基于电子鼻技术的小麦籽粒DON含量检测

为探究利用电子鼻技术对小麦籽粒中DON含量定量检测的可行性,本研究在25℃和40℃平衡温度下对DON含量不同的80个小麦籽粒样品的顶空气体进行电子鼻检测,并结合由UPLC-MS/MS测得的各样品DON含量进行统计分析,结果发现,除4号和5号传感器外,其余8个传感器的响应值均与样品DON含量具有显著或极显著的相关性,其中1号传感器的响应值及其参数与样品DON含量的相关性最强,表明1号传感器可以作为检测小麦籽粒样品DON含量的关键气体传感器。以1号传感器的参数为主,分别建立了在两平衡温度下样品DON含量的回归模型。对各模型的拟合效果分析发现,在40℃平衡温度下基于X_(17)(1号传感器21~60 s响应值的和)所建一元回归模型最好;在25℃平衡温度下,基于X_(1)(1号传感器20~40 s响应值的平均值)和X_(12)(8号传感器1~5 s响应值的和)所建二元回归模型拟合效果最好,其次为基于X_(1)所建的一元回归模型。该研究可为电子鼻技术在小麦籽粒中DON含量检测中的应用提供理论依据和技术支撑。

THE EXPERIMENTAL STUDY ON THE EFFECTS OF SIX MYCOTOXINS ON THE CULTURAL CHONDROCYTES

The effects of deoxynlvalenol (DON), T--2 toxin, nivalenol (NIv), hutenolide (BuT).alternariol methyl ether(AME) and monlliformin (cON ) on rabbit articular chondrocytes were observed by using the method of chondrocyte monolayer culture. The amounts or DNA in chondrocytesand glucuronate in matrix were measured. And the chondrocytes were observed by inversion microscope and transmission electron microscope (TEM). The results showed that the cultured chondrocytes were damaged by all the six mycotoxinsl and the synthesis of DNA and the divided reproductionof chondrocytes were restrained; the damage errect was more evident, esl,ecially in the early stage ofculturel the higher concentration or toxin in the media was used, the lower density of the culturalckondrocytes was observed; the cells were even round damaged and dead, so long as the media contolued toxin. When the six mycotoxins arrected the cultural chondrocytes r.spectively, three dirfereut kinds or ultrastructural changes in ckondrocytes were seen by TEa. The relationship betweenmycotoxiu and KBD was preliminarily discussed, and some problems still need further investigation..

复合吸附剂联合谷氨酰胺对夏季饲喂脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素蛋鸡生产性能、免疫功能、内质网应激和炎症反应的影响

本试验旨在研究复合吸附剂(CA)联合谷氨酰胺(Gln)对夏季饲喂脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和T-2毒素蛋鸡生产性能、免疫功能、内质网应激和炎症反应的影响。选择72周龄京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只。对照组饲喂基础饲粮,DON+T-2组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素,CA组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素+0.50 g/kg复合吸附剂,CA+Gln组在基础饲粮中添加1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素+0.50 g/kg复合吸附剂+4.00 g/kg Gln。预试期3 d,正试期28 d。试验期每天09:00、14:00、19:00的平均温湿指数分别为83.43、88.08、86.70。结果表明:1)与对照组相比,DON+T-2组的平均日采食量和产蛋率显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),料蛋比显著升高(P<0.05)。与DON+T-2组相比,CA组和CA+Gln组的产蛋率极显著升高(P<0.01),CA+Gln组的料蛋比显著下降(P<0.05)。2)与对照组相比,DON+T-2组的血清免疫球蛋白A(IgA)含量和回肠分泌型免疫球蛋白A(sIgA)含量显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01)。与DON+T-2组相比,CA组和CA+Gln组的血清IgA含量极显著升高(P<0.01),CA+Gln组的回肠sIgA含量显著升高(P<0.05)。3)与对照组相比,DON+T-2组的回肠黏膜白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量极显著升高(P<0.01),白细胞介素-10(IL-10)含量极显著降低(P <0.01)。与DON+T-2组相比,CA组和CA+Gln组的回肠黏膜IL-1β含量极显著降低(P<0.01),IL-10含量极显著升高(P<0.01)。4)与对照组相比,DON+T-2组的回肠黏膜蛋白激酶受体样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4) mRNA相对表达量极显著升高(P<0.01)。与DON+T-2组相比,CA组和CA+Gln组的回肠黏膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、肌醇需求酶1(IRE1)、PERK、ATF4、X盒结合蛋白1(XBP1) mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。与CA组相比,CA+Gln组的回肠黏膜IRE1、PERK mRNA相对表达量极显著降低(P<0.01)。由此可见,复合吸附剂与Gln联合可以有效缓解DON与T-2毒素暴露对夏季蛋鸡生产性能、免疫机能、内质网应激和炎症反应带来的负面影响,两者联合可以作为一种有效脱毒剂添加到蛋鸡饲粮中。

