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甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶促进腹壁缺损修复
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作者 刘忠钰 李文娅 +5 位作者 范永鸿 吕双 裴娟 陈娅琴 刘倍余 孙红玉 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第10期2074-2082,共9页
背景:目前用于填充腹壁缺损部位的合成高分子材料(如聚丙烯或聚酯)不仅缺乏可降解性和生物活性,还难以适应复杂形状伤口需求,因此,找到免疫原性低、组织相容性好的生物活性材料成为腹壁缺损修复研究的热点。目的:制备甲基丙烯酰化改性... 背景:目前用于填充腹壁缺损部位的合成高分子材料(如聚丙烯或聚酯)不仅缺乏可降解性和生物活性,还难以适应复杂形状伤口需求,因此,找到免疫原性低、组织相容性好的生物活性材料成为腹壁缺损修复研究的热点。目的:制备甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,探讨其在腹壁缺损中的潜在应用价值。方法:(1)依次用0.25%胰蛋白酶、1%Triton X-100对猪真皮进行脱细胞处理,获得真皮细胞外基质;胃蛋白酶消化真皮细胞外基质,经甲基丙烯酸酐改性后光交联形成甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,扫描电镜观察水凝胶的微观形貌,测试其流变学性能、溶胀性等理化性质;(2)将L929成纤维细胞接种到甲基丙烯酰化改性的真皮细胞外基质水凝胶中,检测细胞相容性;(3)将12只SD大鼠随机分为2组(n=6),创建保留腹膜的腹壁缺损模型,聚丙烯组缺损部位填充聚丙烯材料,水凝胶组缺损部位填充甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶,两组创面皮肤均用聚丙烯材料覆盖,观察创面愈合情况并进行组织学分析。结果与结论:(1)采用酶解法对猪真皮进行脱细胞后具有良好的脱细胞效果,并且原有的糖胺聚糖及胶原蛋白保留较好。扫描电镜下可见甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶为疏松多孔结构,孔径在70-120μm之间,该水凝胶的溶胀比为(16.88±3.24)%,吸水率为(94.24±1.11)%,流变学性能测试表明该水凝胶状态稳定且具有剪切变稀特点,具备可注射性;(2)CCK-8检测与Live/Dead染色结果显示,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶具有良好的细胞相容性;(3)动物实验结果显示,实验组术后7,10,14 d的皮肤创面愈合率高于对照组(P <0.05);皮肤与肌层组织苏木精-伊红、Masson染色显示,与聚丙烯组比较,水凝胶组术后14 d的皮肤创面上皮化情况、毛囊生成、胶原纤维排列及新生血管情况更好,术后28 d的皮肤创面新生组织结构与正常组织相近,并且瘢痕增生较少,术后28 d时可见少量肌肉组织再生;(4)结果表明,甲基丙烯酰化改性真皮细胞外基质水凝胶可促进腹壁缺损大鼠的皮肤创面愈合和肌肉组织再生。 展开更多
关键词 猪真皮 真皮细胞外基质 甲基丙烯酰化改性 水凝胶 光固化 腹壁缺损 皮肤愈合 肌肉组织再生
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NaOH消蚀法制备胎儿脱细胞真皮基质的研究 被引量:9
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作者 夏建春 米立国 +1 位作者 高英 王丽 《中国临床解剖学杂志》 CSCD 北大核心 2005年第4期409-412,共4页
目的:探索NaOH消蚀法对胎儿真皮基质的成分及其形态结构的影响。方法:使用NaOH消蚀法制备胎儿皮肤的脱细胞真皮基质(ADM),应用组织化学和免疫组织化学染色方法检测细胞的余留及细胞外基质成分的破坏情况,应用扫描电镜观察ADM的构筑。结... 目的:探索NaOH消蚀法对胎儿真皮基质的成分及其形态结构的影响。方法:使用NaOH消蚀法制备胎儿皮肤的脱细胞真皮基质(ADM),应用组织化学和免疫组织化学染色方法检测细胞的余留及细胞外基质成分的破坏情况,应用扫描电镜观察ADM的构筑。结果:NaOH消蚀处理16h即可去除真皮细胞成分。制备的ADM韧性好,勿需戊二醛交联。弹性纤维的含量有所减少而胶原纤维形态完整,排列正常,保留了基本的真皮构筑。HLA-DR呈阴性,Fibronectin(FN)呈弱阳性,Laminin(LN)和Ⅳ型胶原均呈阴性。结论:NaOH消蚀法简易经济,去除细胞成分较彻底,所制备的ADM韧性好,胶原纤维形态完整,排列正常,但对基膜的成分及结构破坏较重。 展开更多
关键词 NAOH消蚀法 脱细胞真皮基质 细胞外基质 胎儿
