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Separation and Identification of Differentially Expressed Proteins in Pistillate Flowers between Different Mulberry Cultivars
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作者 牛瑞鹤 陈媛媛 +3 位作者 张萍萍 祁伟 郑必平 谈建中 《Agricultural Science & Technology》 CAS 2013年第10期1383-1385,1402,共4页
[Objective] This study aimed to explore the proteins related to pistillate flower development in different mulberry cultivars. [Method] The total proteins of the pistillate flowers of two mulberry cultivars Dal0 (Mor... [Objective] This study aimed to explore the proteins related to pistillate flower development in different mulberry cultivars. [Method] The total proteins of the pistillate flowers of two mulberry cultivars Dal0 (Morus atropurpurea Roxb.) and SG01 (Morus muIticaulis Perr.) were extracted, separated and detected through two- dimensional electrophoresis (2-DE) and mass spectrometry. [Result] There was sig- nificant difference in the expression of proteins from the pistillate flowers of different mulberry cultivars. From the 2-DE images of Dal0 and SG01, 445_+17 and 425_+12 protein spots were respectively detected. The expression levels of 75 protein spots differed significantly. Thirteen spots those were expressed at high levels and well separated were analyzed by mass spectrometry, and nine of them were identified successfully. The nine proteins are involved in the glycometabolism, protein and amino acid metabolism and defense responses during the development of mulberry pistillate flower after they were pollinated. [Conclusion] The findings will provide reference for further study on the molecular mechanism of mulberry pistillate flower de- velopment. 展开更多
关键词 Mulberry cultivars Pistillate flower differentially expressed proteins Two- dimensional electrophoresis Mass spectrometry
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Differentially Expressed Proteins in Rat Hippocampus after Chronic Immobilization Stress and Intervention Using Xiao Yao San Decoction 被引量:3
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作者 Mei-Jing KOU Zhe XUE +3 位作者 Yan-Yun LIU Yue-Yun LIU Yan LIU Jia-Xu CHEN 《Digital Chinese Medicine》 2018年第3期219-227,共9页
Objective To identify differentially expressed proteins in the hippocampus of rats after chronic immobilization stress(CIS)using a proteomics approach,and to study the effect of the Xiao Yao San(XYS)decoction on diffe... Objective To identify differentially expressed proteins in the hippocampus of rats after chronic immobilization stress(CIS)using a proteomics approach,and to study the effect of the Xiao Yao San(XYS)decoction on differentially expressed proteins.Methods Twenty-four Sprague Dawley rats were randomly assigned to one of four groups of equal body weight:control(non-stress),7-day stress,21-day stress and21-day stress+XYS treatment groups.Two-dimensional gel electrophoresis(2-DE)was used to detect differences in protein expression in rat hippocampus.One differentially expressed protein was measured and verified by western blotting.Results Seventeen proteins showed differential expression.Among these,eight could be identified:glial fibrillary acidic protein-2(GFAP-2),tubulin alpha-1c,cytoplasmic muscle actin2,14-3-3protein,β-2a tubulin,phosphatidylethanolamine binding protein,synucleinαsyn3,and a low molecular weight(18kD)protein.Six of these proteins exhibited increased expression,one showed decreased expression,and the other protein,which comprised five subtypes,were either increased or decreased.These proteins are known to be involved in immunity,signal transduction,cell cycle control,apoptosis,regulation of enzyme activity,cytoskeleton structure,and synaptic plasticity.GFAP-2was further analyzed,and its differential expression confirmed by western blotting.Conclusion Some proteins are differentially expressed in the hippocampus of rats under chronic stress.The biological functions of these differentially expressed proteins are varied.Finally,the XYS decoction can significantly up-or down-regulate these protein expression levels. 展开更多