呕吐毒素和T-2毒素对热应激蛋鸡产蛋性能、肠道抗氧化及免疫功能的影响

为研究呕吐毒素(DON)和T-2毒素对热应激蛋鸡产蛋性能、抗氧化及免疫功能的影响,试验选择96只36周龄健康京红1号蛋鸡随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只。对照组饲喂基础日粮,DON组、T-2组和DON+T-2组分别在基础日粮中添加3mg/kgDON、0.5mg/kgT-2和1.5mg/kgDON+0.25mg/kgT-2。预试期3d,正试期4周。于试验结束采集蛋鸡血清、十二指肠、空肠、回肠用于抗氧化及免疫指标检测。结果显示:①与对照组相比,DON+T-2组36~37、38~39、36~39周龄蛋鸡平均日采食量显著降低(P<0.05),38~39周龄、36~39周龄蛋鸡平均蛋重显著降低(P<0.05)。②与对照组相比,DON组十二指肠丙二醛(MDA)含量显著升高(P<0.05);DON+T-2组十二指肠超氧化物歧化酶(SOD)活力显著下降(P<0.05);DON组和DON+T-2组十二指肠总抗氧化能力(T-AOC)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力显著下降(P<0.05);T-2组和DON+T-2组十二指肠、空肠丙二醛含量显著升高(P<0.05);DON+T-2组回肠超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活力显著下降(P<0.05)。③与对照组相比,T-2组血清IgG含量显著降低(P<0.05);与对照组相比,DON组、T-2组、DON+T-2组回肠sIgA含量均显著降低(P<0.05)。综上所述,饲粮添加3mg/kgDON和0.5mg/kgT-2毒素对热应激条件下36~39周龄产蛋鸡的产蛋性能、肠道抗氧化及免疫功能产生明显的负面影响,且两者存在一定的累加效应。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇与T⁃2毒素对热应激蛋鸡肠道屏障功能及内质网应激和炎症反应的影响

本试验旨在研究脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)与T-2毒素对热应激蛋鸡肠道屏障功能及内质网应激和炎症反应的影响。选择36周龄体重相近的京红1号蛋鸡96只,随机分成4组,每组8个重复,每个重复3只鸡。对照组(CON组)饲喂基础饲粮,DON组、T-2组、DON+T-2组分别在基础饲粮中添加3.00 mg/kg DON、0.50 mg/kg T-2毒素、1.50 mg/kg DON+0.25 mg/kg T-2毒素。预试期3 d,正试期28 d。试验期间白天平均温湿指数为84.87。结果表明:1)与CON组相比,T-2组十二指肠、空肠隐窝深度显著升高(P<0.05),DON+T-2组空肠隐窝深度显著升高(P<0.05),DON、T-2、DON+T-2组十二指肠绒毛高度/隐窝深度(V/C)值显著降低(P<0.05),T-2、DON+T-2组空肠V/C值显著降低(P<0.05),DON组回肠隐窝深度显著升高(P<0.05)。2)与CON组相比,DON、T-2、DON+T-2组血清脂多糖(LPS)含量显著升高(P<0.05),DON+T-2组血清二胺氧化酶(DAO)含量显著升高(P<0.05)。3)与CON组相比,DON、T-2组回肠黏膜白细胞介素-6(IL-6)含量显著升高(P<0.05)。4)与CON组相比,T-2、DON+T-2组回肠黏膜闭锁蛋白(Occludin)mRNA相对表达量显著降低(P<0.05)。5)与CON组相比,DON+T-2组回肠黏膜葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、X盒结合蛋白1(XBP1)mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),DON组回肠黏膜活化转录因子4(ATF4)mRNA相对表达量显著升高(P<0.05)。由此可见,在夏季热应激条件下,饲粮中添加3.00 mg/kg DON和0.50 mg/kg T-2毒素可诱导蛋鸡小肠组织内质网应激和炎症反应,损伤黏膜形态结构和屏障功能,且两者存在一定的累加效应。

