血浆中去甲右美沙芬和愈创木酚甘油醚的HPLC测定

建立了灵敏度高、选择性好、可同时测定人血浆中右美沙芬活性代谢物去甲右美沙芬及愈创木酚甘油醚的HPLC-荧光检测法。采用C_8柱(4.6mm×250mm),流动相为乙腈-0.05 mol/L磷酸二氢钾-二乙胺溶液-冰醋酸(15:85:0.2:2,用磷酸调至pH3.0),检测波长λ_(ex)=280 nm,λ_(em)=313 nm。以盐酸曲马多为内标,血浆样品经液-液萃取后进样测定。方法的日内、日间RSD小于4.63％,回收率97.3％～102.6％。去甲右美沙芬及愈创木酚甘油醚的检测灵敏度分別为5.412和20ng/ml。经方法学验证,满足药物动力学研究的要求。

人血浆中O-去甲右美沙芬的测定及药代动力学研究

目的 建立直接测定人血浆中O 去甲右美沙芬的方法 ,并应用于药代动力学研究。方法 1 8名健康受试者单剂量po氢溴酸右美沙芬 6 0mg后 ,血浆样品经液 液萃取 ,通过液相色谱 质谱 质谱联用法测定其活性代谢物O 去甲右美沙芬的浓度 ,用非室模型计算药代动力学参数。结果 O 去甲右美沙芬测定的线性范围为 0 2～ 80μg·L- 1 ;其主要药代动力学参数Tmax 为 (2 1± 0 7)h ,Cmax为 (1 4± 8) μg·L- 1 ,T1 2 为 (3 8± 1 8)h ,用梯形法计算 ,AUC0 -t为 (6 0± 37) μg·h·L- 1 。结论 该法灵敏度高 ,操作简便 ,可直接测定活性代谢物 。

人血浆中右美沙芬及去甲右美沙芬的HPLC-荧光法测定

建立了简便、准确、灵敏的反相高效液相色谱 -荧光检测法测定人血浆中右美沙芬和活性代谢物去甲右美沙芬的血药浓度。线性范围分别为 0 .5～ 30 ng/ m l和 2 0～ 12 0 0 ng/ ml,定量限分别为 1.0和 2 0 .0 ng/ ml,回收率在97%以上 ,日间、日内 RSD小于 8.5 %。对 18名受试者单剂量口服 6 0 mg右美沙芬缓释混悬液后至 2 4 h血浆样品进行了测定 ,血浆中去甲右美沙芬浓度比右美沙芬高 10 0倍左右。

氢溴酸右美沙芬咀嚼片的药代动力学和相对生物利用度

目的以氢溴酸右美沙芬片为对照药，氢溴酸右美沙芬咀嚼片为试验药进行人体生物利用度和药代动力学研究。方法１０名志愿者随机交叉口服单剂量６０ｍｇ氢溴酸右美沙芬片或咀嚼片，采用高效液相荧光法测定血浆中药物浓度。结果口服后药时曲线均符合一室模型。对照药和试验药的主要药代动力学参数如下，右美沙芬（ＤＭ）的药动学参数分别为Ｔ１／２：（２７５±０８７）ｈ，（２９２±１０３）ｈ；Ｔｍａｘ：（１８１±０５９）ｈ，（１７５±０６５）ｈ；Ｃｍａｘ：（３１０９±１１０１），（３３０９±１３４８）μｇ·Ｌ－１；ＡＵＣ：（１６９１２±８２９４），（１６６９５±７８２３）μｇ·ｈ－１·Ｌ－１；其相对生物利用度（Ｆ％）为（１０４０２±１０３７）。主要活性代谢物去甲右美沙芬（ＤＰ）的药动学参数分别为Ｔ１／２：（３０９±１０６）ｈ，（２９５±１０８）ｈ；Ｔｍａｘ：（２３０±０４８）ｈ，（１９０±０７０）ｈ；Ｃｍａｘ：（８３８５５±３２３７８），（８２８３７±３１９３５）μｇ·Ｌ－１；ＡＵＣ：（４１７７４３±１０７７７９），（４１４３１１±１２７３７６）μｇ·ｈ－１·Ｌ－１；相对?

