地格达-4味汤对“幽门结扎”性肝损伤的保护作用及机制研究

目的:研究地格达-4味汤对"幽门结扎"诱导的肝损伤的作用。方法:取SD大鼠50只,分成5组,即正常、模型、地格达-4味汤高、中、低(166.4、83.2、41.6 g·kg-1;生药量分别为557、278.6、139.3 g·kg-1)剂量组,共给药15 d,末次给药后禁食不禁水24 h,除正常以外腹腔注射10%水合氯醛麻醉,开腹幽门结扎,关腹后单笼饲养18 h,腹主动脉取血,取肝脏,测定相关指标。结果:模型组与正常组比较血清AST、ALT量明显增加(P<0.01或P<0.05),肝组织GSH-PX明显降低(P<0.01);TBIL、DBIL、ALP明显增高(P<0.01);形态学观察肝细胞有明显的脂肪变、水肿、边膜外肝细胞大量坏死;肝细胞膜蛋白MRP3表达上调至3.5倍、MRP4表达下调至0.05倍、核受体Car下调至2.8倍、核受体Pxr下调至0.0019倍。各给药组与模型组比较地格达-4味汤中、高剂量组AST、ALT明显降低,GSH-PX明显增高(P<0.01);对TBIL、DBIL、ALP中剂量组明显降低(P<0.05);肝组织形态有一定量的好转;中剂量组膜蛋白MRP3下调至0.3倍、MRP4上调至2.7倍、核受体Car上调至3066倍、Pxr上调至506倍。结论:模型建立成功,地格达-4味汤具有明显的保肝作用,且它的作用机制为对核受体Car、Pxr的作用,而调节MRP3、MRP4表达发生改变。据结果分析中剂量组效果最佳。

在急性肝损伤状态下蒙药地格达-4味汤、栀子加肋柱花药对及栀子单味药中栀子苷血清含量的动态观察

目的:通过血清药物化学方法,追踪观察单味药、药对及全方中入血指标性化学成分栀子苷在急性肝损伤大鼠体内的动态变化,揭示栀子单味药在地格达-4味汤中的作用和地位,并初步探讨地格达-4味汤保肝效应的有效成分。方法:色谱条件:Dimaonsil C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:甲醇-0.1%磷酸水溶液(22:78);流速:1 m L·min-1;柱温:30℃;波长:238nm;选择急性肝损伤大鼠为研究对象,地格达-4味汤、栀子加肋柱花药对及栀子单味药为示例药物观察给药后不同时间点的血清中栀子苷含量变化。结果:栀子与肋柱花药对相应时间点血中栀子苷含量均高于单味栀子和全方;地格达-4味汤全方相应时间点血中栀子苷含量均低于单味栀子及药对。结论:经方法学考察,本试验方法简单、易行,实验结果可靠,可用于含栀子苷血清的测定;栀子与肋柱花组合产生了增强栀子苷含量的作用而栀子与肋柱花、瞿麦、胡黄连组合产生了消弱栀子苷含量的作用。

地格达-4对酒精性脂肪肝模型大鼠肝功能的影响

目的:观察蒙药地格达-4对酒精性脂肪肝模型大鼠肝功能的影响。方法:将Wi st ar大鼠进行造模后随机分为空白组,模型组,硫普罗宁组和地格达-4高、中、低剂量组。空白组和模型组给以羧甲基纤维素钠,硫普罗宁组给予硫普罗宁40 mg/kg,地格达-4高、中、低剂量组分别给以1 400、700、350 mg/kg地格达-4。灌胃4周后,腹主动脉采血,检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)等指标。结果:地格达-4高剂量组、中剂量组与模型组ALT相比,差异有统计学意义(P<0.05);地格达-4高、中、低剂量组间ALT相比,差异有统计学意义(P<0.05);地格达-4中剂量组与模型组、地格达-4高剂量组、低剂量组AST、γ-GT相比,差异有统计学意义(P<0.05);地格达-4高、中、低剂量组比硫普罗宁组γ-GT相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:地格达-4对酒精性脂肪肝大鼠的肝功能有确切的保护作用,且中等剂量为首选剂量。

蒙药地格达-4味汤及药对保肝作用的比较研究

目的:比较三个药对及全方地格达-4味汤对急性肝损伤大鼠的生物效应,进而验证地格达-4味汤配伍的合理性和科学性.方法:取150只大鼠,按体重随机分正常对照组、模型组、阳性对照组、肋柱花加栀子大中小三个剂量组、肋柱花加胡黄连大中小三个剂量组、肋柱花加瞿麦大中小三个剂量组、地格达-4味汤大中小三个剂量组等15组.给药14天后,各给药组大鼠腹腔注射D-半乳糖胺(D-GlaN)300mg/kg进行造模,采用全自动生化分析仪测定各组血清天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和丙氨酸氨基转移梅(ALT)含量,继而比较药对及全方血清AST和ALT含量.结果:地格达-4味汤可明显降低D-GlaN致肝损伤大鼠的血清AST和ALT含量(P<0.05).肋柱花加栀子药对大和中剂量组AST含量明显降低,差异显著(P<0.05);而ALT含量无明显变化(P>0.05).肋柱花加栀子小剂量组未能明显降低血清AST、ALT含量(P>0.05).药对肋柱花加瞿麦和肋柱花加胡黄连组均未能明显降低血清AST、ALT含量(P>0.05).结论:地格达-4味汤全方对D-GlaN致急性肝损伤的保护作用优于药对.因此,本实验可提示地格达-4味汤配伍的合理性和科学性.

