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Use of (Dig)-DNA Probe for the Epidemiological Survey of Plasmodium falciparum Malaria
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作者 张兆松 王荣芝 陈淑贞 《The Journal of Biomedical Research》 CAS 1994年第1期32-33,共2页
The Plasmodtum falctparum DNA fragment was isolated from a cloned recombinant plasmid pPF14. labelled with Digoxigenin (Dig) and used as a probe (pPF14-F-Dig)to detect 274 blood samples from the eqdemic area populatio... The Plasmodtum falctparum DNA fragment was isolated from a cloned recombinant plasmid pPF14. labelled with Digoxigenin (Dig) and used as a probe (pPF14-F-Dig)to detect 274 blood samples from the eqdemic area population in Hainan Province by dot hybridization.The results showed that out of 274 blood specimens one was positive when using microscopic examination and the positivity rate was 0.36 percent. Fifteen samples showed to be positive (including one positive specimen examined by microscopy) when this probe was applied to detect the 274 samples and its positivity rate was 5.47 percent.The positive coincidence rate between pPF14-F-Dig and microscopic examination was 1/1 and the negative coincidence rate was 94.87 percent. Since a piece of nitrocellulose membrane with the size of 9 by 12 square centimetres can accommodate blots of 96 samples,this probe is fit for large-scale epidemiological surveys. 展开更多
关键词 Plasmodtum falctparum (dig)-DNA probe (pPF14-F-dig) dot hybridization
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(Dig)-DNA探针检测恶性疟病人的研究 被引量:7
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作者 张兆松 陈淑贞 +1 位作者 林珍 王荣芝 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第4期287-289,共3页
采用异羟基洋地黄毒苷配基(Digoxigenin,(Dig)-11-dUTP),以随机引物法标记含有恶性疟原虫(P.f.)DNA的重组质粒片段(酶切克隆pPF14),制成pPF14-F-Dig探针。用此探针,以斑点杂交试验检测提纯的P.f.DNA及海南地区疟疾病人。结果显示,pPF14-... 采用异羟基洋地黄毒苷配基(Digoxigenin,(Dig)-11-dUTP),以随机引物法标记含有恶性疟原虫(P.f.)DNA的重组质粒片段(酶切克隆pPF14),制成pPF14-F-Dig探针。用此探针,以斑点杂交试验检测提纯的P.f.DNA及海南地区疟疾病人。结果显示,pPF14-F-Dig探针至少可检出40pg的P.f.DNA和低至0.005%原虫血症。38例P.f.病人中,检出阳性33例。3例恶性疟原虫和间日疟原虫混合感染者中,2例阳性。4例间日疟病人中,阴性3例,可疑1例。21例正常人血皆为阴性。 展开更多
关键词 疟原虫 DNA探针 疟疾 恶性 诊断
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用人肝细胞cDNA文库制备Dig-Fas探针 被引量:13