关键词 Chronic immobilization stress Syndrome of liver-depression and spleen-deficiency Rat Hippocampus XYS decoction differentially expressed proteins
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Characteristics of Atmospheric Fine Particulate Matter(PM2.5)Induced Differentially Expressed Proteins Determined by Proteomics and Bioinformatics Analyses
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作者 ZHENG Kai CAI Ying +7 位作者 WANG Bing Yu QIN Shuang Jian LI Bo Ru HUANG Hai Yan QIN Xiao Yun LONG Ding Xin ZHANG Zhao Hui XU Xin Yun 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2020年第8期583-592,共10页
Objective To screen the differentially expressed proteins(DEPs)in human bronchial epithelial cells(HBE)treated with atmospheric fine particulate matter(PM2.5).Methods HBE cells were treated with PM2.5 samples from She... Objective To screen the differentially expressed proteins(DEPs)in human bronchial epithelial cells(HBE)treated with atmospheric fine particulate matter(PM2.5).Methods HBE cells were treated with PM2.5 samples from Shenzhen and Taiyuan for 24 h.To detect overall protein expression,the Q Exactive mass spectrometer was used.Gene ontology(GO),Kyoto encyclopedia of genes and genomes(KEGG),and Perseus software were used to screen DEPs.Results Overall,67 DEPs were screened in the Shenzhen sample-treated group,of which 46 were upregulated and 21 were downregulated.In total,252 DEPs were screened in the Taiyuan sampletreated group,of which 134 were upregulated and 118 were downregulated.KEGG analysis demonstrated that DEPs were mainly enriched in ubiquitin-mediated proteolysis and HIF-1 signal pathways in Shenzhen PM2.5 samples-treated group.The GO analysis demonstrated that Shenzhen sample-induced DEPs were mainly involved in the biological process for absorption of various metal ions and cell components.The Taiyuan PM2.5-induced DEPs were mainly involved in biological processes of protein aggregation regulation and molecular function of oxidase activity.Additionally,three important DEPs,including ANXA2,DIABLO,and AIMP1,were screened.Conclusion Our findings provide a valuable basis for further evaluation of PM2.5-associated carcinogenesis. 展开更多
关键词 PM2.5 PROTEOMICS BIOINFORMATICS differentially expressed proteins Weighted correlation network analysis
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Elementary study of differential expression of total soluble proteins in different life phases of Porphyra yezoensis
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作者 孟春晓 高政权 +2 位作者 王依涛 罗韬 叶乃好 《Marine Science Bulletin》 CAS 2010年第2期32-37,共6页
Total soluble proteins of different life stages, filamentous sporophytes cultivated in high temperatures, and blade gametophytes harvested in different seasons, were identified by SDS-PAGE. The types and amounts of ex... Total soluble proteins of different life stages, filamentous sporophytes cultivated in high temperatures, and blade gametophytes harvested in different seasons, were identified by SDS-PAGE. The types and amounts of expressed proteins also varied amongst the samples. The fewest soluble proteins were present in filamentous