Treatment of established colon carcinoma-bearing mice by dendritic cells pulsed with lysates of heat-treated tumor cells

To investigate the therapeutic effect of dendritic cells pulsed with lysates of heat-treated CT26 colon carcinoma cells. Bone marrow-derived DCs were pulsed with lysates of heat-treated tumor cells and were used to immunize BALB/c mice with established colon carcinoma. Cytotoxic T lymphocyte (CTL) response was detected. The therapeutic effect induced by DCs was observed by tumor weight and survival time. DCs pulsed with lysates of heat-treated tumor cells markedly induced specific cytotoxic activity of CTLs. Tumor growth in the immunized BALB/c mice was significantly inhibited and the survival time of the tumor-bearing mice was prolonged. DCs pulsed with lysates of heat-treated tumor cells have an observable therapeutic effect on established colon carcinoma-bearing mice.

冻融抗原冲击致敏的树突状细胞对结肠癌小鼠的治疗作用

目的 :研究冻融的肿瘤抗原冲击致敏的骨髓来源的树突状细胞 (DC)对结肠癌小鼠是否具有治疗作用。方法 :用小鼠结肠癌细胞株C2 6冻融抗原体外冲击致敏BALB/c小鼠骨髓来源的DC ,观察其体外刺激荷瘤小鼠脾细胞增殖的能力及其诱导的CTL对C2 6肿瘤细胞的杀伤活性 ;体内以 3× 10 5DC /只一次或多次接种于已荷瘤 10d结肠癌的小鼠同侧腹股沟皮下 ,观察抗原冲击的DC对肿瘤生长的抑制作用以及对荷瘤小鼠生存期的影响。结果 :体外抗原冲击致敏的DC能显著刺激荷瘤小鼠脾脏T细胞增殖 ,其诱导的CTL对C2 6肿瘤细胞具有显著的杀伤作用 ,在效靶比为 10∶1,5∶1,2 .5∶1时其杀伤率分别 88 1% ,71.4%和 5 0 .0 % ;抗原冲击致敏的DC体内多次皮下免疫后对肿瘤的生长具有显著的抑制作用 ,能显著延长荷瘤小鼠的生存期。一次性DC体内免疫接种对荷瘤小鼠的治疗作用不明显。结论

化疗联合DC-CIK细胞治疗非小细胞肺癌临床研究

目的探讨化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗非小细胞肺癌的疗效。方法 65例晚期非小细胞肺癌患者随机分成研究组与对照组。研究组采用NP方案化疗联合DC-CIK细胞治疗,对照组采用NP方案化疗,观察两组近期临床疗效、生存质量、免疫功能、3年生存率及安全性等。结果两组间客观缓解率差异无统计学意义,但分层研究肺腺癌,研究组客观缓解率52.6%,对照组42.1%;研究组KPS评分总提高率93.8%,对照组78.8%;研究组外周血T淋巴细胞CD3+、CD8+和CD56+的阳性率及rDNA转录活性分析(Ag-NORs)IS值显著上升;研究组3年生存率25.0%,对照组15.2%;研究组对外周血常规及心、肝、肾功能无不良影响。结论化疗联合树突状细胞(DC)和细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)治疗非小细胞肺癌,可以明显改善生活质量,增强免疫功能,延长生存期,提高肿瘤综合治疗疗效。

