A Novel Phenylpropanoid-substituted Catechin Glycoside and a New Dihydrochalcone from Sarcandra glabra

A novel phenylpropanoid-substituted catechin glycoside glabraoside A 1 and a new dihydrochalcone 3＇-（7＂-allylphenyl）-2＇,4＇,4＂-trihydroxy-6＇-methoxydihydrochalcone 2 were isolated from the herbs of Sarcandra glabra. Their structures were elucidated on the basis of spectroscopic analyses and chiroptical methods.

Dihydrochalcones from Symplocos vacciniifolia

A new dihydrochalcone glucoside, vacciniifolin, along with confusoside, trilobatin and sieboldin were isolated from the leaves of Symplocos vacciniifolia. By the method of spectral analysis, this new compound was elucidated as 2 3,4,4 -tetrahydroxydihydrochalcone 4 -O-a-D-glu- , copyranoside.

Dihydrochalcones and phenanthrene derivatives from Fissistigma bracteolatum

Three dihydrochalcones derivatives 1-3, flavone 4 and phenanthrene derivative 5 were isolated, together with 9 known compofinds, from the air-dried root bark of Fissistigma bracteolatum Chatterjee. Their structures were determined by spectroscopic （NMR, MS） and chemical methodologies.

龙血素B通过P38MAPK信号通路调控MC3T3-E1成骨分化和骨形成的机制

目的:探究龙血素B对小鼠胚胎成骨细胞前体细胞(MC3T3-E1细胞)成骨分化和骨形成的影响以及其通过P38MAPK信号通路调控成骨分化和骨形成的机制。方法:培养MC3T3-E1细胞,加入不同浓度(0、15、30、60、90、120μmol/L)龙血素B,采用CCK8法和流式细胞术(FCM)检测不同时间(24h、48h、72h)MC3T3-E1细胞增殖能力和凋亡情况,确定龙血素B促MC3T3-E1细胞成骨最佳的药物浓度及作用时间。培养MC3T3-E1细胞并分为空白组(不作干预),龙血素B组(加入龙血素B共培养),龙血素B+阻断剂组(加入龙血素B和P38抑制剂SB203580共培养),进行干预实验;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测试剂盒测定各组细胞ALP活性,qRT-PCR法检测各组细胞骨桥蛋白(OPN)基因、骨钙素(OCN)基因、骨唾液蛋白(BSP)基因表达水平,茜素红染色法观察各组细胞骨形成能力。结果:龙血素B可促进MC3T3-E1细胞增殖并抑制其凋亡,效果与浓度和干预时间相关,在90μmol/L浓度下干预48h促MC3T3-E1细胞生长作用最强;干预结束后第1、3、5天,龙血素B组细胞ALP活性较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞ALP活性较龙血素B组降低(P<0.05);龙血素B组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较空白组升高,龙血素B+阻断剂组细胞OPN、OCN、BSP基因表达水平较龙血素B组降低(P<0.05);干预结束后第21天,龙血素B组细胞钙化结节区域面积较空白组增大,龙血素B+阻断剂组细胞钙化结节区域面积较龙血素B组减小(P<0.05)。结论:龙血素B可提高MC3T3-E1细胞增殖活性,并通过激活P38MAPK信号通路促进MC3T3-E1细胞成骨分化和骨形成。

新橙皮苷二氢查尔酮化学合成工艺改进及其体外降脂活性研究

新橙皮苷二氢查尔酮(neohesperidin dihydrochalcone,NHDC)是非营养型甜味剂,可用于无糖食品。该研究以化学方法合成NHDC并探究其体外的胰脂肪酶抑制效果。以廉价易得的柚皮苷为原料,经碱性条件开环得到分解产物根皮乙酰苯-4′-新橙皮苷(phloroacetophenone-4′-neohesperidoside,PN),通过Claisen-Schmidt缩合反应合成中间体新橙皮苷,再以廉价的雷尼镍替代昂贵的Pd/C催化氢化反应,合成目标产物NHDC。以高分辨质谱仪、核磁共振波谱仪鉴定产物结构。通过体外胰脂肪酶(pancreatic lipase,PL)抑制实验、荧光猝灭实验探究其降脂活性与动力学作用机制。结果表明,PN的合成中,NaOH与柚皮苷的最佳质量比为1.7,合成新橙皮苷的催化剂吡咯烷与乙酸的最佳摩尔比为2∶1,合成NHDC的最佳NaOH质量分数为7%,雷尼镍催化能力强于Pd/C,最佳添加量为20%。合成工艺改进后,NHDC的总收率为70.6%。NHDC能抑制PL的活性,半数抑制浓度(IC_(50))为0.71 mg/mL,抑制类型为可逆、反竞争性抑制,NHDC与PL结合后,猝灭PL的内源荧光,改变酶结构及微环境,从而降低PL活性,荧光猝灭类型为混合猝灭。因此,NHDC拥有作为胰脂肪酶抑制剂的应用潜力,具有减少脂质吸收的作用。

