液质联用-网络药理-分子对接技术对加味过敏煎干预特应性皮炎的机制研究

目的 基于超高效液相色谱-质谱、网络药理学及分子对接技术,探索加味过敏煎治疗特应性皮炎(AD)的作用机制。方法 使用超高效液相色谱-质谱方法对加味过敏煎冻干粉及含药血清进行分析,获取加味过敏煎入血成分。SwissTargetPrediction数据库获取加味过敏煎入血成分的靶点,通过检索GeneCards、DisGeNET及OMIM数据库得到AD疾病靶点。Cytoscape 3.9.1软件构建“成分-靶点”及蛋白质互作网络。DAVID数据库对交集靶点进行基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。AutoDock软件对排名前5的活性成分与核心靶点进行分子对接验证。结果 共获得57个加味过敏煎入血成分,检索到807个入血成分靶点,2 067个AD靶点,287个交集靶点,筛选出31个核心靶点。KEGG分析主要富集在TNF、JAK-STAT、FcεRI等信号通路。分子对接显示,加味过敏煎活性成分可与核心靶点自发结合。结论 加味过敏煎治疗AD的主要活性成分可能为3-甲基丁酸苯甲酯、肠内酯、荜茇酰胺、镰叶芹二醇、诺米林等,这些活性成分通过作用于STAT3、SRC、PIK3R1、AKT1、MAPK1等靶点和TNF、JAK-STAT、FcεRI信号通路发挥对AD的干预作用。

异位性皮炎患者血清牛磺酸水平的测定

目的:探讨血清牛磺酸水平与异位性皮炎发生的关系。方法:采用高效液相方法,对门诊收集的30例异位性皮炎患者(患者组)和30例正常对照者(对照组)行血清牛磺酸水平的测定。结果:患者组血清牛磺酸水平为(6.25±0.79)mg/L,对照组水平为(10.32±0.65)mg/L,2组牛磺酸水平差别有统计学意义(P<0.01)。结论:异位性皮炎的发生可能与患者血清中牛磺酸水平降低有关。

用柱前衍生RP-HPLC法测定脑蛋白水解物注射液中牛磺酸的含量

目的：建立测定脑蛋白水解物注射液中牛磺酸含量的柱前衍生RP—HPLC法。方法：在碱性条件下，氨基酸与异硫氰酸苯酯反应，生成异硫氰酸苯一氨基酸的衍生物．采用Diamonsil C18色谱柱（250mm×4．6mmm，5μm），用二元梯度洗脱方式．流动相A为0．1mol／L乙酸钠-乙腈（93：7）．流动相B为乙腈-水（80：20），检测波长254nm。结果：牛磺酸在0．01-0．07mg／mL浓度范围内呈良好的线性关系（r=0．9999），精密度良好，低、中、高3种浓度（0．019、0．024、0．029mg／mL）的加样回收率分别为（97．0±0．5）％、（98．8±0．20）％、（100．0±1．6）％（n=3）。结论：本法结果准确，重复性好。

非标记定量技术检测特应性皮炎患儿尿液中差异蛋白的应用

目的应用非标记定量技术研究特应性皮炎患儿尿液中的差异表达蛋白,筛选特应性皮炎患儿尿液中的特异性蛋白质标记物。方法收集特应性皮炎患儿和健康对照者的尿液各6份,处理和提取尿液蛋白质,经一维SDS-PAGE和蛋白胶内酶解获得肽段,应用高效液相色谱串联质谱鉴定,使用Mascot软件查询并用Scaffold软件作相对定量分析。结果特应性皮炎患儿组和健康对照组的尿液共检测出103种表达差异倍数大于1.5倍的蛋白质,患儿组表达升高的有48种蛋白质,表达降低的有55种蛋白质,其中10种蛋白质仅在患儿组检测到,17种蛋白质仅在对照组检测到。结论特应性皮炎患儿与正常儿童尿液间存在蛋白质表达差异。

应用高效液相色谱法测定母乳化奶粉中的牛磺酸

牛磺酸作为新型营养强化剂添加在第二代母乳化奶粉中。作者应用高效液相色谱法对母乳化奶粉中的牛磺酸进行定量分析，样品经1％偏磷酸提取→钠柱分离→柱后OPA衍生→荧光检测器检测定量。操作简便、快速，提取完全，牛磺酸出峰时间8．738min，回收率99．5％，变异系数2．19％，最低检出量20ng，为一个较理想的定量方法。

人脑组织牛磺酸的测定方法

①目的建立一种快速、简易组织中牛磺酸的测定方法。②方法根据美国Ｂｅｃｋｍａｎ－６３００型氨基酸自动分析仪锂柱（０．４ｃｍ×１０ｃｍ）１３０ｍｉｎ程序生理组织和生理体液分析法以及牛磺酸的特性，建立了测定生理组织中牛磺酸的１０ｍｉｎ短程序测定法。③结果该方法重复性好，变异系数小，在牛磺酸浓度为１．８μｍｏｌ／Ｌ时，峰位置和峰面积的变异系数（ＣＶ值）分别为０．０６％和１．９０％（ｎ＝７），明显低于规定的技术指标（１．０％和２．５％）。④结论该法时间短，茚三酮和缓冲液用量少，成本低，可用于测定生理组织中牛磺酸的含量。