不同基因型牛病毒性腹泻病毒对BALB/c小鼠致病性研究

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是危害养牛业的重要病原。2021年本实验室从患有肺炎的牛肺中分离出1株BVDV(毒株编号为JS2201),经鉴定为1b亚型。为了评价该分离株的毒力与致病性,分别建立了分离株与参考株BVDV-1型Oregon C24V株、BVDV-2型C1602株BVDV感染BALB/c小鼠模型,通过检测攻毒后小鼠临床症状、体重变化、病毒血症情况、血液中白细胞与淋巴细胞的变化、组织器官的病理组织学变化及病毒载量,比较了分离株JS2201与1型和2型参考株的致病性差异。结果显示:BVDV分离株JS2201与参考株均能够成功感染BALB/c小鼠,攻毒BALB/c小鼠均形成病毒血症,导致血液中白细胞数量、淋巴细胞数量以及淋巴细胞百分比短暂下降;BVDV分离株JS2201株攻毒组小鼠肝脏、肾脏、肺脏、脾脏中BVDV载量要高于C24V、C1602株攻毒组;攻毒组小鼠均表现为间质性肺炎病变,JS2201株攻毒组与1型参考株C24V株攻毒组小鼠肺脏病理组织学变化相似,BVDV-2型参考株C1602株攻毒组小鼠肺脏病变更为严重。综上,本研究成功建立了不同亚型BVDV急性感染BALB/c小鼠的模型,且比较分析了分离株与参考株之间的致病性差异,为BVDV疫苗的研制以及致病机制的研究奠定了基础。

群体感应分子3OC12HSL对小鼠生长、血液和肠道的影响

本研究旨在探讨群体感应分子3OC12HSL对小鼠生长、炎症因子及肠粘膜屏障的影响。采用高剂量盐酸林可霉素灌胃方法建立小鼠腹泻模型,对正常小鼠和腹泻模型小鼠分别灌胃生理盐水、二甲基亚砜(DMSO)、溶于DMSO的3OC12HSL溶液。结果显示,灌胃3OC12HSL降低正常小鼠和腹泻小鼠的增重,提高血清中D-乳酸、TNF-α含量,降低大肠长度及空肠和回肠绒毛长度(P<0.05);腹泻提高血清中IL-1、IL-8、TNF-α含量,降低空肠及回肠绒毛长度(P<0.05);灌胃3OC12HSL和腹泻对回肠绒隐比有协同降低趋势,但差异不显著(P>0.05)。综上,3OC12HSL不利于小鼠的生长,腹泻可能加重3OC12HSL的影响。

牦牛胃溶菌酶抗小鼠腹泻的研究

本研究采用PichiaPink^(TM)毕赤酵母表达系统对牦牛胃溶菌酶进行异源表达,以探索提高重组牦牛胃溶菌酶表达量的方法以及重组牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌O111所致小鼠腹泻的治疗作用。试验选取10只体重相近的无特定病原体昆明小鼠,用大肠杆菌O111建立小鼠腹泻模型;建模成功后取30只小鼠随机分为6组,每组5只,设对照组、腹泻模型组、牦牛胃溶菌酶组、重组牦牛胃溶菌酶组、抗生素治疗组、溶菌酶产品治疗组,除对照组和腹泻模型组外其余各组灌胃给药,记录小鼠采食量及体重;第4天采血后全部扑杀,取小鼠十二指肠组织制切片做形态学观察;取肠道内容物进行肠道菌群Alpha和Beta多样性分析。结果表明:重组牦牛胃溶菌酶在诱导96 h时表达量最高,分子质量约为15.6 ku,比活性为1428.58 U/mg。攻毒后腹泻模型组、溶菌酶产品治疗组与对照组相比采食量显著降低(P<0.05);腹泻模型组与对照组相比,白细胞数、淋巴细胞数和中性粒细胞数均有极显著升高(P<0.01);十二指肠病理解剖观察发现,牦牛胃溶菌酶组肠道绒毛有所增长且厚度增加;重组牦牛胃溶菌酶组肠绒毛有所恢复。Alpha多样性分析发现,牦牛胃溶菌酶组的Simpson指数与对照组相比显著增加(P<0.05);腹泻模型组的变形菌门和弯曲杆菌门相对丰度显著增加(P<0.05);重组牦牛胃溶菌酶组和牦牛胃溶菌酶组的厚壁菌门和拟杆菌门相对丰度有所增加。本研究表明,牦牛胃溶菌酶对大肠杆菌引起的腹泻有较好的治疗效果。由于牦牛胃溶菌酶具备较强抗胃蛋白酶能力,其原酶及重组酶在饲料添加剂以及在食品加工和医疗卫生等领域具有一定的应用潜力。