柚皮苷制备柚皮苷二氢查尔酮的氢化工艺优化

为探讨柚皮苷二氢查尔酮的制备合成工艺,本文通过单因素试验和响应面试验优化制备过程中的氢化工艺,并对氢化产物进行纯化鉴定研究。得到优化氢化工艺为:反应温度25℃、反应压力0.5 MPa、柚皮苷添加量5.8 g/L、NaOH用量为0.21%、反应溶剂为水、反应时间为7.90 h、催化剂为10%的Pd/C、催化剂用量为0.16%。在此条件下,柚皮苷二氢查尔酮的合成产率为93.11%。对合成产物进行结晶纯化,结晶产物经HPLC分析以及核磁共振技术鉴定为柚皮苷二氢查尔酮,纯度为92%。本研究的优化工艺具有反应温度低、反应压力小、反应时间短、柚皮苷二氢查尔酮产率高、产物容易纯化制备等优点,为工业化生产柚皮苷二氢查尔酮提供了高效的氢化工艺参考。

基于网络药理学研究龙血竭总黄酮治疗心肌缺血再灌注损伤的作用机制

目的:通过网络药理学和分子对接的方法预测龙血竭总黄酮(SDF)防治心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用机制。方法:利用文献检索收集SDF的主要化学成分,通过SwissTargetPrediction和TargetNet数据库进行关键成分靶点筛选。通过GeneCards、OMIM、TTD和PharmGkb数据库进行疾病靶点筛选,将靶点交集并通过Cytoscape构建“药物-关键成分-靶点”网络关系图,通过Cytoscape软件进行可视化并分析得到核心靶点。通过Metascape平台进行GO功能和KEGG通路富集分析。依据AutoDock Vina软件和PyMol对核心化合物与核心靶点进行分子对接。动物实验进一步探索SDF的药效机制。结果:SDF的活性成分有龙血素A和龙血素B等,映射391个靶点。从数据库共获得MIRI疾病靶点3096个,进行交集后获得172个交集靶点,分析得到核心靶点56个。核心的关联途径包含肿瘤途径以及细胞死亡信号途径等。分子对接证明了关键构成部分与关键靶点的结合活力强。动物实验发现SDF能够有效防治MIRI,显著抑制花生四烯酸15-脂氧合酶的mRNA和蛋白表达,减少MIRI后的心肌梗死面积。结论:SDF可能对MIRI治疗有一定的积极意义,其机制可能与ALOX15因子的调控有关。

麝香接骨胶囊中龙血竭替代血竭投料的研究

目的:以龙血素A、龙血素B为专属性目标,建立麝香接骨胶囊中龙血竭替代血竭投料的鉴别研究方法。方法:采用HPLC-UV法对处方制剂3%磷酸甲醇溶液提取液进行定性分析,再以UPLC-MS/MS法进行定性验证。结果:建立的HPLC-UV法测定龙血素A、龙血素B,线性较好,回收率分别为98.23%,98.81%,RSD分别为1.41%,0.89%;UPLC-MS/MS法专属性好,灵敏度高,能够准确验证检出。此外,经分析测定,26批样品中有6批检出龙血素A、龙血素B成分,不合格率23%,表明制剂存在血竭原料被龙血竭掺伪的情况。结论:该方法简便、快速、准确,可用于麝香接骨胶囊中龙血竭替代血竭投料的检查分析。