热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞瘤苗对原位接种结肠肿瘤的免疫预防作用

目的:研究热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞的体内抗肿瘤作用以及对原位接种结肠肿瘤小鼠的免疫保护作用. 方法:肿瘤细胞CT-26经热休克处理后制备冻融抗原,体外负载树突状细胞,免疫同源小鼠(热休克组).以IFN-γELISPOT实验、LDH释放实验检测小鼠体内肿瘤特异性T细胞免疫反应,以原位接种结肠肿瘤的体积以及荷瘤小鼠的生存时间来评价该树突状细胞瘤苗对结肠原位接种CT-26小鼠的免疫保护作用,并与非热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞的免疫效果(非热休克组)作一比较. 结果:热休克处理肿瘤细胞可提高肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞表面MHC-Ⅱ类分子(66.3% vs 59.1%)、共刺激分子CD86的表达(39.4% vs 36.7%);热休克组小鼠脾淋巴细胞中肿瘤特异性CTL数量高于非热休克组(P=0.001),相同效靶比下前者肿瘤特异性细胞毒活性强于后者:热体克组与非热休克组小鼠原位接种结肠肿瘤14 d后的肿瘤体积均明显小于单纯DC免疫组(P=0,000),但HSCT-26DC免疫组与CT-26 DC免疫组间差异无显著性(P=0.480).单纯DC免疫组50% (3/6)可见腹膜转移,CT-26 DC免疫组以及HSCT- 26DC免疫组均未见腹腔转移;热休克组小鼠荷瘤生存时间显著长于非热休克组(P=0.0384). 结论:热休克处理肿瘤细胞可以提高肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞的体内抗肿瘤作用,热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞瘤苗对原位接种结肠肿瘤小鼠具有良好的免疫保护作用.

DC-CIK治疗晚期非小细胞肺癌的近期临床疗效观察

目的评价树突状细胞(dendritic cell,DC)联合细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine-induced killer,CIK)治疗晚期非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)的临床疗效及安全性。方法收集34例采用DC-CIK细胞治疗可评价的晚期NSCLC患者,评价其近期疗效及安全性。结果 DC-CIK细胞治疗晚期NSCLC 1-3月后的客观缓解率(objective response rate,ORR)为20.6%,疾病控制率(disease control rate,DCR)为67.6%。近期疗效与远处转移无关(P>0.05)。患者细胞治疗的ORR与治疗次数无关(P>0.05),DCR与治疗次数有关(P<0.05)。无明显的不良反应。结论 DC-CIK治疗晚期NSCLC安全、有效,可减缓病情进展,为晚期NSCLC患者提供了一条新的治疗途径。

树突状细胞诱导的抗大肠癌免疫预防裸鼠移植瘤发生并抑制其生长

目的 研究大肠癌患者外周血树突状细胞（ Ｄ Ｃ）体外诱导抗肿瘤免疫反应能否预防裸鼠移植瘤发生及抑制裸鼠移植瘤生长。方法 联合应用粒／巨噬细胞集落刺激因子（ Ｇ Ｍ Ｃ Ｓ Ｆ）及白介素４（ Ｉ Ｌ４）从大肠癌患者外周血中培养出 Ｄ Ｃ；人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 细胞的肿瘤抗原粗提物刺激 Ｄ Ｃ； Ｄ Ｃ激活同源的 Ｔ 淋巴细胞； Ｄ Ｃ激活的 Ｔ 淋巴细胞预防性接种于裸鼠皮下，观察随后接种的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生率；观察 Ｄ Ｃ 激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制已接种于裸鼠的人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤生长。结果 Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞明显能预防裸鼠人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 移植瘤发生（预防组 １０％ ， 对照组 １００％ ， Ｐ＜ ０００１）； Ｄ Ｃ 体外激活的 Ｔ 淋巴细胞抑制该移植瘤生长〔对照组、治疗组 及加强 治疗组 肿瘤 大小分 别为 ８７３ｍ ｍ ２ ±１９ｍ ｍ ２ 、５６９ｍ ｍ ２ ±１７ｍ ｍ ２ 、３６１ｍ ｍ ２ ±２６ｍ ｍ ２ ， Ｐ＜ ００５ 及 Ｐ＜ ００１〕。结论 大肠癌患者外周血 Ｄ Ｃ体外诱导的抗肿瘤细胞免疫反应不仅能预防人大肠癌细胞系 Ｌ Ｏ Ｖ Ｏ 裸鼠移植瘤发生。

