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德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8脱硫基因启动子的克隆与鉴定 被引量:2
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作者 余志坚 李焕杰 +1 位作者 王海胜 李信 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第3期529-533,共5页
利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动... 利用PCR方法,从专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8中克隆了脱硫基因启动子系列缩短的片段,连接至启动子探测型表达载体pPR9TT,电转原始菌R-8,并测定重组菌R-8-P中的报告基因LacZ表达量。结果表明脱硫基因核心启动子区缩短至300 bp,并对启动子序列进行了预测。 展开更多
关键词
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麦草畏降解菌Acidovorax delafieldii XD-3的新型固定化技术及其降解效果 被引量:3
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作者 辛华东 陈立伟 +2 位作者 蔡天明 姜灿烂 杨倩 《环境工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期5289-5294,共6页
采用新型生物炭与海藻酸钠联合固定化技术对麦草畏降解菌XD-3进行固定化,结果表明海藻酸钠-生物炭联合固定化的小球机械强度、传质性能明显高于海藻酸钠固定化小球;电镜扫描图谱结果发现海藻酸钠-生物碳联合固定化小球更适合麦草畏降解... 采用新型生物炭与海藻酸钠联合固定化技术对麦草畏降解菌XD-3进行固定化,结果表明海藻酸钠-生物炭联合固定化的小球机械强度、传质性能明显高于海藻酸钠固定化小球;电镜扫描图谱结果发现海藻酸钠-生物碳联合固定化小球更适合麦草畏降解菌的生长和定殖;不同的温度、p H值、Na Cl浓度和重金属离子浓度对固定化菌与游离菌降解效果影响研究表明,生物碳与海藻酸钠联合固定化细菌适应范围广,抗冲击能力更强。在实验室规模的流化床生物反应器(FBBR)中,联合固定化菌可以持续高效降解模拟麦草畏废水,为麦草畏固定化菌的工程化应用奠定了基础。 展开更多
关键词 - Acidovorax delafieldii XD-3 FBBR
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德氏假单胞R-8菌脱硫的“硫饥饿”诱导机理 被引量:3
3
作者 余志坚 李焕杰 +3 位作者 王海胜 李玉光 闫艳春 李信 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期235-239,共5页
以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1... 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,构建了含有重组质粒pRT-D的重组菌株R-8-D.在不同硫酸盐浓度条件下,研究了R-8和R-8-D脱硫的"硫饥饿"诱导机理,结果表明,在充足的Na2SO4(>0.023mmolL-1)条件下,R-8菌首先利用硫酸盐生长,脱硫酶的合成受阻遏,DBT不被利用,而R-8菌处于"硫饥饿"状态(Na2SO4浓度≤0.023mmolL-1)时,诱导了脱硫酶的合成,能利用DBT生长;Na2SO4在临界浓度以上时,R-8-D菌阻遏了脱硫基因的报告基因lacZ的表达,低于临界浓度时不抑制lacZ表达.本实验结果从细胞和分子水平上证实了R-8菌脱硫属"硫饥饿"诱导类型,并首次确定了脱硫微生物"硫饥饿"诱导的硫酸盐临界浓度为0.023mmolL-1,为构建高活性的、不受硫酸盐抑制的脱硫工程菌提供了理论依据和技术支持. 展开更多
关键词 DBT 饿 pPR9TT
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脱硫菌R-8的生长及其生物降解水中二苯并噻酚 被引量:10
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作者 罗明芳 姜成英 +4 位作者 邢建民 缑仲轩 李珊 刘会洲 陈家镛 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期278-282,共5页
以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳... 以二苯并噻酚(DBT)为唯一硫源考察了pH、温度、碳源、氮源等对德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R(8生长的影响. 结果表明,该菌的最适生长pH范围为6-9,最适生长温度为30oC,甘油是细胞生长的最好碳源,最佳浓度范围为10-15 g/L,最佳无机氮源乙酸铵的浓度为 1.6 g/L. 有机氮源能促进细胞的生长,但对从DBT脱硫却产生抑制作用. 硫酸钠、二甲基亚砜、胱氨酸和蛋氨酸等硫化物都可以作为R-8生长的硫源,但对R-8脱硫活性的表达没有诱导作用. 展开更多
关键词
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脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析 被引量:3
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作者 李焕杰 余志坚 +2 位作者 熊小超 李玉光 李信 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期2034-2040,共7页
以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反... 以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,利用pPR9TT穿梭质粒构建脱硫操纵子表达载体,转化原始菌培养得到1株多拷贝脱硫基因的脱硫工程菌R-8-1,并对其脱硫性能进行了研究。结果表明,在同样的生物催化脱硫反应条件下,工程菌的脱硫活性达到6.25μmol DBT/g dry cell/h,是原始菌的2倍;柴油的脱硫试验表明,在12h内工程菌静息细胞能将柴油硫含量从310.8mg/L降至100.1mg/L,脱硫率达到68%,而原始菌为53%。进一步比较了重组质粒pPR-dsz在工程菌株中传代的稳定性,试验表明pPR-dsz在工程菌株R-8-1中具有良好的遗传稳定性。此研究为生物脱硫提供了1株优良的工程菌株,并为该技术的应用提供了参考。 展开更多
关键词
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解磷细菌德氏嗜酸菌D86菌株的分离、筛选及鉴定 被引量:3
6