反相高效液相色谱法测定人尿中右美沙芬及去甲右美沙芬的含量

目的建立反相高效液相色谱法测定人尿中右美沙芬及其代谢产物去甲右美沙芬浓度的方法。方法以非那西丁为内标,尿样经水解,碱化后用正己烷-正丁醇(9:1)萃取,采用DiamonsilTMC18柱(250mm×4.6mm,5μm)分析。色谱条件:流动相为乙腈(A)-1%三乙胺(磷酸调节pH=2.2,B),梯度洗脱,0～15min,20%～35%A,流速为1.0ml/min,检测波长为280nm,柱温40℃。结果右美沙芬在0.05～2.0μg/ml范围内线性良好(r=0.9999,n=5),检测限为0.04μg/ml;去甲右美沙芬尿样浓度在0.5～20.0μg/ml范围内线性良好(r=0.9999,n=5),检测限为0.4μg/ml。两者日内、日间精密度RSD均<10%,低、中、高浓度的提取回收率在94%～108%之间。结论此方法简便准确、重复性好,适用于CYP2D6表型分析以及右美沙芬与其代谢产物的人体药代动力学研究。

氢溴酸右美沙芬口服液在正常人体内的生物利用度

氢溴酸右美沙芬剂量小,体内代谢迅速而广泛,母体药物浓度测定困难。本文通过测定氢溴酸右美沙芬的主要活性代谢物——去甲右美沙芬的血药浓度,进而对氢溴酸右美沙芬口服液在正常人体内的生物利用度进行研究。结果表明,8例正常人口服氢溴酸右美沙芬30mg 后,在体内可迅速转化为去甲右美沙芬,约在2h 达高峰浓度,T_(1/2)在1.7～4.7h。口服液的Tmax 较片剂明显提前,统计学t 检验有显著性差异(P<0.05);但Cmax 和AUC 在两种剂型间基本一致。

柱切换HPLC法测定血浆中氢溴酸右美沙芬的代谢物去甲右美沙芬

应用柱切换HPLC法建立了氢溴酸右美沙芬的主要代谢产物去甲右美沙芬的血浆浓度测定方法。去甲右美沙芬的葡萄糖醛酸结合物,经β-葡萄糖醛酸苷酶水解后,即可取血浆直接进行HPLC分析。预处理柱为30 mm×5 mm ID,内装μBondapak C_(18),37～50μm;分析柱为150 mm×5 mmID,内装YWG-C_(18),10μm。预处理流动相为0.2%的乙酸溶液,流速3 ml/min;分析流动相为乙腈—水—乙酸—三乙胺—二氯甲烷(17:82:1:0.05:0.025)的混合溶液,流速1 ml/min荧光检测波长分别为λex=290 nm和λem=315 nm。血浆浓度测定的线性范围为20～640 ng/ml,血浆中最低检测浓度为4ng/ml,方法的平均回收率为103.8%,日内及日间变异均小于10%。

右美沙芬缓释混悬液的生物等效性研究

在 18名男性健康受试者中研究国产右美沙芬缓释混悬液的药物动力学特性及生物等效性。采用双周期交叉设计 ,反相高效液相色谱 -荧光检测法测定血浆中右美沙芬活性代谢物去甲右美沙芬的浓度。单剂量口服 6 0 m g右美沙芬缓释混悬液与进口对照品的 cmax分别为 4 36 .8± 116 .7和 4 0 9.5± 113.7ng/m l;Tmax为 3.3± 1.0和 3.4±0 .8h;T1 /2 为 7.5± 2 .7和 7.5± 3.1h;AUC0→ tn为 3435± 6 6 4 .2和 32 6 9± 6 2 6 .0 ng· ml- 1 · h。多剂量服药达稳态后两制剂的波动度分别为 (12 1.9± 37.1% )和 (133.2± 4 0 .6 ) %。主要药动学参数经统计学检验表明 :国产右美沙芬缓释混悬液与进口同类产品具生物等效性 ,相对生物利用度为 (10 5 .9± 13.8) %。