肝癌热休克蛋白-抗原肽复合物的构建及诱导CTL反应的初步研究

目的:研究体外构建热休克蛋白-抗原肽复合物的方法,观察其在体外的抗肿瘤作用。方法:用经43℃热处理1小时的人肝细胞悬液,经过裂解液裂解,60%～80%饱和硫酸铵沉淀,用SephadexG-100柱制备,取分子量为70KD组份,Westernblot进行性质鉴定。应用多肽解离液处理该组份,SephadexG-25柱过滤获得未结合多肽的蛋白分子,使其在体外与肝癌抗原肽SLIVHLNEV结合,构建成热休克蛋白-抗原肽复合物。应用此复合物刺激树突状细胞,激活同源外周血T淋巴细胞产生肿瘤特异性杀伤T淋巴细胞(CTL),应用MTT法检测其对T2细胞及肿瘤细胞的杀伤活性。结果:所得蛋白经电泳及Westernblot进行蛋白分子量及性质鉴定为热休克蛋白70。SephadexG-25柱双分离法证实应用上述方法成功构建了肝癌热休克蛋白70-抗原肽复合物,用该复合物负荷树突状细胞在体外可以诱导出较强的肝癌抗原肽特异性CTL,可以杀伤负荷有该肽的T2细胞及递呈该肽的肿瘤细胞系。结论:体外构建的热休克蛋白-抗原肽复合物可以增强抗原肽诱导CTL反应能力,热休克蛋白是良好的T细胞免疫佐剂,有可能在肿瘤疫苗治疗中发挥重要作用。

树突细胞联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗的实验研究

背景与目的树突细胞(Dendriticcells,DC)是目前发现的功能最强大的肿瘤抗原专职免疫递呈细胞,DC疫苗是目前最具临床应用潜能的治疗性疫苗。肿瘤细胞凋亡小体被DC的MHC-I分子提呈并诱导的特异性CTL免疫反应抗癌作用显著。本研究探讨了DC负载凋亡癌细胞抗原后诱导的免疫应答联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌治疗作用。方法制备C57BL/6小鼠骨髓源性DC并鉴定,负载肿瘤抗原后制备成疫苗。分别观察DC诱导的CTL和β-榄香烯对胰腺癌细胞的杀伤作用。体内观察DC疫苗联合β-榄香烯对小鼠胰腺癌的抑制作用。结果经电镜及流式细胞鉴定可获得典型的具有抗原加工及递呈作用的DC,利用TNF-α可使成熟的树突状细胞比例增加,MHC-Ⅱ、CD83、CD86等表面分子的表达较单纯DC组显著增强。负载凋亡抗原后DC诱导的特异性CTL体外对胰腺癌细胞有显著杀伤作用,效靶比30∶1时,诱导的CTL对胰腺癌细胞抑制率达93%。β-榄香烯对癌细胞增殖抑制明显,DC疫苗与β-榄香烯联合治疗可明显抑制荷瘤小鼠肿瘤的生长,使其生存期延长,联合治疗组生存期为49.4天,与单纯β-榄香烯组(24.8天)、DC疫苗(38.5天)、DC组(20.7天)及对照组(17.5天)相比有显著差异(P<0.05)。结论经凋亡肿瘤细胞致敏的DC回输荷瘤小鼠可激发宿主针对特异肿瘤的Th1及CTL免疫应答,以DC介导的免疫反应联合中药的治疗方法可成为抗肿瘤的崭新且有效手段。

