超高效液相色谱-串联质谱法检测绵羊组织中地昔尼尔残留的方法学研究

【目的】建立一种绵羊组织中地昔尼尔及其代谢产物2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶质量浓度的超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)检测方法。【方法】对采集的绵羊肌肉、脂肪、肝脏、肾脏组织进行前处理,以乙腈和七氟丁酸水溶液为流动相,利用Acquity UPLC Beh C18色谱柱进行梯度洗脱;流速为0.15 mL/min,柱温为30℃,进样量为5μL。在正离子扫描模式下通过多离子反应监测采集数据,采用外标法测定地昔尼尔及其代谢产物浓度,并考察该检测方法的线性范围、检测限、定量限、回收率、批内与批间精密度、准确度和稳定性。【结果】建立的检测方法灵敏度高,检测限为10μg/kg,定量限为20μg/kg,地昔尼尔和2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶的添加浓度为20~1000μg/kg,标准曲线的线性关系良好,相关系数均≥0.99。将地昔尼尔和2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶以高、中、低、定量限4个水平分别添加到各空白组织中,测得地昔尼尔和2,4,6-三氨基-5-氰基嘧啶的回收率为70%~110%,批内和批间变异系数均<15%。在考察的条件下,地昔尼尔和2,4,6-三氨基-5-氰基嘧在各组织中的稳定性良好。【结论】建立的UPLC-MS/MS检测方法专属性强、重复性好、灵敏度高,可适用于地昔尼尔乳剂在绵羊组织内的药物代谢动力学和残留研究。

高效液相色谱法测定含脂羊毛中灭蝇胺和环虫腈

建立了高效液相色谱法(HPLC)测定含脂羊毛中的灭蝇胺和环虫腈的方法及HPLC-MS/MS确证方法。样品用80mL1%三氯乙酸溶液超声提取,MCX柱净化,Hypersil NH2色谱柱分离,水-乙腈为流动相梯度洗脱,214nm检测,HPLC-MS/MS确证。在正离子电喷雾电离(ESI+)模式下,环虫腈[M+H]+及2个主要的特征离子分别为m/z191.0,150.0和163.0;灭蝇胺[M+H]+及2个主要的特征离子分别为m/z167.0,85.0和125.0。在0.05～5.0mg/L范围内,灭蝇胺和环虫腈均有良好的线性关系,相关系数均为0.9999。本方法的检出限灭蝇胺为0.02mg/kg,环虫腈为0.01mg/kg。方法的平均加标回收率:灭蝇胺为95.0%～99.9%,环虫腈为83.6%～92.2%。

高效液相色谱法测定动物性食品中地昔尼尔残留量

本试验建立了羊肉和牛肉中地昔尼尔残留高效液相色谱方法,样品经乙腈提取,正己烷脱脂,HLB固相萃取柱净化,高效液相色谱分离,270nm波长下紫外测定。结果表明,地昔尼尔在20～1000μg/L浓度范围内线性良好,相关系数大于0.99;在100～1000μg/kg的添加回收试验中,平均回收率为81.8%～93.4%,批内变异系数(n=5)小于11.9%,批间变异系数(n=3)小于9.4%。地昔尼尔在羊肉和牛肉中的检测限分别为30.0和28.0μg/kg,定量限分别为100.0和93.1μg/kg,该方法简单、灵敏和准确,可用于动物性食品中地昔尼尔的残留检测分析。

一种新的制备兽药地昔尼尔的方法

目的采用新的合成路线制备兽药地昔尼尔(dicyclanil)。方法以N-氰亚胺基-S,S-二硫代碳酸二甲酯、丙二腈、盐酸、环丙胺等为基础原料,经过缩合、环合、取代、氧化、氨化等反应步骤得到高品质的地昔尼尔。结果通过设计的新的合成路线成功得到高品质的地昔尼尔产品,HPLC分析其含量≥99.9%。结论该合成工艺,工艺操作简单,设备要求低,生产收率高,适于工业生产。

超高效液相色谱法测定饲料中地昔尼尔

本研究建立了超高效液相色谱测定饲料中地昔尼尔的方法。饲料样品经过乙腈提取,取5mL上清液氮气吹干,用20%甲醇溶液(含0.2%甲酸)溶解,经过Waters Oasis MCX固相萃取小柱净化,然后用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1mm×100mmi.d.,1.8μm)分离,以甲醇和水为流动相进行洗脱,外标法定量。结果表明,地昔尼尔质量浓度在0.05～100μg/mL内线性良好,相关系数大于0.9999;在10～200mg/kg的添加水平,平均加标回收率为78.0%～86.3%;相对标准偏差为4.2%～6.1%;方法的检出限低至0.05mg/kg,定量下限低至0.1mg/kg。该方法简单、快速、灵敏,可满足饲料中地昔尼尔的快速筛选检测的要求。