sporophytes. There were more types and amounts of soluble protein in conchospores than in filamentous sporophytes, but fewer than in bulgy sporophytes. More types of protein were detected in filamentous sporophytes cultivated in high temperatures than in those growing in normal situations. The most types and amounts of protein were found in blade gametophytes in all samples. Blade gametophytes harvested last year and stored at -20 ℃ showed only minor differences in expression of proteins when compared with those harvested in different seasons. 展开更多
关键词 Porphyra yezoensis total soluble proteins differential expression
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Identification of four differentially expressed genes associated with acute and chronic spinal cord injury based on bioinformatics data 被引量:1
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作者 Su-Ping Niu Ya-Jun Zhang +3 位作者 Na Han Xiao-Feng Yin Dian-Ying Zhang Yu-Hui Kou 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2021年第5期865-870,共6页
Complex pathological changes occur during the development of spinal cord injury(SCI),and determining the underlying molecular events that occur during SCI is necessary for the development of promising molecular target... Complex pathological changes occur during the development of spinal cord injury(SCI),and determining the underlying molecular events that occur during SCI is necessary for the development of promising molecular targets and therapeutic strategies.This study was designed to explore differentially expressed genes(DEGs)associated with the acute and chronic stages of SCI using bioinformatics analysis.Gene expression profiles(GSE45006,GSE93249,and GSE45550)were downloaded from the Gene Expression Omnibus database.SCI-associated DEGs from rat samples were identified,and Gene Ontology and the Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway enrichment analyses were performed.In addition,a protein-protein interaction network was constructed.Approximately 66 DEGs were identified in GSE45550 between 3–14 days after SCI,whereas 2418 DEGs were identified in GSE450061–56 days after SCI.Moreover,1263,195,and 75 overlapping DEGs were identified between these two expression profiles,3,7/8,and 14 days after SCI,respectively.Additionally,16 overlapping DEGs were obtained in GSE450061–14 days after SCI,including Pank1,Hn1,Tmem150c,Rgd1309676,Lpl,Mdh1,Nnt,Loc100912219,Large1,Baiap2,Slc24a2,Fundc2,Mrps14,Slc16a7,Obfc1,and Alpk3.Importantly,3882 overlapping DEGs were identified in GSE932491–6 months after SCI,including 3316 protein-coding genes and 567 long non-coding RNA genes.A comparative analysis between GSE93249 and GSE45006 resulted in the enrichment of 1135 overlapping DEGs.The significant functions of these 1135 genes were correlated with the response to the immune effector process,the innate immune response,and cytokine production.Moreover,the biological processes and KEGG pathways of the overlapping DEGs were significantly enriched in immune system-related pathways,osteoclast differentiation,the nuclear factor-κB signaling pathway,and the chemokine signaling pathway.Finally,an analysis of the overlapping DEGs associated with both acute and chronic SCI,assessed using the expression profiles GSE93249 and GSE45006,identified four overlapping DEGs:Slc16a7,Alpk3,Lpl and Nnt.These findings may be useful for revealing the biological processes associated with SCI and the development of targeted intervention strategies. 展开更多
关键词 BIOINFORMATICS differential expression factor gene immune response INJURY PATHWAYS protein spinal cord