广州某茶叶市场普洱茶中多种生物毒素污染现状调查

目的:为了解广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶中真菌毒素的污染情况,对所抽取的70份普洱茶样本中黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)、伏马毒素(fumonisin B1,FB1)、呕吐毒素(脱氧雪腐镰刀菌烯醇,deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的浓度水平进行检测,旨在为制定有关普洱茶叶安全卫生管理规范和相关的卫生标准提供数据资料。方法:随机抽取广州某茶叶市场湿仓储存普洱茶70份,破碎、浸提、过滤后采用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法检测AFB1,ELISA试剂盒检测FB1、DON和T-2毒素的污染情况。结果:本次调查所采70份普洱茶样品中,AFB1污染水平超出标准规定限值(5μg/kg)的有8例(11.43%),DON污染水平超出标准规定限值(1 mg/kg)的有63例(90%),FB1和T-2毒素污染水平均未超出标准规定限值(分别为1 mg/kg和100μg/kg)。结论:本调查结果提示广州市该茶叶市场中的湿仓储存普洱茶存在不同程度的AFB1及DON污染情况,而FB1及T-2毒素虽未超出标准规定的限值,但在样品中均可检出,应引起广泛重视。

抗小麦赤霉病体细胞突变体筛选研究

以禾谷镰刀菌提取的DON粗毒素为选择剂,对不同小麦品种的体细胞培养物进行抗赤霉病细胞突变体筛选。结果表明:①不同基因型的离体幼胚组织和幼穗、幼胚愈伤组织对DON毒素的敏感性反应与品种在田间的抗病性一致;在6×10^(-5)M DON毒素浓度下,抗性品种望水白和中抗品种温州红和尚的幼胚愈伤诱导率明显高于两个感病品种Alondra's和Veery。②DON毒素对小麦细胞培养物的影响与毒素浓度、外植体来源和继代培养时间等因素有关;试验中发现直接用幼胚筛选更容易诱导抗(耐)毒素细胞系。③筛选得到了多个抗(耐)毒素细胞系和分化的再生植株。R_1和R_2代田间抗病性鉴定发现,一些株系的抗赤霉病能力高于原供体品种。

稻谷真菌毒素污染调查与分析

利用免疫亲和柱检测体系检测了我国 31个储藏稻谷样品的真菌毒素含量。结果显示 :阳性率方面 ,黄曲霉毒素 (90 .32 % )和赭曲霉毒素 (87.1 0 % )远高于T - 2毒素(35 .4 8% )和呕吐毒素 (3.2 2 % )。在稻谷样品真菌毒素安全水平上 ,T - 2毒素的超标较严重 ,达到 2 9.0 3% ,赭曲霉毒素和呕吐毒素次之 ,都是 3.2 2 % ,黄曲霉毒素的超标率 (0 )最低。

镰刀菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇对心肌细胞Ca^(2+)通道的阻滞作用

目的 观察镰刀菌毒素单端孢霉烯族化合物脱氧雪腐镰刀菌烯醇 (DON)对培养心肌细胞Ca2 +通道单通道电活动的影响。方法 取新生 1～ 2日龄Wistar大鼠 ,分离心肌细胞 ,培养基为 80 %DMEM与 2 0 %小牛血清 ,于3 7℃ ,在含 5 %CO2 与 95 %空气的培养箱内进行培养 ,于培养 2 4～ 48h期间进行实验记录。采用贴附式膜片钳技术 ,记录心肌细胞B、L、T三型Ca2 +通道单通道电活动为加入毒素前对照 ,然后向培养基中加入 1mg·ml-1DON ,以观察DON对心肌细胞Ca2 +通道单通道电活动的影响。结果 DON浓度为 1mg·ml-1时 ,心肌细胞B ,L ,T三型Ca2 +通道均受到明显的阻滞。其阻滞作用表现在使B、L、T三型Ca2 +通道的开放时间分别缩短 47 3 % ,42 1%和 17 1% ,关闭时间分别延长 2 83 3 % ,92 8%和 40 7% ,使通道的开放概率分别下降 77 8% ,71 1%和 42 8%。而对流过B ,L ,T三型Ca2 +通道的Ba2 +流幅值均无明显影响。结论 DON能抑制大鼠培养心肌细胞的Ca2

畜禽产品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素残留分析

目的:分析市售畜禽产品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)和T-2毒素的残留情况。方法:试样经乙腈提取、正己烷脱脂、HLB柱净化,用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS/MS)测定,外标法定量。结果:所有受检猪背脊肌肉、猪肝、猪肾、鸡胸肉、鸡腿肉、鸡翅肉和肉制品样品中均未发现DON残留,猪背脊脂肪样品中DON残留阳性率为28.75%,最高残留量为0.4265μg/kg;所有受检猪肝、猪肾和肉制品样品中均未发现T-2毒素残留,猪背脊肌肉、猪背脊脂肪、鸡胸肉、鸡腿肉、鸡翅肉样品中T-2毒素残留阳性率范围为8.33%～57.14%,最高残留量范围为0.0704～0.4515μg/kg。结论:在部分受检畜禽样品中检测到了DON和T-2毒素痕量残留。