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作者 唐恩洁 杨宗琪 +5 位作者 赵明才 冯莉 任碧轩 敬保迁 李仁 眭维耻 《川北医学院学报》 CAS 2000年第3期1-3,共3页
为探索SLE发生、发展与Fas表达的关系 ,本文采用降落PCR技术、分子克隆技术和Fas特异性引物 ,将从人肝细胞cDNA文库中扩增的FascDNA插入T -easyvector中 ,转染JM10 9,经耐药性和lacZ插入失活筛选 ,快速细胞裂解法、限制性内切酶酶切片段... 为探索SLE发生、发展与Fas表达的关系 ,本文采用降落PCR技术、分子克隆技术和Fas特异性引物 ,将从人肝细胞cDNA文库中扩增的FascDNA插入T -easyvector中 ,转染JM10 9,经耐药性和lacZ插入失活筛选 ,快速细胞裂解法、限制性内切酶酶切片段和PCR扩增试验分析鉴定 ,确证获阳性转化子。然后采用地高辛化学连接标记和查见方法 ,标记扩增、分离和纯化的FascDNA ,经斑点免疫实验证实获高滴度Dig 展开更多
关键词 FAS CDNA文库 dig标记 探针 PCR 系统性红斑狼疮
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生物素肼化学标记和DIG标记cDNA探针检测柑桔裂皮病类病毒 被引量:7
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作者 胡勤学 张春立 +2 位作者 陈捷 吴德喜 林木兰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期159-163,共5页
分别用生物素肼化学标记和DIG标记我国柑桔裂皮病类病毒(CEVd)全长克隆cDNA,用以上探针对不同来源的核酸样品进行斑点杂交。两种探针可检出病柑桔总核酸的最低含量约为400ng/斑点和80ng/斑点;生物素肼标记C... 分别用生物素肼化学标记和DIG标记我国柑桔裂皮病类病毒(CEVd)全长克隆cDNA,用以上探针对不同来源的核酸样品进行斑点杂交。两种探针可检出病柑桔总核酸的最低含量约为400ng/斑点和80ng/斑点;生物素肼标记CEVd-cDNA探针,可检出CEVd-cDNA的最低含量约为10pg/斑点。研制的CEVd检测试剂盒能检测出发病和隐性带毒苗木中的CEVd,灵敏、特异、简便、快速、试剂盒已被用于检测来自我国主要裂皮病病区、湖南、湖北、福建等地的柑桔和香橼材料。 展开更多
关键词 植物病毒 柑桔裂皮病 类病毒 生物素肼 化学标记
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基于DIG-化学发光法的Southern blot方法优化 被引量:4
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作者 张晓 张锐 +5 位作者 于源华 史计 孟志刚 孙国清 周焘 郭三堆 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期205-210,共6页
目前,基于DIG-化学发光法的Southern blot技术已在生物实验室广泛应用,但在试验过程中经常会遇到背景黑、目的信号弱等问题,以致不能获得理想结果。在棉花线粒体基因组RFLP分析过程中结合前人经验对基于DIG-化学发光法的Southern blot... 目前,基于DIG-化学发光法的Southern blot技术已在生物实验室广泛应用,但在试验过程中经常会遇到背景黑、目的信号弱等问题,以致不能获得理想结果。在棉花线粒体基因组RFLP分析过程中结合前人经验对基于DIG-化学发光法的Southern blot技术在探针标记、探针浓度、探针剥离等方面进行了优化。优化后的方法重复性好,一张转好的尼龙膜最多可以反复使用11次;一份杂交液在两年内至少可以反复使用5次且不会明显降低杂交效果。 展开更多
关键词 SOUTHERN BLOT dig标记 化学发光法 尼龙膜 探针
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应用DIG标记探针杂交检测IBDV 被引量:4
6
作者 陈士友 陈溥言 +3 位作者 蔡宝祥 金由辛 王德宝 张兹钧 《中国病毒学》 CSCD 1994年第4期351-355,共5页
本试验用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的探针建立了核酸杂交检测传染性法氏囊病病毒(IB-DV)的方法,并在敏感性方面同琼脂扩散试验进行了比较。探针来源于IBDVSTC-ll9和STC-243cDNA。杂... 本试验用地高辛(Digoxigenin,DIG)标记的探针建立了核酸杂交检测传染性法氏囊病病毒(IB-DV)的方法,并在敏感性方面同琼脂扩散试验进行了比较。探针来源于IBDVSTC-ll9和STC-243cDNA。杂交方法的敏感性试验表明,核酸杂交可以检测到0.1pg的IBDVRNA;与多个毒株核酸的杂交则显示出标记的探针可以作为通用试剂用于IBDV早期感染的诊断;而同琼脂扩散试验的比较则说明,杂交方法比常规的免疫沉淀反应敏感104倍以上。除此之外,由于杂交方法特异以及非放射性探针操作方便,因而具有很大的应用前景。 展开更多