苍朴乌梅散对脂多糖致腹泻小鼠的保护作用

【目的】评价苍朴乌梅散对脂多糖(LPS)致腹泻小鼠的保护作用,为苍朴乌梅散防护肠炎腹泻提供理论依据。【方法】将60只ICR小鼠随机分为6组,每组10只,雌雄各半。空白对照组和LPS模型组小鼠按照20 mL/kg灌胃纯化水;盐酸小檗碱组按照20 mL/kg灌胃5 mg/mL盐酸小檗碱溶液;苍朴乌梅低、中、高剂量组按照20 mL/kg分别灌胃0.8、1.6、3.2 g/kg苍朴乌梅散混悬液(终浓度分别为40、80和160 mg/mL),连续7 d给药后,除空白对照组外,其余各组小鼠末次给药空腹24 h后,按照20 mL/kg剂量腹腔注射0.5 mg/mL LPS溶液,诱导小鼠腹泻,观察并记录2 h内小鼠排便情况,统计腹泻起始时间、腹泻率和腹泻指数;统计小鼠初始体重、造模前体重及终末体重;2 h后采集小鼠血液并进行血常规检测,采集回肠、盲肠和结肠组织进行病理切片观察。【结果】LPS模型组雄性、雌性小鼠的腹泻起始时间分别为8、6 min,而苍朴乌梅散低、中、高剂量组雄性小鼠的腹泻起始时间分别为23、29和41 min,雌性小鼠的腹泻起始时间分别为22、27和29 min。与LPS模型组相比,苍朴乌梅散中、高剂量组雌雄小鼠腹泻率、腹泻指数均显著降低(P<0.05)。苍朴乌梅散低、中、高剂量组雌雄小鼠的白细胞数、淋巴细胞数与盐酸小檗碱组相比无显著差异(P>0.05)。苍朴乌梅散中、高剂量组雌雄小鼠的腹泻指数和体重增长率与空白对照组相比无显著差异(P>0.05)。组织病理学观察结果显示,LPS模型组雌雄小鼠回肠、盲肠和结肠炎性细胞浸润较为严重,绒毛变短;苍朴乌梅散低剂量组雌雄小鼠出现少量炎性细胞浸润;盐酸小檗碱组及苍朴乌梅散中、高剂量组雌雄小鼠的肠道绒毛、杯状细胞未见明显变化。【结论】小鼠灌胃苍朴乌梅散可以延长腹泻起始时间,降低稀便率和腹泻指数,缓解LPS诱导的肠炎腹泻,本试验条件下推荐苍朴乌梅散剂量为1.6 g/kg。

苍朴乌梅散对番泻叶致泻小鼠的作用效果研究

试验旨在探究苍朴乌梅散对番泻叶所致小鼠腹泻的影响。拆方试验设无苍术组、无厚朴组、全方组、番泻叶致泻模型组和空白对照组;止泻试验和肠道推进试验设置高剂量组(3.2 g/kg BW)、中剂量组(1.6 g/kg BW)、低剂量组(0.8 g/kg BW)、番泻叶致泻模型组和空白对照组。给药7 d后,采用番泻叶进行建模,以腹泻指数、血清电解质离子浓度、脏器指数和结肠病理变化为指标评价苍朴乌梅散防治腹泻的效果,肠道推进试验则灌胃炭末混悬液,计算肠道推进率。拆方试验结果显示全方组小鼠的腹泻率较低。结肠组织无损伤;止泻试验中高剂量组在2 h和6 h的止泻效果最好,中剂量组在3、4、5 h的止泻效果最好;在肠道推进试验中,各试验组肠道推进率均降低。结果表明,通过拆方试验可知全方效果较好,说明苍朴乌梅散配伍合理;通过止泻试验和肠道推进试验发现苍朴乌梅散能缓解番泻叶诱导的小鼠腹泻,改善离子失衡,保护结肠组织免受炎症细胞浸润以及涩肠等作用,推荐剂量为1.6 g/kg BW。

