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适配体筛选中单链DNA获取方法研究进展
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作者 白亚龙 廖小艳 +1 位作者 普春敏 邵毅 《上海农业学报》 2024年第2期126-138,共13页
适配体技术近20年来快速发展,在食品安全、环境监测、法医鉴定、生物医药等领域都得到了高度重视。目前,已有大量研究针对小分子、蛋白质、病毒、细菌、细胞等进行了单链脱氧核糖核酸(ssDNA)适配体筛选。然而ssDNA适配体筛选仍然是一项... 适配体技术近20年来快速发展,在食品安全、环境监测、法医鉴定、生物医药等领域都得到了高度重视。目前,已有大量研究针对小分子、蛋白质、病毒、细菌、细胞等进行了单链脱氧核糖核酸(ssDNA)适配体筛选。然而ssDNA适配体筛选仍然是一项费时费力的工作,一般都需要经过10轮左右甚至更多轮的ssDNAdsDNA(双链DNA)-ssDNA重复步骤,直到亲和力强的序列成为主要序列,经过测序后,从中挑选一条或几条亲和力最强的序列。显然,在此过程中ssDNA的获取是适配体筛选的关键步骤,也是限速步骤。本文对适配体筛选研究中ssDNA获取的方法进行了系统综述,期望针对适配体筛选中ssDNA次级文库的获取环节可以展开更多更深入的研究,以提高筛选效率。 展开更多
关键词 适配体 筛选 单链dna 双链dna 聚合酶链式反应
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SELEX技术中制备单链DNA的方法
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作者 徐婷钰 林陈水 《生物化工》 CAS 2024年第2期238-242,共5页
制备单链DNA(ssDNA)是许多常用实验中的重要内容,是通过指数富集的配体系统(SELEX)进行体外筛选核酸适配体的关键步骤之一。目前已报道多种方式可通过双链DNA(dsDNA)制备ssDNA,包括链霉亲和素包被磁珠分离、不对称PCR、不等大小引物PCR... 制备单链DNA(ssDNA)是许多常用实验中的重要内容,是通过指数富集的配体系统(SELEX)进行体外筛选核酸适配体的关键步骤之一。目前已报道多种方式可通过双链DNA(dsDNA)制备ssDNA,包括链霉亲和素包被磁珠分离、不对称PCR、不等大小引物PCR、酶消化、不对称PCR结合酶消化和不对称乳液PCR等,而如何快速高效地制备ssDNA是研究重点。本文综述了常用的几种通过聚合酶链式反应(PCR)制备ssDNA的方法,对其进行综合分析。根据产物的纯度、操作难易、实验成本等方面综合考虑,选择产物高纯度、操作简便且实验成本较低的ssDNA制备方法,为具有不同需求的应用场景提供参考依据。 展开更多
关键词 核酸适配体 单链dna制备 聚合酶链式反应
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DNA条形码技术融入普通昆虫学实验教学
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作者 康泽辉 孙丽娟 +1 位作者 郑桂玲 张晓 《实验室研究与探索》 CAS 北大核心 2024年第3期184-187,212,共5页
为了提升普通昆虫学实验教学质量,以DNA条形码技术为例,尝试将最新科研成果和技术与普通昆虫学实验教学进行融合。介绍了植物保护专业学生掌握DNA条形码技术的必要性,分析了在普通昆虫学实验教学中开展DNA条形码实验的可行性,在样品保存... 为了提升普通昆虫学实验教学质量,以DNA条形码技术为例,尝试将最新科研成果和技术与普通昆虫学实验教学进行融合。介绍了植物保护专业学生掌握DNA条形码技术的必要性,分析了在普通昆虫学实验教学中开展DNA条形码实验的可行性,在样品保存、DNA提取、PCR扩增、电泳检测、测序和分析等方面优化了以COI基因序列作为DNA条形码开展分子鉴定的具体流程,设计了开展DNA条形码专题实验或者将其与传统分类实验结合的实施和考核方案。DNA条形码技术的融入改变了普通昆虫学实验传统教学模式,也为探索创新性实验教学提供了思路。 展开更多
关键词 普通昆虫学 实验设计 课程改革 基因条形码
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THE CLINICAL SIGNIFICANCE OF FLOW CYTOMETRIC DEOXYRIBONUCLEIC ACID MEASUREMENT OF DEPARA-FFINIZED SPECIMEN IN BLADDER TUMOR
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作者 王泽 缪廷杰 +1 位作者 熊汝成 曹世龙 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 1991年第1期77-81,共5页
