外泌体靶向递送核酸类分子研究进展

外泌体作为纳米级小细胞外囊泡,是生命体内细胞信息传递的重要方式。外泌体由于具有递送效率高、免疫原性低、可跨过多种生物屏障和具有靶向性等特点。促使外泌体成为药物递送载体的重要成员,用以克服某些药物稳定性差、生物利用度不足、溶解度低和毒性高等缺点。本文将主要介绍近年来广泛关注的利用外泌体以囊泡形式作为新型药物递送几种核酸类分子,主要包括小分子核糖核酸、小干扰核糖核酸和脱氧核糖核酸进行综述,本文旨在为发展高效安全的外泌体靶向核酸类分子递送提供理论依据和设计思路,促进其临床转化。

乙基紫-脱氧核糖核酸共振发光体系的研究及其分析应用

研究了碱性染料乙基紫与小牛胸腺脱氧核糖核酸（ｃｔＤＮＡ）体系的结合反应及其共振发光光谱．在ｐＨ５．０～１０．０范围内，乙基紫在５９５ｎｍ处有一特征吸收峰，加入ＤＮＡ后，吸收峰消失，而在５０７ｎｍ处出现新的吸收峰，表明有新的结合物形成．在５１０ｎｍ处出现共振发光峰，其发光强度与ＤＮＡ浓度呈线性关系，线性范围为０～５００ｎｇ／ｍＬ；检出限（３σ）为１．５４ｎｇ／ｍＬ．方法具有较高的灵敏度和准确度．将该体系用于核酸试样的测定。

以DNA为载体的线性时序逻辑模型检测

线性时序逻辑模型检测被广泛应用于处理器设计与验证、网络协议验证、安全协议验证等领域.然而到目前为止,该技术只能在电子计算的平台上实现.为了以脱氧核糖核酸(Deoxyribo Nucleic Acid,DNA)为载体对线性时序逻辑(Linear Temporal Logic,LTL)实施模型检测,给出了使用粘贴自动机实现Until算子模型检测的方法.首先,使用粘贴自动机对Until公式的有穷状态自动机(Finite State Automata,FSA)模型进行编码;然后,将系统模型转换为粘贴自动机的输入字符串;最后,用粘贴自动机验证系统是否满足公式.仿真实验结果证实,新方法可实现对LTL逻辑时序算子的检测.

1-(2,6-二甲基苯氧基)-2-(3,4-二甲氧基苯乙氨基)丙烷盐酸盐对肥厚心肌DNA含量和培养心肌细胞DNA合成的影响

为研究１－（２，６－二甲基苯氧基）－２－（３，４－二甲氧基苯乙氨基）丙烷盐酸盐（ＤＤＰＨ）对心肌肥厚大鼠左室组织ＤＮＡ含量有无逆转作用，用部分狭窄腹主动脉的方法建立心肌肥厚的模型．术后ｗｋ４开始给药，连续８ｗｋ，左室心肌切片并进行Ｆｅｕｌｇｅｎ染色，用ＴＪＴＹ－３００图像分析系统对ＤＮＡ进行相对定量，发现肥厚组平均吸光度为０．０８９，是对照组的１．４３倍，而二个给药组分别为０．０７９和０．０７１，明显低于肥厚组，但仍高于对照组（Ｐ＜０．０５），说明ＤＤＰＨ对肥厚心肌的ＤＮＡ含量有一定的逆转作用．为进一步研究ＤＤＰＨ能否抑制去甲肾上腺素（ＮＥ）致培养乳鼠心肌细胞ＤＮＡ合成的作用，体外培养乳鼠心肌细胞，实验分６组：（１）对照组；（２）ＮＥ组；（３）ＤＤＰＨ１．０μｍｏｌ·Ｌ－１组；（４）ＤＤＰＨ１０μｍｏｌ·Ｌ－１组；（５）哌唑嗪（Ｐｒａ）１．０μｍｏｌ·Ｌ－１组；６）Ｐｒａ１０μｍｏｌ·Ｌ－１组．每孔加［３Ｈ］ＴｄＲ３７Ｂｑ，３ｈ后测ｃｐｍ值，发现ＮＥ组为对照组的３．１倍，而ＤＤＰＨ及Ｐｒａ组均减少ｃｐｍ值（Ｐ＜０．０１），且Ｐｒａ组作用更明显，二个高剂量组与对照组无显著差异，结果说明ＤＤＰＨ可以抑制ＮＥ诱导?

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术

建立检测血清HBV DNA的多聚酶链反应技术。人工合成adr、adw和ayw三个业型HBV的两个共有序列NC1和NC2作为引物扩增一长428bp且含一BglⅡ酶切点的HBV C基因片段。含FD酶的反应体系在水浴93℃30秒、55℃60秒、72℃90秒依序循环30周期,当克隆HBV DNA模板最小加量为10 fg时,产物作琼脂糖凝胶电泳经溴化乙锭染色在紫外线下观察仍可见428 bp位置的阳性荧光带。阳性产物经BgⅠⅡ酶切后分为125 bp和303 bp的两个特异片段。同一条件下的阴性对照则出现阴性结果。这一技术用以检测经常规DNA提取的127例HBsAg阳性血清,结果HBV DNA检出率达88％,其中HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为97％,抗HBeAg阳性血清HBV DNA检出率为82％。

DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)磷酸化功能位点推测及功能分析

为阐明DNA拓扑异构酶Ⅱβ结合蛋白1(TopBP1)参与DNA损伤修复应答的分子机制,本研究通过生物信息学分析,发现多个潜在的TopBP1磷酸化位点T860,S887,T1104及T1167,利用分子生物学手段从人cDNA文库中扩增并获得TopBP1克隆质粒,将上述磷酸化位点突变为丙氨酸,观察突变质粒转染细胞对DNA损伤修复的应答反应.结果显示,在粒子射线照射或化疗药物处理细胞后,第1104丙氨酸突变(T1104A)的TopBP1蛋白导致pRPA32-S33的磷酸化水平大幅降低,同时细胞周期检验点失活,严重阻滞了DNA应激反应,证实T1104是TopBP1参与DNA损伤修复的关键活性位点.

基于SHA-3与DNA编码混沌系统的输电线路图像加密算法研究

针对输电线路巡检中无人机(unmanned aerial vehicle,UAV)采集的图像数据存在的安全与加密效率问题,提出一种安全哈希算法(security Hash algorithm-3,SHA-3)与脱氧核糖核酸(deoxyribo nucleic acid,DNA)编码混沌系统相结合的图像加密算法。首先,为加强密钥对图像明文的敏感性,利用SHA-3算法生成巡检图片的哈希值作为超混沌系统的初始值密钥;然后,根据对角线提取规则将图片进行像素块置乱,并使用超混沌系统生成的混沌序列映射DNA编码规则,对置乱完毕的巡检图片进行DNA编码、运算与解码,实现巡检图像的加密与解密;最后,为验证所提方法的有效性以及优越性,以某国网公司实际巡检图像数据为基础,设置密钥空间、密钥敏感性、直方图、信息熵、加密时效等实验对所提算法进行测试分析。结果表明:所提算法相较传统算法安全性更高的同时,具有较好的实时性,可胜任实际巡检中的图像加密任务,为输电线路巡检图像加密任务提供了新的思路和技术方法。