加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠疗效、免疫及肠道菌群的影响

为了研究加味理中汤方(干姜、党参、白术、甘草加茯苓、山药、木香、桂枝、砂仁)对脾虚泄泻小鼠疗效、免疫及肠道菌群的影响,试验将72只小鼠随机分为6组,分别为空白对照组、泄泻模型组、恩诺沙星组及中药低、中、高剂量组,空白对照组小鼠灌胃生理盐水,其余各组小鼠按体重灌胃30 g/kg番泻叶水提物(每天1次,连续9 d)建立脾虚泄泻模型,试验第10天,空白对照组和泄泻模型组小鼠灌胃生理盐水,中药低、中、高剂量组及恩诺沙星组分别按体重灌胃6.5,13,26 g/kg中药提取物及24.15 mg/kg恩诺沙星水溶液,连用3 d。试验期间每日测定小鼠体重、采食量及饮水量,计算日均采食量和日均饮水量并观察腹泻情况和一般状态,统计稀便率、稀便级及腹泻指数;试验结束后检测血清免疫球蛋白(Ig)A、IgG、IgM质量浓度,统计胸腺指数、脾脏指数及结肠粪便中大肠杆菌、肠球菌、乳酸杆菌、双歧杆菌的菌落数。结果表明:治疗前,与空白对照组比较,其余各组小鼠出现脾虚症状,且稀便率、稀便级和腹泻指数均极显著升高(P<0.01),日均采食量及体重均极显著下降(P<0.01),表明脾虚泄泻模型建立成功。治疗结束后,与空白对照组比较,泄泻模型组小鼠脾虚症状持续,胸腺指数及血清IgA、IgG质量浓度均极显著下降(P<0.01),血清IgM质量浓度显著下降(P<0.05),粪便中大肠杆菌、肠球菌菌落数极显著升高(P<0.01)。与泄泻模型组比较,中药各剂量组稀便率、腹泻指数、粪便中大肠杆菌及肠球菌菌落数均极显著降低(P<0.01),且血清IgA、IgG质量浓度,乳酸杆菌菌落数均极显著升高(P<0.01),恩诺沙星组粪便中双歧杆菌菌落数显著升高(P<0.05);中药中、高剂量组体重、脾脏指数、双歧杆菌菌落数、血清IgM质量浓度均极显著升高(P<0.01),中药低剂量组血清IgM质量浓度显著升高(P<0.05)。与恩诺沙星组比较,中药各剂量组日均采食量,脾脏、胸腺指数及乳酸杆菌、大肠杆菌和双歧杆菌的菌落数显著或极显著升高(P<0.05或P<0.01),而稀便率显著或极显著降低(P<0.05或P<0.01),中药中、高剂量组腹泻指数显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),中药高剂量组体重、血清IgM质量浓度均极显著升高(P<0.01),而肠球菌菌落数极显著降低(P<0.01)。说明加味理中汤方可治疗小鼠脾虚泄泻,且高剂量加味理中汤方疗效优于恩诺沙星,其止泻机制可能与提高免疫力和调节肠道菌群有关。

猪轮状病毒OSU株对乳鼠的致病性

为建立猪轮状病毒(PoRV)OSU株感染乳鼠致腹泻模型,研究PoRV对乳鼠的致病性,本试验选用40只4日龄昆明乳鼠,将其随机分为3个攻毒组和1个空白对照组,攻毒组乳鼠经口灌胃不同剂量的PoRV培养液,分别为攻毒组1(50μL)、攻毒组2(100μL)和攻毒组3(150μL),病毒滴度为10~(5.2)TCID_(50)/100μL,空白对照组按同样的方法灌服细胞培养液。在感染后不同时间点观察乳鼠的临床症状、腹泻和死亡情况、解剖症状,采用苏木精-伊红(H.E.)染色进行肠道组织病理学检查,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测乳鼠肠内容物中PoRV含量。结果显示,乳鼠在接种PoRV后24 h出现明显腹泻症状,攻毒后3~4 d时发病最严重,4 d时乳鼠的腹泻率介于62.5%~100%,7 d时恢复正常,乳鼠的死亡率介于44.4%~90.0%。与空白对照组比,攻毒组小鼠在给予PoRV后,肠道出现明显的病理变化,主要表现为水肿和充血、肠上皮完整性破坏。RT-PCR检测结果显示,攻毒组部分乳鼠的肠内容物中检出PoRV。本试验利用PoRV OSU株成功建立了乳鼠腹泻模型,阐明了其致病特征。