液相色谱-质谱联用法测定人混合肝微粒体中去甲右美沙芬浓度

目的建立测定人混合肝微粒体(HLM)中去甲右美沙芬浓度的方法。方法采用液相色谱-质谱联用(LC-MS/MS)法,以卡马西平为内标,色谱柱为Agilent ZORBAX XDB-C18(2.1 mm×50 mm,3.5μm),流动相为0.05%甲酸水溶液-0.05%甲酸甲醇溶液梯度洗脱;以多反应离子检测(MRM)方式进行检测。去甲右美沙芬和内标检测离子对的m/z分别为258.1→199.1,237.1→194.1。结果去甲右美沙芬浓度在19.22~768 960 ng·L^(-1)范围内线性关系良好(r=0.999 8),最低定量限为19.22 ng·L^(-1),提取回收率为94.02%~98.74%,日内、日间RSD均<10%。补骨脂素对细胞色素P450(CYP)2D6半数抑制浓度为0.6μmol·L^(-1)。结论所建立的LC-MS/MS法测定去甲右美沙芬快速、灵敏、重复性好,补骨脂素对CYP2D6具有较强的抑制作用。

地塞米松注射液对大鼠细胞色素P4502D6的影响

目的观察地塞米松(激素类药物)注射液对大鼠细胞色素P4502D6(CYP2D6)亚型的影响。方法 SD大鼠,雌雄各半,随机分成2组,地塞米松组按50mg·kg-1尾静脉给药,对照组按10mL.kg-1尾静脉给生理盐水,给药7d后,每组给予氢溴酸右美沙芬注射液5mg·kg-1;按时间从大鼠眼静脉取血10次,血样处理后,用HPLC法同时测定大鼠血浆CYP2D6R探针药物右美沙芬及其代谢产物去甲右美沙芬浓度,用DAS2.0软件进行分析,求出其主要药代动力学参数。结果地塞米松组与对照组比较,对右美沙芬t1/2无显著性差异;而AUC0-t右美沙芬为(63.43±7.71)mg·mL-1.min,与对照组(41.07±4.63)mg.L-1.min比较有显著性差异(P<0.05)。结论地塞米松注射液对右美沙芬有一定诱导作用,可以促进合用药物的消除,从而加速其代谢。

(S)-去甲吗喃制备过程中副产物的研究

对止咳药右美沙芬的关键中间体(S)-去甲吗喃的制备过程中产生的微量杂质进行了富集和提纯。运用核磁共振、液质联用等分析技术对其进行了分析,确定该杂质为(S)-去甲吗喃的同分异构体,并探讨了该杂质的形成机理,提出了抑制方法。

UPLC-MS/MS法检测人体毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬

目的:建立一种准确、快速检测毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)方法。方法:用含内标双苯戊二氨酯(SKF525A)的甲醇溶液提取含有右美沙芬及其代谢物的毛发,经0.22μm微孔有机滤膜过滤,UPLC-MS/MS检测。采用ACQUITY UPLC HSS T3超高液相色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm),以0.2%甲酸(10 mmol·L^(-1)甲酸铵)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,流速0.3 mL·min-1,柱温为室温。采用电喷雾离子源,正离子多反应模式检测。结果:右美沙芬和去甲右美沙芬质量浓度均在1~100 ng·mL^(-1)范围内线性响应良好,线性方程分别为Y=1.34949X-0.02080(r=0.9988)和Y=0.77510X-0.01387(r=0.9991),检测限和定量限均分别为0.01 ng·mL^(-1)和0.025 ng·mL^(-1),平均回收率在97.0%~104.8%,日内精密度和日间精密度分别在1.5%~3.9%和2.1%~5.5%。将本方法应用于实际案例,结果在6例右美沙芬滥用者毛发中均检测出右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬。结论:该方法操作简便,检测灵敏度高,可用于毛发中右美沙芬及其代谢物去甲右美沙芬的检测。

脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液对急性脑梗死患者神经功能、血液流变学和氧化应激的影响

目的:探讨脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液对急性脑梗死(ACI)患者神经功能、血液流变学和氧化应激的影响。方法:选取南京市中心医院及常州市第一人民医院在2022年7月-2023年7月收治的ACI患者140例,根据随机数字表法将患者分为对照组(n=70,常规治疗联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗)和观察组(n=70,对照组基础上接受脑脉利颗粒治疗)。对比两组疗效、神经功能、日常生活活动能力、血液流变学和氧化应激变化情况。结果:观察组的临床总有效率较对照组更高(P<0.05)。观察组治疗后美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、血浆黏度、全血低切黏度、全血高切黏度、红细胞压积、丙二醛(MDA)低于对照组,日常生活能力量表评分(Barthel指数)评分、超氧化物歧化酶(SOD)高于对照组(P<0.05)。结论:脑脉利颗粒联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗ACI患者,有助于调节血液流变学,改善患者的神经功能,减轻氧化应激,提高其日常生活活动能力。

消栓肠溶胶囊联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗急性脑梗死的临床研究

目的:研究消栓肠溶胶囊联合依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗急性脑梗死(ACI)的临床疗效。方法:选取2021年3月-2022年8月间我院诊治的132例ACI患者,按照随机数字表法将患者分为对照组(n=66,依达拉奉右莰醇注射用浓溶液治疗)和观察组(n=66,对照组的基础上接受消栓肠溶胶囊治疗)。治疗14d后,对比两组疗效、卒中量表评分[美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)、改良Rankin评分量表(mRS)]、脑血流灌注指标[平均流速(TMV)、收缩期峰值流速(PSV)、阻力指数(RI)]、炎症因子水平[正五聚蛋白3(PTX-3)、脂蛋白相关磷脂酶A2(Lp-PLA2)、淀粉样蛋白A(SAA)]水平和血管内皮功能指标[一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血浆血栓素B2(TXB2)],同时记录两组不良反应发生情况。结果:观察组的临床总有效率高于对照组(P<0.05)。与对照组治疗14 d后相比,观察组的NIHSS、mRS评分、RI、Lp-PLA2、PTX-3、SAA、ET-1、TXB2更低,TMV、PSV、NO更高(P<0.05)。两组不良反应发生率对比未见差异(P>0.05)。结论:依达拉奉右莰醇注射用浓溶液和消栓肠溶胶囊联合治疗ACI,可减轻神经损伤,抑制炎症反应,改善血管内皮功能,促进脑循环恢复,且无明显不良反应。

液相色谱-串联质谱联用测定人血浆中伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬和苯海拉明的浓度

目的建立同时测定人血浆中伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的液相色谱-串联质谱方法。方法血浆中加入内标酚妥拉明后,进行固相萃取,以甲醇-0.5%甲酸水溶液(55∶45)为流动相,经C18柱分离后;采用三重四极杆串联质谱,电喷雾离子源(ESI),以正离子多反应监测(MRM)方式进行定量分析,用于监测的离子为m/z166.4→m/z115.2(伪麻黄碱),m/z258.2→m/z157.1(O-去甲基右美沙芬),m/z256.2→m/z167.2(苯海拉明),m/z282.2→m/z212.2(内标,酚妥拉明)。结果线性范围为伪麻黄碱1.0～200μg·L-1(r=0.9993),O-去甲基右美沙芬为0.05～10μg·L-1(r=0.9991),苯海拉明为1.0～200μg·L-1(r=0.9988);提取回收率为伪麻黄碱在67.4%～73.4%之间,O-去甲基右美沙芬在74.6%～75.7%之间,苯海拉明在81.9%～83.9%之间,日内、日间RSD均小于6.2%,伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲基右美沙芬的最低定量浓度分别为1.0,1.0和0.05μg·L-1。结论该方法专属性强、灵敏度高、准确,适用于伪麻黄碱、O-去甲基右美沙芬、苯海拉明的临床药动学研究。