A retrospective study of flow cytometric measurements on paraffin-embedded tumor specimens from 188 patients with bladder tumor was conducted. The results were analyzed in combination with the morphological variation ... A retrospective study of flow cytometric measurements on paraffin-embedded tumor specimens from 188 patients with bladder tumor was conducted. The results were analyzed in combination with the morphological variation of bladder tumors. It was found that the DNA ploid pottern, degree of infiltration and the multiplicity of bladder tumor were closely related with tumor recurrence, among which the DNA ploid pattern was most significant. In aneuploid bladder tumors the recurrent rate and mean annual recurrence frequency were 76.7% and 1.46, and those in the diploid bladder tumors were 18.7% and 0.33 respectively. Aneuploid was the most indicative parameter of the recurrence in bladder tumors. In addition, according to the DNA ploid pattern and DNA index (DI), the aneuploid tumors in our group were divided into 4 types, namely, tetraploid tumors, npn-euploid with DI(?)1.5, non-euploid tumors with DI>1.5 and two-aneuploid tumors. The results showed that the recurrent rate of tetraploid tumors was relatively lower and it became higher and higher in the following order: non-euploid tumors with DI(?)1.5, non-euploid tumors with DI>1.5, and two-aneuploid tumors. This indicates that there are different biological behaviors in tumors with different ploid pattern. Finally, the correlation between DNA ploid pattern and tumor metastasis was also discussed. 展开更多
关键词 RATE THE CLINICAL SIGNIFICANCE OF FLOW CYTOMETRIC deoxyribonucleic acid MEASUREMENT OF DEPARA-FFINIZED SPECIMEN IN BLADDER TUMOR dna FCM
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聚合酶链反应系统检测人巨细胞病毒DNA的性能验证及评价 被引量:1
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作者 袁方 佟利威 +6 位作者 闫研 吴海涵 李浩桐 陈能能 李好莲 李波 李伯安 《中国医学装备》 2023年第8期39-43,共5页
目的:利用实时荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)系统检测人巨细胞病毒脱氧核糖核酸(HCMV DNA)的性能验证及评价,以满足临床检测需要。方法:收集医院临床样本及第三方提供的标准品,采用实时荧光定量PCR系统检测HCMV DNA试剂的性能及进行... 目的:利用实时荧光定量-聚合酶链式反应(FQ-PCR)系统检测人巨细胞病毒脱氧核糖核酸(HCMV DNA)的性能验证及评价,以满足临床检测需要。方法:收集医院临床样本及第三方提供的标准品,采用实时荧光定量PCR系统检测HCMV DNA试剂的性能及进行评价。依据中国合格评定国家认可委员会发布的《分子诊断检验程序性能验证指南(CNAS-CL039)》《临床化学定量检验程序性能验证指南(CNAS-GL037)》及美国临床和实验室标准化协会(CLSI)扩展(EP)系列文件相关要求对实验室HCMV DNAFQ-PCR系统的检测方法的正确度、测量精密度(含测量批内重复性和测量批间精密度)、线性区间、检出限、抗干扰能力、交叉反应等性能进行验证及评价。