单端孢霉烯族毒素抑制动物生长作用的研究进展

单端孢霉烯族毒素是主要的饲料污染物,包括T-2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)等,具有较强的毒性作用,能引起动物体多种病理变化。其毒性作用能改变真核翻译起始因子2α(EIF2α)、丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)、热休克蛋白90(Hsp90)、胰岛素样生长因子1(IGF-1)等细胞因子的活性,调节多种胺酰tRNA合成酶的活性,进而抑制蛋白质合成,阻滞动物生长。论文从单端孢霉烯族毒素对生长激素影响的角度,综述了该类毒素对动物生长的抑制作用,以期为阐明单端孢霉烯族毒素抑制动物生长的毒性作用机制奠定基础。

常见镰刀菌素与细胞凋亡的研究进展

某些常见镰刀菌素如伏马菌素 B1 、T- 2毒素、脱氧雪腐镰刀菌烯醇、镰刀菌烯酮 - X可以诱导多种细胞发生凋亡 ,如肝细胞、肾细胞、胃肠细胞、免疫细胞和传代细胞。这些镰刀菌素诱导细胞凋亡的机制较为复杂 ,可能与神经鞘氨醇、某些基因如 P2 1、蛋白激酶、CAMP信号系统、细胞内 Ca2 + 水平等许多因素有关。

饲料中脱氧雪腐镰刀菌烯醇毒素含量及其对畜禽的影响

脱氧雪腐镰刀菌烯醇是一种单端孢霉烯族毒素,主要由禾谷镰刀菌产生。广泛地存在于玉米、小麦、水稻、豆饼等饲料原料中,对人畜健康危害十分严重。文章综述了常用饲料中DON毒素含量的情况以及饲料中DON对畜禽的影响。

小麦赤霉病菌FgVPS26与FgRab7的相互作用及对DON毒素合成的影响

小麦赤霉病菌合成DON毒素是多基因控制的次级代谢过程,阐明各种基因的调控作用有利于进行科学防控。以赤霉病菌为研究对象,通过酵母双杂交、实时定量PCR及ELISA等技术研究FgVPS26与FgRab7的相互作用及对DON毒素生物合成的影响。结果表明:FgVPS26和激活态FgRab7可以相互作用,但与原始态FgRab7不能相互合作。FgVPS26和FgRab7基因可相互影响其表达,与野生型菌株PH-1相比,当FgVPS26和FgRab7其中一个基因缺失时另一个基因的表达量将显著下降。另外,FgVPS26或FgRab7基因缺失也显著降低与DON毒素合成相关的Tri基因表达,从而导致同一生长时期突变菌株的DON毒素合成量比野生型菌株PH-1明显减少。因此,小麦赤霉病菌中FgVPS26和FgRab7可以相互作用并调控DON毒素的生物合成。

小麦赤霉病穗中脱氧雪腐镰刀菌烯醇量的变化

用ＪＦ－１２菌株的子囊孢子接种５个不同程度抗感赤霉病的小麦品种，于不同时间对穗组织中脱氧雪腐镰刀菌烯醇（ＤＯＮ）的量进行了测定。结果表明：感病品种（宁麦６号及扬麦３号）穗中的ＤＯＮ量自接种后第４～８天迅速升高，最高可达３７．６４μｇ／ｇｄｗ），抗病品种（望水白）的ＤＯＮ含量较低（≤７．３５μｇ／ｇｄｗ），且自接种后第８天起逐渐下降，中抗（扬麦４号）和中感（宁８０２６）品种的ＤＯＮ含量居于抗、感病品种之间。ＤＯＮ含量与穗发病程度的相关性依品种不同而异，即在感病品种上两者有较显著的相关性（ｒ＝０．９０９～１．００），但在抗病及中抗品种上相关性不显著（ｒ＝０．４６６～０．５３１）。说明抗病品种可能存在降解ＤＯＮ的解毒机制。另外，所有供试品种均在接种后２４小时、尚未表现症状时即可检测到一定量（０．４６～２．４１μｇ／ｇｄｗ）的ＤＯＮ。