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毛乳头细胞凝集性生长对诱导毛囊样结构形成能力的影响 被引量:15
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作者 麦跃 刘荣卿 +3 位作者 伍津津 程波 唐书谦 钟白玉 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1197-1200,共4页
目的 以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为 ,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响。方法 传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后 ,促进形成凝集性生长团 ,... 目的 以细胞外基质成分纤维连接蛋白促进培养的人头皮毛乳头细胞凝集性生长行为 ,观察毛乳头细胞的凝集性生长对诱导毛囊形成能力的影响。方法 传代培养的人头皮毛乳头细胞经细胞外基质纤维连接蛋白预处理后 ,促进形成凝集性生长团 ,再与毛囊上皮细胞共同移植于裸鼠皮下 ,分别于 8、12周进行组织学检查 ,观察毛囊形成及分化程度。结果  8周后纤维连接蛋白预处理的毛乳头细胞组可见有毛囊样结构形成 ,未处理组仅见松散细胞团 ;12周后两组均可见有毛囊样结构形成 ,但纤维连接蛋白预处理组较未处理组诱导形成毛囊样结构分化更成熟 ;真皮成纤维细胞组未见有毛囊样结构形成。结论 毛乳头细胞的凝集性生长特性对其诱导毛囊形成的能力有密切的关系 ,细胞呈凝集性生长后 ,其生物学功能增强。 展开更多
关键词 毛乳头细胞 毛囊重建 细胞外基质 裸鼠
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冰川水和白雪茶提取物延缓人真皮成纤维细胞衰老的实验研究 被引量:11
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作者 陈迪 章漳 +2 位作者 蒋耀权 方兆华 丛峰松 《天然产物研究与开发》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期469-474,共6页
本文主要研究了冰川水和白雪茶提取物对正常人真皮成纤维细胞的抗衰老作用及其潜在的机制。用冰川水和白雪茶提取物处理正常人真皮成纤维细胞,检测了不同处理对细胞活性、细胞外基质成分及其水解酶表达水平的影响。结果显示,冰川水和白... 本文主要研究了冰川水和白雪茶提取物对正常人真皮成纤维细胞的抗衰老作用及其潜在的机制。用冰川水和白雪茶提取物处理正常人真皮成纤维细胞,检测了不同处理对细胞活性、细胞外基质成分及其水解酶表达水平的影响。结果显示,冰川水和白雪茶提取物可以提高人真皮成纤维细胞的增殖活性和能量代谢水平,促进透明质酸和弹性蛋白的表达;此外,白雪茶提取物还可以促进I型胶原蛋白的表达和下调弹性蛋白酶的mRNA表达水平;两者共同作用时影响更显著。以上研究表明,冰川水和白雪茶提取物有延缓皮肤衰老的作用,作用机制与两者可增强成纤维细胞活力,提高外基质成分的表达水平并抑制部分成分的降解有关。 展开更多
关键词 冰川水 白雪茶 抗衰老 成纤维细胞 细胞活性 细胞外基质
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颗粒状脱细胞真皮基质的形态学特征及理化性能体外研究 被引量:4
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作者 左海斌 彭代智 +3 位作者 郑必祥 何升东 周新 刘敬 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期4-8,共5页
目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和... 目的研究颗粒状脱细胞真皮基质(particulate acellular dermal matrix,PADM)的体外形态学特征与理化性能。方法收集SD大鼠背部皮肤样本,采用本实验室的脱细胞方法制备片状脱细胞真皮基质(acellular dermal matrix,ADM)并分析其内胞核和DNA残留情况。将片状ADM切割成不同规格的PADM,并结合大体观察、组织学分析、电镜技术、激光粒度分析仪和傅里叶变换红外光谱仪检测其外观轮廓、形态学、粒径分布和胶原分子结构。并将其复合人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)体外培养24 h,观察PADM与HUVEC的黏附情况。结果脱细胞方法有效降低了ADM的DNA含量[(1.51±0.37)μg/mgvs(0.30±0.09)μg/mg]。制备的PADM为白色颗粒,外形近似于长方体或立方体,显微镜下HE染色观察显示颗粒内部胶原纤维束结构疏松。扫描电镜显示颗粒断面结构疏松,透射电镜显示胶原原纤维周期性横纹结构和均匀分布的胶原原纤维间隙。激光粒度分析仪检测显示其粒度分布集中,例如,规格为0.2 mm的PADM,其80%(d0.1~d0.9)的粒径分布于233~487μm。FTIR结果显示,PADM分别在1 659、1 549、1 239 cm-1处出现的特征吸收峰,表明其保留了胶原分子的α-helix、β-sheet和β-turn二级结构,且体外HUVEC较易黏附于PADM。结论室温条件下,切割法制备的新型PADM形态规则,粒径分布集中,胶原纤维束形态和胶原分子的二级结构保存良好。 展开更多