结果:荧光定量PCR系统检测HCMV DNA的正确度在允许范围内;低浓度(1.72E+04 copies/ml)、高浓度(2.74E+09 copies/ml)样本批内重复性测量精密度变异系数(CV)分别为3.90%和0.11%,批间测量精密度CV分别为4.05%和0.94%;在4.00E+02~4.00E+09 copies/ml范围内线性关系良好(R^(2)=0.999),符合要求;检测下限可以达到4.00E+02 copies/ml;干扰物(总胆红素、甘油三脂、血红蛋白)样本检测结果与对照样本绝对偏差≤±log0.4;交叉反应病原体[乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、单纯疱疹病毒、人类疱疹病毒4型、人乳头瘤病毒6/11型]检测结果均为阴性。结论:HCMV DNA荧光定量PCR检测方法的各项性能指标与厂家声明相符,可用于临床检测。 展开更多
关键词 人巨细胞病毒 脱氧核糖核酸(dna) 性能验证 实时荧光定量
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Effect of mono-/divalent metal ions on the conductivity characteristics of DNA solutions transferring through a microfluidic channel
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作者 朱洁 薛菁 +3 位作者 赵伟 张琛 冯晓强 王凯歌 《Chinese Physics B》 SCIE EI CAS CSCD 2023年第11期161-167,共7页
Interactions between deoxyribonucleic acid(DNA) and metal ions are vital for maintaining life functions, however,there are still unsolved questions about its mechanisms. It is of great practical significance to study ... Interactions between deoxyribonucleic acid(DNA) and metal ions are vital for maintaining life functions, however,there are still unsolved questions about its mechanisms. It is of great practical significance to study these issues for medical chip design, drug development, health care, etc. In this investigation, the conductivity properties of λ-DNA solutions with mono-/divalent metal ions(Na+, K^(+), Mg^(2+), and Ca^(2+)) are experimentally studied as they are electrically driven through a 5 μm microfluidic channel. Experimental data indicate that the conductivities of λ-DNA solutions with metal ions(M+/M2+) basically tend to reduce firstly and then increase as the voltage increases, of which the turning points varied with the metal ions. When the voltage surpasses turning points, the conductivity of λ-DNA-M+solutions increases with the concentration of metal ions, while that of λ-DNA-M^(2+)solutions decrease. Moreover, the conductivity of λ-DNA-M^(2+)solutions is always smaller than that of λ-DNA-M+solutions, and with high-concentration M^(2+), it is even smaller than that of the λ-DNA solution. The main reasons for the above findings could be attributed to the polarization of electrodes and different mechanisms of interactions between metal ions and λ-DNA molecules. This investigation is helpful for the precise manipulation of single DNA molecules in micro-/nanofluidic space and the design of new biomedical micro-/nanofluidic sensors. 展开更多
