胎盘及其提取物的化学成分、药理作用及临床应用研究进展

对人和动物胎盘及其提取物的化学成分、药理作用及临床应用方面的研究进展进行了综述。当前 ,对健康产妇的胎盘(紫河车)化学成分研究较深入 ,临床应用较多 ,主要应用于医药行业 ,但对其加工相对较原始 ,应用范围尚待拓宽 ;羊胎盘产品 ,主要用于营养保健品和化妆品行业 ;对鹿胎盘的研究仅有少量报道 ,在未来将有广阔的发展前景 ,而对其他动物如猪、牛等胎盘的研究仅有零星报道。因此 ,对已开发的胎盘产品应对其活性物质及其机理进行深入研究 ,同时对具有较大发展前景的鹿胎盘产品进行研究开发势在必行 ,而数量多 ,来源广的猪、牛等动物的胎盘亦有很大的开发价值。

β-环糊精鹿胎盘肽微胶囊的制备

本实验以β-环糊精为壁材,利用超声波技术制备鹿胎盘肽微胶囊。通过正交试验研究微胶囊化过程中的最佳工艺条件。结果表明:用超声波法制备鹿胎盘肽的最佳工艺条件是:鹿胎盘肽:β-环糊精为1:20、超声功率为160W、超声时间为100min、超声温度为30℃,此工艺条件下包埋率为60.63%。

双酶水解法制备鹿胎盘活性多肽

采用双酶水解的方法制备鹿胎盘生物活性肽。以水解度和酸溶性肽得率为指标,确定了木瓜蛋白酶与胰蛋白酶为最优酶系组合。通过正交实验得出酶解工艺条件为:pH 7.0、温度52℃、酶活添加量6 000u/g(料)、底物浓度10%、酶比为1∶1,水解时间3 h,在此条件下对鹿胎盘进行水解,水解度为34.5%,酸溶性多肽得率为81.56%。

活性炭对梅花鹿胎盘寡肽脱色脱腥条件的优化研究

利用活性炭的吸附作用,对梅花鹿胎盘寡肽脱色脱腥的最佳工艺进行研究。通过正交试验方差分析研究脱色脱腥过程中的最佳工艺条件。各试验因素对脱色率的影响顺序为:添加量>脱色温度>脱色时间;对于寡肽损失率的影响顺序为:添加量>脱色时间>脱色温度。结果表明:利用活性炭对梅花鹿胎盘寡肽脱色脱腥的最佳工艺条件为:活性炭用量2.0%,脱色pH值11,脱色温度70℃,脱色时间60min。此工艺条件下脱色率为74.8%,寡肽损失率为19.5%,无腥味。

利用层析法纯化鹿胎盘多肽的研究

利用离子交换柱及凝胶层析柱对鹿胎盘多肽进行纯化,试验结果表明,鹿胎盘多肽粗提溶液利用Q- Sepharose Fast Flow柱,用5 mmol/L pH 8.0的Tris-HCl缓冲液洗脱得到3个组分,经E-玫瑰花环试验证实,第2个组分生物活性较高,使脱受体的人体T淋巴细胞的E-玫瑰花环率恢复到62.5%。将分离出的较高活性组分经Sephadex G-50凝胶层析柱,用50 mmol/L的NaCl缓冲溶液洗脱,得到2个组分,第2个组分具有较高活性,使脱受体的人体T淋巴细胞的E-玫瑰花环率恢复到72.5%,其特征吸收峰在228 nm处。

鹿胎盘多肽稳定性的研究

研究了鹿胎盘多肽的稳定性,发现在pH6.0￣8.0范围内鹿胎盘多肽比较稳定,60℃左右的加热温度对其稳定性影响不大。葡萄糖、丙三醇、蔗糖、甘露醇对鹿胎盘多肽的热变性有明显的保护作用,其中以葡萄糖的保护效果最好,保护剂的浓度为20%时较为适宜。

不同鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠延缓衰老的作用

观察了鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠某些衰老生化指标的影响。结果表明:鹿胎及胎盘制剂可显著或极显著抑制大鼠脑和肝脏中MAO活性,其中鹿胎纯粉和鹿胎制剂Ⅱ号处理组。脑中MAO活性分别比对照组降低67.74%和66.73%(P<0.01);鹿胎制剂Ⅱ号处理组肝脏中MAO活性比对照组降低31.37%(P<0.05);不同处理组心肌和脑中脂褐质含量也有不同程度的降低(P>0.05)。上述结果表明,鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠具有一定的抗衰老作用,其中鹿胎制剂Ⅱ号的抗衰老作用效果最好。