作者 马焕 解复红 +2 位作者 权淑静 刘金娥 陈国参 《河南科学》 2015年第9期1544-1548,共5页
从昆明磷矿土壤中分离筛选出降解无机磷的8株解磷细菌,通过平板初筛得到3株降解无机磷能力较强的菌株.进一步液体摇瓶复筛,得到1株降解无机磷能力最强的菌株D86.通过菌落形态、生理生化特性和16S r DNA序列比对,初步鉴定该菌株为德氏嗜... 从昆明磷矿土壤中分离筛选出降解无机磷的8株解磷细菌,通过平板初筛得到3株降解无机磷能力较强的菌株.进一步液体摇瓶复筛,得到1株降解无机磷能力最强的菌株D86.通过菌落形态、生理生化特性和16S r DNA序列比对,初步鉴定该菌株为德氏嗜酸菌(Acidovorax delafieldii). 展开更多
关键词 16S RDNA
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Analysis on Construction and Property of the Constitutively Desulfurization Engineered Strain
7
作者 YU Zhi-jian CHEN Chuan-hong +1 位作者 LI Jiang HUANG De-juan 《Meteorological and Environmental Research》 2012年第8期53-57,共5页
[Objective] The research aimed to study construction and property of the constitutively desulfurization engineered strain. [Method] Des- ulfurization gene dszABC in Pseudomonas delafieldii R-8 strain was cloned into e... [Objective] The research aimed to study construction and property of the constitutively desulfurization engineered strain. [Method] Des- ulfurization gene dszABC in Pseudomonas delafieldii R-8 strain was cloned into expression vector pPR9TT with gap promoter to build a constitutive expression plasmid pRT-C. Then, pRT-C was reintroduced into R-8-0 strain to obtain constitutively engineered strain R-8-C. Moreover, its desulfu- rization property was studied. [ Result ] Strain R-8-C still had higher desulfurization activity in BSM medium with 0.10 mmol/L of Na2 SO4. Within 72 h, its desulfurization activity was 93% of the strain R-8 using DBT as the sole sulfur source, while control (strain R-8) nearly couldn't desulphate. When DBT was the sole sulfur source, in different growth periods, the desulfurization activity of strain R-8-C was all higher than that of the strain R-8. Within 24 h, its activity was 1.3 times of the strain R-8. [ Conclusion] These results were theoretically and technically helpful for understanding regulation mechanism of the desulfurization gene and constructing highly active desulphurization engineering strain. 展开更多
关键词 Bio-desulfurization P. delafieldii Constitutively engineered strain DBT China
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组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能分析
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作者 余志坚 陈传红 +1 位作者 李江 黄德娟 《安徽农业科学》 CAS 2012年第18期9862-9865,共4页
[目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pR... [目的]研究组成型脱硫工程菌的构建及其脱硫性能。[方法]以专一性脱硫菌德氏假单胞菌Pseudomonas delafieldii R-8为出发菌株,将该菌的脱硫质粒中的脱硫基因dszABC和组成型gap基因启动子克隆到表达载体pPR9TT中,获得的组成型重组质粒pRT-C后电转化R-8-0菌,得到了组成型工程菌R-8-C,并对其脱硫性能进行了比较研究。[结果]R-8-C菌在含0.10 mmol/L Na2SO4的BSM培养基中仍然具有较高脱硫活性,在72 h内,是以二苯并噻吩(DBT)为唯一硫源时R-8脱硫活性的93%;而对照组(即原始菌R-8)几乎不能脱硫。以DBT为唯一硫源时,在不同生长时期内,R-8-C菌生长细胞的脱硫活性均高于R-8菌,且在24 h内,R-8-C菌的脱硫活性约为R-8菌的1.3倍。[结论]该研究为进一步了解脱硫基因调控机制及构建高活性脱硫工程菌奠定了基础。 展开更多
关键词
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Bio-regeneration of p-complexation desulfurization adsorbents 被引量:4
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作者 LI Wangliang1,2, XING Jianmin1, XIONG Xiaochao1,2, SHAN Guobin1,2 & LIU Huizhou1 1. Laboratory of Separation Science and Engineering, Institute of Process Engineering, Chinese Academy of Sciences, Beijing 100080, China 2. Graduate School of the Chinese Academy of Sciences,Beijing 100039, China 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 2005年第6期538-544,共7页