关键词 细胞外基质 颗粒状脱细胞真皮基质 粒径分布 傅里叶变换红外光谱仪
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微粒化脱细胞真皮基质(mADM)面部年轻化的专家共识(2021版) 被引量:7
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作者 王晓阳 石冰 +8 位作者 李勤 张歌 王飏 刘红梅 洪伟 黎立 于晓春 高扬 曾东 《中国医疗美容》 2021年第4期17-24,共8页
1前言数十年以来的医疗美容基础及临床研究实践表明,面部衰老包含皮肤质地的改变、软组织松垂与容量的减少、韧带老化及骨组织的吸收等多重因素。因此,面部年轻化的合理治疗必然是多种方法、多维度序贯性的联合治疗方案。
关键词 脱细胞真皮基质 微粒化脱细胞真皮基质 细胞外基质 组织工程再生支架 专家共识
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高糖环境下抑瘤素对人皮肤成纤维细胞增殖和细胞外基质分泌的影响 被引量:2
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作者 刘露露 符学铭 +1 位作者 薛碧宇 薛斌 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期955-963,共9页
目的探讨高糖环境下抑瘤素(oncostatin M,OSM)对人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)增殖和细胞外基质分泌的影响及其可能的作用机制。方法(1)高糖模型建立:人皮肤成纤维细胞分为5组,分别给予5、10、15、20、25 mmol/L葡... 目的探讨高糖环境下抑瘤素(oncostatin M,OSM)对人皮肤成纤维细胞(human dermal fibroblasts,HDFs)增殖和细胞外基质分泌的影响及其可能的作用机制。方法(1)高糖模型建立:人皮肤成纤维细胞分为5组,分别给予5、10、15、20、25 mmol/L葡萄糖处理;采用MTT检测高糖培养24、36、48 h各组细胞的增殖活力,Western blot检测对照组(5 mmol/L葡萄糖)和高糖组(20 mmol/L葡萄糖)细胞培养24、36、48 h后ERK、p-ERK和CyclinD1蛋白表达。(2)探讨OSM对高糖模型作用的最佳浓度:细胞分为5组,对照组给予20 mmol/L葡萄糖处理,其余各组分别给予20 mmol/L葡萄糖+25、50、100、200 ng/mL OSM处理;采用MTT检测各组细胞培养24、36、48 h后的增殖活力;Western blot检测各组细胞CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin蛋白表达。(3)探讨OSM对高糖模型的作用的机制:将细胞分为对照组、高糖组、高糖+OSM组、高糖+OSM+抑制剂PD98059组。流式细胞仪测定各组细胞周期,Western blot检测ERK、p-ERK、CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin等相关因子的蛋白表达,q-PCR验证各组细胞ERK1/2、CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin基因相对表达量的差异。结果与对照组比较,经20 mmol/L葡萄糖处理后,HDFs的增殖活力显著降低(P<0.001),G1期细胞增多(P<0.01),S期细胞显著减少(P<0.01);ERK、p-ERK、CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin蛋白表达显著降低(P<0.01,P<0.05)。与高糖组比较,100 ng/mL OSM处理高糖组48 h后,细胞的增殖活力显著增高(P<0.001);G1期细胞减少(P<0.05),S期细胞显著增多(P<0.05);ERK、p-ERK、CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、Fibronectin的蛋白表达显著增高(均P<0.01);q-PCR结果与Western blot结果基本一致,差异均有统计学意义(P<0.05)。当ERK通路特异性小分子抑制剂PD98059阻断ERK信号通路后,上述效应显著减弱(P<0.05)。结论OSM可能通过ERK信号通路逆转高糖对HDFs增殖和细胞外基质分泌的抑制作用。 展开更多