中药联合益生菌对大肠杆菌致小鼠腹泻保护机制研究

【目的】前期研究表明中药联合益生菌对致病性大肠杆菌所致小鼠腹泻具有明显的保护作用,本研究旨在进一步探讨中药联合益生菌对致病性大肠杆菌致小鼠腹泻的保护机制。【方法】选取小鼠60只,随机分为5组,空白组、模型组、中药组、益生菌组及中药联合益生菌组,每组12只。除空白组外,其余各组小鼠通过腹腔注射1×10^(7) CFU/kg大肠杆菌分离株菌悬液建立小鼠腹泻模型,空白组腹腔注射等量生理盐水。中药组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖),益生菌组灌胃给予枯草芽孢杆菌悬液(2×10^(8) CFU/kg),中药联合益生菌组灌胃给予中药液(2.5 g/kg蒲公英提取物、0.5 g/kg黄芪总黄酮及0.5 g/kg黄芪多糖)与枯草芽孢杆菌悬液(5×10^(7) CFU/kg)的混合液,1次/d,连续给药7 d。HE染色观察小肠组织病理学变化,扫描电镜观察小肠组织超微结构变化,ELISA法检测小鼠小肠匀浆和血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-6(IL-6)含量,RT-PCR法检测小肠组织及血液中TNF-α和IL-6 mRNA表达,免疫组织化学染色检测小肠组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65蛋白表达。【结果】中药联合益生菌能改善小肠病理组织学病变、修复小肠绒毛高度脱水萎缩和微绒毛脱落明显的损伤。同时,中药联合益生菌可明显降低小肠组织及血清中TNF-α和IL-6的含量(P<0.05;P<0.01),显著抑制小肠组织及血液中TNF-α和IL-6 mRNA的表达(P<0.05;P<0.01)。中药联合益生菌可明显降低小肠组织NF-κB p65蛋白的表达。【结论】中药联合益生菌可通过调控NF-κB信号通路,抑制小肠组织及血液TNF-α和IL-6 mRNA的过度表达,降低小肠组织及血清TNF-α和IL-6含量,改善肠腺变性和黏膜炎性细胞浸润以及小肠绒毛和微绒毛损伤,从而对大肠杆菌所致小鼠腹泻起到保护作用。

樟芝深层发酵多糖对抗生素相关性腹泻小鼠肠道菌群的调节作用

为了研究樟芝(Antrodia cinnamomea)深层发酵产生的多糖对抗生素相关性腹泻小鼠肠道菌群的影响,开发樟芝在功能食品领域的应用价值和潜力,本实验首先采用水提醇沉法从樟芝深层发酵菌丝体及发酵液中提取樟芝胞内多糖(Antrodia cinnamomea intracellular polysaccharides,AIPS)及胞外多糖(Antrodia cinnamomea exopolysaccharides,AEPS)并进行结构表征,结果表明,AIPS和AEPS的主要组成单糖均为葡萄糖、半乳糖及甘露糖;AEPS的平均分子质量为4.16×10^(5) Da,AIPS的平均分子质量为3.52×10^(6) Da;AEPS是吡喃环结构多糖,而AIPS则具有—C≡C—H及C—O官能团;随后进行体外抗α-淀粉酶消化能力和抗模拟胃液消化能力实验,结果表明,AIPS和AEPS均具有较强的抗消化能力;最后进行抗生素盐酸林可霉素(lincomycin hydrochloride,LIH)相关性腹泻小鼠体内实验,结果表明,灌胃樟芝多糖可明显增加小鼠肠道菌群中部分有益微生物(如Lactobacillus)的相对丰度,同时明显降低部分有害微生物(如Enterococcus、Staphylococcus、Parasutterella及Shigella)的相对丰度,其中AEPS的调节效果明显优于AIPS。本研究可为开发新型多功能益生元提供新思路及依据。