LB对IL-17A诱导HaCaT细胞增殖和细胞因子影响

目的探讨龙血素B(LB)对白细胞介素-17(IL-17A)诱导的HaCaT细胞增殖和细胞因子分泌的影响及其机制。方法采用噻唑蓝检测细胞增殖;酶联免疫吸附检测IL-6和IL-23表达,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测趋化因子(CXCL1、CXCL12、CXCL20)mRNA表达量,蛋白免疫印迹方法检测Janus激酶-信号转导子及转录激活子(JAK-STAT)通路相关蛋白Janus激酶1(JAK1)、磷酸化信号转导子和转录激活子3(p-STAT3)、信号转导子和转录激活子3(STAT3)的表达。结果与对照组相比,IL-17A组的吸光度值(A值)及IL-6、IL-23和CXCL1、CXCL12和CXCL20 mRNA表达明显增加(F=34.76~135.70,P<0.001),JAK1、p-STAT3和STAT3蛋白表达上调(F=53.91~105.70,P<0.001)。IL-17A可以剂量依赖性地降低HaCaT细胞的A值,IL-6、IL-23,CXCL1、CXCL12、CXCL20 mRNA含量及JAK1、p-STAT3、STAT3蛋白量(F=22.55~88.41,P<0.001)。与IL-17A+LB-H组相比,IL-17A+LB-H+AG490组的A值、IL-6、IL-23和CXCL1、CXCL12、CXCL20 mRNA明显降低(t=4.73~8.40,P<0.001)。结论LB能抑制IL-17A诱导的HaCaT细胞增殖及相关细胞因子分泌,其作用机制可能与抑制JAK-STAT通路有关。

基于线虫模型的木姜叶柯抗氧化应激及抗衰老作用

本研究对木姜叶柯提取物(Lithocarpus litseifolius folium extract,LLFE)的主要成分进行分析,以秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans,C.elegans)为模型,评价木姜叶柯(Lithocarpus litseifolius folium)对线虫的抗氧化应激和抗衰老作用,并探讨可能的作用机制。结果表明:木姜叶柯提取物中含总酚52.84±1.45 mg/g,总黄酮380.74±15.12 mg/g,总糖470.36±5.84 mg/g,二氢查尔酮类化合物含量约为6.00%,其中根皮苷含量为52.76±0.71mg/g,根皮素1.64±0.06 mg/g,三叶苷4.88±0.01 mg/g;LLFE(0.25、1.25 mg/mL)也可以显著延长线虫在氧化应激和热应激条件下的平均寿命(P<0.05),增强自身的抗逆性;后以H_(2)O_(2)诱导的线虫氧化损伤为模型,发现与模型组相比,LLFE(0.05、0.25、1.25 mg/mL)可以显著提升线虫的平均寿命(P<0.05);当LLFE浓度为1.25 mg/mL时,线虫体内总超氧化物歧化酶活提升了39.85%(P<0.05)、过氧化氢酶活提升了39.21%(P<0.05),谷胱甘肽过氧化物酶活提升了66.95%(P<0.001);丙二醛和活性氧的积累量也分别减少66.05%(P<0.001)和49.69%(P<0.001)。表明LLFE有良好的抗氧化效果,进而延缓衰老的进程。

新橙皮苷二氢查耳酮体内降血糖活性

以血糖值为指标,采用四氧嘧啶和葡萄糖联用浸泡的方法建立斑马鱼高血糖模型,探究新橙皮苷二氢查耳酮体内降血糖活性。结果表明:0.050 mmol/L四氧嘧啶+4%葡萄糖浸泡16 h后成功建立斑马鱼高血糖模型,模型组血糖值(5.6 mmol/L)极显著高于空白组(2.3 mmol/L)(P<0.005);0.100 mg/mL新橙皮苷二氢查耳酮干预16 h后能显著降低高血糖斑马鱼血糖、葡萄糖、甘油三酯、胆固醇水平(P<0.05),增加组织糖原含量,表明新橙皮苷二氢查耳酮具有一定的体内降血糖活性。

骨筋丸胶囊中血竭掺杂龙血竭鉴别研究

目的 建立HPLC-DAD法对骨筋丸胶囊中血竭掺杂龙血竭进行检查。方法 以龙血素B为指标成分,采用Agilent Eclipse-C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-0.1%甲酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速:1.0 m L/min,柱温:30℃,检测波长:277 nm,二极管阵列检测器进行检测,通过与龙血素B对照品色谱峰比对加以确证。结果 龙血素B在3.49~174.70μg/m L浓度范围内线性关系良好,其平均加样回收率为98.88%。12家生产企业47批次样品中,有11批次样品检查出龙血素B成分,提示企业可能存在以掺杂有龙血竭的血竭投料的情况。结论 所建立的方法专属性强、简便、可行,可用于检查骨筋丸胶囊中血竭掺杂龙血竭的情况。