关键词 抑瘤素 人皮肤成纤维细胞 高糖 细胞增殖 ERK 细胞外基质
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Novel technique for a symptomatic subscapularis herniation through a scapu-lar defect 被引量:1
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作者 Luis Grau Kevin Chen +1 位作者 Ali A Alhandi Benjamin Goldberg 《World Journal of Orthopedics》 2017年第2期208-211,共4页
Fractures of the scapula are rare and have been reported to account for only 1% of all fractures and 3%-5% of upper extremity fractures. Several studies have reported successful outcomes with non-operative treatment o... Fractures of the scapula are rare and have been reported to account for only 1% of all fractures and 3%-5% of upper extremity fractures. Several studies have reported successful outcomes with non-operative treatment of scapula fractures. Although non-operative treatments are successful in a very high percentage of patients, very few cases of non-union of scapular body fractures have been reported. In our review of the literature, we found two case reports of scapular body fractures developed into non-unions. In both of these cases, open reduction and internal fixation with reconstruction plates and bone graft was successful at eliminating pain and restoring function. This is a case report of a patient with a symptomatic, extra-articular scapular body defect from a non-union that was treated successfully with an acellular dermal extracellular matrix and bone graft using a novel 展开更多
关键词 Scapular fractures Mesh repair NON-UNION Bone graft ACELLULAR dermal extracellular matrix
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人真皮成纤维细胞受长波紫外线辐照引起基因表达动态变化 被引量:4
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作者 殷庆飞 陈田 《日用化学工业》 CAS 北大核心 2021年第9期874-880,共7页
通过不同累积剂量(1~7天)长波紫外线UVA辐照人原代真皮成纤维细胞,研究其细胞外基质、细胞周期及衰老相关基因动态变化情况。结果显示,胶原蛋白基因COL1A2、COL4A1在辐照1天时表达上调,辐照3天后下降;而弹性蛋白基因ELN在辐照1天时表达... 通过不同累积剂量(1~7天)长波紫外线UVA辐照人原代真皮成纤维细胞,研究其细胞外基质、细胞周期及衰老相关基因动态变化情况。结果显示,胶原蛋白基因COL1A2、COL4A1在辐照1天时表达上调,辐照3天后下降;而弹性蛋白基因ELN在辐照1天时表达不变,辐照3天后下降;基质金属蛋白酶基因MMP1、MMP9在辐照5天时表达显著上调。UVA辐照3天和5天后,细胞阻滞于S期和G2/M期。细胞周期相关基因CDKN2A基因表达下调,TP53基因表达先上调后下调;CDKN1A基因表达上调,且在UVA辐照3天时上调幅度最大。衰老相关基因SIRT1、HDAC1与对照组相比,表现出先上调后下降,再上升的动态变化情况。结果表明UVA照射引发的细胞衰老变化是一个程序性调控的过程,成纤维细胞不同类型基因在UVA辐照下表现出差异的动态变化趋势,UVA辐照诱导细胞衰老模型应用于化妆品抗衰老功效研究时,应根据具体需求选择合适的生物学标志物。 展开更多