番泻叶致小鼠急性腹泻模型的建立

本研究旨在建立小鼠急性腹泻模型。取昆明小白鼠30只,随机分为3组,分别为模型组1、模型组2及对照组,每只分别灌胃1 g/mL番泻叶水煎液0.2 mL、0.3 mL和生理盐水0.2 mL。每天两次,连续5天。观察小鼠排便情况,并记录稀便率、稀便级、腹泻指数。试验第六天,每组随机选取小鼠5只采集血清,测定血糖和甘油三酯。采血后断颈处死,采集回肠和盲肠标本,制作苏木精-伊红(HE)染色病理切片。通过指标稀便率、稀便级、腹泻指数及体重分析,两种番泻叶浓度均可明显致小鼠急性腹泻(P<0.05),并对小鼠血糖水平无明显影响(P>0.05),但高浓度番泻叶使甘油三酯血液水平有明显降低(P<0.01)。饲喂番泻叶组小鼠的回肠盲肠黏膜均无明显坏死和炎症反应,但高浓度番泻叶会影响肠道黏膜下层间隙并使少量绒毛上皮细胞脱落。结果表明两种浓度番泻叶均可建立小鼠急性腹泻模型,但灌胃0.3 mL番泻叶组效果更明显。

抗大肠杆菌卵黄抗体及其纳米粒-微球对大肠杆菌腹泻预防效果评价

试验旨在探讨抗大肠杆菌卵黄抗体(IgY)及其纳米粒-微球对大肠杆菌腹泻的预防效果。采用IgY连续饲喂小鼠8 d,记录并计算小鼠体重变化、血常规变化、器官指数、巨噬细胞吞噬指数和吞噬百分数;建立小鼠大肠杆菌腹泻模型,将小鼠随机分为IgY组、纳米粒-微球组、空白对照组,分别以口服、腹腔注射、腹腔注射+口服3种方式给药,其中空白对照组以磷酸缓冲盐(PBS)代替IgY。结果显示,IgY饲喂试验中,IgY组小鼠的平均日增重高于对照组,增幅为11.25%;IgY组小鼠的肝脏指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬百分数显著高于对照组(P<0.05),IgY组小鼠的巨噬细胞吞噬指数极显著高于对照组(P<0.01)。在小鼠腹泻预防试验中,IgY与IgY纳米粒-微球对小鼠大肠杆菌腹泻均具有一定的保护作用,IgY组口服、腹腔注射、腹腔注射+口服3种给药方式下小鼠死亡率分别为16.67%、33.33%、0,IgY纳米粒-微球组对应给药方式的死亡率为83.33%、0、16.67%。研究表明,IgY对小鼠的生长及免疫具有促进作用,抗大肠杆菌IgY及其纳米粒-微球对小鼠大肠杆菌腹泻有显著的预防作用。

加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠血常规、血糖及脏器指数的影响

试验旨在研究加味理中汤方对脾虚泄泻模型小鼠血常规、血糖及脏器指数的影响。试验中复方由干姜、党参、白术、甘草、茯苓、山药、木香、桂枝、砂仁组成。选择无特定病原体级ICR小鼠72只,随机分为6组,每组12只小鼠,雌、雄各半。除空白对照组(C组)小鼠灌胃同体积的生理盐水外,其余各组小鼠灌胃番泻叶提取物9 d建立脾虚泄泻模型。试验第10 d停用番泻叶,恩诺沙星治疗组(A组)小鼠灌胃恩诺沙星水溶液,各中药组分别给予低剂量(6.5 g/kg)、中剂量(13.0 g/kg)、高剂量(26.0 g/kg)灌胃治疗,C组和泄泻模型组(M组)用同体积的生理盐水灌胃,连续治疗3 d。结果显示,与C组相比,M组小鼠空腹血糖含量、淋巴细胞百分比、肝脏指数均极显著降低(P<0.01),血小板数目显著降低(P<0.05),中性粒细胞百分比及白细胞数目显著增加(P<0.01)。与M组比,各治疗组小鼠中性粒细胞百分比极显著降低(P<0.01),淋巴细胞百分及空腹血糖含量极显著升高(P<0.01);中药高剂量组(ZH组)小鼠血小板数目显著提高(P<0.05),肝脏指数极显著提高(P<0.01)。与A组比,ZH组小鼠血糖含量、肝脏指数均极显著升高(P<0.01),血小板数目、肾脏指数均显著升高(P<0.05)。研究表明,加味理中汤方对脾虚泄泻小鼠的血常规、血糖及肝肾脏器指数等指标异常具有一定的改善作用,高剂量中药效果最佳且优于恩诺沙星。