关键词 MICROFLUIDICS interaction between deoxyribonucleic acid(dna)and metal ions conductivity-voltage relations asymmetric electrodes
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基于机器学习的DNA N4-甲基胞嘧啶位点预测研究
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作者 杨启钥 《信息与电脑》 2023年第16期29-31,共3页
脱氧核糖核酸(DeoxyriboNucleic Acid,DNA)N4-甲基胞嘧啶(N4-methylcytosine,4mC)修饰涉及基因表达、DNA复制等多个过程,是一种较为常见的DNA位点预测方法。对6个不同物种进行独热编码(One-Hot encoding),在进行算法训练和模型评估后发... 脱氧核糖核酸(DeoxyriboNucleic Acid,DNA)N4-甲基胞嘧啶(N4-methylcytosine,4mC)修饰涉及基因表达、DNA复制等多个过程,是一种较为常见的DNA位点预测方法。对6个不同物种进行独热编码(One-Hot encoding),在进行算法训练和模型评估后发现,支持向量机模型的各项评估结果均高于其他算法,由此说明采用支持向量机模型预测4mC位点是最优选择。 展开更多
关键词 机器学习 dna N4-甲基胞嘧啶 位点预测
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密穗高粱总DNA导入水稻的研究 被引量:25
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作者 洪亚辉 董延瑜 +1 位作者 赵燕 萧浪涛 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第2期87-91,共5页
为了选育高产、优质、多抗的水稻新品种,采用花粉管通道法,将密穗高粱总DNA导入水稻晚粳品种鄂宜105,从D1至D5代变异材料中选育出DH3,DH4,DH5等多个具有高光效、高产和优质的新品系.经随机扩增多态DNA技术... 为了选育高产、优质、多抗的水稻新品种,采用花粉管通道法,将密穗高粱总DNA导入水稻晚粳品种鄂宜105,从D1至D5代变异材料中选育出DH3,DH4,DH5等多个具有高光效、高产和优质的新品系.经随机扩增多态DNA技术对供体、受体、后代进行分子验证,后代中出现了在供体中存在而在受体中不存在的泳带.解剖学观察发现了后代剑叶、穗颈及穗基的输导组织比受体发达,维管束数目比受体增加10%~30%.后代DH3,DH4的光合速率亦显著高于受体.在形态解剖、光合特性和分子水平上进一步证明了高粱DNA片段在受体中的表达和稳定遗传.对DH3,DH4,DH5等品系进行生产示范,增产效果显著,单产高达7500kg/hm2.DH5已于1999年2月通过长沙市品种审定,定名为长晚粳1号.米质分析结果表明,整精米率、蛋白质含量。 展开更多
关键词 高粱 dna导入 水稻 随机扩增多态性 dna分析
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钌(Ⅱ)多吡啶配合物的合成、荧光性质及与脱氧核糖核酸DNA的作用机制研究 被引量:12
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作者 王海滔 胡婷婷 +5 位作者 张黔玲 刘剑洪 任祥忠 李翠华 王芳 张培新 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2008年第13期1565-1571,共7页
设计合成含多个配位中心的多吡啶配体ODCIP(3,4-二氯基苯并咪唑并[4,5-f][1,10]邻菲咯啉)及其钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(bpy)2ODCIP]2+.运用元素分析、红外光谱、核磁谱和质谱对配体及配合物进行结构表征.利用紫外吸收光谱、荧光光谱和粘... 设计合成含多个配位中心的多吡啶配体ODCIP(3,4-二氯基苯并咪唑并[4,5-f][1,10]邻菲咯啉)及其钌(Ⅱ)多吡啶配合物[Ru(bpy)2ODCIP]2+.运用元素分析、红外光谱、核磁谱和质谱对配体及配合物进行结构表征.利用紫外吸收光谱、荧光光谱和粘度法研究了[Ru(bpy)2ODCIP]2+与DNA(脱氧核糖核酸)的作用机制、与Co2+配位后与DNA的作用机制及其荧光变化情况.结果表明[Ru(bpy)2ODCIP]2+与DNA通过部分插入模式作用,[Ru(bpy)2ODCIP]2+与Co2+配位形成的双核配合物[Ru(bpy)2(ODCIP)Co]4+也能与DNA插入结合.进一步利用稳态荧光发射光谱、荧光淬灭实验等方法研究了单核配合物[Ru(bpy)2ODCIP]2+和双核配合物[Ru(bpy)2(ODCIP)Co]4+的荧光性质. 展开更多
关键词 脱氧核糖核酸dna 多吡啶钌配合物 双核 插入 荧光
