金属硫蛋白对培养神经细胞迟发性损伤的作用和一氧化氮的表达

本文以新生大鼠原代培养皮质神经元为实验材料，造成迟发性神经元损伤模型．在不同时程内，测试培养液中的细胞乳酸脱氢酶漏出量和用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核着苷酸脱氢酶染色反应，观察培养细胞中一氧化氮合酶的表达水平．结果表明，缺血组在缺血与再灌流中，细胞乳酸脱氢酶漏出量明显高于对照组，差异显著（Ｐ＜０．００１）．一氧化氮合酶阳性神经元数量在缺血组的缺血时即明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），再灌流后一氧化氮合酶表达仍然强烈，与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）．当损伤细胞再灌流时，同时加入金属硫蛋白后，显示一氧化氮合酶表达减弱，和缺血组相比有显著差异（Ｐ＜０．０５～０．００１），细胞乳酸脱氢酶漏出量在再灌流后的早期近似于对照组．结合文献和本实验结果提示：在迟发性神经元损伤形成过程中一氧化氮起着重要作用；金属硫蛋白对脑缺血后迟发性神经元损伤有一定保护作用，是一种细胞保护剂，可望用于临床，控制缺血再灌流损伤。

中药“健脑液”对培养神经细胞迟发性损伤的保护作用

以新生大鼠皮质神经细胞原代培养为实验对象，造成迟发性神经元损伤（ＤＮＤ）模型。在不同时程内，测试培养液中的细胞乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）漏出量和用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷磷酸脱氢酶（ＮＡＤＰＨ－ｄ）染色反应，观察培养细胞中一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的表达水平。结果表明，缺血组在缺血与再灌流中，ＬＤＨ漏出量明显高于对照组，并随时间延长，差异越来越明显（Ｐ＜０．０５～０．０１）。ＮＯＳ阳性神经元数量在缺血时明显高于对照组（Ｐ＜０．０１），再灌流后早期ＮＯＳ表达仍然强烈，与对照组相比有显著差异（Ｐ＜０．０１）。从本实验细胞模型上，可以看到ＤＮＤ形成的机理与兴奋性氨基酸受体过度刺激造成第二信使效应过盛和自由基损伤两种因素关系密切。本实验应用以川芎、首乌、党参、葛根为主要成分的中药＂健脑液＂，在ＤＮＤ形成过程中，对细胞起到一定的保护作用。