梅花鹿胎盘多肽体外抗氧自由基及抗油脂氧化性能的研究

研究了鹿胎盘多肽的抗氧化性。鹿胎盘多肽具有清除羟基自由基(.OH)、超氧自由基(O2-.)和H2O2的能力,同时对油脂有一定的抗氧化作用。随着多肽浓度的增大,抗氧化能力进一步增强。当鹿胎盘多肽浓度达到200μg/mL时,对.OH、O2-.、H2O2的抑制率分别为42.4%、73.7%、65.2%。在猪油贮藏的第7d,加入200、300μL浓度为200μg/mL的鹿胎盘多肽,其抗氧化作用比0.02%的BHT分别高28.83%、33.95%。

超滤法分离梅花鹿胎盘寡肽的工艺研究

采用超滤法对梅花鹿胎盘中活性寡肽进行分离,考察料液质量分数、压力、温度、流速、浓缩倍数及操作时间因素对分离效果的影响,确定最佳分离工艺条件为料液质量分数1.5%、压力0.06MPa、温度30℃、流速2.0ml/s、浓缩倍数2.5倍、操作时间3min,分离后的样品中蛋白含量为56.22%。膜污染后用0.2%NaOH溶液浸泡2h,循环1h后,用盐酸浸泡1h,循环0.5h,再用水洗至中性,膜通量可得到较好的恢复,流量恢复率为0.834。

响应面法优化梅花鹿胎盘多肽超声波杀菌工艺

以酶解获得的梅花鹿胎盘多肽为原料,进行超声波杀菌,研究超声功率、超声时间和脉冲时间对多肽杀菌率的影响。利用响应面分析法确定了超声波杀菌的最佳工艺参数为:超声功率850 W、超声时间4.6 min、脉冲时间7 s,此时梅花鹿胎盘多肽的损失率为20.2%,多肽的杀菌率为87.5%,其中细菌总数为68 CFU/mL,大肠杆菌最大可能数为零,均符合国家标准。在最佳杀菌工艺条件下获得的梅花鹿胎盘多肽,对超氧阴离子自由基的清除率比未经杀菌处理的多肽仅降低了3.3%,对羟自由基的清除率降低了1.1%,对DPPH自由基的清除率降低了1.7%。这说明超声波杀菌后的梅花鹿胎盘多肽既达到了商业无菌的标准,又有效地保持了其生物活性。

鹿胎盘肽微胶囊技术的研究

分别以明胶、β-环糊精、多孔淀粉为包埋材料,利用超声波技术制备鹿胎盘肽微胶囊,比较了各微胶囊的性质,结果表明:明胶作为壁材,包埋率高于β-环糊精,但从整体的包埋效果来看,以β-环糊精为壁材的微胶囊溶解性非常好,产品无腥味,缓释作用强于以明胶为壁材的微胶囊。多孔淀粉-鹿胎盘多肽为芯材的微胶囊中,明胶作为壁材的包埋效果好于β-环糊精,其包埋率最大可达到55.33%,尽管两者的包埋率都较低,但缓释作用却表现得非常明显。微胶囊化的鹿胎盘多肽抗氧化性保持较好,不易吸潮,其中以多孔淀粉-鹿胎盘多肽为芯材,β-环糊精为壁材的微胶囊活性保持最好,贮藏9d后,抑制率仍可达到47.56%。

鹿胎盘生物活性多肽的制备及其药理作用研究

采用低温酶解法制备鹿胎盘生物活性多肽,通过正交试验确定了其水解最佳条件,并将上述提取液进行超滤,得到分子量在3 000道尔顿以下的混合肽,通过混合肽主要成分的分离、小鼠灌肠实验、细胞培养实验,研究其药理作用,结果表明,鹿胎盘生物活性多肽具有镇静作用,促进神经细胞和人皮肤细胞生长作用,具有很好的临床应用及美容保健开发价值。

利用反相液相色谱技术纯化梅花鹿胎盘肽的条件研究

利用反相液相色谱技术对梅花鹿胎盘肽进行纯化,考察三氟乙酸(TFA)的加入量、有机相的起始浓度、流速和温度对纯化效果的影响,确定最佳分离纯化条件为:色谱柱HypersilODSC18(250mm×4.6mm,5μm),流动相A液0.05%TFA-乙睛,B液0.05%TFA-水,30min内10%A～50%A,90%B～50%B线性梯度洗脱,流速1.0ml/min,温度30℃,检测波长214nm。