DC-CIK联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌临床效果评价

目的观察树突状细胞(dendritic cell,DC)-细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killers,CIK)联合化疗治疗中晚期非小细胞肺癌(non-small-cell carcinoma,NSCLC)的临床效果。方法选取100例诊断为中晚期NSCLC的患者随机分为观察组与对照组,每组50例。两组均给予紫杉醇+顺铂化疗,观察组在此基础上给予DC-CIK免疫细胞治疗。比较观察两组治疗前后外周血肿瘤标志物、免疫功能指标,近远期临床疗效,及不良反应发生情况。结果两组治疗后外周血细胞角蛋白19血清片段211(CYFRA211)、鳞状细胞癌相关抗原(SCC-Ag)、癌胚抗原(CEA)、癌抗原(CA)125浓度均较治疗前降低(P<0.05);观察组治疗后外周血CYFRA211、SCC-Ag、CEA、CA125浓度低于对照组(P<0.05)。观察组治疗后外周血CD3、CD8、CD56/CD3、CD16/CD3、Ig G、Ig M、Ig A较治疗前有所升高(P<0.05),CD4/CD8降低(P<0.05);对照组外周血CD3、CD8、CD4、CD4/CD8、CD56/CD3、CD16/CD3较治疗前无明显改变(P>0.05),Ig G、Ig M、Ig A较治疗前降低(P<0.05);观察组治疗后外周血CD3、CD8、CD56/CD3、CD16/CD3、Ig G、Ig M、Ig A明显高于对照组(P<0.05),CD4/CD8明显低于对照组(P<0.05)。两组治疗过程中均未出现严重不良反应,治疗后均出现不同程度消化道反应、骨髓抑制,观察组不良反应发生率低于对照组(P<0.05)。结论 DC-CIK联合化疗能提高中晚期NSCLC的临床疗效,且不良反应较小。

树突状细胞对裸鼠结肠癌移植瘤的抗癌效应

目的研究结肠癌患者外周血树突状细胞(DC)体外诱导后在裸鼠体内的抗癌效应。方法通过皮下移植法建立裸鼠模型,按治疗次数分为对照组、治疗组和加强组;从患者外周血中分离并培养出DC,以肿瘤抗原和金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激DC;DC激活同源T淋巴细胞;DC激活的T淋巴细胞经用该患者结肠腺癌细胞建立的裸鼠模型的尾静脉注入,观察成瘤时间、肿瘤生长情况、移植肿瘤大小及裸鼠摄食、活动状况。结果成功建立结肠癌裸鼠模型。肿瘤接种第60天,对照组、治疗组及加强组肿瘤大小分别为(3899±22)mm3、(1301±16)mm3、(392±18)mm3。与对照组相比,治疗组及加强组移植瘤生长均受到抑制(P=0.000);与治疗组相比,加强组移植瘤生长抑制更明显(P=0.000)。结论同源结肠癌患者外周血DC和T淋巴细胞共孵后能抑制裸鼠体内移植瘤的生长。这有可能为肿瘤治疗提供一种新的方法。

体外联合抗原修饰的树突状细胞的抗癌效应

目的:研究结肠癌患者外周血树突状细胞(dendritic cell,DC)体外联合抗原诱导后的免疫活性.方法:从结肠癌患者外周血中分离并培养DC,时效实验中分时段以肿瘤抗原修饰DC,取最佳组与T淋巴细胞共孵不同时间,用MTT检验其对肿瘤细胞的杀伤率;量效实验中将肿瘤抗原和不同浓度金黄色葡萄球菌肠毒素B(staph-lococcus aureus enterotoxin B,SEB)在上一步得出的最佳时间内修饰DC,取最佳组按不同比例(DC:T淋巴细胞)来共孵上一步得出的最佳共孵时间,用MTT检验其对肿瘤细胞的杀伤率.结果:时效实验组抗原修饰36 h组DC特有分子表达最高,对结肠腺癌细胞的杀伤率也最高,与其他组比较有差异(35.92±0.71 vs 14.85±1.24.35.92±0.71 vs 9.68±1.25.35.92±0.71 vs 17.97±1.01.35.92±0.71 vs 20.32±0.92,P<0.05),量效实验组联合抗原修饰第7天(SEB:100μg/L)DC表达DC特有分子最高,在联合修饰组内,以1:100组的杀伤率最高,与其他组比较有显著差异(47.70±2.84 vs 28.99±6.95.47.70±2.84 vs 40.02±3.65.47.70±2.84 vs 34.55±3.21,P<0.01).结论:体外DC抗原修饰和递呈的最佳时间都是36 h,联合应用超抗原SEB的最佳值100 ug/ L.DC与T淋巴细胞的最佳共孵比例是1:100.