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瑞香素对体外培养恶性疟原虫超氧化物歧化酶活性及DNA合成的影响 被引量:12
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作者 牟凌云 王琴美 倪奕昌 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期157-159,共3页
目的 研究瑞香素(DPNT)对体外培养恶性疟原虫超氧化物歧化酶(SOD)活性及DNA合成的影响。方法 在恶性疟原虫FCC1株体外培养体系中,以SOD试剂盒检测瑞香素、瑞香素铁盐及去铁胺(DFO)对疟原虫SOD活性的影响。疟原虫培养同步化,利用荧光素Ho... 目的 研究瑞香素(DPNT)对体外培养恶性疟原虫超氧化物歧化酶(SOD)活性及DNA合成的影响。方法 在恶性疟原虫FCC1株体外培养体系中,以SOD试剂盒检测瑞香素、瑞香素铁盐及去铁胺(DFO)对疟原虫SOD活性的影响。疟原虫培养同步化,利用荧光素Hoechest33258测定在瑞香素和去铁胺作用下疟原虫不同发育阶段(环状体和滋养体)的DNA合成水平。结果 与未加药对照组比较,经瑞香素作用后疟原虫总SOD下降约60%(P<0.01),而相应的经去铁胺作用后,疟原虫的总SOD仅下降约22%(P>0.05)。瑞香素铁螯合能力被遮蔽后,几乎失去对疟原虫SOD的影响。同步培养的滋养体阶段疟原虫,在瑞香素作用下DNA合成率明显低于对照组。结论 在体外瑞香素可显著降低疟原虫SOD活性,并影响滋养体阶段疟原虫的DNA合成。 展开更多
关键词 瑞香素 体外培养 恶性疟原虫 超氧化物歧化酶 活性 dna
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不同方法对金黄色葡萄球菌基因组DNA提取效果的比较 被引量:11
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作者 冯飞 梁景龙 +1 位作者 苏丽婷 曾慕衡 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期153-155,共3页
分别采用酶解法、CTAB法、SDS法、CTAB/NaCl法等4种方法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA,并进行比较改良。结果表明,SDS法提取的DNA含量最高;当金黄色葡萄球菌的DNA质量稀释至1.975×10-4pg时,SDS法提取的DNA仍能用于PCR扩增;此外,该... 分别采用酶解法、CTAB法、SDS法、CTAB/NaCl法等4种方法提取金黄色葡萄球菌基因组DNA,并进行比较改良。结果表明,SDS法提取的DNA含量最高;当金黄色葡萄球菌的DNA质量稀释至1.975×10-4pg时,SDS法提取的DNA仍能用于PCR扩增;此外,该方法稳定性好、经济性高,是理想的金黄色葡萄球菌基因组DNA提取方法。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 dna提取 不同方法
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高频超声照射下血卟啉(HP)对脱氧核糖核酸(DNA)结构的影响 被引量:4
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作者 王君 熊大珍 +5 位作者 张朝红 张向东 刘斌 张邯玉 孙伟 栗荣贺 《应用化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期22-26,共5页
采用紫外-可见(UV-Vis)光谱和荧光(FL)光谱研究了超声波照射激活光敏性化合物-血卟啉(HP)对脱氧核糖核酸(DNA)的损伤作用。在超声波和HP的协同作用下,在UV-Vis光谱中DNA溶液的吸光度表现出明显的增色效应,在FL光谱中DNA-EB溶液的荧光强... 采用紫外-可见(UV-Vis)光谱和荧光(FL)光谱研究了超声波照射激活光敏性化合物-血卟啉(HP)对脱氧核糖核酸(DNA)的损伤作用。在超声波和HP的协同作用下,在UV-Vis光谱中DNA溶液的吸光度表现出明显的增色效应,在FL光谱中DNA-EB溶液的荧光强度表现出明显的猝灭现象。考察了在超声波照射和HP存在的条件下,各种因素(如超声波照射时间,HP浓度和溶液酸度等)对DNA损伤程度的影响。结果表明,在一定条件下,DNA的损伤程度随着超声波照射时间的增长和HP浓度的增加而增大。溶液酸度对DNA损伤程度的影响较为复杂。当溶液为弱酸性和中性时对DNA的损伤较为明显,弱碱性时对DNA的损伤程度则又呈下降趋势。另外,在超声波损伤DNA的同时,溶液中的HP浓度也呈现出明显的下降趋势,说明HP也遭到了破坏。同时还探讨了超声波照射激活HP对DNA损伤的可能机理,认为对DNA损伤的现象可以采用"声致发光"和"热点"形成的机理进行解释。 展开更多
关键词 超声 血卟啉(HP) 损伤 脱氧核糖核酸(dna)
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高粱DNA导入水稻的RAPD分子验证 被引量:12
13