在急性肝损伤状态下地格达-4味汤血中三种移行成分动态观察

目的:建立地格达-4味汤血中三种移行成分的HPLC检测方法.方法:将蒙药地格达-4味汤水提物灌胃给予D-GlaN致急性肝损伤模型大鼠后,在不同时间点取血,离心分离血清,以高效液相色谱(HPLC)法测定獐牙菜苦苷、栀子苷、胡黄连苷Ⅱ含量.结果:在HPLC含量分析中,血中獐牙菜苦苷、栀子苷及胡黄连苷Ⅱ均具有良好的线性关系,在急性肝损伤状态下大鼠血清不同时间点均能检测到三种化学成分,而且在30min-1h内含量较高.结论:三种成分可作为地格达-4味汤质量控制及物质基础研究的有效指标.

蒙药地格达-4颗粒成型工艺研究

目的优选蒙药地格达-4颗粒的成型工艺。方法以颗粒得率、脆碎度、溶化时间为考察指标,采用单因素试验结合中心复合试验设计优选颗粒处方参数及干法制粒工艺参数,并对制得的颗粒进行质量检查。结果最佳制备工艺参数为蒙药地格达-4喷雾干燥粉-乳糖-微粉硅胶(9∶1∶5‰,m∶m∶m),干法制粒机液压40 bar,滚轮间隙1 mm,滚轮转速3.0 r/min,破碎频率30 Hz,所制得的颗粒得率、溶化时间等项目检查都符合2020年版《中国药典(四部)》要求。结论优选出的蒙药地格达-4颗粒成型工艺可行,可为工业化生产提供参考。

地格达-4对幽门结扎性肝损伤大鼠PXR、CAR表达的影响

目的:研究地格达-4能否通过孕烷X受体(PXR)、组成型雄甾烷受体(CAR)表达变化治疗幽门结扎性肝损伤。方法:取50只大鼠,分为5组,即正常组、模型组、地格达-4的3个剂量(1.86、3.71、7.43g/kg)组,通过幽门结扎法建立大鼠肝损伤动物模型,灌胃给药共15d,采用实时荧光定量链式聚合酶反应(RTPCR)、蛋白印迹(Western blot)法检测大鼠肝脏组织中PXR、CAR表达变化及测定血清和肝组织中肝损伤敏感性指标。结果:与正常组比较,模型组血清AST、ALT、BILD2、BILT3、TBA显著增加(P<0.01,P<0.05),肝组织GSH-PX显著降低(P<0.01);腹腔观察,腹膜具有明显的黄色、腹腔积水、黄尿、肉眼观察肝脏淤血;形态学观察,肝细胞有明显的脂肪变、水肿、边膜外肝细胞大量坏死、肝细胞具有一定程度的凋亡;与模型组比较,各给药组对AST、ALT、BILD2、BILT3、TBA显著降低(P<0.01,P<0.05),GSH-PX显著增高(P<0.01);腹腔及肝组织形态具有一定好转;RT-PCR结果,地格达-4低、中、高组对核受体CAR上调至9 739、3 066、1 263倍;PXR上调至455、506、298倍;Western blot结果,地格达-4各给药组对PXR具有显著的下调、CAR具有显著的上调作用(P<0.01)。结论:幽门结扎能引起急性肝损伤,且能改变对核受体PXR和CAR表达的变化。地格达-4通过PXR和CAR膜蛋白表达变化,引起保护肝脏,促进胆汁分泌功能。

地格达-4味汤煎煮工艺考察

目的:优化地格达-4味汤(DGD-4D)的煎煮工艺,为蒙药汤剂煎煮规范化研究提供参考。方法:以DGD-4D为模型药,比较了不同蒙药煎煮方法;采用HPLC测定汤剂中指标成分秦皮乙素、栀子苷、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ的含量,以指标成分转移率和浸膏得率为指标,在单因素试验基础上,采用星点设计-效应面法优选DGD-4D的煎煮工艺,使用Design-Expert8. 0. 6软件进行回归模型拟合,建立工艺参数预测模型,并对最优工艺进行验证。结果:确定DGD-4D最佳煎煮条件为加40倍量水,煎煮17 min,煎煮1次;秦皮乙素、栀子苷、胡黄连苷Ⅰ和胡黄连苷Ⅱ转移率以及浸膏得率分别为70. 01%,94. 11%,61. 23%,92. 32%,32. 89%。结论:建立了DGD-4D的最佳煎煮方法,对于提高蒙药制剂水平以及保证其临床疗效的一致性具有重要参考意义。