热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞对结肠癌小鼠的治疗作用

背景与目的:目前通过树突状细胞诱导机体抗肿瘤免疫已经成为肿瘤免疫治疗的一种重要途径,热休克处理肿瘤细胞可提高肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞分化成熟,增强其体内抗肿瘤作用。本实验研究热休克肿瘤细胞抗原负载的骨髓来源的树突状细胞(dendritic cell,DC)对结肠癌小鼠的治疗作用。方法:20只小鼠随分为4组,将小鼠结肠癌细胞CT26热休克处理后超声破膜,以其细胞裂解液负载BALB/c小鼠骨髓来源的DC,观察DC诱导肿瘤特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte,CTL)杀伤活性;并将DC接种于荷瘤小鼠皮下,观察其对肿瘤生长的抑制作用及对荷瘤小鼠生存期的影响。结果:与冻融抗原-DC组、DC组、PBS组相比,热休克抗原-DC诱导的CTL对CT26肿瘤细胞具有显著的杀伤作用,相同效靶比(P=0.00)下其肿瘤特异性细胞毒活性强于前者{(0.99±0.19)g vs.[(1.27±0.28)g、(2.19±0.35)g、(2.14±0.27)g],P均=0.00};用其进行免疫后对小鼠肿瘤的生长具有显著的抑制作用[(128±18)mm3vs.(313±52)mm3,P=0.04],并能显著延长荷瘤小鼠的生存时间{(57±7)d vs.[(40±3)d、(25±3)d、(24±3)d],P均=0.00}。结论:热休克肿瘤细胞抗原负载的树突状细胞对结肠癌小鼠具有显著的治疗效果。

晚期非小细胞肺癌患者DC-CIK治疗前的免疫状态与预后的关系

目的探讨晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者树突状细胞-细胞因子诱导的杀伤细胞(dendritic cellcytokine induced killers,DC-CIK)治疗前外周血CD4+CD25+CD127-调节性T细胞(regulatory T cells,TRegs)、CD3+CD56+细胞因子诱导的杀伤细胞(cytokine induced killer cells,CIKs)、CD4+/CD8+T细胞比值与预后的关系。方法采用流式细胞仪技术检测45例晚期NSCLC患者DC-CIK治疗前、后外周血CD4+CD25+CD127-TRegs、CD3+CD56+CIKs、CD4+和CD8+T细胞,并与患者临床特征进行相关分析;采用Cox回归模型分析治疗前CD4+CD25+CD127-TRegs、CD3+CD56+CIKs、CD4+/CD8+T细胞比值对患者预后的影响。结果晚期NSCLC患者DC-CIK治疗前、后比较,治疗后患者外周血CD4+T细胞减少,CD8+T细胞增多,CD4+/CD8+T细胞比值下降,差异均有统计学意义(均P<0.05);原发病灶瘤体最长直径越大,患者治疗前外周血TRegs越多,CIKs越少(均P<0.05);生存分析显示,治疗前TRegs越多,患者预后越差,生存期越短,且TRegs>7×109/L影响患者的生存(P<0.05)。结论晚期NSCLC患者外周血TRegs是判断预后的独立预测指标。

树突状细胞对肿瘤浸润性淋巴细胞抗结肠癌活性影响的研究

目的:探讨树突状细胞(DC)激活的肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)体外对结肠癌细胞的杀伤活性。方法:从结肠癌患者外周血获取DC,应用粒/巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、白细胞介素-4(IL-4)和肿瘤抗原激活DC,然后用DC激活TIL,观察TIL在体外对自体结肠癌细胞和VoLo细胞的杀伤活性。结果:DC激活的TIL对自体结肠癌细胞具有很强的杀伤活性,杀伤率为87.62%±3.01%,明显高于未经DC激活的TIL、DC激活的T淋巴细胞和未经DC激活的T淋巴细胞对自体结肠癌细胞的杀伤率分别为53.72%±1.50%、52.23%±1.46%和3.55%±0.25%,而它们对VoLo细胞的杀伤活性则相对较低。结论:结肠癌患者外周血DC能诱导TIL产生高效而特异的抗结肠癌免疫活性。