不同鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠免疫机能影响的研究

研究了鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠免疫器官指数、血清球蛋白含量和巨噬细胞吞噬率及吞噬指数的影响。结果表明,鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠胸腺和脾脏指数影响不显著(P>0.05);但提高了老年雄性大鼠血清球蛋白含量,其中鹿胎制剂Ⅰ号组最高,比对照组高出62.64%,与其他各组相比有显著差异(P<0.05);鹿胎制剂Ⅱ号组和人胎盘粉处理组大鼠巨噬细胞吞噬率和吞噬指数与对照组相比有极显著提高(P<0.01),说明鹿胎及胎盘制剂对老年雄性大鼠具有提高免疫机能的作用。

鹿胎膏、阿胶、紫河车补精益髓经验——仝小林三味小方撷萃

小儿五迟、五软,妇女产后精血亏虚,老年脑髓空虚是临床上常见的疑难病。仝小林院士认为,羸弱、或贫血或行迟,腰脊无力是本病临床辨识要点,需将大补精血、益髓充督贯穿治疗的始终。用药上,根据多年临床经验,精选鹿胎膏、阿胶、紫河车合成三味小方。临床常用剂量鹿胎膏3 g,阿胶9~30 g,紫河车3~6 g。

高效液相色谱法分离鹿胎盘多肽的研究

试验采用高效液相色谱法对鹿胎盘多肽进行分离,考察了洗脱方式及TFA对分离效果的影响,最终确定最佳分离条件为:上样量10ul;检测波长228nm;流速1.0ml/min;流动相A液0.05%TFA/乙腈,B液0.05%TFA/水,30min内10%A～50%A,90%B～50%B线性梯度洗脱。

梅花鹿胎盘免疫调节因子制备工艺

以梅花鹿鹿胎盘作为原料,制备具有生物活性的小分子活性物质——鹿胎免疫调节因子。通过正交试验优化超声功率、固液比、超声时间和丙酮量等因素,获得最优化鹿胎提取液制备工艺为超声功率400W、固液比1:2、超声时间120s、(提取液:丙酮比1:3),此条件下鹿胎提取液多肽质量浓度可达30.35mg/mL。之后,利用超滤法处理鹿胎提取液,可得到微黄色透明液体即为鹿胎免疫调节因子,主要含多肽(3.7±0.04)mg/mL、核酸(3.3±0.07)μg/mL、多糖(0.54±0.002)mg/mL,且超滤法显著优于透析法。

人参鹿胎葡萄酒工艺条件优化

以人参、鹿胎、黄精、金钗石斛、玫瑰花为原料,以葡萄酒为酒基经过加工、灭菌灌装制得人参鹿胎抗疲劳葡萄酒。分别采用渗滤法、热回流法、冷浸法制备人参鹿胎抗疲劳葡萄酒,以总皂苷的含量以及葡萄酒的感官评价为指标综合评价,筛选出最佳制备方法;然后以料液质量比、提取时间、提取次数为因素设计正交试验,以上述指标为依据,优选出最佳工艺条件。结果表明,选用冷浸法,通过正交试验得出最优的工艺条件:料液质量比1∶10、每次冷浸1 d、冷浸2次。此条件可以较充分的提取药材中的总皂苷同时还具有较高的感官评分。

梅花鹿鹿胎盘化学成分的初步研究

本实验对梅花鹿鹿胎盘的主要化学成分进行了初步测定。结果表明:鹿胎盘中可溶性蛋白含量为22.00%;总糖、还原糖和可溶性糖含量分别为6.037%、1.588%和3.271%;总粗脂肪、游离脂肪酸和磷脂含量分别为9.10%、1.34%和0.30%;鹿胎盘中钙和磷的含量分别为1.53%和14.51%;而碱性磷酸酶的含量为2741.2金氏单位。

梅花鹿胎盘发酵制备多肽的工艺条件优化

以梅花鹿胎盘为原料,利用枯草芽孢杆菌发酵制备胎盘多肽。以多肽得率和水解度为指标通过单因素试验结合响应面分析法优化发酵条件,确定梅花鹿胎盘发酵制备多肽的最佳发酵条件为:接种量2%、起始pH7.5、发酵温度31℃、发酵时间53h、摇瓶转速130r/min。经验证,在该最佳工艺条件下多肽得率可达55.43%。