双氢青蒿素对人骨肉瘤细胞株143B增殖和凋亡的作用

目的观察双氢青蒿素(dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞143B的增殖和凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养人骨肉瘤细胞株143B;MTT比色法和克隆形成实验检测不同浓度DHA对骨肉瘤细胞存活与克隆形成能力的影响。Hoechst 33258染色法观察细胞凋亡的形态变化。构建β-Catenin荧光素酶报告基因(β-Catenin-Luc,p-Top)检测DHA作用143B后细胞内β-Catenin活性变化。不同浓度的DHA作用后,Western blot检测与细胞增殖(如PC-NA、Cyclin D1、c-Myc)、凋亡(如Bad、Bcl-2、Caspase-3)密切相关的标志物蛋白质表达变化。结果 DHA作用于143B细胞24 h后,MTT结果显示143B细胞的增殖活性受到明显抑制,且其克隆形成能力减弱(P<0.05),在DHA浓度达35μmol.L-1时,抑制效率最明显。Western blot结果显示PC-NA表达下调;而促凋亡蛋白Bad和Caspase-3表达上调,Bcl-2蛋白表达明显减弱。结论双氢青蒿素具有较明显的抑制人骨肉瘤细胞的增殖且促进其凋亡的作用,可能通过下调细胞增殖相关蛋白PCNA、Bcl-2和上调促凋亡蛋白Bad和Caspase-3,启动凋亡程序,致143B细胞发生凋亡。

人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润中双氢青蒿素抑制作用的研究

目的:研究双氢青蒿素(Dihydroarteminin,DHA)对人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润的影响并对其机制进行探讨。方法:通过划痕愈合试验、Transwell穿梭试验、人工基质胶浸润试验,检测DHA对143B细胞的转移迁徙能力的影响;Western Bloting检测与人骨肉瘤细胞株143B转移和浸润密切相关的两种蛋白:基质金属蛋白酶(Matrix Metal Proteinase 9,MMP-9)和血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF),经DHA作用后表达的影响。结果:划痕愈合试验、Transwell穿梭试验和基质胶侵袭试验结果均呈现阳性,表明DHA可有效地抑制人骨肉瘤细胞143B的转移与浸润;Western Bloting结果显示MMP-9和VEGF的表达受到明显抑制,抑制效果随着其浓度增大和时间延长而增加。结论:双氢青蒿素具有明显的抑制人骨肉瘤细胞143B的转移和浸润的作用,可能与双氢青蒿素能抑制MMP-9和VEGF表达有关。