肾癌HSP70-PC体外诱导DC成熟激活特异性抗肿瘤免疫的作用

目的研究肾癌细胞株中纯化的HSP70-PC体外诱导DC成熟及激活特异性抗肿瘤免疫的作用。方法采用亲和层析及离子交换层析法纯化肾癌细胞HSP70-PC,体外致敏DC,流式细胞仪检测DC表型变化,用DC体外诱导CTL产生,MTT法比较其对不同肿瘤细胞的杀伤活性。结果HSP70-PC和TNF-α均能使DC高表达分化相关抗原CD1a、CD83、HLA-DR,肾癌细胞中纯化的HSP70-PC致敏的DC体外诱导的CTL对肾癌细胞有较高的杀伤活性。结论肾癌细胞中纯化的HSP70-PC能有效地诱导DC成熟,并使其具有活化针对肾癌细胞的特异性CTL的能力。

免加热工艺大蒜提取物对结肠癌THC8908细胞活性的影响

【目的】研究免加热工艺的大蒜提取物对结肠癌细胞活性的影响,为免加热工艺提取的大蒜用于预防结肠癌提供理论依据。【方法】以结肠癌细胞系THC8908为靶细胞,用MTT比色法检测免加热大蒜提取物对结肠癌细胞活性的影响,在倒置显微镜下观察培养细胞的形态学改变,在荧光显微镜下观察药物干预后细胞的存活、凋亡或坏死。【结果】免加热大蒜提取物浓度在3mg/ml时对肿瘤细胞活性的抑制率为51.9%,浓度为6mg/ml时抑制率82.6%。倒置显微镜观察药物处理后细胞变圆、脱壁,解离成簇状分布的小体。荧光显微镜可观察到药物处理后,染色质凝集,细胞凋亡。【结论】免加热工艺提取的大蒜有较强的抑制结肠癌细胞活性,抑制率与药物浓度具明显的量效关系,且能有效诱导结肠癌细胞凋亡。

胎儿来源的树突状细胞诱导抗膀胱癌效应的研究

目的:研究胎儿来源的树突状细胞(DC)体外诱导抗膀胱癌的特异性细胞免疫的效果。方法:从胎儿骨髓获得单个核细胞,经粒细胞-单核细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4和TNF-α诱导产生DC。利用50%～70%硫酸铵饱和沉淀法获取膀胱癌细胞系EJ含热休克蛋白(HSP)成分的细胞溶解物,以该抗原负载DC,激活胎脾细胞产生肿瘤特异性的细胞杀伤性T淋巴细胞(CTL)。利用IL-2刺激胎脾细胞产生LAK细胞。应用MTT法分别检测CTL和LAK细胞对EJ细胞的杀伤效应。结果:胎儿骨髓可诱导出功能成熟的DC,高表达CD1a、CD86、HLA-DR和CD83。负载EJ抗原的DC可诱导产生CD8+CTL。其对EJ细胞的杀伤作用明显强于LAK细胞。结论:含HSP成分的肿瘤细胞溶解物负载胎儿来源的DC,体外可诱导出更强的特异性抗肿瘤免疫应答。

