾蟹的生殖营养及精子代谢作了综述。大量研究证实 ,在人工养殖条件下 ,雄性虾蟹的生殖力会出现明显下降 ,其原因与人工饲养条件下营养缺乏有关。精子储存在贮精囊和纳精囊中时 ,不断进行旺盛的代谢活动 ,其代谢类型主要是无氧代谢 ,而代谢的能量物质大部分种类为碳水化合物 。

生物能量学理论及其虾蟹类的研究进展

生物能量学是研究能量在生物体内转换的科学.本文重点介绍动物个体水平上的能量转换的基本理论和方法.能量收支方程为:C=G+R+U+F,其中,R=SDA+RS+RA;虾蟹类能量收支方程为:C=G+R+U+F+E.研究上式各组分与环境因子和内源因子的关系,及各组分间的定量关系是生物能量学的主要内容.本文还介绍了虾蟹类生物能量学研究一些新进展,如各种生态因子对虾蟹类能量收支的影响、SDA与营养因子关系的研究和虾蟹类响应环境突变的能量学机制的研究等.最后,对生物能量学在种群营养动力学研究方面的应用、种群水平的生物能量学研究和生物能量学在水产养殖以及在育种方面的应用等方面作了展望.

十足目节肢动物化石在关岭生物群的发现

云南罗平岔江新江底村发现的十足目节肢动物化石产出于三叠统卡尼阶小凹组,是十足目化石在关岭生物群的首次发现,也是此类化石在中国上三叠统中首次报道。此发现增加了关岭生物群的多样性,为今后在中国三叠纪其他特异埋藏化石库中寻找更多的十足目节肢动物化石提供了新的线索。

真虾部动物精子结构研究进展

综述了近年来真虾部甲壳动物精子结构研究进展 ,对精子发生过程中细胞核及细胞质尤其是几种主要细胞器的变化作了分析 。

东海浮游十足类数量分布与环境的关系

根据1997～2000年东海23°30′～33°N、118°30′～128°E海域4个季节海洋调查资料,运用定量、定性方法,探讨东海浮游十足类(Decapods)总丰度的平面分布、季节变化以及变化的动力学机制.结果表明,浮游十足类总丰度有明显的季节变化,夏季最高为451ind/(100 m3),秋季次之为71ind/(100m3),春季最低为24ind/(100m3).北部近海(29°30′～33°N、123°30′～125°E)水域春季几乎没有分布,除冬季外,总丰度基本呈近海高于外海的分布趋势.中型莹虾(Lucifer intermedius)是影响总丰度变化最主要的种类;夏季与秋季及四季总丰度的变化同水温有非常显著的线性相关关系,与盐度的相关关系不显著;冬季则仅仅与盐度有关,春季则与温度和盐度相关.从春季到夏季,高丰度区随台湾暖流向北扩展,并在闽浙沿岸水团与台湾暖流交汇处形成高丰度分布区[＞2 500ind/(100 m3)];从夏季到秋季,浮游十足类随着台湾暖流继续向北,在与长江冲淡水交汇处形成较高丰度区.水温和海流是影响东海浮游十足类总丰度分布的主要环境因子.

东海浮游十足类优势种环境适应的研究

根据1997-2000年东海23°30'～33°N、118°30'～128°E海域4个季节海洋调查资料,对东海浮游十足类优势种的生态特征进行了研究,探讨这些优势种对环境的适应及与渔场的关系.结果表明:主要优势种有中型莹虾Lucifer intermedius、刷状莹虾Lucifer penicillifer、细螯虾Leptochela gracilis和汉森莹虾Lucifer hanseni.前2个优势种是近海暖水种,细螯虾是广温高盐种,汉森莹虾是外海暖水种.近海暖水种不但平均丰度高,而且优势度和占浮游十足类总丰度的百分比均大于其它优势种.广温高盐优势种具有较高的出现率,细鳌虾丰度不高,但在每个季节、各个海区均有出现.在夏季,低温环境适应力差的暖水种往往有很高的聚集强度.与东海其它类群的浮游动物不同,浮游十足类以夏季丰度最大.就个体数量而言,以近海暖水种个体居多,主要分布在位于东海沿岸河口附近的鱼类产卵场.