反相高效液相色谱法测定国产血竭中龙血素A和B的含量

目的 :测定 6种品牌国产血竭原料药和胶囊剂中龙血素 A和 B的含量 ,为探讨新的质量控制方法提供实验依据。方法 :采用反相高效液相色谱法 ,乙腈 -冰醋酸 (1→ 90 ) (40∶ 6 0 )为流动相 ,流速 :1.0 m l/ min;U V检测波长 :2 70 nm ;柱温 :室温。结果 :龙血素 A在浓度 4～ 2 4 μg/ ml范围内和峰面积呈线性相关 ,回归方程 Y=85 5 .8+80 37.1X (r=0 .9999) ;龙血素 B在 2 0～ 12 0 μg/ m l范围内和峰面积呈线性相关 ,回归方程为 Y=2 19.3+80 81.8X(r=0 .9999)。结论 :所测 6种国产血竭样品中龙血素 B含量均未达到部颁标准的规定 ,样品中龙血素 A的含量明显高于龙血素

新橙皮苷二氢查尔酮的研究进展

新橙皮苷二氢查尔酮(NHDC)是查尔酮的衍生物,作为一种新型甜味剂,它口味清凉,在食品工业中有着广泛的应用。综述了新橙皮苷二氢查尔酮的性质、合成方法、安全性及其应用。重点叙述了新橙皮苷二氢查尔酮的合成方法及其在食品工业中的应用。

RP-HPLC测定龙血竭胶囊中龙血素A和B的含量

目的 :建立RP HPLC测定龙血竭胶囊中龙血素A和B的含量。方法 :以C18反相键合硅胶为固定相 ,乙腈 1%冰醋酸 (34.5∶6 5 .5 )为流动相 ,检测波长为 2 80nm ,用外标法定量。结果 :龙血素A在 9.8～ 2 5 0ng范围有良好线性关系 ,r=0 .9996 ,方法回收率为 97.6 8% ;龙血素B在 10 .8～ 2 16ng范围有良好线性关系 ,r =0 .9993,方法回收率为 96 .77%。结论 :本方法是测定龙血竭胶囊中龙血素A和B含量的简便、快速、可靠的定量方法。

新型甜味剂—二氢查尔酮衍生物

对二氢查尔酮类甜味剂的制备和应用作了一简要的概述,介绍了影响此类物质甜度的各个因素和二氢查尔酮衍生物的制备合成方法。同时,对柚皮甙二氢查尔酮和新橙皮甙二氢查尔酮两种甜味剂的性质、用途、合成方法、应用前景做了详细介绍。

HPLC法同时测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分

为建立HPLC测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分的方法,选择了广西、云南产9个批次的龙血竭,测定了其中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的含量.采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-1%冰醋酸,梯度洗脱,流速1.0 m L·min^(-1),柱温40℃,检测波长278 nm.3个药效成分在45min内达到基线分离,线性关系良好.9个批次龙血竭中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的平均含量分别为:0.47%,0.96%,0.44%;平均加样回收率分别为:99.6%,103.2%,100.5%;RSD分别为:1.20%,0.65%,1.30%.该实验方法操作简便,结果准确,重复性和稳定性良好,可为龙血竭的质量控制提供参考.

HPLC测定龙血竭中龙血素A和龙血素B的含量

目的建立龙血竭中龙血素A和龙血素B的含量测定方法。方法采用HPLC法,用C18柱,乙腈-1%冰醋酸溶液(37∶63)为流动相,检测波长275nm,柱温30℃。结果方法线性关系良好,平均加样回收率龙血素A为100.25%,RSD=1.2%(n=6);龙血素B为101.32%,RSD=1.7%(n=6)。结论所用方法简便易行,结果准确,可用于龙血竭药材的质量控制。

HPLC法检测合成新橙皮苷二氢查尔酮

建立高效液相色谱法分析以新橙皮苷为原料合成新橙皮苷二氢查尔酮的方法。色谱柱为美国Zorbax extend-C18(150 mm×4.6 mm,5μm);甲醇-水(48∶52,体积比)洗脱溶剂,流速1 mL/min;柱温:(23±2)℃;检测波长280 nm。新橙皮苷二氢查尔酮在0.05 mg/mL～1.00 mg/mL范围内线性关系良好,平均回收率为98.91%,RSD=1.29%(n=5)。该法准确、简便、灵敏度高,可作为合成新橙皮苷二氢查尔酮的检测方法。

影响国产血竭中龙血素B含量测定的干扰成分的分离鉴定

目的 HPLC法测定龙血素B含量时鉴定其近旁杂质峰的结构 ,便于进行龙血竭的质量控制。方法 HPLC法确定龙血素B及近旁杂质峰位置 ,硅胶柱层析用于龙血素B近旁杂质峰的分离 ,质谱和核磁共振用于结构鉴定。结果 龙血素B近旁杂质峰为龙血素A。结论 龙血素A与龙血素B结构相近 ,用HPLC法很难完全分开 ,有必要对原来质量标准进行修订。