CEA-rV负荷树突状细胞与CIK细胞共培养后对裸鼠结肠癌移植瘤生长的抑制作用

目的探讨负荷了CEA-rV的树突状细胞与CIK细胞共培养后在裸鼠体内特异性的抑瘤作用。方法在Balb/c裸鼠颈背皮下接种Lovo结肠癌细胞,次日起连续6d给予不同的效应细胞(CIK、DC+CIK、CEA-rV+DC+CIK)治疗,观察其对结肠癌生长的抑制作用。结果裸鼠体内实验表明,CEA-rV+DC+CIK能够显著抑制CEA阳性的Lovo结肠癌细胞的生长,其抑瘤率可达51.2%,明高于CIK组的25.1%以及DC+CIK组的28.5%。结论负荷CEA-rV的DC与CIK细胞共培养后在裸鼠体内对CEA阳性的Lovo结肠癌有特异性抑瘤作用。

认知干预对经DC-CIK治疗的中晚期肝细胞癌患者生命质量、疼痛程度及临床疗效的影响

目的研究认知干预对经DC-CIK治疗的中晚期肝细胞癌患者的生命质量、疼痛程度及临床疗效的影响。方法选择中国医科大学附属第一医院普通外科及肿瘤内科2011年1月—2014年1月收治的中晚期肝细胞癌156例,随机分为观察组(82例)与对照组(74例)。两组均予肿瘤常规方案、DC-CIK方案治疗及常规心理干预,观察组同步予认知干预。治疗前后用肿瘤生命质量核心问卷(QLQ-C30)评估两组生命质量,采用视觉模拟评分法(VAS)评价两组疼痛程度,评估两组近、远期临床疗效,记录两组中位生存期,观察并记录治疗过程中的不良反应。结果治疗后两组QLQ-C30整体功能、特异性症状模块各指标及整体生命质量评分均明显优于治疗前(P<0.05,P<0.01),治疗后观察组上述指标均优于对照组(P<0.05);两组治疗后疼痛程度均明显低于治疗前(P<0.01),治疗后观察组疼痛程度明显低于对照组(P<0.05);治疗后两组近期临床疗效差异无统计学意义(P>0.05),观察组远期临床疗效优于对照组(P<0.05),且中位生存期长于对照组(P<0.05);两组治疗中主要不良反应发生率差异无统计学意义(P>0.05)。结论对于中晚期肝细胞癌患者在进行DC-CIK免疫治疗的基础上给予认知干预,能很好改善患者的生命质量、缓解疼痛、提高远期临床疗效,且安全性较高。

高转移结肠癌细胞微环境对人树突状细胞功能的影响

目的:探讨高转移结肠癌细胞SW620分泌的可溶性细胞因子营造的微环境对人单个核细胞来源的树突状细胞(DC)分化发育的影响,为DC疫苗在结肠癌患者中的临床应用提供依据。方法:密度梯度离心法分离人外周血单个核细胞,加入含重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子和重组人白细胞介素-4的RPMI1640培养液诱导培养,第2天对照组同前培养,实验组在此基础上加入SW620条件培养基,均隔天半量换液,第4天加入超声破碎法制备的SW620抗原,第6天加入脂多糖。第8天收集对照组正常成熟DC和实验组肿瘤相关DC(TADC)。显微镜观察其形态,流式细胞仪检测其免疫表型,RT-PCR检测CD1amRNA的表达,混合淋巴细胞反应及体外杀伤活性实验检测其刺激T细胞增殖及杀伤能力。结果:TADC与正常成熟DC相比,细胞形态明显受到抑制。流式细胞仪检测PBMC、正常DC及TADCCD86及CD1a分子阳性率,差异均有统计学意义(F分别为46.95及19.09,P<0.001)。与正常DC比较,TADCCD86分子阳性率由(68.56±8.04)%降为(42.41±10.87)%,CD1a分子阳性率由(55.71±12.12)%降为(26.60±12.03)%(P均<0.05);CD1a基因表达降低,体外刺激T细胞增殖[(112.53±7.16)%vs.(91.26±6.62)%]及杀伤能力[(62.42±0.57)%vs.(50.37±2.21)%]均下降(t分别为6.17、17.41,P均<0.001)。结论:SW620条件培养基所营造的微环境对DC的诱导分化及其功能有明显的抑制作用,这可能是肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制之一。