关键词 真皮成纤维细胞 光衰老 长波紫外线 细胞外基质 细胞周期 化妆品
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人脐带间充质干细胞对人真皮成纤维细胞增殖和细胞外基质基因表达的影响 被引量:2
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作者 章毅 陈侃俊 +4 位作者 伍婷 祁成 金魏名 孔凡瑞 陈亮 《中国医药生物技术》 2019年第3期215-223,共9页
目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSCs)对人真皮成纤维细胞(HDFib)增殖与细胞外基质相关基因表达的影响及其可能机制。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备hucMSCs,用流式细胞术鉴定P3代hucMSCs表面标记抗原,用油红O染色、... 目的探讨人脐带间充质干细胞(hucMSCs)对人真皮成纤维细胞(HDFib)增殖与细胞外基质相关基因表达的影响及其可能机制。方法采用Ⅱ型胶原酶消化法从新生儿脐带中分离制备hucMSCs,用流式细胞术鉴定P3代hucMSCs表面标记抗原,用油红O染色、茜素红S染色和Masson染色进行间充质干细胞三向分化能力鉴定;随后与P3代HDFib进行transwell共培养,对照组transwell小室上添加等量培养基,观察24、48和72h时两组HDFib的细胞形态,CCK8法进行细胞增殖检测,qRT-PCR法测定培养24和48h时HDFib主要细胞外基质蛋白collagenⅠ、elastin、fibronectin、MMP-1和细胞信号转导相关基因PI3K、Akt、p38和caspase3 mRNA表达水平。结果制备获得的hucMSCs呈典型成纤维细胞样并贴壁生长,其表面间充质干细胞标志性抗原CD105、CD90、CD73阳性表达率分别为96.97%、99.75%和99.81%,诱导培养16 d后出现明显的成脂、成骨和成软骨细胞特性。hucMSCs共培养处理24、48和72 h,HDFib细胞存活率较对照组分别显著增加了7.29%(P<0.01)、25.82%(P<0.05)和11.74%(P<0.05),与形态学观察结果一致。qRT-PCR结果显示,hucMSCs共培养处理24 h,HDFib elastin和fibronectin基因表达分别上调为对照组的1.45倍(P<0.01)和1.30倍(P<0.05),PI3K mRNA水平上调为对照组的1.19倍(P<0.05);共培养48 h时,collagen I、elastin、fibronectin和PI3K、Akt分别上调2.60倍(P<0.001)、3.66倍(P<0.05)、3.45倍(P<0.01)和1.43倍(P<0.05)、1.65倍(P<0.05),MMP-1、p38和caspase3转录水平显著降低至对照组的0.70倍(P<0.01)、0.60倍(P<0.01)和0.86倍(P<0.05)。结论hucMSCs能够显著促进正常HDFib增殖,同时提高HDFib I型胶原、弹性蛋白和纤维粘连蛋白转录水平,是理想的皮肤组织工程学种子细胞。hucMSCs对HDFib细胞外基质的调节作用可能与激活HDFib皮肤创伤修复信号通路PI3K/Akt、下调细胞外基质调节基因p38、凋亡基因caspase3的mRNA水平有关。 展开更多
关键词 人脐带间充质干细胞 人真皮成纤维细胞 细胞外基质 胶原
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脱细胞真皮基质黏膜组织补片在咽部修复中的应用 被引量:36
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作者 彭解人 蔡翔 +5 位作者 王心涛 许耀东 关中 龚坚 黄晓明 郑亿庆 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期195-199,共5页