作者 向平安 洪亚辉 董延瑜 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 1999年第1期6-8,共3页
对以密穗型高粱DNA为供体、通过花粉管通道技术导入水稻所获得的水稻后代进行了RAPD分子验证.结果表明:从122个引物中找到9个引物检测出DNA的多态性。
关键词 高梁 脱氧核糖核型 水稻 RAPD
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外源性DNA对小鼠自身DNA的保护作用 被引量:6
14
作者 唐孝礼 许实波 周永红 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1998年第4期125-127,共3页
采用骨髓有核细胞微核率测定法,检测小鼠服用鲤鱼精巢DNA后,60Co-γ射线对小鼠骨髓细胞染色体损伤的严重程度,结果表明,小鼠每天每千克体质量灌胃鲤鱼精巢DNA100mg,连续15d,可使总剂量6Gy的60Co-γ射... 采用骨髓有核细胞微核率测定法,检测小鼠服用鲤鱼精巢DNA后,60Co-γ射线对小鼠骨髓细胞染色体损伤的严重程度,结果表明,小鼠每天每千克体质量灌胃鲤鱼精巢DNA100mg,连续15d,可使总剂量6Gy的60Co-γ射线致小鼠骨髓有核细胞微核发生率减少47.2%(P<0.001);采用全血UDS测定法,检测小鼠血细胞DNA受紫外线损伤后的修复速度,结果表明,小鼠每天每千克体质量灌胃鲤鱼精巢DNA30mg,连续3个月,其全血UDS增加40.02%(P<0.001). 展开更多
关键词 鲤鱼 精巢 微核率 dna 外源性
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DNA共价修饰单壁碳纳米管电极的制备及与VB_6相互作用的研究 被引量:6
15
作者 张怀 张云怀 +4 位作者 李静 肖鹏 乔雷 李泽全 樊小燕 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期830-834,共5页
利用单壁碳纳米管(SWNTs)上的羧基与DNA末端的氨基形成酰胺共价键从而共价修饰SWNTs,制备了新型DNA共价修饰SWNTs电极。傅立叶红外光谱表明DNA共价结合在SWNTs上,用扫描电镜(SEM)表征了SWNTs、DNA共价修饰的SWNTs的结构与形貌。循环伏安... 利用单壁碳纳米管(SWNTs)上的羧基与DNA末端的氨基形成酰胺共价键从而共价修饰SWNTs,制备了新型DNA共价修饰SWNTs电极。傅立叶红外光谱表明DNA共价结合在SWNTs上,用扫描电镜(SEM)表征了SWNTs、DNA共价修饰的SWNTs的结构与形貌。循环伏安法(CV)研究了DNA修饰SWNTs电极的电化学特性,通过改变扫描速率,发现DNA修饰电极的过程属于扩散控制过程。维生素B6(VB6)与SWNTs上DNA的相互作用研究结果表明:DNA分子共价修饰在SWNTs上后仍具有生物活性,且能够与其他生物分子发生相互作用。 展开更多
关键词 单壁碳纳米管 脱氧核糖核酸 修饰 维生素B6 电化学
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硫堇与DNA相互作用及DNA光散射/荧光比率测定方法 被引量:7
16
作者 李原芳 黄承志 谭克俊 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2008年第4期529-532,共4页
在pH4.56的BR缓冲溶液中,DNA能使硫堇的光散射增强,荧光发生猝灭。本实验基于硫堇的三维光谱讨论了其发光属性,并通过在普通荧光光度计上单次扫描同时获得的539nm处的光散射强度(I539)与630nm处的荧光强度(F630)之比,建立了测定痕量... 在pH4.56的BR缓冲溶液中,DNA能使硫堇的光散射增强,荧光发生猝灭。本实验基于硫堇的三维光谱讨论了其发光属性,并通过在普通荧光光度计上单次扫描同时获得的539nm处的光散射强度(I539)与630nm处的荧光强度(F630)之比,建立了测定痕量DNA的光散射/荧光比率法。当硫堇的浓度为1.0×10^-4mol/L时,方法的线性范围为0.1~1.6mg/L,检测限为(3σ)为12.0μg/L。将所建立的方法用于DNA合成样品的测定,回收率为94.9%~107.0%,相对标准偏差小于3.0%。 展开更多
关键词 硫堇 脱氧核糖核酸(dna) 光散射/荧光比率 三维光谱
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雷公藤总DNA提取方法的研究 被引量:5
17
作者 范文洁 洪伟 +3 位作者 李键 陈昕 林晗 吴承祯 《福建林学院学报》 CSCD 北大核心 2011年第1期8-12,共5页
由于雷公藤叶片富含多糖及酚类物质,要获得高质量的DNA有一定难度。本研究以雷公藤植物叶片为材料,对传统提取方法进行改进、优化,比较了4种不同的提取方法,最终获得了一种以CTAB法为基础,试剂盒纯化的获得高质量DNA的方法。试验结果表... 由于雷公藤叶片富含多糖及酚类物质,要获得高质量的DNA有一定难度。本研究以雷公藤植物叶片为材料,对传统提取方法进行改进、优化,比较了4种不同的提取方法,最终获得了一种以CTAB法为基础,试剂盒纯化的获得高质量DNA的方法。试验结果表明,使用该方法从雷公藤叶片中分离的DNA,纯度高、杂质少,且相对于其他方法,试验成功率明显提高,适用性强。 展开更多