轮状病毒感染乳鼠致病机制的实验研究

目的研究轮状病毒(rotavirus,RV)腹泻发病机制。方法生后7d乳鼠经口感染猴RV(SA-11)后不同时间点取小肠组织,观察形态学改变并用软件(Image pro plus5.1,IPP5.1)测定;免疫组化染色观察RV抗原分布;Phalloi-dine染色观察小肠绒毛丝状肌动蛋白分布;肠上皮细胞原位凋亡检测。结果乳鼠感染RV后小肠绒毛轻度充血水肿、上皮细胞广泛空泡状变性,顶部大量脂滴样结构,微绒毛排列紊乱或脱落,而细胞间连结未见明显结构改变;RV抗原分布主要在小肠绒毛的上部;肠组织丝状肌动蛋白含量有明显减少;小肠上皮细胞凋亡增加。结论RV主要感染小肠成熟绒毛上皮细胞;腹泻的发生与小肠绒毛上皮细胞骨架损害、微绒毛损害、细胞凋亡脱落和绒毛萎缩相关,但与肠上皮细胞间连接损害关系不大。

嗜酸乳杆菌发酵复方中药成分变化对腹泻小鼠的影响

为对比研究中药复方经发酵前后其成分变化对小鼠腹泻的影响,本研究采用高效液相色谱检测中药复方发酵前后成分的变化,以大肠杆菌K88所致腹泻小鼠为动物模型,对比研究中药复方发酵液与中药复方水提液对腹泻小鼠腹泻率、腹泻指数、免疫器官指数、肠道菌群及细胞因子IFN-γ、IL-4的影响。结果显示,中药复方发酵液中保留时间为16 min处的主要特征吸收峰消失,主要成分发生了转变,产生了一种新的特征吸收峰。饲喂试验显示发酵组小鼠腹泻指数与腹泻率显著低于中药水提组(p<0.05);中药复方发酵液在降低小鼠盲肠内大肠杆菌数量,提高双歧杆菌及嗜酸乳杆菌数量方面优于中药复方水提液;发酵组小鼠胸腺指数与肝脏指数显著高于水提组(p<0.05)。中药复方发酵液在提高IFN-γ/IL-4比值方面优于中药复方水提液。结果表明,中药复方经过发酵后成分发生了变化,形成了新的物质,对腹泻小鼠产生了有益的影响,应用效果优于中药复方水提液,为其在治疗腹泻方面的应用奠定基础。

半夏泻心汤干预依立替康致小细胞肺癌荷瘤鼠腹泻的研究

目的:应用半夏泻心汤干预依立替康致小细胞肺癌(small-cell lung cancer,SCLC)荷瘤鼠的腹泻,了解其在改善食欲、缓解体重下降及干预腹泻方面的作用。方法:将荷瘤鼠随机分成4组,高、中、低3个给药组剂量分别为20、10、5g/kg,空白组给等量水,灌胃给药,共8天。干预给药第3天,按35mg/(kg.天)尾静脉注射CPT-11,共4天。记录食量、体重及腹泻等情况。第8天处死荷瘤鼠,取结肠和回肠组织,显微镜下观察结肠、回肠组织的病理形态改变。结果:除高剂量组外使用CPT-11后第8天比第3天均表现为不同程度的体重下降;高剂量组与中剂量组相对于空白组在第8天比第1天体重下降的比较有统计学差异。各组荷瘤鼠食量两两比较均无统计学差异。各组荷瘤鼠腹泻的总积分空白组最高,中剂量组与高剂量组相对于空白组比较均有统计学差异。肠组织黏膜损伤程度病理学积分空白组最高。结论:半夏泻心汤能在一定程度上预防和控制CPT-11致SCLC荷瘤鼠的腹泻,并缓解体重的下降。

新生小鼠轮状病毒腹泻模型建立及病理学致病机制研究

目的研究轮状病毒（RV）感染性腹泻的病理学机制。方法50只3d昆明鼠按接种RV与否随机分为实验组（40只）与对照组（10只），实验组经胃灌入0．2ml（2×10^8 PFU）含病毒（SA11株）培养液，对照组灌人0．2ml不含病毒的培养液，分别于接种后不同时间点观察腹泻情况，ELISA方法检测粪便RV抗原，并取其肠黏膜光镜观察形态学变化及电子显微镜下观察RV定植及细胞超微改变。结果实验组接种病毒后24h均出现腹泻，在接种后4d达高峰，第10天完全恢复正常，粪便ELISA检测RV抗原均为阳性。突出的病理改变为小肠上皮细胞广泛空泡样变性，炎症改变轻微。电镜下绒毛上皮细胞结构完整，紧密连接疏松、增宽，完整性受到破坏。结论猴SA11株可成功感染新生昆明鼠制备RV感染模型。RV腹泻的发生可能是通过破坏肠上皮细胞间连接关系，改变上皮细胞极化，从而影响水电解质平衡；与微绒毛损害、细胞凋亡脱落、绒毛萎缩及隐窝细胞取代关系不大。