目的 探讨脱细胞真皮基质黏膜组织补片(acellular dermal matrix,ADM)在咽部的修复作用。方法 2003年6月—2004年12月对18例患者行口咽、喉咽癌切除术,其中4例肿瘤原发于口咽和喉咽后壁,保留喉功能切除肿瘤,用ADM重建口咽和喉咽... 目的 探讨脱细胞真皮基质黏膜组织补片(acellular dermal matrix,ADM)在咽部的修复作用。方法 2003年6月—2004年12月对18例患者行口咽、喉咽癌切除术,其中4例肿瘤原发于口咽和喉咽后壁,保留喉功能切除肿瘤,用ADM重建口咽和喉咽后壁;3例肿瘤原发一侧梨状窝侧壁和咽后壁,声带活动正常的,保留喉功能行咽后壁或侧壁切除术,将ADM缝在椎前筋膜和咽侧壁上关闭咽腔,用保留的胸锁乳突肌加固;对11例肿瘤累及颈段食管,声带活动受限及固定者,行喉全切除或喉咽全切除术,将ADM缝在椎前筋膜上重建喉咽后壁,用胸大肌肌皮瓣重建喉咽前壁和侧壁,重建密闭腔道。术后全部患者进行放射治疗,放疗剂量60~70Gy。结果 18例患者术后未发生排异反应,无咽瘘,创面均黏膜化。2例患者切口皮下感染,经换药后伤口愈合。所有患者均可经口进食。7例保留喉的患者恢复了喉功能,拔除气管套管,但其中3例进食流质时有轻度误咽。术后随访12~30个月,中位随访时间为19.38个月,补片移植区无排异反应、瘢痕和挛缩。随访18月以上11例,其中3例肿瘤复发,1例再次手术后健在,2例死于全身转移。结论 ADM来源方便,组织相容性好,厚薄适宜,手术操作简便,可联合胸大肌肌皮瓣或其他颈部组织修复咽部环周缺损,是一种新的安全有效的修复材料。 展开更多
关键词 咽肿瘤 修复外科手术 细胞外基质 脱细胞真皮基质黏膜组织补片
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瘢痕形成机制的研究:真皮“模板缺损”学说 被引量:64
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作者 陆树良 青春 +7 位作者 刘英开 王西樵 向军 毛志刚 章伏生 金曙雯 董叫云 花兰女 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期6-12,共7页
创面愈合过程由细胞、细胞因子、细胞外基质等共同参与完成,以往瘢痕形成机制的研究主要着眼于这些环节。随着研究的深入和范围的拓展,人们逐渐意识到:在创面愈合过程中,细胞、细胞因子、细胞外基质等扮演着“参与者”和“执行者”... 创面愈合过程由细胞、细胞因子、细胞外基质等共同参与完成,以往瘢痕形成机制的研究主要着眼于这些环节。随着研究的深入和范围的拓展,人们逐渐意识到:在创面愈合过程中,细胞、细胞因子、细胞外基质等扮演着“参与者”和“执行者”的角色,对瘢痕形成而言,其变化及相互调控等诸多环节可能属于后续的“连锁”或“瀑布”效应,是一种修复的“中间过程”,而非导致瘢痕超常增生的始动因素和根本原因。 展开更多
关键词 瘢痕 细胞外基质 修复细胞 真皮 模板缺损
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异体颗粒状脱细胞真皮基质与自体刃厚皮复合移植修复大鼠皮肤缺损创面效果观察 被引量:8
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作者 左海斌 彭代智 +4 位作者 郑必祥 陈博 刘小玲 王勇 周灵 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期10-15,共6页
目的观察异体颗粒状脱细胞真皮基质(PADM)与自体刃厚皮复合移植修复大鼠皮肤缺损创面的效果。方法采用随机数字表法将12只SD大鼠分为实验组和对照组,每组6只。于2组大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,实验组创面复合移植SD大鼠异体PADM... 目的观察异体颗粒状脱细胞真皮基质(PADM)与自体刃厚皮复合移植修复大鼠皮肤缺损创面的效果。方法采用随机数字表法将12只SD大鼠分为实验组和对照组,每组6只。于2组大鼠背部制作全层皮肤缺损创面,实验组创面复合移植SD大鼠异体PADM(扩张比10:5)及厚度0.20mm的自体刃厚皮,对照组创面仅移植厚度0.20mm自体刃厚皮。术后2周起打开敷料观察大鼠创面愈合情况。术后2、3、4、6、8、12、20周计算2组创面移植皮片成活率、收缩率(或扩张率)。术后20周取2组创周正常皮肤及创面皮肤标本,采用HE染色法观察胶原纤维束结构,测量胶原纤维束直径和间隙率;用天狼星红染色法观察I、Ⅲ型胶原分布情况,测量I、Ⅲ型胶原含量及其比值。对实验数据行独立样本t检验、Levene检验、t’检验。结果(1)术后2周,实验组大鼠创面移植皮片成活率[(76.1±13.1)%]低于对照组[(94.5±1.3)%,t’=3.440,P=0.018]。术后3周,实验组创面移植皮片收缩率[(34±8)%]明显大于对照组[(16±12)%,t=-3.211,P=0.009];术后8周,2组移植皮片扩张率接近一致。(2)HE染色和天狼星红染色显示,与大鼠创周正常皮肤比较,对照组移植皮片胶原纤维束呈均质化改变,胶原纤维纤细,排列紊乱;实验组移植皮片胶原纤维束结构、排列更接近创周正常皮肤,可见未完全降解的PADM。