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CXCR4 MFAP2 KLF4在分化型甲状腺癌中的表达及对预后的预测价值研究
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作者 顾占国 李军 +1 位作者 梁金屏 石福民 《河北医学》 CAS 2024年第3期423-428,共6页
目的:研究趋化因子4受体(CXCR4)、微纤维相关蛋白2(MFAP2)、Krüppel样因子4(KLF4)在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及对预后的预测价值。方法:选择我院2019年7月至2020年7月收治的113例DTC患者,术中留取其肿瘤组织及癌旁正常组织。... 目的:研究趋化因子4受体(CXCR4)、微纤维相关蛋白2(MFAP2)、Krüppel样因子4(KLF4)在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及对预后的预测价值。方法:选择我院2019年7月至2020年7月收治的113例DTC患者,术中留取其肿瘤组织及癌旁正常组织。采用蛋白免疫印迹法检测DTC组织及癌旁正常组织中CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,分析CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平与DTC临床病理特征的关系。对DTC患者进行3年随访,统计3年总生存情况,比较死亡组与存活组CXCR4、MFAP2、KLF4表达水平,采用ROC曲线分析CXCR4、MFAP2、KLF4对DTC预后的预测价值,采用Cox回归模型进行DTC预后单因素和多因素分析。结果:与癌旁正常组织比较,DTC组织CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著升高(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著降低(P<0.05)。TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05),TNM分期Ⅲ期、发生淋巴结转移、肿瘤低分化者KLF4蛋白表达量显著低于TNM分期Ⅰ+Ⅱ期、未发生淋巴结转移、肿瘤中高分化者(P<0.05)。113例DTC患者随访3年期间失访8例,最终获得随访者105例。死亡组患者CXCR4、MFAP2蛋白表达量显著高于存活组(P<0.05),KLF4蛋白表达量显著低于存活组(P<0.05)。绘制ROC曲线发现,CXCR4、MFAP2、KLF4单独或联合预测DTC预后的AUC(95%CI)分别为0.692(0.562~0.823)、0.729(0.590~0.869)、0.766(0.622~0.910)、0.832(0.690~0.975),联合预测的效能显著优于单项检测(P<0.05)。Cox回归分析显示,淋巴结转移、TNM分期Ⅲ期、肿瘤低分化、CXCR4表达升高、MFAP2表达升高、KLF4表达降低是DTC预后的危险因素(P<0.05)。结论:分化型甲状腺癌患者肿瘤组织中CXCR4、MFAP2呈高表达,KLF4呈低表达,其表达水平与淋巴结转移、肿瘤分化程度、TNM分期及3年总生存率相关,三者联合检测有助于预测分化型甲状腺癌预后。 展开更多
关键词 趋化因子4受体 微纤维相关蛋白2 Krüppel样因子4 分化型甲状腺癌 表达水平 预后 预测价值
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SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达在三阴性乳腺癌组织中的临床意义
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作者 付刚 封琳 《实用癌症杂志》 2024年第11期1774-1776,1781,共4页
目的探讨分泌性卷曲相关蛋白4(SFRP4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中表达意义。方法选取83例TNBC患者作为研究对象,均于术中采集肿瘤组织及癌旁正常组织... 目的探讨分泌性卷曲相关蛋白4(SFRP4)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、DEP结构域蛋白1B(DEPDC1B)、程序性死亡蛋白配体-1(PD-L1)在三阴性乳腺癌(TNBC)组织中表达意义。方法选取83例TNBC患者作为研究对象,均于术中采集肿瘤组织及癌旁正常组织,采用免疫组化SP法检测SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达情况,比较肿瘤组织及正常组织内上述表达情况;并分析SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1表达与患者年龄、绝经状态、肿瘤直径、淋巴结转移、肿瘤分期等病理特征的关系。结果肿瘤组织内SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阳性表达率高于正常组织,差异有统计学意义(P<0.05);SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阳性表达患者肿瘤直径≥3 cm、临床分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移占比高于SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1阴性表达患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论SFRP4、HMGB1、DEPDC1B及PD-L1在TNBC组织内存在较高表达,且高表达与肿瘤分期、淋巴结转移关系密切,可用于指导临床完善治疗方案。 展开更多
关键词 三阴性乳腺癌 分泌性卷曲相关蛋白4 高迁移率族蛋白B1 DEP结构域蛋白1B 临床表达
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基于TMT技术的牦牛妊娠期血清蛋白质组学分析 被引量:1
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作者 姚颖 周应聪 +7 位作者 杜培岩 李一娟 钱文洁 李柳杨 余志鹏 崔燕 余四九 樊江峰 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期192-206,共15页
为了探究妊娠期内牦牛血清的蛋白质组特征,筛选并分析差异表达蛋白质(DEPs)在牦牛妊娠维持中的作用。本研究选择9头4岁半至6岁龄健康状况良好且当年未产犊的自然发情母牦牛进行人工授精(AI)。在AI后第30、60及90天采集其血清样品,并对... 为了探究妊娠期内牦牛血清的蛋白质组特征,筛选并分析差异表达蛋白质(DEPs)在牦牛妊娠维持中的作用。本研究选择9头4岁半至6岁龄健康状况良好且当年未产犊的自然发情母牦牛进行人工授精(AI)。在AI后第30、60及90天采集其血清样品,并对授配母牦牛进行妊娠诊断。依据诊断结果将采集的样品进行回顾性分组,即妊娠第1、2、3月组及未妊娠组(未妊娠组样品来自AI后90天经妊娠诊断确诊为未孕的牦牛个体),每组样品3个生物学重复。利用串联质谱标签(TMT)技术对牦牛血清样品的蛋白表达情况进行定量分析,筛选差异表达蛋白,并对其进行GO功能富集和KEGG通路等生物信息学分析,进一步筛选与牦牛妊娠维持相关的潜在蛋白。结果显示,在4组牦牛血清蛋白样品中共获得497个蛋白,以差异倍数≥1.2或≤0.83,且P<0.05为条件筛选,共筛选到68个差异蛋白。GO功能富集和KEGG通路分析显示,这些DEPs在代谢、免疫系统、粘附、生物调节等生物学过程以及补体与凝血级联、金黄色葡萄球菌感染等与炎症和免疫途径相关的通路有明显富集。值得注意的是,妊娠期各组间差异蛋白富集通路中均包含有PI3K-Akt、Rap1、MAPK等与生殖相关的信号通路。DEPs中IGFBP2、FGG、B2M、PDIA4、AZGP1的表达具有随妊娠时间的延长而连续上调的趋势,且这些蛋白在妊娠第3月表达量显著高于未妊娠状态。研究结果表明,牦牛妊娠早期存在明显的血清蛋白组的变化。这些DEPs分别在促进细胞粘附与增殖、母胎血管生成、维持母体代谢与免疫平衡等过程中起到重要作用。尤其是IGFBP2、FGG、B2M、PDIA4、AZGP1可能通过参与调节胎盘生长发育、免疫应答和脂质代谢等过程,在牦牛妊娠维持中发挥着重要作用。研究结果为进一步探明牦牛维持妊娠过程的调控机制提供了基础资料。 展开更多