几种杀菌剂防控小麦赤霉病穗腐及籽粒脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)毒素的评价

小麦赤霉病是小麦穗期的主要病害之一。化学防控一直是小麦主产区防控赤霉病的主要措施。为明确几种新型杀菌剂对小麦赤霉病的防效和对小麦籽粒DON毒素含量的影响,于2018年进行了氰基丙烯酸酯类和三唑类杀菌剂单剂及其复配剂对赤霉病的防效试验。结果表明:30%戊唑·多菌灵悬浮剂(SC)1500 mL/hm^2处理对赤霉病病穗防效达92.40%,病指防效达93.20%,小麦籽粒DON毒素检出量较不用药对照降低80.38%;25%氰烯菌酯SC 2000 mL/hm^2处理对赤霉病的病穗防效达86.80%,病指防效达88.78%,小麦籽粒DON毒素检出量较不用药对照降低88.19%;48%氰烯·戊唑醇SC 900 mL/hm^2和40%丙硫·戊唑醇SC 600 mL/hm^2对小麦赤霉病的病穗防效分别为77.20%、78.00%,病指防效分别为80.27%和79.59%,对籽粒DON毒素检出量较不用药对照分别降低73.87%和81.42%。在小麦赤霉病较重发生的情况下,上述4种杀菌剂单剂或复配剂1次用药既能高效控制病情,又能有效控制小麦籽粒DON毒素不超标。本试验研究进一步阐明,氰烯菌酯、戊唑醇、丙硫菌唑等杀菌剂及其复配剂均能有效控制小麦赤霉病的危害,并能有效降低小麦籽粒DON毒素含量;吡唑醚菌酯单剂及其复配剂虽然对小麦赤霉病的病穗和病指防效也较高,但控制小麦籽粒DON毒素含量效果相对较差。研究结果为小麦穗期赤霉病化学防控提供了科学参考。

紫外光辐照对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的去除作用

目的:研究紫外光辐照对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的去除作用。方法:测定不同辐照时间、不同辐照距离、不同pH值条件下紫外光辐照对DON和T-2毒素影响,采用高效液相色谱-质谱联用技术测定毒素及其衍生物,外标法定量。结果:经紫外光辐照后,溶液中DON、T-2毒素的质量浓度均随着辐照时间的延长而不断减小,随着辐照距离和pH值的减小而不断减小。pH 7的1.0μg/mL DON、T-2毒素溶液,在紫外灯功率20 W、辐照距离150 mm条件下辐照60 min后,DON、T-2毒素去除率分别为(84.90±2.52)%、(74.60±2.74)%。紫外光辐照后,毒素溶液中不含有已知的毒素衍生物,可能被转化成新的未知产物。结论:在非碱性条件下,紫外光辐照对DON、T-2毒素具有明显的去除作用。

食品添加剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素体外去除作用研究

目的为了探索食品中单端孢霉烯族毒素残留的控制方法,研究了多种食品添加剂对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的体外去除作用。方法通过食品添加剂处理DON和T-2毒素,研究它们对DON和T-2毒素的体外去除作用。结果去除效果最显著是磷酸三钠、焦磷酸钠、碳酸钠,对DON的去除率分别为76.60%±3.70%、33.30%±3.10%、45.90%±3.30%,对T-2毒素的去除率分别为99.98%±0.01%、95.20%±2.10%、99.98%±0.01%,处理后毒素溶液中不含有已知产物,可能将DON、T-2毒素转化为新的未知产物。结论多种受试食品添加剂对DON、T-2毒素具有不同程度的去除作用。

脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)的毒素污染分析及防控研究进展

真菌毒素脱氧雪腐镰刀菌烯醇(DON)可污染粮食和食品,对人和动物可造成消化和神经系统的中毒,严重时,可损害其造血系统甚至死亡。针对DON的生物特性研究、DON的检测方法,尤其是防控方面的研究进展进行论述,以期为后续研究提供科学依据。

热处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇和T-2毒素的去除作用

研究热处理对脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol,DON)和T-2毒素的去除作用。测试不同温度、不同加热时间、不同pH值条件下热处理对DON和T-2毒素影响,采用高效液相色谱-质谱测定毒素及其衍生物,采用外标法定量。DON在中酸性条件下,121℃加热60 min,DON浓度保持稳定,碱性条件能促进DON的热降解。T-2毒素在中酸性条件下,105℃加热30 min开始降解,121℃处理pH值为7的1.0μg/mL T-2毒素溶液60min,T-2毒素去除率分别为(51.98±3.37)%,碱性条件能促进T-2毒素的热降解。在一定条件下,热处理对DON、T-2毒素具去除作用。