与对照组创面皮肤胶原纤维束直径[(7.3±1.4)um]、间隙率[(17±4)%]、I型胶原含量[(68.1±8.4)%]、Ⅲ型胶原含量[(32.0±8.4)%]以及I、Ⅲ型胶原比例(2.3±1.0)比较,实验组胶原纤维束更粗[(9.6±0.8)um,t=-3.562,P=0.005],间隙率更大[(24±5)%,t=-2.760,P=0.020],I型胶原含量更高[(80.2±5.4)%,t=-2.981,P=0.014],Ⅲ型胶原含量更低[(19.8±5.4)%,t=2.981,P=0.014],I、Ⅲ型胶原比例更高(4.3±1.2,t=-3.204,P=0.009)。实验组创面皮肤上述胶原相关指标更接近于创周正常皮肤水平。结论异体PADM在体内作为真皮再生模板,有助于改善自体刃厚皮所修复的大鼠皮肤缺损创面中真皮胶原纤维束的结构,提高再生真皮组织的成熟度。 展开更多
关键词 皮肤移植 细胞外基质 颗粒状脱细胞真皮基质 真皮再生
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烧伤变性脱细胞真皮基质可再生利用的实验研究 被引量:12
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作者 王晓川 李川 +3 位作者 单菲 王文婷 朱旭国 姜笃银 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期201-206,共6页
目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法(1)取12只Wistar大鼠,其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)创面,分别于伤后1、2、3d(每时相点3只)取创面全厚皮肤,用2.5g/L胰蛋白酶-体... 目的探讨烧伤变性脱细胞真皮基质(DADM)作为真皮替代物用于创面修复的可行性。方法(1)取12只Wistar大鼠,其中9只背部造成深Ⅱ度烫伤(以下称烧伤)创面,分别于伤后1、2、3d(每时相点3只)取创面全厚皮肤,用2.5g/L胰蛋白酶-体积分数0.5%Triton X-100行脱细胞处理制成DADM,相应称为DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d;余下3只大鼠不致伤,同法制备ADM作为对照。对ADM和各DADM行大体、组织学观察及微生物学和生物力学检测(极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率、应力-应变关系)。(2)另取64只Wistar大鼠,按随机数字表法分为ADM组、DADM.1d组、DADM-2d组、DADM-3d组,每组16只。于各大鼠背部制作-2.0cm×1.8cm大小皮瓣,将前述ADM和DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d切制成1.8cm×1.5cm大小后分别埋植于皮瓣下。术后1、3、5、9周,每组每时相点取4只大鼠,肉眼观察创面愈合情况及埋植物的变化,并对埋植物行组织学观察。对数据行单因素方差分析及t检验。结果(1)新鲜制备的各DADM呈乳白色,质地柔软有弹性,韧性较ADM弱。光学显微镜下见ADM和各DADM中均无上皮结构和细胞存在,DADM胶原纤维增粗程度不均匀,排列紊乱,嗜伊红性增强。各DADM微生物学检测结果均为阴性。DADM-1d、DADM-2d、DADM-3d之间极限抗拉强度、最大拉力、断裂伸长率和应力-应变关系比较,差异均无统计学意义(F值为0.088-3.591,P值均大于0.05);其中DADM-3d此4项指标值最高,分别为(13.0±2.4)MPa、(61±4)N、(173±7)%、(45.7±2.0)%。ADM此4项指标各为(19.0±2.6)MPa、(95±4)N、(201±5)%、(62.5±2.2)%,与3种DADM两两比较均偏高(t值为6.42±17.125。P值均小于0.01)。(2)埋植术后1周,各组大鼠创面元渗出或红肿,埋植物未收缩或卷曲;创面有炎性细胞浸润并有Fb及毛细血管长人。术后3周时,DADM-1d、DADM-2d、ADM组埋植区毛发生长正常,DADM-3d组埋植区毛发较稀疏;各组炎性细胞减少,Fb增多,有新生小血管长人,DADM.3d组炎性细胞减退稍延迟。术后第5周,各组埋植区毛发恢复正常,埋植物收缩、变薄,表面纤维膜包裹紧密,有较大血管束长人;各组真皮基质与周围正常组织融合。术后第9周,ADM和DADM均为薄、软白色组织片,与皮瓣内面连接紧密;各组无炎性细胞浸润,胶原纤维排列规则、致密,与正常胶原组织融合。结论烧伤DADM无明显免疫原性,生物相容性好,经离体改造有望成为创面修复治疗中的真皮替代物。 展开更多
关键词 烧伤 细胞外基质 变性真皮 脱细胞真皮基质 创面修复
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体外培养组织工程皮肤几种活性肽及细胞外基质的表达 被引量:7