关键词 TMT 蛋白质组学 牦牛 血清 差异表达蛋白 妊娠维持
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骨形态发生蛋白/Wnt信号通路调控成骨:揭示骨骼形成和重塑的分子机制 被引量:1
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作者 刘淏文 乔卫平 +3 位作者 孟志成 李凯杰 韩暄 史鹏博 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第3期563-571,共9页
背景:成骨细胞是负责骨骼形成和重塑的主要细胞类型,其功能的正常发挥受到多种信号通路的精密调控,其中,骨形态发生蛋白和Wnt信号通路在成骨过程中起着关键作用。目的:综述了骨形态发生蛋白/Wnt信号通路在调控成骨细胞功能中的作用,并... 背景:成骨细胞是负责骨骼形成和重塑的主要细胞类型,其功能的正常发挥受到多种信号通路的精密调控,其中,骨形态发生蛋白和Wnt信号通路在成骨过程中起着关键作用。目的:综述了骨形态发生蛋白/Wnt信号通路在调控成骨细胞功能中的作用,并分析其在不同生理和病理条件下的变化,以期进一步揭示骨骼形成和重塑的分子机制。方法:以中文检索词“BMP信号通路,Wnt信号通路,成骨”及英文检索词“BMP signaling pathway,Wnt signaling pathway,osteogenesis”在中国知网、万方和PubMed数据库中检索研究原著,检索时限为各数据库建库至2023年6月的相关文献,最终筛选61篇文献进行分析总结。采用文献综述的方法,对骨形态发生蛋白/Wnt信号通路调控成骨作用的研究进行梳理和分析。结果与结论:①骨形态发生蛋白和Wnt信号通路在成骨细胞的分化、增殖和成熟过程中发挥重要作用。骨形态发生蛋白信号通路主要通过激活Smad蛋白来调控成骨相关基因的表达,Smad蛋白被激活后进入细胞核,调控与成骨相关的基因表达,与骨形态发生蛋白不同,Wnt信号通路主要依赖于β-catenin的激活来发挥生物学效应。②不同生理和病理状态下,骨形态发生蛋白/Wnt信号通路的调控作用会受到多种因素的影响。生长因子及激素及机械应力等会在一定程度上影响骨形态发生蛋白/Wnt信号通路的活性。③骨形态发生蛋白/Wnt信号通路在调控成骨过程中与其他信号通路相互作用,共同构成复杂的调控网络。④中药和天然化合物可以通过调控信号通路来促进骨骼健康,为中药治疗骨骼疾病提供了新的可能性。⑤未来研究可进一步探讨骨形态发生蛋白/Wnt信号通路与其他信号通路的相互作用以及其在不同生理和病理条件下的变化,解析此复杂网络中的关键节点和调控机制,为骨骼相关疾病的治疗提供更精确的靶点,也为揭示骨骼形成和重塑的分子机制提供新的思路。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白信号通路 Wnt信号通路 成骨 骨骼 基因表达 分化 增殖 调控作用 交互作用 调控网络
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Astrocytic endothelin-1 overexpression impairs learning and memory ability in ischemic stroke via altered hippocampal neurogenesis and lipid metabolism 被引量:5
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作者 Jie Li Wen Jiang +9 位作者 Yuefang Cai Zhenqiu Ning Yingying Zhou Chengyi Wang Sookja Ki Chung Yan Huang Jingbo Sun Minzhen Deng Lihua Zhou Xiao Cheng 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2024年第3期650-656,共7页
Vascular etiology is the second most prevalent cause of cognitive impairment globally.Endothelin-1,which is produced and secreted by endothelial cells and astrocytes,is implicated in the pathogenesis of stroke.However... Vascular etiology is the second most prevalent cause of cognitive impairment globally.Endothelin-1,which is produced and secreted by endothelial cells and astrocytes,is implicated in the pathogenesis of stroke.However,the way in which changes in astrocytic endothelin-1 lead to poststroke cognitive deficits following transient middle cerebral artery occlusion is not well understood.Here,using mice in which astrocytic endothelin-1 was overexpressed,we found that the selective overexpression of endothelin-1 by astrocytic cells led to ischemic stroke-related dementia(1 hour of ischemia;7 days,28 days,or 3 months of reperfusion).We also revealed that astrocytic endothelin-1 overexpression contributed to the role of neural stem cell proliferation but impaired neurogenesis in the dentate gyrus of the hippocampus after middle cerebral artery occlusion.Comprehensive proteome profiles and western blot analysis confirmed that levels of glial fibrillary acidic protein and peroxiredoxin 6,which were differentially expressed in the brain,were significantly increased in mice with astrocytic endothelin-1 overexpression in comparison with wild-type mice 28 days after ischemic stroke.Moreover,the levels of the enriched differentially expressed proteins were closely related to lipid metabolism,as indicated by Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes pathway analysis.Liquid chromatography-mass spectrometry nontargeted metabolite profiling of brain tissues showed that astrocytic endothelin-1 overexpression altered lipid metabolism products such as glycerol phosphatidylcholine,sphingomyelin,and phosphatidic acid.Overall,this study demonstrates that astrocytic endothelin-1 overexpression can impair hippocampal neurogenesis and that it is correlated with lipid metabolism in poststroke cognitive dysfunction. 展开更多
