米糠肽抗氧化活性的研究

通过测定米糠肽的还原力、抗卵黄脂蛋白的脂质过氧化能力、抗油脂过氧化能力以及H2O2诱导的红细胞氧化溶血试验和大鼠肝匀浆脂质过氧化试验研究了米糠肽的抗氧化作用。结果表明:米糠肽具有较强的还原力,对脂质过氧化和油脂过氧化均具有良好的抑制作用,并能抑制H2O2诱导的红细胞氧化溶血反应和肝组织匀浆脂质过氧化反应的发生,有望作为天然抗氧化剂及功能性食品得到开发应用。

脱脂米糠抗氧化肽的制备工艺研究

为了得到脱脂米糠抗氧化肽的最佳制备工艺,研究了胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶酶解脱脂米糠蛋白的进程特性以及不同的酶解条件对脱脂米糠抗氧化肽活性的影响。从5种蛋白酶中筛选出最合适的酶,通过单因素实验考察了底物浓度、加酶量、pH、温度以及时间对酶解产物水解度和ABTS自由基清除率的影响,在单因素实验的基础上,以酶解产物的ABTS自由基清除率为响应值,进行Box-Behnken中心组合实验。结果表明:选用碱性蛋白酶制备脱脂米糠抗氧化肽效果最好;最佳酶解工艺条件为加酶量1.8%、温度50℃、时间276 min、pH9.0、底物浓度5%;在最佳酶解工艺条件下,所得脱脂米糠抗氧化肽对ABTS自由基清除率可达71.85%。

体外化学模拟体系中米糠肽抗氧化活性的研究

通过测定米糠肽对DPPH自由基、亚硝酸盐、过氧化氢的清除能力。对Fe^(2+)的螯合能力以及对亚油酸自氧化的抑制作用等进行实验,研究了它的体外抗氧化活性。实验结果表明,米糠肽对DPPH自由基、亚硝酸盐和过氧化氢具有不同效果的清除活性,对Fe^(2+)有较强的螯合能力,对亚油酸的自氧化具有一定的抑制作用。

脱脂米抗氧化肽的分离纯化与研究

通过碱性蛋白酶酶解脱脂米糠蛋白制得脱脂米糠抗氧化肽(DRBAP),用DEAE-52、SephadexG-15纯化DRBAP,薄层层析鉴定其纯度。通过亚油酸体系中抗氧化能力、自由基捕获能力、金属离子螯合力等不同的实验体系研究其纯化组分的体外抗氧化活性,同时分析了其氨基酸组分和分子量分布情况。结果表明,分离纯化得到抗氧化活性较高的组分G4,较纯化前的DRBAP其对铁离子的螯合率提高了近11%,对DPPH自由基、·OH、O2-·清除率依次提高了20%、9%、16%,在亚油酸体系中吸光值下降了0.7,其主要氨基酸成分为Asp、Glu、Leu、Phe、Arg、Pro,相对分子质量小于1000u的比例达到90.83%,分子量小于500u的达到14.38%。

米糠抗氧化肽的分离纯化研究

以DEAE-52离子交换柱层析和SephadexG-25凝胶过滤柱层析纯化米糠抗氧化肽,以硅胶G薄层层析测定其纯度,氨基酸自动分析仪测定其氨基酸组成。实验结果表明:米糠抗氧化肽经DEAE-52柱层析和Sephadex G-25柱层析后基本上得到了纯化;氨基酸组成分析表明,米糠抗氧化肽由14种氨基酸组成,富含两种酸性氨基酸:Asp、Glu,并含有6种人体必需氨基酸(Val、Met、Ile、Leu、Phe、Lys),占米糠抗氧化肽氨基酸总含量的31.89%,具有较高的营养价值和保健功能。

不同溶剂萃取脱脂米糠中抗氧化因子的研究

采用不同极性有机溶剂对脱脂米糠乙醇粗提取物进行液-液萃取,将粗提物划分为3个不同极性组分(乙酸乙酯萃取物、正丁醇萃取物、水相残留物);选用总还原力、DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除率及金属螯合能力对粗提物和萃取物进行抗氧化活性评价。结果表明:脱脂米糠醇提物具有较好的抗氧化活性。正丁醇萃取物的总还原力(浓度为2.5mg/mL时,吸光值达0.862)、DPPH自由基清除能力(浓度为3mg/mL时,清除能力达61.98%)、超氧阴离子清除能力(浓度为10mg/mL时,清除能力达52.39%)和金属螯合能力(浓度为5mg/mL时,螯合能力达83.77%)较佳,且总多酚类物质、总黄酮含量也显著高于其他组分;正丁醇萃取物呈现出最强的抗氧化活性。推测脱脂米糠抗氧化活性物质富集于正丁醇萃取物。

酶法水解脱脂米糠蛋白抗氧化性质研究

以脱脂米糠为原料,采用碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和中性蛋白酶酶解制备米糠蛋白,并将制备酶解液与抗坏血酸在超氧阴离子自由基(O2-.)清除率、羟自由基(.OH)清除率、H2O2清除能力及还原能力等方面进行比较,研究米糠蛋白抗氧化活性。结果表明,米糠蛋白具有较强抗氧化活性,虽效果不如抗坏血酸;但对超氧阴离子自由基(O2-.)(最高为98.41%)、羟自由基(.OH)(最高达97.04%)及H2O2均有不同程度清除作用,并具有一定还原能力;且抗氧化能力与添加量存在一定量效关系,其中还出现有促氧化特殊现象。

米糠蛋白抗氧化肽的制备及初步分离

试验以米糠蛋白为原料,制备米糠蛋白抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为指标,采用正交试验,优化碱性蛋白酶酶解米糠蛋白制备抗氧化肽的工艺条件;采用超滤、Sephades G-25柱层析分离纯化米糠蛋白抗氧化肽。试验结果表明,制备米糠蛋白抗氧化肽的最优工艺条件为:酶解温度45℃,pH 9.0,时间60 min,米糠蛋白底物浓度3%,碱性蛋白酶加酶量3 000 U.g-1。在米糠蛋白酶解产物中,Mr≤5 KDa组分的抗氧化活性最强,其对DPPH自由基清除率为68.7%。通过Sephadex G-25凝胶层析柱进一步分离得到4个混合组分,混合组分Ⅱ活性最强,其DPPH自由基清除率为75.83%。

米糠抗氧化肽的提取和纯化工艺研究

研究了米糠抗氧化肽的提取、分离纯化工艺及氨基酸组成。研究结果显示,米糠抗氧化肽的最佳提取工艺条件为:在pH7.0、温度为55℃、[E]/[S]=12%、底物浓度为8%时,米糠蛋白经AS1.398中性蛋白酶酶解6 h,可获得对超氧阴离子氧化作用的抑制率最高的混合肽;经分子筛层析和离子交换层析,获得含3个肽段的米糠抗氧化混合肽;通过氨基酸组成和含量分析可知该米糠抗氧化混合肽由16种氨基酸组成,人体必需氨基酸含量丰富。