鳖龙软肝汤含药血浆对HBV相关性肝癌患者外周血树突状细胞增殖的影响

目的:观察鳖龙软肝汤含药血浆对HBV相关性肝癌患者外周血树突状细胞增殖的影响。方法:选择32例湖南中医药大学第一附属医院2016年6月—2017年2月肝病研究所HBV相关性肝癌、中医辨证为肝郁脾虚证患者分别采集抗凝外周静脉血,分离外周血单个核细胞(PBMCs),体外培养使DCs增殖,培养第五天(D5)采用大鼠鳖龙软肝汤含药血浆低、中剂量进行干预24 h、48 h、72 h,并设立空白血浆组,通过CCK-8试剂、酶标仪检测干预的不同时间后细胞的增殖(OD值)。结果:鳖龙软肝汤含药血浆对HBV相关性肝癌患者外周血树突状细胞的增殖有促进作用,且呈时间和浓度依赖性:24 h低剂量组5%、10%、20%,48 h低剂量组5%、10%、20%,72 h低剂量组20%的含药血浆与相对应空白血浆组比较有显著性差异(P <0. 01),其中48 h低剂量20%含药血浆组对树突状细胞的增殖最明显(P <0. 01)。结论:鳖龙软肝汤能刺激HBV相关性肝癌、中医辨证为肝郁脾虚患者外周血DCs的增殖,而以低剂量20%的含药血浆干预48 h效果最佳。

未成熟树突状细胞联合骨髓移植诱导肾移植大鼠免疫耐受及其机制

目的 供体来源未成熟树突状细胞输注联合骨髓移植,诱导异体肾移植大鼠产生免疫耐受,并探讨其 机制。方法 肾移植大鼠分为5组:阴性对照组、未成熟树突状细胞组、骨髓移植组、联合诱导组、环磷酰胺组。 51Cr释放实验测定大鼠细胞毒性T淋巴细胞(CTL)细胞毒效应;ELISA检测脾细胞培养上清IL-4、IFN-γ、TGP- β水平。结果 阴性对照组肾移植大鼠的平均存活时间(MST)为(7.12±1.25)d,未成熟树突状细胞组为(24.38 ±3.20)d,骨髓移植组为(7.87±2.1)d,环磷酰胺组为(18.13±2.36)d,而联合诱导组延长到(80.75±16.88)d, 与上述4组比较,均存在显著性差异(P<0.01)。耐受组大鼠(CTL)杀伤率低于排斥组(4.3±1.0)υs(39.6± 4.4),(P<0.01)。耐受组大鼠脾细胞培养上清IL-4和TGF-β水平为(185.44±32.17)ng／L和(716.82± 197.62)ng／L,高于排斥组(P<0.01);而IFN-γ水平为(532.78±34.54)ng／L,低于排斥组(P<0.01)。结论 术前供体来源未成熟树突状细胞输注联合骨髓移植,可成功诱导受体大鼠产生免疫耐受,其机制可能与特异性 CTL无能及TH1／TH2/TH3细胞因子网络的免疫偏离有关。

pEgr-MIP3α重组质粒的构建及其在Lewis肺癌细胞中的辐射诱导表达

目的 探讨辐射对转染pEgr MIP3α质粒的Lewis肺癌细胞MIP3α表达的影响。方法 用PCR方法扩增出MIP 3α基因 ,构建 pEgr MIP3α重组表达质粒 ,脂质体介导转染Lewis肺癌细胞 ,用RT PCR和Western方法检测不同剂量X射线照射后的MIP 3α表达水平。结果 所构建的重组质粒 pEgr MIP3α中MIP 3αcDNA正确插入表达载体 ;各照射组在不同剂量电子线照射后 ,MIP 3α表达均高于未转染组和假照射组。结论 Egr 1启动子具有辐射启动和诱导下游MIP 3α基因在Lewis肺癌中增强表达的功能 ,为pEgr MIP3α用于放射

小鼠MIP-3α基因在Lewis肺癌中的放射诱导表达

目的 构建pEgr 1 MIP 3α(pEM)质粒 ,探讨辐射对被转染的Lewis肺癌细胞中MIP 3α表达的影响。方法 用定向克隆方法 ,构建pEM重组表达质粒 ,脂质体介导转染Lewis肺癌细胞 ,用RT PCR和ELISA方法检测不同剂量电子线照射后的MIP 3α表达水平。结果 本实验构建的重组质粒pEM中MIP 3αcDNA正确插入表达载体 ;各照射组在不同剂量电子线照射后 ,MIP 3α表达均高于未转染组和假照射组。结论 Egr 1启动子具有辐射启动和诱导下游MIP 3α基因在Lewis肺癌中增强表达的功能 ,为pEM用于放射 -基因治疗的体内研究 ,提供了实验基础。

Functional Role of Dendritic Cells in Patients with Unstable Angina

Summary： To investigate the function of dendritic cells （DC） in patients with unstable angina, 10 mL of blood was drawn from 30 subjects. 15 patients diagnosed as having unstable angina and 15 healthy subjects were included in an observation and a control groups respectively. The mononuclear cells were separated from the peripheral blood and cultured in RPMI1640 supplemented with recombinant human granulocyte/macrophage-colony stimulating factor （rh GM-CSF） and recombinant human interleukin-4 （rh IL-4） to induce dendritic cells. The shape and ultrastructure of DC was examined with electronic microscope. The phenotype of DC was analyzed with FACS and the alloantigen presenting capacity of DC was evaluated by mixed lymphocyte reaction （MLR）. The expression tale of CD86 of DC in patients with unstable angina was （40. 7±3. 6）%, which was obviously higher than thai of normalDC （29.6±2.5 %） （P〈0.001）. The capacity of the DCs in unstable angina patients to induce allogenic T cells （OD 2.73±1. 10）, was significantly higher than that of the normal DC （OD：0.9±0.21） （P〈0.005）. It is suggested thai the function of DC in patients with unstable angina is increased, which may play an important role in the initiation of immune reaction in the plaque.

树突显微损伤对体外培养的小脑神经元的影响

本实验观察了树突显微损伤对体外培养的小脑神经元的影响以及损伤后的恢复过程。选择体外培养10～20天的幼兔的小脑神经元,在树突不同部位进行显微损伤或切断,显微镜下直接观察。结果表明:损伤部位不同,所发生的变化的时程不同。以在树突二级分枝处切断为例,受伤的树突在1小时内已退化;与此同细胞体内的细胞器发生聚集;使邻近树突发生弯曲。受伤3小时的树突又形成微棘或生长锥进行再生。讨论了树突受显微损伤后引起的一些变化,与细胞骨架受损时的反应相似。

胞外体与肿瘤免疫治疗

胞外体（EXO）是真核细胞晚期内体分泌到细胞外的小囊泡体，负载了来源细胞的膜分子，蛋白分子以及一些参与信号转导的分子。不同来源的EXO其所负载的蛋白成分不同，其生物学特性也有所差异。以树突细胞（DC）为代表的抗原递呈细胞（APC）以及肿瘤细胞释放的EXO在机体免疫调节以及肿瘤免疫治疗中的作用研究近年来取得了较大进展。就EXO的生物学特性及其在肿瘤免疫治疗中研究进展作一综述。