关键词 传染性 法氏囊病病毒 地高辛 标记 探针
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PCR-DIG探针斑点杂交法快速检测SRY基因 被引量:2
7
作者 郭金虎 余多慰 单祥年 《中国优生与遗传杂志》 1999年第3期29-30,共2页
以正常男性DNA作为模板,用本文设计的SRY基因的1对引物组合进行PCR法制备DIG探针,然后通过低熔点琼脂糖电泳回收将扩增产物纯化,得到SRY基因探针。与其他制备探针的方法相比,此方法制得的探针产量和标记效率都很高... 以正常男性DNA作为模板,用本文设计的SRY基因的1对引物组合进行PCR法制备DIG探针,然后通过低熔点琼脂糖电泳回收将扩增产物纯化,得到SRY基因探针。与其他制备探针的方法相比,此方法制得的探针产量和标记效率都很高,标记灵敏度达001pg,片段长度均一,为290bp。在DNA斑点杂交检测SRY基因时显示了很好的特异性,显示这种方法可以同时对大量性反转病例进行临床检测。 展开更多
关键词 PCR dig探针标记 SRY基因 产前诊断
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应用Digoxigenin标记探针定量检测血清HBV DNA
8
作者 张立农 俞树高 +4 位作者 苏东辉 刘延深 陈治新 郑祥雄 胡金福 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 1994年第2期28-30,共3页
本文报道采用非同位素Digoxigenin标记探针定量检测血清HBVDNA。显色膜经空气干燥、液体石蜡透明处理后,即可置酶联免疫检测仪上测定各斑点的光密度(OD)值,波长630nm。结果发现已知含量的HBVDNA在2... 本文报道采用非同位素Digoxigenin标记探针定量检测血清HBVDNA。显色膜经空气干燥、液体石蜡透明处理后,即可置酶联免疫检测仪上测定各斑点的光密度(OD)值,波长630nm。结果发现已知含量的HBVDNA在2-500pg/样点范围内与其相应的OD值有着良好的线性关系(r=0.970y=0.0012x+0.1056)。标本测得OD值后,便可知其含量。该法重复性试验结果良好,11份HBVDNA阳性的血清经定量测定,其HBVDNA含量在20-105pg/40μl之间。定量检测血清HBVDNA不仅可用来评价乙肝治疗的效果,而且也可用于了解血清传染性的强弱。 展开更多
关键词 dig标记探针 DNA 乙型肝炎病毒
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应用(Dig)-DNA探针进行恶性疟流行病学调查
9
作者 张兆松 王荣芝 陈淑贞 《南京医学院学报》 CSCD 1993年第1期40-41,共2页
重组的恶性疟原虫DNA片段用洋地黄毒苷配基标记后作为探针(pPF_(14)-F-Dig),以斑点杂交试验对海南省恶性疟流行区人群的274份血样进行检测,并同时作厚薄血片镜检。结果显示,274例样本中血片镜检阳性1例,带虫率为0.36%;pPF_(14)-F-Dig ... 重组的恶性疟原虫DNA片段用洋地黄毒苷配基标记后作为探针(pPF_(14)-F-Dig),以斑点杂交试验对海南省恶性疟流行区人群的274份血样进行检测,并同时作厚薄血片镜检。结果显示,274例样本中血片镜检阳性1例,带虫率为0.36%;pPF_(14)-F-Dig 探针检出阳性15例(其中1例为镜检阳性者),阳性率为5.47%;pPF_(14)-F-Dig 与镜检的阳性符合率为1/1,阴性符合率为94.87%。每张硝酸纤维素膜可查96份样本,故该探针具有用于大规模流行病学调查的价值。 展开更多
关键词 DNA探针 斑点杂交试验 疟疾
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Digoxigenin(DIG)标记RNA探针检测侵染花生的Potyviruses
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作者 许泽永 Pierre-YvesTeycheney RalfG.Dietzgen 《中国油料》 CSCD 北大核心 1993年第4期55-58,共4页
以花生条纹病毒(PStV)和花生斑驳病毒(PMV)克隆cDNA为模板,体外转录合成Digo-xgenin(DIG)标记PStV—I_9、PStV-I_(131)、PStV—I_(57-7)和PMV—A_(15)四种RNA探针。在点杂交反应中,PStV—I_9RNA探针能检测出0.25ng提纯PStV和花生病汁液6... 以花生条纹病毒(PStV)和花生斑驳病毒(PMV)克隆cDNA为模板,体外转录合成Digo-xgenin(DIG)标记PStV—I_9、PStV-I_(131)、PStV—I_(57-7)和PMV—A_(15)四种RNA探针。在点杂交反应中,PStV—I_9RNA探针能检测出0.25ng提纯PStV和花生病汁液62500倍稀释液中PStV。PMV—A_(16)RNA探针能检测到0.67ng提纯PMV和菜豆病汁液5120倍稀释液中PMV。两种病毒RNA探针均有高度特异性。PStV—I_(57-7)和PStV—I_(131)两种RNA探针具有与PStV—I_9RNA探针相同敏感性,但特异性稍差。 展开更多