以右美沙芬为探针测定大鼠肝微粒体中CYP2D6酶活性及动力学分析

目的建立大鼠肝微粒体中细胞色素P450(CYP)2D6酶活性的检测方法,以右美沙芬为探针底物进行体外酶动力学分析,为相关药物代谢研究提供参考依据。方法采用高效液相色谱-荧光检测(HPLC-FLD)方法提高检测灵敏度。通过优化大鼠肝微粒体孵育体系的反应条件,建立稳定的动力学评价方法。以Graphpad prism 5.01软件绘制米曼动力学曲线并计算V_(max)与K_m值。结果右美沙芬与其代谢产物右啡烷分离良好且无其他内源性物质干扰。右啡烷检测限为5 nmol·L^(-1)(S/N>3),定量下限为0.015μmol·L^(-1),线性范围为0.015~7.5μmol·L^(-1)。测定方法重现性好且稳定。经优化条件后测定,不同浓度的右美沙芬在0.2 mg·mL^(-1)蛋白浓度下,孵育10 min,测得动力学参数V_(max)为(1.075±0.060)nmol·min^(-1)·mg^(-1)pro,K_m为(7.470±0.983)μmol·L^(-1)。结论高效液相色谱结合荧光检测法可以有效提高灵敏度,此大鼠微粒体孵育体系的建立可应用于体外CYP2D6酶活性的测定及酶动力学研究。

健康受试者口服酚麻美敏片后氢溴酸右美沙芬及其代谢物的人体药动学研究

目的:研究20名健康受试者单剂量口服2片酚麻美敏片(每片含对乙酰氨基酚325 mg,盐酸伪麻黄碱30 mg,氢溴酸右美沙芬15 mg,马来酸氯苯那敏2 mg)后氢溴酸右美沙芬及其代谢物O-去甲右美沙芬的人体药代动力学。方法:以盐酸克仑特罗为内标,采用LC-MS/MS法ESI正离子化,选择性反应监测,同时测定人血浆中的氢溴酸右美沙芬及其代谢物O-去甲右美沙芬浓度;并采用β-葡萄糖醛酸酶酶解后测定O-去甲右美沙芬总量浓度,采用DAS 2.0计算药动学参数。结果:测得血浆中游离氢溴酸右美沙芬和O-去甲右美沙芬的主要药代动力学参数分别为Cmax(4.4±4.6),(9.7±5.4)μg.L-1;Tmax(4.2±3.3),(1.8±0.8)h;AUC0-τ(61.0±84.2),(59.4±25.4)h.μg.L-1;t1/2(9.5±2.9),(6.0±2.8)h;MRT0-τ(13.8±5.5),(7.6±2.8)h。酶解后测得O-去甲右美沙芬的主要药代动力学参数为Cmax(536±165)μg.L-1;Tmax(2.1±0.6)h;AUC0-τ(3504±710)h.μg.L-1;t1/2(6.4±2.7)h;MRT0-τ(7.2±2.3)h。结论:建立的LC-MS/MS测定法准确灵敏。健康受试者单剂量口服酚麻美敏片后的血浆中葡萄糖醛酸结合型O-去甲右美沙芬的浓度显著高于游离氢溴酸右美沙芬和O-去甲右美沙芬。