关键词 astrocytic endothelin-1 dentate gyrus differentially expressed proteins HIPPOCAMPUS ischemic stroke learning and memory deficits lipid metabolism neural stem cells NEUROGENESIS proliferation
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柯乐猪异常乳腺组织的TMT蛋白组学分析 被引量:1
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作者 王春源 熊力 +4 位作者 杨红文 郭小江 张依裕 谭元成 杨酸 《福建农林大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期69-78,共10页
【目的】基于串联体量标记(TMT)定量蛋白组学技术探讨柯乐猪母猪乳腺发育的调控机制,为选育工作提供依据。【方法】选取乳腺发育正常和异常的柯乐猪母猪各3头,采集乳腺组织,利用TMT定量蛋白组学技术探究正常和异常乳腺组织的差异表达蛋... 【目的】基于串联体量标记(TMT)定量蛋白组学技术探讨柯乐猪母猪乳腺发育的调控机制,为选育工作提供依据。【方法】选取乳腺发育正常和异常的柯乐猪母猪各3头,采集乳腺组织,利用TMT定量蛋白组学技术探究正常和异常乳腺组织的差异表达蛋白,筛选与乳腺发育相关的差异关键蛋白,并对差异表达蛋白进行生物信息学分析。【结果】从柯乐猪乳腺组织中共筛选出474个差异表达蛋白,包括245个上调蛋白、229个下调蛋白;基因本体(GO)功能注释和富集分析显示,差异表达蛋白主要富集在上皮细胞分化、皮肤形成和肾小管上皮细胞分化等生物学过程中,主要分布在胞外区和细胞外空隙中,参与调节肽酶抑制剂活性和肽链内切酶活性;京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析显示,差异表达蛋白主要富集在补体系统、过氧化物酶体增殖物激活受体和金黄色葡萄球菌感染等信号通路上;结合差异表达蛋白互作网络分析,筛选出10个核心差异表达蛋白[上调蛋白有P14287(骨桥蛋白)、F1RXF9(角蛋白25)、I3LDS3(角蛋白10)、Q75QW1(上皮细胞黏附分子)、A0A5S8KLN1(丛生蛋白)、F1RW75(桥粒素),下调蛋白有A0A286ZT13(白蛋白)、P06867(血纤维蛋白溶酶原)、F1SCC9(含丝氨酸蛋白酶抑制剂结构域的蛋白)、P50447(α-1-抗胰蛋白酶)]。【结论】采用TMT定量蛋白组学技术能有效筛选出母猪正常和异常乳腺组织中的差异表达蛋白。 展开更多
关键词 柯乐猪 串联体量标记(TMT)技术 乳腺组织 差异表达蛋白
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罗非鱼感染无乳链球菌前后血浆蛋白组学的差异表达分析
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作者 张美燕 朱伟娟 +4 位作者 刘志刚 王章 曹建萌 卢迈新 可小丽 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期559-567,共9页
为了探究罗非鱼(Oreochromis spp.)感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)前后血浆蛋白的差异表达及其相关的信号通路,选取体质健康、规格统一的吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus GIFT,体质量为150 g±10 g)86尾,随机分成两组... 为了探究罗非鱼(Oreochromis spp.)感染无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)前后血浆蛋白的差异表达及其相关的信号通路,选取体质健康、规格统一的吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus GIFT,体质量为150 g±10 g)86尾,随机分成两组,试验组鱼体腹腔注射浓度为5×10^(7)CFU/mL的无乳链球菌WC1535菌液100μL,对照组鱼体腹腔注射无菌PBS溶液100μL,攻毒6 h后,采集两组罗非鱼的血浆,利用蛋白组学技术分析罗非鱼感染无乳链球菌前后的血浆差异表达蛋白,并分别对差异表达蛋白进行GO和KEGG富集分析。结果表明:罗非鱼感染无乳链球菌前后共鉴定出751个蛋白,其中显著差异蛋白34个,包括9个显著上调,25个显著下调;GO功能注释显示,这些差异蛋白主要与结合、运动、催化等功能有关;KEGG富集通路分析显示,差异蛋白在肌动蛋白细胞骨架调节、MAPK信号通路、癌症中心碳代谢和癌症相关蛋白聚糖等通路显著富集。研究表明,罗非鱼感染无乳链球菌前后,其血浆差异蛋白主要富集于鱼体能量代谢、细胞运动和免疫调节等相关的信号通路,该结果为进一步研究罗非鱼感染无乳链球菌的相关分子机制提供了基础数据。 展开更多
关键词 罗非鱼 无乳链球菌 蛋白组学 血浆 差异蛋白
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转录组测序分析外源水杨酸诱导茶树热激蛋白基因的响应
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作者 刘悦 曲浩 +3 位作者 田易萍 陈春林 冉隆珣 陈林波 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期607-614,共8页
水杨酸是诱导植物抗性机制中重要的信号分子,外源喷施水杨酸能够调控多种防御相关蛋白质,提升农作物的抗病能力。开展外源水杨酸诱导茶树抗性机制的研究能够挖掘抗病基因,为茶树抗病育种提供分子基础。本研究采集外源喷施水杨酸0 h、6 h... 水杨酸是诱导植物抗性机制中重要的信号分子,外源喷施水杨酸能够调控多种防御相关蛋白质,提升农作物的抗病能力。开展外源水杨酸诱导茶树抗性机制的研究能够挖掘抗病基因,为茶树抗病育种提供分子基础。本研究采集外源喷施水杨酸0 h、6 h、12 h、24 h、48 h的茶树叶片进行转录组测序与分析,结果表明,外源喷施水杨酸6 h、12 h、24 h、48 h时茶树叶片内差异表达基因数量分别为9 360个、3 399个、596个、115个,外源水杨酸处理后各时间点均发生差异表达的基因共604个。KEGG功能富集结果显示,处理后6 h时富集于植物激素信号转导、植物-病原菌互作、核糖体、剪接体和碳代谢通路上的差异表达基因数量分别为95个、73个、121个、94个、154个。差异表达基因中有12个热激因子基因、40个热激蛋白基因和12个WRKY家族转录因子基因上调表达。处理48 h后,无上调表达的热激因子基因,但仍有28个热激蛋白基因上调表达。病程相关蛋白基因在检测阶段均上调表达。外源水杨酸的诱导作用在处理6 h时最为明显,并且引起了大量热激蛋白的响应。本研究结果为开展外源水杨酸诱导茶树抗病机制和茶树抗病分子育种研究提供了参考。 展开更多
关键词 外源水杨酸 茶树 转录组 差异表达基因 热激蛋白
