龟鹿益神颗粒对慢性疲劳综合征大鼠行为及相关雄性激素的影响

目的:观察龟鹿益神颗粒对慢性疲劳综合征(Chronic fatigue syndrome,CFS)大鼠行为学及血清睾酮(Testosterone,T)、双氢睾酮(Dihydrotestosterone,DHT)、硫酸脱氢表雄酮(Dehydroepiandrosterone sulfate,DHEAS)的影响,探讨龟鹿益神颗粒抗疲劳的作用机制。方法:雄性SD大鼠60只,随机分成正常组、模型组、苁蓉益肾颗粒组、龟鹿益神颗粒低、中、高剂量组,每组10只,采用慢性束缚、力竭游泳复合方法构建CFS大鼠模型,造模成功后,正常组、模型组每天给予10 m L/(kg·d)生理盐水灌服,其他各组给予相应药物灌服,龟鹿益神颗粒低、中、高剂量组,分别按照1.625 g/(kg·d),3.250 g/(kg·d),6.500 g/(kg·d)的剂量灌胃,苁蓉益肾颗粒组给予苁蓉益肾颗粒混悬液417 mg/(kg·d),每天1次,连续14天。造模前、后及灌胃后分别测量大鼠行为学指标,末次灌胃12 h后ELISA法测定各组大鼠血清T、DHT、DHEAS的含量。结果:造模前各组大鼠体质量、矿场跨格运动次数、力竭游泳时间无明显差异。造模后,与正常组比较,各组大鼠体质量、矿场跨格运动次数、力竭游泳时间均明显减少(P <0.05);给药后,与正常组比较,模型组大鼠体质量、矿场跨格运动次数、力竭游泳时间及血清T、DHT、DHEAS的含量明显降低(P <0.05,P <0.01);与模型组比较,龟鹿益神颗粒各剂量组和苁蓉益肾颗粒组大鼠体质重、旷场跨格次数、力竭游泳时间及血清T、DHT、DHEAS均有显著上升(P <0.05,P <0.01);与苁蓉益肾颗粒组相比,龟鹿益神颗粒中、高剂量组大鼠体质量、矿场跨格运动次数、力竭游泳时间及血清T、DHT、DHEAS的含量明显上升(P <0.05,P <0.01)。结论:龟鹿益神颗粒可显著改善CFS大鼠的疲劳状态,升高机体内T、DHT、DHEAS的含量,此可能是其抗疲劳机制之一。

多囊卵巢综合征相关雄性激素的液相色谱-串联质谱检测

建立了液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)检测血清中硫酸脱氢表雄酮(DHEAS)、雄烯二酮(A4)、睾酮(T)、17-羟基孕酮(17-OHP)、双氢睾酮(DHT)5种激素的分析方法。血清样本经蛋白沉淀后,采用固相萃取,经Agela Venusil MP C18色谱柱(3.0 mm×50 mm,3μm)分离,以含0.1%甲酸的甲醇和含0.02%甲酸的水为流动相进行梯度洗脱。使用正-负离子多反应监测模式进行数据采集。结果表明,5种激素在各自质量浓度范围内线性关系良好(r2>0.995),回收率为96.0%~105%,各激素的批内精密度和批间精密度均小于10%,DHEAS、A4、T、17-OHP、DHT的定量下限(LOQ)分别为5.00、0.05、0.05、0.025、0.025 ng/mL。该方法快速、准确、灵敏,适用于临床对多囊卵巢综合征(PCOS)患者血清雄性激素水平的检测。

雄激素对运动骨骼肌MAPK和mTOR信号的作用研究

目的:通过皮下埋植双氢睾酮(DHT)缓释剂并结合运动,探讨雄激素对骨骼肌内mTOR通路和MAPK通路的影响,旨在对雄激素促进骨骼肌蛋白合成的调控机制进行深入研究。方法:24只雄性成熟SD大鼠在适应性训练后随机分为安静对照组(S)、DHT组(D)、运动组(E)和DHT运动组(ED)。在大鼠颈背部皮下埋植DHT缓释剂,在作用10 d后于末次运动后12 h取材。分别检测肌肉湿重、肌纤维横断面、IGF-I和AR基因表达,MHC含量及AR、MEK、ERK、p90RSK、mTOR、p70S6K和4EBP1磷酸化。结果:1)DHT、运动组和DHT运动组的腓肠肌湿重分别比对照组高3.1%、2.1%和6.7%,肌纤维横截面积比对照组增加了28%、5%和27%。MHC比对照组增加了25%、27%和44%。2)DHT组、运动组和DHT运动组AR基因分别为对照组的3.43倍、1.97倍和5.92倍。IGF-I基因分别为对照组的2.48倍、1.63倍和3.59倍。3)DHT组AR、MEK、ERK、p90RSK、mTOR、p70S6K和4EBP1磷酸化分别增加21%、35%、31%、30%、26%、28%和23%;运动组的分别增加25%、30%、23%、24%、38%、27%和32%;DHT运动组的分别增加45%、72%、53%、60%、59%、44%和55%。结论:1)DHT明显促进了骨骼肌的肥大,使肌肉横断面、肌肉湿重和MHC明显增加。而且,运动加强了雄激素的这种促合成效应。2)DHT和运动均能促进肌肉内IGF-I的生物合成,且运动具有协同增强效应。3)DHT明显促进肌肉内MAPK通路和mTOR通路活性的增强。