氨麻苯美片在健康人体内药动学和生物等效性

20名健康志愿者按两个制剂双周期交叉试验设计口服2种氨麻苯美片,采用HPLC-MS/MS法测定血浆中的伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲右美沙芬,采用HPLC-UV法测定血浆中的对乙酰氨基酚,结果表明:受试制剂中对乙酰氨基酚、伪麻黄碱、苯海拉明和O-去甲右美沙芬的相对生物利用度分别为(104.2±10.4)%、(107.4±17.9)%、(106.0±23.1)%和(106.5±17.4)%,表明两种氨麻苯美片具有生物等效性。

药物抑制CYP2D6突变体代谢右美沙芬的比较研究

目的:基于CYP2D6代谢右美沙芬成为去甲右美沙芬的反应,以去甲右美沙芬浓度为测定指标,考察CYP2D6突变对抑制剂响应作用的变化,为个体化用药提供参考。方法:选择亚洲人群中代表性的4种表型分别为CYP2D6*1、CYP2D6*2、CYP2D6*10和CYP2D6*39,以及6种CYP2D6抑制剂,包括奎尼丁、普罗帕酮、阿米替林、利培酮、氟伏沙明和美托洛尔。通过优化底物浓度、孵育时间和孵育酶量等反应参数,确定了孵育反应体系。利用LC-MS/MS方法测定上述孵育体系中去甲右美沙芬的浓度,计算得到了6种药物对4种CYP2D6酶的IC50值。结果:建立并验证了去甲右美沙芬浓度的测定方法。得到了酶抑制结果:奎尼丁和普罗帕酮对野生酶(CYP2D6*1)具有最强的抑制作用,IC50值分别为0.030μmol·L^-1和0.33μmol·L^-1;阿米替林、利培酮和氟伏沙明表现为中等抑制,IC50值在6.0~8.0μmol·L^-1范围内;美托洛尔是最弱的抑制剂,IC50值大于39.0μmol·L^-1。同种药物对CYP2D6*1、CYP2D6*2和CYP2D6*39的抑制作用没有显著区别。每种药物对CYP2D6*10的IC50值是野生酶IC50值的2.5~6.7倍。结论:CYP2D6*10突变体减弱了药物对其代谢右美沙芬的抑制能力,对于临床用药具有指导意义。

复方愈麻美芬缓释片在健康志愿者体内药动学研究

目的研究复方愈麻美芬缓释片单剂量和多剂量给药在健康志愿者体内的药动学规律。方法采用自身对照的双周期交叉试验设计,12名健康受试者单次和多次口服受试制剂复方愈麻美芬缓释片或相应的参比制剂,不同时间点收集血样,采用LC/MS/MS法测定血浆中愈创甘油醚、伪麻黄碱、右美沙芬和O-去甲右美沙芬的浓度。药动学参数采用DAS软件处理获得。结果单剂量口服受试制剂后,愈创甘油醚、伪麻黄碱、右美沙芬、O-去甲右美沙芬的主要参数为tmax:1.09±0.42、3.68±1.62、5.05±2.29、3.82±1.25 h;t1/2:3.32±3.54、6.20±0.97、12.2±3.1、7.60±0.97 h;Cmax:499±159、96.1±12.9、1.82±1.18、142±34 ng/m L;AUC0-t:2 363±529、1 359±284、31.4±23.6、1 504±242 ng·h/m L;AUC0-∞:2 554±639、1 395±303、38.4±28.4、1 563±248 ng·h/m L。多剂量口服愈创甘油醚、伪麻黄碱、右美沙芬、O-去甲右美沙芬的主要参数为Cmax:709±298、169±27、9.64±6.36、314±96 ng/m L;Cmin:48.9±25.4、50.8±13.9、5.45±5.53、110±45 ng/m L;tmax:8.27±5.71、7.64±4.99、8.27±6.57、7.55±5.99 h;AUC0-t:5 277±2 212、2 741±508、199±198、4 964±1 387 ng·h/m L;AUC0-∞:5 718±2 176、2 750±511、220±226、5 196±1 506 ng·h/m L。结论复方愈麻美芬缓释片各成分药动学具有明显的缓释特征。