关键词 RNA探针 花生 条纹病毒 斑驳病毒
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用RT-PCR对湖北省部分猪场猪繁殖与呼吸综合症的检测 被引量:12
11
作者 李勇 梅书棋 +3 位作者 郑新民 樊俊华 孟庆友 杨宜生 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期363-365,共3页
关键词 猪繁殖与呼吸综合症 逆转录聚合酶链式反应 cDNA-dig探针 Southern转印杂交
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金黄色葡萄球菌norA基因探针的制备 被引量:3
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作者 钟利 冯萍 +2 位作者 范昕建 吕晓菊 雷秉钧 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期541-542,584,共3页
目的 研究制备 nor A基因介导的金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制的 Dig- nor A基因探针。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)制备 Dig- nor A基因探针。结果  PCR法制备 Dig- nor A基因探针简便易行 ,可在较短时间内获得大量的探... 目的 研究制备 nor A基因介导的金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类药物的耐药机制的 Dig- nor A基因探针。方法 采用聚合酶链反应 (PCR)制备 Dig- nor A基因探针。结果  PCR法制备 Dig- nor A基因探针简便易行 ,可在较短时间内获得大量的探针 ,所得探针有较高的敏感性 ;Dig- nor A基因探针安全、易操作 ,标记探针可长期保存。结论 为进一步研究 nor 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 聚合酶链反应 norA基因 探针 氟喹诺酮类药物 耐药性
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利用RT-PCR扩增和分析柑桔裂皮病类病毒 被引量:21
13
作者 胡勤学 林木兰 +2 位作者 张春立 吴德喜 陈捷 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1997年第7期613-617,共5页
参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别... 参考国外CEVd-A株中央保守区段(C区)和左端区段(T区),设计并合成引物Cl(-)、C2(+)、C3(+)、T1(-)、T2(+)。对感染 CEVd中国分离物的柑桔(Citrus L.)和香橼(Citrus medica L.)总核酸进行了cDNA第一链合成和PCR扩增,其中C1/C3、C1/C2分别能从感病香橼和柑桔总核酸中扩增出210bp和370bp左右的特异DNA,分别相当于CEVd的左半部和全长片段,T1/T2未能扩增出产物;健康香橼和柑桔总核酸中均未能扩增出产物。扩增结果用DIG标记的CEVd-cDNA探针进行了确证。扩增结果说明:CEVd中国分离物在左端T区与CEVd-A株存在差异。PAGE-银染法分析扩增产物表明:建立的RT-PCR方法可从约0.1ng柑桔总核酸中扩增出全长CEVd-cDNA。 展开更多
关键词 柑桔裂皮病 类病毒 反转录 聚合酶链反应
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PCR法制备地高辛标记探针改良PCR-Select Differential Screening试剂盒 被引量:4
14
作者 肖军 邹飞 蔡绍曦 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期205-208,共4页
目的 :探讨采用地高辛 (digoxin ,DIG)标记探针替代PCR Selectdifferentialscreening试剂盒中同位素标记探针的方法。方法 :抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)所分离的差异表达序列转移至硝酸纤维素膜 ,以PCR... 目的 :探讨采用地高辛 (digoxin ,DIG)标记探针替代PCR Selectdifferentialscreening试剂盒中同位素标记探针的方法。方法 :抑制性消减杂交 (suppressionsubtractivehybridization ,SSH)所分离的差异表达序列转移至硝酸纤维素膜 ,以PCR法掺入DIG 11 dUTP制备探针 ,按DIG标记探针常规操作进行杂交显色 ,杂交阳性结果采用reverseNorthernblot再度杂交验证。结果 :应用DIG标记探针改良PCR SelectDifferentialScreening试剂盒所得到的阳性结果经reverseNorthernblot验证符合率达到 90 %。结论 :DIG标记探针改良PCR Selectdifferentialscreening试剂盒在避免了放射污染同时具备很高的特异性 ,完全可以替代同位素标记探针。 展开更多