The coupling of adsorption desulfurization and biodesulfurization is a new approach to produce clean fuels. Sulfur compounds are firstly adsorbed on adsorbents, and then the ad-sorbents are regenerated by microbial co... The coupling of adsorption desulfurization and biodesulfurization is a new approach to produce clean fuels. Sulfur compounds are firstly adsorbed on adsorbents, and then the ad-sorbents are regenerated by microbial conversion. p-Complexation adsorbent, Cu(I)-Y, was ob-tained by ion exchanging Y-type zeolite with Cu2+ and then by auto-reduction in helium at 450℃ for 3 h. Dibenzothiophene (DBT) was used as a model compound. The effects of cell concentra-tion, volume of oil phase, the ratio of aqueous phase to adsorbent on DBT desorption by a bac-terium were studied. The amounts of DBT desorbed and 2-HBP produced can be apparently increased with addition of n-octane. BDS activity can be improved by increasing cell concentra-tion and the ratio of water-to-adsorbent. 89% of DBT desorbed from the adsorbents can be converted to 2-HBP within 6 h and almost 100% within 24 h, when the volume ratio of oil-to-water was 1/5 mL/mL, the cell concentration was 60 g·L?1, and the ratio of adsorbent-to-oil was 0.03 g·mL?1. The amount of 2-HBP produced was strongly dependent on the volume ratio of oil-to- water, cell concentration and amount of adsorbent. Adsorption capacity of the regenerated ad-sorbent is 95% that of the fresh one after being desorbed with Pseudomonas delafieldii R-8, washed with n-octane, dried at 100℃ for 24 h and auto-reduced in He. 展开更多
关键词 adsorption desulfurization p-complexation adsorbents bio-regeneration Pseudomonas delafieldii desorption.
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血红蛋白基因在脱硫菌R-8中的表达及其在柴油脱硫中的应用 被引量:4
10
作者 李焕杰 余志坚 +3 位作者 熊小超 李玉光 王海胜 李信 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1026-1032,共7页
【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒... 【目的】旨在构建一株优良的工程菌株,对血红蛋白基因在柴油的生物脱硫领域的应用做初步的探索。【方法】以德氏假单胞菌(Pseudomonas delafieldii)R-8为出发菌株,通过基因工程的手段,构建透明颤菌(Vitreoscilla)血红蛋白基因表达质粒并电击导入原始菌株,得到重组菌P.delafieldiiR-8-2。【结果】R-8-2菌株的CO差光谱在419nm处有特征峰出现,表明血红蛋白在脱硫菌中得到了有效表达。R-8-2菌株和R-8菌株相比,生长得到改善,相同培养条件下菌体密度比R-8提高了20%,最大脱硫活性能够达到R-8的2.4倍。在实际柴油脱硫实验中,R-8-2菌株能将柴油的硫含量降至96.6mg/L,脱硫率达到69.9%,而R-8仅为57.2%。【结论】R-8-2是在较低溶氧条件下仍能保持较高的菌体密度和脱硫活性的基因工程菌株,具有良好的应用前景,该研究为血红蛋白基因在生物脱硫工业的应用提供参考。 展开更多
关键词 R-8
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硅藻土固定细胞-陶瓷膜微泡曝气-搅拌釜式反应器生物脱硫的研究
11
作者 朱飞燕 魏雪团 +2 位作者 胡中波 罗明芳 刘会洲 《计算机与应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期483-486,共4页
Pseudomonas delafieldii R-8是一株高效的脱硫菌,是好氧菌。陶瓷膜微泡曝气能产生100μm左右的气泡,理论的利用率能达到100%,并且膜管在曝气的过程中有滤菌作用,可以节约能耗。搅拌釜式反应器在气液之间的混合效果好、相接触面积大以... Pseudomonas delafieldii R-8是一株高效的脱硫菌,是好氧菌。陶瓷膜微泡曝气能产生100μm左右的气泡,理论的利用率能达到100%,并且膜管在曝气的过程中有滤菌作用,可以节约能耗。搅拌釜式反应器在气液之间的混合效果好、相接触面积大以及传质效果好。本文首次使用陶瓷膜微泡曝气技术,研究了硅藻土固定化的R-8细胞在搅拌釜式反应器中的脱硫反应,得到最优的脱硫条件为:温度为30℃,搅拌转速为400 rpm以及通气量为0.04 MPa。等量的细菌量进行生物脱硫,陶瓷膜微泡曝气的初始脱硫速率以及24 h的总脱硫率分别为0.12 mmol/h和91%,而传统的鼓泡曝气的的初始脱硫速率以及24 h的总脱硫率分别为0.07 mmol/h和23%,使用陶瓷膜微泡曝气的初始比脱硫率以及24 h的总脱硫率要远远大于传统鼓泡曝气,因此,陶瓷膜微泡曝气具有明显的优越性。 展开更多
关键词 R-8
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