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原料乳冷藏过程中差异表达蛋白的表征与比较分析
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作者 庄姣 剧柠 +6 位作者 朱晓雪 李亚凤 丁雨红 高岩 陈彦辉 齐瑾 杨秉坤 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2024年第5期225-232,共8页
采用数据独立采集蛋白质组学技术分析4℃冷藏6 d的原料乳差异蛋白质组成及其生物学功能。冷藏过程中,共鉴定到902种蛋白质。其中,冷藏前期(d 0 vs d 3)和冷藏后期(d 3 vs d 6)分别筛选出70种和71种差异表达蛋白。生物信息学分析发现冷... 采用数据独立采集蛋白质组学技术分析4℃冷藏6 d的原料乳差异蛋白质组成及其生物学功能。冷藏过程中,共鉴定到902种蛋白质。其中,冷藏前期(d 0 vs d 3)和冷藏后期(d 3 vs d 6)分别筛选出70种和71种差异表达蛋白。生物信息学分析发现冷藏前期差异蛋白具有对神经生长因子的刺激反应和细胞组织的调控等功能,主要参与了细胞的生物学过程;冷藏后期差异蛋白具有碳水化合物代谢过程和RNA代谢过程的调节等功能,主要参与了糖代谢途径。蛋白-蛋白互作网络分析表明,细胞分裂控制蛋白42同源物(CDC42)是两个冷藏阶段共有的关键节点蛋白,该蛋白与细胞的吞噬作用密切相关。上述结果揭示了冷藏过程中的蛋白质组成差异和功能的多样性,为原料乳的冷藏提供了理论依据,对原料乳的质量控制具有重要意义。 展开更多
关键词 原料乳 冷藏 蛋白组学 差异表达蛋白 生物信息学
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嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1调控宿主细胞剪接体转录机制的初步分析
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作者 李芮芮 史梦华 +5 位作者 张妍 何洪琴 王雨璐 陈佳 王勇 陈创夫 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期39-48,共10页
为研究嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1对宿主细胞内蛋白表达的影响,并初步分析Ats-1对宿主细胞剪接体的调控机制,本研究将嗜吞噬无形体的Ats-1基因克隆后连接至pcDNA3.1质粒,构建pcDNA3.1-Ats-1重组质粒,经PCR和测序鉴定正确后利用脂质体Lip... 为研究嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1对宿主细胞内蛋白表达的影响,并初步分析Ats-1对宿主细胞剪接体的调控机制,本研究将嗜吞噬无形体的Ats-1基因克隆后连接至pcDNA3.1质粒,构建pcDNA3.1-Ats-1重组质粒,经PCR和测序鉴定正确后利用脂质体LipofectamineTM3000将其转染HEK293T细胞,继续培养至24 h、48 h时经western blot鉴定,结果显示,在48 ku(全长蛋白)和35 ku(成熟蛋白)出现特异性条带,表明Ats-1蛋白在细胞内可正确表达;且相较于24 h,48 h Ats-1蛋白在细胞内的表达量显著增加(P<0.05)。将重组质粒pcDNA3.1-Ats-1和空质粒pcDNA3.1分别转染HEK293T细胞,48 h后收获细胞并裂解取裂解液,利用同量异位标签定量蛋白质组学方法(iTRAQ)筛选Ats-1表达后宿主细胞内差异显著表达的蛋白,并采用基因本体论(GO)分析差异显著表达蛋白的功能,利用京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库分析差异显著表达蛋白参与的信号通路。从剪接体通路选取34个差异表达蛋白通过q RT-PCR验证。i TRAQ结果显示,与空质粒转染细胞组相比,重组质粒pcDNA3.1-Ats-1转染细胞组共鉴定到852个差异显著表达的蛋白,其中表达显著上调蛋白406个,表达显著下调蛋白446个。GO功能分析结果显示,差异显著表达蛋白主要定位在膜、胞内膜结合细胞器、膜组分,参与大分子生物合成过程,有核酸和RNA结合活性。KEGG信号通路分析结果显示,差异显著表达蛋白显著富集于剪接体、N-糖基化、蛋白输出和RNA运输等信号通路。q RT-PCR结果显示,剪接体通路富集的差异显著表达蛋白仅O43143蛋白的m RNA转录水平上调,其他33个蛋白(A0A024R1K8、Q13435、Q13573等)m RNA的转录水平均显著下调,与iTRAQ的分析结果一致。综上所述,本研究首次证实Ats-1蛋白表达后可能参与宿主细胞中剪接体、N-糖基化和蛋白输出信号通路的调控,抑制宿主细胞中剪接体调控通路中部分蛋白的转录,从而可能抑制剪接体调控,该结果为研究嗜吞噬无形体效应蛋白Ats-1在宿主细胞中的调控机制提供了新的方向和思路。 展开更多
关键词 Ats-1蛋白 ITRAQ 差异表达蛋白 剪接体
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炎症性肠病合并皮肤损害患者外泌体差异表达蛋白质及发病机制研究
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作者 吴俊俊 李珍 +3 位作者 李华铭 李春霞 朱伟琴 王宇芳 《浙江医学》 CAS 2024年第1期57-61,I0007,共6页
目的探讨炎症性肠病(IBD)合并皮肤损害患者外泌体差异表达蛋白质及发病机制。方法选取杭州市第三人民医院2020年1月至2021年12月收治的5例IBD以及5例IBD合并皮肤损害患者为研究对象,分别为IBD组、IBD+皮肤损害组;另选取本院同期体检的5... 目的探讨炎症性肠病(IBD)合并皮肤损害患者外泌体差异表达蛋白质及发病机制。方法选取杭州市第三人民医院2020年1月至2021年12月收治的5例IBD以及5例IBD合并皮肤损害患者为研究对象,分别为IBD组、IBD+皮肤损害组;另选取本院同期体检的5名年龄和性别匹配的健康志愿者为对照组。提取3组对象血清外泌体,检测差异表达蛋白质;采用基因本论(GO)和京都基因和基因组数据库(KEGG)对差异表达蛋白质进行生物信息学分析。结果共鉴定829种蛋白质,其中包含定量信息的蛋白质726种。与对照组比较,IBD组有15种蛋白质表达上调,21种蛋白质表达下调;IBD+皮肤损害组有24种蛋白质表达上调,25种蛋白质表达下调;与IBD组比较,IBD+皮肤损害组有12种蛋白质表达上调和8种蛋白质表达下调。GO分析显示,IBD组与对照组、IBD+皮肤损害组与对照组、IBD+皮肤损害组与IBD组差异表达蛋白质涉及的生物过程包括刺激反应、细胞过程、单有机过程、生物调节等,细胞组成主要包括细胞、细胞膜外域、细胞器等,分子功能主要包括结合、催化活性等。KEGG分析显示,IBD组与对照组差异表达蛋白质主要与细胞黏附、离子跨膜运输调控、细胞形态分化等有关;IBD+皮肤损害组与对照组差异表达蛋白质主要与细胞分泌、细胞分解代谢、分泌调节有关;IBD+皮肤损害组与IBD组差异表达蛋白质主要与细胞胺代谢、NIK/NF-κB信号通路、细胞周期过程的负调控等有关。结论本研究基于TMT蛋白质组学分析筛选出IBD+皮肤损害患者血清外泌体差异表达蛋白质,这些蛋白质参与IBD合并皮肤损害的代谢相关通路及病变的发生。 展开更多
关键词 炎症性肠病 皮肤损害 外泌体 差异表达蛋白质 信号通路
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玉米胚发育过程蛋白组分析
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作者 朱俊杰 张鑫悦 +6 位作者 纪坤 潘梦影 徐秋月 石慧玥 张龙 李玉玲 董永彬 《植物遗传资源学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期129-140,I0008,I0009,共14页