关键词 抑制性消减杂交 地高辛 标记探针 同位素 PCR
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核酸探针检测鸡传染性支气管炎病毒方法的建立及应用 被引量:4
15
作者 莫胜兰 刘惠莉 陆承平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期168-171,共4页
以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与... 以地高辛(DIG)标记鸡传染性支气管炎病毒(IBV)pol基因的保守片段制成核酸探针,与IBV参考株、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽流感病毒、正常鸡胚尿囊液及正常鸡肾组织等的RT-PCR产物进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与IBV毒株的RT-PCR产物杂交呈阳性,与对照病毒和组织的RT-PCR产物杂交呈阴性。敏感性试验显示,探针最低能检出约3.4pg的IBVRT-PCR产物。用该方法检测了38份疑似IBV临床病料,31份阳性;而用RT-PCR法扩增IBVS2基因确诊为阳性的只有29份。对人工接种IBV H52弱毒苗鸡咽喉和肛门拭子32份进行检测,检出15份阳性。结果表明,利用DIG探针检测IBV的RT-PCR产物,特异性和敏感性强,可重复,能克服RT-PCR非特异性反应和探针Northern杂交的不稳定性。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 dig探针 RT-PCR 检测
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丙型肝炎病毒RNA打点杂交检测方法同RT-PCR方法的比较 被引量:4
16
作者 杨永平 丛勉尔 +2 位作者 夏宁邵 曹经瑗 刘崇柏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第3期257-262,共6页
采用HCV基因组结构区C区cDNA探针和非结构区NS3-4区cDNA探针,建立了用打点杂交(dotblothybridization)检测血清中HCVRNA的方法,同采用HCV基因组5’端非编码区的一对寡核苷酸引物通... 采用HCV基因组结构区C区cDNA探针和非结构区NS3-4区cDNA探针,建立了用打点杂交(dotblothybridization)检测血清中HCVRNA的方法,同采用HCV基因组5’端非编码区的一对寡核苷酸引物通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)检测血清中HCVRNA的方法相比较,发现两种方法都能快速早期和特异地检出血清中HCVRNA,但RT-PCR法敏感性优于RNA打点杂交法。对于无血清学指标的慢性NANB肝炎病人的诊断,可采用这两种方法。这两种方法的敏感性在很大程度上依赖于引物和探针的敏感性,以及RNA提取方法。RT-PCR法适用于诊断病毒血症和复制,打点杂交法适用于研究HCVRNA量的变化,对治疗的评价,以及为实验筛选较高滴度的HCVRNA阳性样本。 展开更多
关键词 丙型肝炎病毒 打点杂交 检测 RNA
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猪流感病毒M基因核酸探针的制备与应用 被引量:9
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作者 吕翠 马小明 +1 位作者 尹燕博 单虎 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期87-92,共6页
以地高辛(DIG)标记猪流感病毒(SIV)M基因的保守片段制成核酸探针,与H1及H3亚型的猪流感病毒(SIV)的cDNA、猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)的cDNA、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的DNA、猪瘟病毒(CSFV)cDNA、猪伪狂犬病(PRV)的DNA进行斑点杂交,以... 以地高辛(DIG)标记猪流感病毒(SIV)M基因的保守片段制成核酸探针,与H1及H3亚型的猪流感病毒(SIV)的cDNA、猪呼吸与繁殖综合征病毒(PRRSV)的cDNA、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)的DNA、猪瘟病毒(CSFV)cDNA、猪伪狂犬病(PRV)的DNA进行斑点杂交,以检测探针的特异性,结果该探针仅与H1及H3亚型的猪流感病毒(SIV)的cDNA杂交呈阳性,与其余病毒杂交呈阴性;敏感性试验显示,探针最低能检出约5 pg的H3亚型的SIV RT-PCR产物。应用该探针对35份疑似SI临床病料进行检测,结果检出9份阳性,与RT-PCR检测结果一致。本研究结果表明,建立的DIG标记的核酸探针特异性强,敏感性高,适合于对SI的诊断和流行病学调查。 展开更多