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作者 肖仕初 夏照帆 +5 位作者 杨珺 刘志国 贲道锋 俞为荣 杨勇 朱世辉 《中华烧伤杂志》 CAS CSCD 2003年第S1期47-49,共3页
目的 观察体外培养组织工程皮肤的生物学活性。 方法 将表皮细胞和 ( 或 )成纤维细胞种植于脱细胞真皮表面 ,经培养后形成各种皮肤替代物 ,分别于接种后 3、7d时收集培养上清 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定白细胞介素 (IL) 6、IL ... 目的 观察体外培养组织工程皮肤的生物学活性。 方法 将表皮细胞和 ( 或 )成纤维细胞种植于脱细胞真皮表面 ,经培养后形成各种皮肤替代物 ,分别于接种后 3、7d时收集培养上清 ,采用酶联免疫吸附法 (ELISA)测定白细胞介素 (IL) 6、IL 8和转化型生长因子 β1 (TGF β1 )的含量 ,采用放射免疫法测定层粘连蛋白、透明质酸、Ⅰ型和Ⅲ型胶原的含量。 结果 各皮肤替代物上清中均可检测到一定量的细胞因子、生长因子和细胞外基质成分 ,培养 7d与 3d时相比 ,除TGF β1 外 ,其余各指标的含量均明显上升 (P <0.0 1)。含表皮细胞和成纤维细胞的皮肤替代物与单纯含成纤维细胞的皮肤替代物相比 ,培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少 (P <0.0 1)。  结论 体外培养的皮肤替代物具有较强的生物学活性 ,种植表皮细胞对成纤维细胞的功能具有一定的调节作用。 展开更多
关键词 表皮细胞 成纤维细胞 细胞外基质 活性肽 脱细胞真皮基质
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血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中I型胶原和纤维连接蛋白表达的研究 被引量:2
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作者 周乃慧 李艳 +3 位作者 朱月倩 任孙 王淼淼 刘铭 《中华皮肤科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期642-646,共5页
目的探讨血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中I型胶原和纤维连接蛋白表达的作用及可能机制。方法分离培养雄激素性秃发区毛乳头细胞,实时定量荧光PCR检测雄激素受体mRNA在不同传代次数毛乳头细胞中的相对表达量,CCK8法检测0、10... 目的探讨血管生成素抑制雄激素性秃发区毛乳头细胞中I型胶原和纤维连接蛋白表达的作用及可能机制。方法分离培养雄激素性秃发区毛乳头细胞,实时定量荧光PCR检测雄激素受体mRNA在不同传代次数毛乳头细胞中的相对表达量,CCK8法检测0、10、20、40、80、160μg/L血管生成素对含或不含0.1nmol/L二氢睾酮培养基培养的毛乳头细胞增殖的影响。取生长融合的第l代毛乳头细胞传代后分为3组:对照组(不用二氢睾酮或血管生成素处理)、0.1nmol/L二氢睾酮组、0.1nmol/L二氢睾酮+80μg/L血管生成素组。作用48h后,用实时荧光定量PCR检测I型胶原基因、纤维连接蛋白和转化生长因子β1(TGF-β1)mRNA的表达,Western印迹检测I型胶原、纤维连接蛋白、TGF一β1、p-Smad2和p-Smad3蛋白的表达。实验数据采用单因素方差分析、LSD检验和独立样本t检验进行分析。结果体外培养的雄激素性秃发区毛乳头细胞随着传代次数增加,雄激素受体mRNA相对表达量明显降低(P〈0.05)。细胞增殖实验发现,20-160μg/L血管生成素明显拮抗0.1nmol/L二氢皋酮对毛乳头细胞增殖的抑制作用(均P〈0.05)。与对照组相比,二氢睾酮组I型胶原基因、纤维连接蛋白和TGF一β1mRNA显著升高,但二氢睾酮+血管生成素组较二氢睾酮组I型胶原基因mRNA(1.563±0.143比4.329±0.165)、纤维连接蛋白mRNA(1.290±0.063比2.156-4-0.115)和TGF-β1mRNA(1.136-4-0.098比1.707±0.100)显著降低(均P〈0.05)。而且,血管生成素还能明显抑制由二氢睾酮诱导的毛乳头细胞中I型胶原、纤维连接蛋白、TGF-β1、p-Smad2和p-Smad3蛋白的表达(均P〈0.05)。结论血管生成素在体外能够抑制雄激紊陆秃发区毛乳头细胞中细胞外基质成分I型胶原和纤维连接蛋白的表达,其机制可能与其下调TGF-β1表达及抑制TGF-β1/Smad信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 血管生成素类 秃发 细胞外基质 转化生长因子β1 毛乳头细胞
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