牛奶中三聚氰胺、环丙氨嗪、地昔尼尔的高效液相色谱-串联质谱检测方法的建立

【目的】建立检测和监测牛奶中三聚氰胺、地昔尼尔、环丙氨嗪残留的科学方法。【方法】用1%三氯乙酸-乙腈溶液将样品中的蛋白沉淀,将目标分析物提取出来,通过强阳离子固相萃取柱对目标分析物进行富集净化后,最后用Waters超高效液相色谱-串联质谱仪对三种物质残留含量进行标准检测,色谱柱采用Acquity HSS T3(2.1mm×50mm,1.7μm),以0.1%甲酸水溶液-乙腈为流动相进行梯度洗脱,外标法定量。对前处理方法及液相色谱和质谱条件进行优化。【结果】用该方法对牛奶中三聚氰胺、地昔尼尔、环丙氨嗪残留的检测低限为20μg/kg,添加回收率在94%~104%之间。【结论】该方法灵敏、稳定性好,可满足牛奶中三聚氰胺、地昔尼尔、环丙氨嗪的检测与确证要求。

HPLC法测定地昔尼尔含量及有关物质

建立了高效液相色谱法测定地昔尼尔的含量和有关物质的检测方法。采用C18色谱柱(5μm,4.6 mm×250 mm),流动相为甲醇-水(30∶70),流速1.0 mL/min,检测波长269 nm,进样量20μL,柱温25℃。该方法的线性范围为1.01～20.16μg/mL(r=0.9998);最低检出限2 ng;精密度的RSD为0.56%(n=6);平均加样回收率为99.66%(n=9)。该方法简便灵敏,结果准确可靠,可用于地昔尼尔原料的含量及有关物质的测定。

昆虫生长调节剂环虫腈的合成研究

报道了环虫腈合成新工艺。以双氰胺钠和丙二腈为起始原料,经缩合和环合反应制备2-氯-4,6-二氨基嘧啶-5-腈,再与环丙胺进行取代反应得到目标产物环虫腈,3步反应总收率大于64%,产品质量分数99%以上。环虫腈及其中间体的化学结构经核磁共振氢谱、核磁共振碳谱、质谱和红外光谱确认。

地昔尼尔合成工艺的改进

地昔尼尔是一种新型杀虫剂,现有地昔尼尔制备工艺复杂,反应条件苛刻,生产成本过高。通过改进其合成方法,使用易得、低毒试剂,简化了后处理方法,经缩合、环合、胺化、氧化和氨化五步反应得到本品,产品结构经1HNMR确认,总收率达到40%以上,产品纯度99%以上。

地昔尼尔的药理学研究进展

地昔尼尔作为一种新型昆虫生长调节剂,对双翅目昆虫和蚤有高度灭杀作用,可有效防止各种蝇、蚊及蚤的幼虫发育成蛹或成虫,尤其能够有效预防家蝇和埃及伊蚊对动物的侵害,其毒性作用较低,安全性较高。本文介绍了地昔尼尔在药效学及药代动力学方面的研究进展,旨在为筛选高效安全的抗体外寄生虫药物提供参考。

地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学研究

为建立高效液相色谱法(HPLC)测定猪血浆中地昔尼尔质量浓度的方法,探讨地昔尼尔乳剂在猪体内的药动学特征,将50g/kg地昔尼尔乳剂以45mg/kg的单剂量为6头健康猪给药(背正中线浇泼),血浆经乙腈提取,采用HPLC测定了血液中地昔尼尔浓度。本试验条件下,地昔尼尔在0.05～20μg/mL内线性良好,r2=0.999,最低检测限为0.01μg/mL;其药时数据符合一级吸收二室模型,主要药动学参数为:t1/2ka=9.836h±0.198h,t1/2α=13.649h±0.124h,t1/2β=20.745h±1.187h,tmax=17.576h±0.216h,Cmax=9.129μg/mL±0.313μg/mL,AUC=450.010μg/mL.h±2.993μg/mL.h。结果表明,该测定方法专属、准确、灵敏,适用于地昔尼尔的药动学研究;地昔尼尔乳剂经皮给药后,在猪体内的吸收、消除速率较慢,达峰浓度高。