关键词 地高辛标记的核酸探针 猪流感病毒 检测
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人IL-2RαcDNA探针制备及在肾移植中的应用初探 被引量:2
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作者 汪泽厚 何斌 +2 位作者 莫华根 骆勇 王瑞英 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期44-46,共3页
从质粒pBSR中分离出人IL-2RacDNA片段,长0.9kb,应用地高辛配基标记此片段,制备成人IL-2RacDNA探针。该探针特异性强,敏感性可达到检测1.5pg同源DNA或RNA,且无放射性污染等。用此探针连续检测5例肾移植病人外周血淋巴细胞mRNA,结果显示:... 从质粒pBSR中分离出人IL-2RacDNA片段,长0.9kb,应用地高辛配基标记此片段,制备成人IL-2RacDNA探针。该探针特异性强,敏感性可达到检测1.5pg同源DNA或RNA,且无放射性污染等。用此探针连续检测5例肾移植病人外周血淋巴细胞mRNA,结果显示:术前IL-2RamRNA均很低,术后肾功能稳定者也处于很低水平,2例出现排斥反应者IL-2RamRNA明显升高。 展开更多
关键词 探针 斑点 肾移植 白细胞介素2
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鹅副黏病毒核酸探针检测方法的建立与应用 被引量:1
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作者 张伟 刁有祥 +5 位作者 杜爱庆 高晓伟 张瑞平 刘方娜 臧大鹏 刘霞 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期879-882,896,共5页
根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能... 根据GenBank中已发表的鹅副黏病毒F基因序列,设计合成1对引物,利用RT-PCR扩增出1条与目的片段大小一致,约856bp的基因片段,回收并纯化此PCR产物。用随机引物法合成cDNA,地高辛标记,建立了地高辛标记探针检测鹅副黏病毒的方法。该探针能与鹅副黏病毒核酸发生特异性杂交,最低检出限量为3ng/L;而与H9N2亚型禽流感病毒、鹅细小病毒、大肠杆菌等核酸杂交均为阴性。对疑似鹅副黏病毒感染病变组织检测结果表明,气管、肺脏、脾脏、肝脏均可检测出鹅副黏病毒,以气管的检出率为最高。该研究为鹅副黏病毒的诊断和流行病学调查提供了一种可靠的方法。 展开更多
关键词 鹅副黏病毒 地高辛标记探针 RT-PCR
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双歧杆菌地高辛标记寡核苷酸基因探针制备和应用研究 被引量:1
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作者 姚玉川 冯天杰 +3 位作者 赵江华 王磊辉 王继德 熊德鑫 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期187-188,共2页
目的探讨地高辛标记寡核苷酸基因探针应用于微生态研究的可行性和实用性。方法制备双歧杆菌属和部分种的地高辛标记16S rRNA寡核苷酸探针,初步应用于微生态制剂鉴定和临床肠道微生态检测,评价寡核苷酸探针杂交在肠道微生态研究和检测中... 目的探讨地高辛标记寡核苷酸基因探针应用于微生态研究的可行性和实用性。方法制备双歧杆菌属和部分种的地高辛标记16S rRNA寡核苷酸探针,初步应用于微生态制剂鉴定和临床肠道微生态检测,评价寡核苷酸探针杂交在肠道微生态研究和检测中的应用价值。结果地高辛标记寡核苷酸探针具有较好的特异性与灵敏度:地高辛标记的双歧杆菌属和种的共6种寡核苷酸基因探针与标准菌株杂交后灵敏度和特异度分别为属探针95%、75%,青春双歧87.5%、90%,两歧双歧87.5%、87.5%,短双歧87.5%、92.5%,婴儿双歧75%、95%,长双歧75%、100%。结论寡核苷酸基因探针用于肠道细菌的鉴定显示出一定前景,加大探针的种类与扩大调查范围有可能使该技术替代现有细菌培养技术。 展开更多
关键词 双歧杆菌 菌落杂交 基因探针 16S RRNA
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