梅花鹿三种深加工制品的营养保健成分研究

分析测定了鹿茸血酒，鹿心片和鹿鞭精中的蛋白质、脂肪、总糖、维生素及无机微量元素的含量。结果表明，它们是优良的营养保健佳品。

梅花鹿和驯鹿外周血和茸血对牛蛙离体心脏心肌收缩力和心率的影响

为探讨鹿血对牛蛙离体心脏收缩力和心率的影响,采用斯氏法离体蛙心,分别用不同的鹿血对离体心脏进行灌流,用BL420E生物技能试验系统记录离体心脏给药前、后心肌收缩力和心率的变化。试验结果表明：梅花鹿外周血、梅花鹿茸血、驯鹿外周血和驯鹿茸血与任氏液对照组相比心肌收缩力增加42.27%-126.62%,差异极显著（P〈0.01）,其中梅花鹿外周血和驯鹿外周血较比梅花鹿茸血和驯鹿茸血对增强离体蛙心心肌收缩力更为明显,但对各组间的心率没有影响（P〉0.05）。

鹿心补心片对心血管系统的生物效应

以梅花鹿鹿心为主要原料制成的鹿心补心片能显著增加大白鼠冠脉血流量、强壮大白鼠的心肌；显著增加小白鼠对常压、低压缺氧的耐受力；保护药物所致的氧耗量增加的小白鼠耐缺氧能力。

梅花鹿心脏组织cDNA文库的构建

[目的]构建梅花鹿心脏cDNA文库。[方法]提取梅花鹿心脏总RNA,纯化mRNA;合成双链cDNA,连接载体,并电转化至感受态细胞;测定文库的克隆数、重组率及插入片段大小。[结果]经鉴定,所构建梅花鹿心脏组织cDNA文库,库容量为3.8×106个克隆,重组率为100%,插入片段大小为0.5～2.0kb,平均长度约为1.0kb。[结论]所构建cDNA文库的各项指标均达到要求。

鹿心的性状与紫外光谱鉴别

本文对梅花鹿心、马鹿心的鲜品、干品(商品)进行了性状、荧光与紫外光谱鉴别,其鹿心血的乙醇提取液在紫外310nm处有最小吸收。

压力负荷对大鼠血浆CGRP的改变及鹿角方的影响

为研究压力负荷增加大鼠血浆降钙素基因相关肽 (CGRP)的改变及鹿角方的影响。 36只大鼠建立腹主动脉狭窄所致压力负荷增加大鼠充血性心力衰竭 (CHF)心肌肥厚模型 ,随机分为 3组 ,假手术组 (A)、模型组 (B)和鹿角方组(C) ,观察左室重量指数 (LVMI) ,并检测血浆CGRP。结果 :B组LVMI明显高于A组 (P <0 0 0 1) ,C组LVMI与B组比较有明显下降 (P <0 0 1) ;B组血浆CGRP水平明显低于A组 (P <0 0 5 ) ,C组血浆CGRP较B组显著上升 (P <0 0 5 )。提示压力负荷增加所致充血性心力衰竭心肌肥厚大鼠血浆降钙素基因相关肽水平是降低的 ;鹿角方具有升高该大鼠血浆CGRP水平 ,逆转心肌肥厚的作用。

鹿心肽对小鼠急性酒精性肝肾损伤的干预作用

探究鹿心肽对小鼠酒精性肝肾损伤的影响。选用20只雄性健康昆明种小鼠,随机分为空白组、对照组、鹿心肽低剂量、高剂量组4组。除空白组外,其他3组灌胃56度白酒,建立酒精性肝肾损伤模型。称量小鼠体重及器官湿重,测得肝肾指数,通过检测血清中抗氧化指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)含量以检测氧化应激水平,并使用酶标仪及试剂盒对乙醛脱氢酶(ALDH)活性进行检测;在用Trizol取得肝肾总RNA后用qPCR检测肝肾脏白介素-1β (IL-1β)、白介素-6 (IL-6)及肿瘤坏死因子(TNF-α) mRNA表达水平。结果表明:与对照组对比,鹿心肽高低剂量组在肝脏指数上均有显著下降,鹿心肽高低剂量的肝脏指数也显著低于对照组,而低剂量肝脏指数明显低于高剂量组;经检测显示,空白组与对照组的肾脏指数有极显著差异,而对照组与低剂量组有极显著差异,与高剂量组则为显著差异;在SOD含量方面,鹿心肽高低剂量组相对对照组均有不同程度上升;相比对照组,鹿心肽高低剂量组MDA含量均有降低;与对照组相比,鹿心肽高低剂量组在ALDH数值上均有极显著上升;在TNF-α、IL-1β、IL-6的表达水平上,鹿心肽高低剂量组相对于对照组有显著下降。说明鹿心肽对小鼠酒精性肝肾损伤有一定的干预与预防作用。

中药材鹿心分子鉴定方法及检测试剂的研究

目的建立中药材鹿心DNA指纹鉴定方法,研发鹿心DNA检测试剂盒。方法以梅花鹿和马鹿mtDNA Cytb基因作为靶基因,设计小片段特异性引物,研制鹿心DNA提取及PCR检测试剂;应用分子克隆及测序技术,克隆鹿心对照药材;并对试剂的特异性、重现性、稳定性及灵敏度进行考察;对市售鹿心样品进行真伪鉴定。结果自主研发的试剂提取鹿心的DNA浓度纯度均达到PCR的要求;在退火温度为63℃时引物的特异性最强;克隆测序后的鹿心DNA序列与鹿心mtDNA Cytb特异指纹区段序列一致;自主研发的试剂重现性、稳定性良好,灵敏度达到0.5%;对市售30个鹿心样品进行检测,伪品率为40%。结论建立的鹿心DNA指纹鉴定方法特异、准确、可靠,研制的鹿心DNA检测试剂盒操作简便、结果稳定。

鹿心酶解条件的优化及氨基酸组分的初步检测

采用酶解法提取家养梅花鹿鹿心多肽蛋白并初步检测其中的氨基酸组分。首先通过试验从木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶和中性蛋白酶中筛选出合适的水解用酶。然后通过单因素试验和正交试验优化出最佳的液料比、酶用量和酶解时间。最后采用UPLC法初步检测鹿心酶解液中的氨基酸组分。试验结果表明:选择木瓜蛋白酶作为最佳水解酶、酶用量为2000 U/g、液料比为9:1(v/w)、酶解时间为4.5 h,在最优条件下多肽提取率为14.04%。UPLC色谱图结果显示,鹿心酶解液中含有标准样品组中的17种氨基酸,且含量比无酶解作用的鹿心提取液高很多,营养丰富,具有潜在的保健价值。