Synthesis,Crystal Structure,Spectroscopy and Hirshfeld Analysis of 4,6-Diamino-2-cyclopropylaminopyrimidine-5-carbonitrile with Different Solvents:N,N-dimethylformamide,Methanol and Water

Three new solvates of 4,6-diamino-2-cyclopropylamino-5-pyrimidine carbonitrile(DCL):crystal 1(DCL with N,N-dimethylformamide(DMF)),crystal 2(DCL with methanol)and crystal 3(DCL with water)were synthesized and characterized by single-crystal X-ray diffraction,thermal behaviour,Hirshfeld surface and powder X-ray powder diffraction(PXRD).1H and ^(13)C NMR spectra confirm solvent molecules existing in the crystal lattice.Crystal 1 forms a 1:1 DCL:DMF crystal;crystal 2 gives a 1:0.5 DCL:methanol crystal and crystal 3 gets a 1:1.5 DCL:H_(2)O crystal.The three crystals are all primarily stabilized by a strong N–H×××N hydrogen bonding interaction between DCL and the solvents.The structures are stabilized by H×××H,N–H×××O,N–H×××N and O–H×××O intermolecular interactions.When crystal 2 is dried at 150℃,the new polymorph with no solvate is obtained.

地昔尼尔乳剂的制备及其HPLC测定方法的建立

为制备地昔尼尔乳剂并建立其质量浓度的测定方法,以稳定常数和离心稳定性作为乳剂稳定性评价指标,采用单因素试验和正交设计试验法考察处方因素和工艺因素对乳剂稳定性的影响,以筛选出乳剂的最优处方和制备工艺;采用高效液相色谱法(HPLC)测定乳剂的药物质量浓度。结果显示,地昔尼尔乳剂的最优处方为地昔尼尔50g/L、乳化剂70mL/L、油相125mL/L、助乳化剂160mL/L、稳定剂为3.5g/L;地昔尼尔乳剂的制备方法为乳化温度50℃,20 000r/min高速搅拌10min。建立的HPLC色谱条件为色谱柱X Bridge C18(4.6mm×250mm,5μm),流动相乙腈与水(6mL/L三乙胺+2mL/L甲酸)的体积比为10∶90,流速0.8mL/min,柱温30℃,紫外检测波长267nm,进样体积20μL。在10~100μg/mL的质量浓度范围内,峰面积与药物浓度呈良好线性关系(r2=0.999 9,n=7),回归方程为y=148.01x+91.629。精密度试验相对标准偏差均小于2%,在80%、100%和120%3个添加水平时,平均回收率为98.36%,精密度、回收率均符合要求。定量限和检测限分别为10ng/mL和20ng/mL,测得3批地昔尼尔乳剂的平均质量浓度为49.29mg/mL,为标示量的98.57%。结果表明,该处方合理、制备工艺可靠,所建立的高效液相色谱法可用于地昔尼尔乳剂的检测。

地昔尼尔乳剂在绵羊体内的药动学研究

为建立高效液相色谱法（HPLC）测定绵羊血浆中地昔尼尔的质量浓度,比较健康绵羊经皮肤浇泼地昔尼尔乳剂和进口地昔尼尔乳剂（Clik）后的药动学特征及生物利用度,选用12头健康绵羊随机分为地昔尼尔乳剂组和Clik组,公母各半,并以35 mg·kg-1的剂量于背正中线浇泼给药,在不同时间点内于颈静脉处采血,分离血浆,采用HPLC测定地昔尼尔的血药浓度。结果显示：地昔尼尔在20-10 000 ng·mL^（-1）浓度范围内线性良好,r2〉0.999,定量限（LOQ）为20 ng·mL^（-1）;地昔尼尔以定量限、低、中、高（20、100、1 000、10 000 ng·mL^（-1））4个浓度添加水平的回收率均大于80%,精密度均小于15%;地昔尼尔乳剂组药动学参数：消除半衰期（T（1/2λz））=（25.35±7.50）h,达峰时间（T（max））=（46.00±4.90）h,达峰浓度（C（max））=（473.73±102.53）ng·mL^（-1）,药时曲线下面积（AUC（0→t））=（20 856.38±4 178.93）ng·mL^（-1）·h;Clik-组药动学参数：T（1/2λz）=（33.91±10.54）h,T（max）=（44.00±6.20）h,C（max）=（469.08±126.34）ng·mL^（-1）,AUC0→t=（23 475.42±6 845.78）ng·mL^（-1）·h;地昔尼尔乳剂的相对生物利用度为88.84%。结果表明：该方法专属性强、重复性好、灵敏度高,适用于地昔尼尔在绵羊体内的药动学研究。