关键词 雷公藤 dna提取 CTAB法 试剂盒法试验
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聚电解质结构及盐浓度对基于DNA和聚阳离子的层层组装型大孔薄膜结构的影响 被引量:3
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作者 于永江 魏光耀 +5 位作者 周颖 李文超 李秋顺 王珺楠 姚卫国 董文飞 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2013年第11期2644-2649,共6页
选择2种不同类型的聚阳离子[强电解质型聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)和弱电解质型聚盐酸丙烯胺(PAH)],分别和脱氧核糖核酸(DNA)分子通过静电吸附作用制备层层组装膜.利用原子力显微镜和紫外-可见分光光度计研究了聚阳离子结构和组装分... 选择2种不同类型的聚阳离子[强电解质型聚二烯丙基二甲基氯化铵(PDDA)和弱电解质型聚盐酸丙烯胺(PAH)],分别和脱氧核糖核酸(DNA)分子通过静电吸附作用制备层层组装膜.利用原子力显微镜和紫外-可见分光光度计研究了聚阳离子结构和组装分子溶液中盐(NaCl)浓度对大孔结构及薄膜生长规律的影响.结果表明,在DNA/PDDA体系中,盐浓度对于大孔结构的形成起到关键性作用.而对于DNA/PAH薄膜体系,即使增加DNA或PAH溶液中盐的浓度,也不会有大孔结构出现,这主要是由PAH分子的弱电解质特性决定的. 展开更多
关键词 自组装 聚阳离子 脱氧核糖核酸 大孔多层薄膜
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磁珠分离纯化技术在实时荧光定量PCR检测HBVDNA中的应用 被引量:5
19
作者 李成德 岑丽莲 +6 位作者 陈金强 黄玉环 梁梅芳 梁洁玲 黄晓佳 陈雄毅 李海珠 《现代检验医学杂志》 CAS 2011年第3期68-71,共4页
目的评价磁珠分离纯化技术(简称磁珠法)提取核酸的重复性、提取效率一致性、线性范围、灵敏度及抗干扰性,初步探讨其在实时荧光定量PCR检测HBVDNA中的应用价值。方法采用磁珠法提取HBVDNAlog值分别为4。16,5.23和7.04的质控血清... 目的评价磁珠分离纯化技术(简称磁珠法)提取核酸的重复性、提取效率一致性、线性范围、灵敏度及抗干扰性,初步探讨其在实时荧光定量PCR检测HBVDNA中的应用价值。方法采用磁珠法提取HBVDNAlog值分别为4。16,5.23和7.04的质控血清进行重复性试验,HBVDNA阳性血清10倍梯度稀释的系列标本评价其提取效率一致性,HBVDNA强阳性血清作10倍系列稀释后检测其线性范围,HBVDNA标准血清与舍干扰成分(溶血、黄痘和脂血)的HBVDNA阴性血清,按4:0,3:1,2:2,1:3和0:4比例分别混合成5个不同浓度标本用于千扰试验。以提取方法为沉淀煮沸法的PCR荧光诊断试剂作对照,应用磁珠法及配套扩增试剂检测288份乙型肝炎患者血清HBVDNA含量,并比较测定结果。结果磁珠法批内和批间平均变异系数分别为3.66%和4.75%;HBVDNA含量不同的血清提取效率均在98%以上;在1.28×10^2 IU/L~1.28×10^9IU/L之阍有良好的线性关系;最低检出限为60.5IU/L;不同浓度的黄疸和脂血对扩增曲线和实验结果无明显影响;血清中血红蛋白浓度至50g/L时,HBVDNA结果相差约0.5~1.0个数量级。磁珠法和沉淀煮沸法的阳性率分别为88.19%和82.64%。当沉淀煮沸法检测结果log值处在2.699~4.000之间时,两法检测相应标本结果差异有统计学意义。结论磁珠法高效、快速和易于自动化,应用于HBVDNA检测对乙型肝炎患者的临床诊断和疗效监测将有十分重要的意义。 展开更多
关键词 磁珠分离纯化技术 乙型肝炎病毒 脱氧核糖核酸 实时荧光PCR
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高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合 被引量:3
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作者 张若蘅 杨栩 +1 位作者 李崇熙 徐筱杰 《色谱》 CAS CSCD 北大核心 1994年第4期297-298,共2页
高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合张若蘅,杨栩,李崇熙,徐筱杰(北京大学化学系北京100871)1前言在脱氧核糖核酸(DNA)结合蛋白质中,除了螺旋-转折。螺旋、锌指和亮氨酸拉链三种主要结构域之外 ̄[1]... 高效亲和色谱研究含有特定结构域肽与DNA的结合张若蘅,杨栩,李崇熙,徐筱杰(北京大学化学系北京100871)1前言在脱氧核糖核酸(DNA)结合蛋白质中,除了螺旋-转折。螺旋、锌指和亮氨酸拉链三种主要结构域之外 ̄[1],近年来,一类含有β-转折结构的S... 展开更多
关键词 氨基酸 高效亲和色谱 结合作用
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