葛根芩连方抗Wa株轮状病毒的药效学研究

目的观察葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠腹泻的治疗作用,为深入研究开发葛根芩连方提供实验依据。方法建立Wa株轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠腹泻模型和空白对照模型,以葛根芩连方提取物0.78 g/kg进行干预治疗,比较用药前后Wa株轮状病毒感染乳鼠的体征、腹泻率、腹泻程度、小肠及肺的病理形态学等指标变化。结果葛根芩连方提取物0.78 g/kg能够降低乳鼠的腹泻率,减轻腹泻程度,改善感染乳鼠体征及小肠病理形态学变化。结论葛根芩连方具有抗Wa株轮状病毒作用。

九香止泻片对小鼠体内抑菌作用的实验研究

目的观察九香止泻片(又名秦香止泻肠溶片)对小鼠体内肠道常见致病菌的影响,探讨其治疗湿热泄泻的作用机制。方法分别腹腔注射小鼠致死量大肠杆菌、乙型副伤寒杆菌、痢疾杆菌3种不同细菌菌悬液制作腹泻感染动物模型,观察九香止泻片高、中、低3个不同剂量(以下简称九香高、中、低剂量组)及肠康片、诺氟沙星胶囊对感染小鼠模型的存活率、存活时间的影响。结果与模型组比,各药物组均可显著提高3种不同细菌感染小鼠模型的存活率、明显延长其存活时间,差异具有统计学意义(P﹤0.05),其中,诺氟沙星组、九香高剂量组均明显优于肠康片组,差异具有统计学意义(P﹤0.05),而九香中剂量组与肠康片组、九香高剂量组与诺氟沙星对感染模型小鼠存活率的提高及存活时间的延长相当。结论九香止泻片对腹腔注射致死量大肠杆菌、痢疾杆菌和乙型副伤寒杆菌等感染小鼠模型可明显提高其存活率,显著延长感染小鼠存活时间,并呈现一定的量效关系,表明其对感染模型小鼠具有较好的保护作用,对体内肠道常见致病菌具有较好抑制作用。

新生小鼠轮状病毒腹泻诱导型一氧化氮合酶mRNA的表达及其意义

目的研究新生小鼠轮状病毒(rotavirus,RV)腹泻小肠诱导型一氧化氮合酶mRNA(iNOS mRNA)的表达,探讨其在RV腹泻发病机制中的作用。方法48只3 d新生昆明小鼠随机分为实验组(32只)与对照组(16只),实验组经口灌入0.2 ml(2×108 PFU)含RV培养液,对照组灌入0.2 ml不含病毒的培养液,分别于接种后相应时间点观察腹泻情况并评分。ELISA方法检测粪便RV抗原,并取肠黏膜观察病理学变化,采用实时荧光PCR检测实验组iNOS mRNA表达变化,对腹泻程度及iNOS表达进行相关性分析。结果实验组小鼠接种病毒后24 h均出现腹泻,在接种后第4天达高峰,第10天完全恢复正常,粪便ELISA检测RV抗原均为阳性,小肠病理改变为上皮细胞空泡样变性;小肠iNOS mRNA的表达显著增强,乳鼠肠iNOS mRNA的表达变化趋势与腹泻发生程度有相关性(r=0.708,P<0.05)。对照组未出现腹泻,病理改变不明显。结论新生小鼠RV腹泻小肠iNOS mRNA表达增强,乳鼠肠iNOS mRNA的表达变化与腹泻发生程度存在正相关,提示其在介导RV腹泻中发挥重要作用。

桃花止泻颗粒的药效学研究

目的 观察桃花止泻颗粒对正常及脾虚小鼠胃肠功能的影响。方法 通过小鼠肠推进试验、胃排空试验、对脾虚小鼠排便影响的试验 ,观察桃花止泻颗粒的止泻作用。结果 桃花止泻颗粒可抑制正常小鼠小肠推进及胃排空运动 ,明显减少脾虚小鼠的腹泻次数。结论 桃花止泻颗粒具有止泻作用 。