高油玉米是一种籽粒含油量比普通玉米高50%以上的玉米类型,其籽粒中油分含量85%集中于胚中。本研究以高油玉米自交系GY220为材料,对授粉后15 d(G15)、25 d(G25)、35 d(G35)的胚蛋白质组进行双向凝胶电泳分离,利用串联质谱对分离蛋白质... 高油玉米是一种籽粒含油量比普通玉米高50%以上的玉米类型,其籽粒中油分含量85%集中于胚中。本研究以高油玉米自交系GY220为材料,对授粉后15 d(G15)、25 d(G25)、35 d(G35)的胚蛋白质组进行双向凝胶电泳分离,利用串联质谱对分离蛋白质进行鉴定,并分析了差异蛋白功能。结果表明在授粉后3个发育时期共鉴定到41个差异表达蛋白,其中授粉后25 d相对于15 d G25/G15上调18个,下调19个;授粉后35 d相对于25 d G35/G25上调18个,下调25个;授粉后35 d相对于15 d G35/G15上调20个,下调22个。通过GO注释分析和KEGG富集分析显示差异表达蛋白主要在小分子代谢、氧化还原和碳水化合物代谢等过程富集。根据差异蛋白表达丰度及其功能注释,甘油-3-磷酸脱氢酶(Zm00001d041962)和果糖激酶(Zm00001d035037)在15 d、25 d时蛋白表达量较高,在35 d时蛋白表达量较低;RT-PCR分析表明在自交系GY220胚发育进程中Zm00001d041962和Zm00001d035037表达量呈逐渐增加趋势,两个基因均与大豆、花生、油菜中的相关基因高度同源。本研究为进一步提升玉米籽粒品质和挖掘胚发育功能基因奠定基础。 展开更多
关键词 高油玉米 差异表达蛋白 蛋白组学 荧光定量PCR
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大理野茄M239响应黄萎病病菌侵染的差异表达蛋白分析
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作者 蔚亚楠 黎志彬 +5 位作者 龚亚菊 鲍锐 桂敏 杜光辉 刘家迅 吴丽艳 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2024年第1期165-174,共10页
为了探索植物响应黄萎病病原菌侵染的作用机制,以黄萎病高感野茄材料大理野茄(M239)为研究对象,通过人工接种黄萎病病原菌大丽轮枝菌的方法,首先测定M239在接种大丽轮枝菌后0,6,12,24,48 h的根部4个关键生理指标,即过氧化物酶(POD)、过... 为了探索植物响应黄萎病病原菌侵染的作用机制,以黄萎病高感野茄材料大理野茄(M239)为研究对象,通过人工接种黄萎病病原菌大丽轮枝菌的方法,首先测定M239在接种大丽轮枝菌后0,6,12,24,48 h的根部4个关键生理指标,即过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性和可溶性蛋白(SP)含量的变化。结果确定接种大丽轮枝菌后12,24 h为蛋白组分析取样的关键时间点;在此基础上,利用iTRAQ技术分析M239在接种大丽轮枝菌后根部蛋白的变化。结果发现,与清水接种(CK)相比,M239接种大丽轮枝菌后12 h有463个差异表达蛋白(DEPs),其中305个下调,158个上调;接种后24 h,有456个DEPs被病原菌诱导表达,包括296个下调,160个上调。这些蛋白主要富集在碳代谢、乙醛酸和二羧酸代谢、次生代谢物的生物合成、丙酮酸代谢、新陈代谢等途径。通过与已报道的黄萎病抗性材料的研究结果进行对比分析发现,M239在响应大丽轮枝菌的侵染过程中,参与防御响应的蛋白数量和代谢通路较少,未能形成有效的防御网络,最终表现为感病。 展开更多
关键词 野茄 黄萎病 大丽轮枝菌 iTRAQ技术 差异表达蛋白
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静脉注射利多卡因后差异蛋白质的蛋白质组学分析
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作者 李翔 张永海 +6 位作者 杨凡 张玉 杨万吉 高冉 文岳 马少玲 马汉祥 《宁夏医科大学学报》 2024年第6期571-576,共6页
目的利用蛋白质组学技术定量分析静脉注射利多卡因(IVL)前后血清中差异蛋白质的表达。方法选取健康志愿者5例,IVL 1.5 mg·kg^(-1)后再以3 mg·(kg·h)^(-1)持续泵注30 min。IVL前和IVL后1 h各采集静脉血5 mL,通过串联质谱... 目的利用蛋白质组学技术定量分析静脉注射利多卡因(IVL)前后血清中差异蛋白质的表达。方法选取健康志愿者5例,IVL 1.5 mg·kg^(-1)后再以3 mg·(kg·h)^(-1)持续泵注30 min。IVL前和IVL后1 h各采集静脉血5 mL,通过串联质谱标记及高效液相色谱分离技术鉴定IVL后差异表达蛋白,并采用京都基因和基因组百科全书(KEGG)和基因本体论(GO)数据库分析鉴定差异蛋白的生物学信息。结果检测到IVL前后的血清中差异蛋白共15种,其中上调蛋白6种、下调蛋白9种。GO分析发现,大部分差异蛋白参与了细胞进程;亚细胞结构定位发现多数差异蛋白定位于细胞外区域及细胞质;功能富集分析发现多数蛋白参与炎性反应调节、B细胞的活化调控和蛋白质加工。上调蛋白组KEGG通路富集到p53信号通路。通过对上调组和下调组差异蛋白分析,发现差异蛋白依托泊苷诱导的2.4号蛋白(EI24)参与p53信号通路且调控钙离子浓度。结论IVL可能通过调控依托泊苷诱导的EI24和上池蛋白(SBSN)抑制肿瘤细胞的发生与发展;EI24可能通过调控细胞内钙离子浓度参与IVL产生的镇静作用。 展开更多
关键词 差异蛋白 基因本体论 富集分析 串联质谱标签 利多卡因
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幽门螺杆菌东亚型菌株GZ7/cagA^(+)和GZ7/ΔcagA源外膜囊泡的蛋白组学比较
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作者 彭国玲 周佳 +3 位作者 廖永慧 谢渊 周建奖 赵艳 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第5期636-644,共9页
目的通过分离、鉴定和比较细胞毒素相关基因A蛋白(cagA)、阳性幽门螺杆菌(H.pylori)、东亚型菌株GZ7/cagA^(+)及其cagA敲除菌株GZ7/ΔcagA来源的外膜囊泡(OMVs)中的差异表达蛋白(DEPs),分析cagA基因对OMVs中蛋白表达的影响。方法采用超... 目的通过分离、鉴定和比较细胞毒素相关基因A蛋白(cagA)、阳性幽门螺杆菌(H.pylori)、东亚型菌株GZ7/cagA^(+)及其cagA敲除菌株GZ7/ΔcagA来源的外膜囊泡(OMVs)中的差异表达蛋白(DEPs),分析cagA基因对OMVs中蛋白表达的影响。方法采用超速离心法分别提取GZ7/ΔcagA和GZ7/cagA^(+)的OMVs,通过透射电镜和纳米颗粒追踪技术鉴定其形态和粒径,使用Western blot技术验证两组OMVs中cagA蛋白的表达,分析OMVs的蛋白质组学;对蛋白组学数据进行质控分析和主成分分析鉴定后,以上调蛋白倍数变化(FC)>2.0、下调蛋白FC<0.5,FDR≤0.05为筛选条件筛选DEPs,利用OmicsBean在线工具、Gene Ontology和KOBAS对DEPs进行生物信息学分析;采用免疫荧光鉴定OMVs细胞在细胞中的定位,实时无标记细胞分析仪检测细胞活性。结果通过电镜和粒径证实成功分离纯化了OMVs;蛋白质组分析发现,GZ7/cagA^(+)-OMVs组与GZ7/ΔcagA-OMVs组比较有79个DEPs,其中38个蛋白下调、41个蛋白上调;生物信息学分析显示,DEPs主要与丙酮酸代谢、丙酸代谢、糖酵解/糖异生及柠檬酸循环等代谢途径有关;免疫荧光和实时无标记细胞分析证实H.pylori来源的OMVs能进入细胞并定位在线粒体并抑制细胞增殖。结论cagA能影响H.pylori分泌的OMVs中蛋白质的成分,DEPs可能促进cagA^(+)H.pylori在胃黏膜上的定植及致病性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因A蛋白 胃癌 蛋白组 差异表达蛋白 线粒体
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