Capillary gas chromatographic determination of dimethachlon residues in fresh tobacco leaves and cut-tobacco

Simple procedures for extraction and chromatographic determination of dimethachlon residues in fresh tobacco leaves and cut-tobacco are described.The determination was carried out by capillary gas chromatography(GC) with electron capture detection(ECD) and confirmed by GC-MS.The mean recoveries and relative standard deviation(RSD) were 93.2%～112.9% and 3.5%～6.7%,respectively at levels ranging from 0.01 to 0.1 mg/kg.The limit of determination was 0.001 mg/kg.Tobacco samples in routine check were successfully analyzed using the proposed method.

核盘菌对菌核净的抗药性机制初探

经药剂筛选获得对菌核净不同表型的核盘菌 (Sclerotinia sclerotiorum)抗药性突变体。与敏感亲本菌株相比 ,抗药突变体 MN6 1(MR)和 MN91(HR)在含 1%和 8%葡萄糖的PDA上生长受到抑制 ,MN113(L R)只对 1%葡萄糖敏感。通过测定抗药突变体 MN6 1和野生敏感菌株 PN0 6 1的电导率 ,发现抗药突变体能在更短的时间里渗出更多的电解质。抗药突变体苯丙氨酸解氨酶活性比敏感亲本菌株高出 1倍以上 ,当用不同浓度菌核净处理或饥饿处理时 ,抗药突变体和敏感亲本菌株 PAL活性均上升 ,但抗药突变体的酶活始终高于敏感亲本菌株。

油菜菌核病菌对多菌灵、菌核净抗药性菌株性质研究

通过紫外诱导在 PDA平板上获得抗多菌灵或菌核净的油菜菌核病菌抗药性突变体 ,突变频率 2 .4× 1 0 - 4～ 2 .4× 1 0 - 5。突变体与敏感亲本菌株相比菌丝生长存在个体差异 ,仅 85.7%的抗菌核净突变体表现致病 ,而所有敏感菌株及抗多菌灵突变体均能致病。抗菌核净突变体比敏感亲本菌株产菌核能力弱 ,并对渗透压表现敏感。

烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的抗药性检测

为了解吉林省和黑龙江省烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的抗性水平,采用菌丝生长速率法,测定了318株烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑的药剂敏感性,建立敏感基线。运用最低抑制浓度法确定抗性菌株及频率,并比较不同采样地点的抗性水平。结果表明,供试敏感菌株对菌核净的敏感性频率分布呈连续的单峰曲线,接近正态分布,其EC50均值2.916μg/mL可作为两省烟草赤星病菌对菌核净的敏感基线,抗性频率为21.38%;烟草赤星病菌对苯醚甲环唑的敏感基线为1.198μg/mL,抗性频率为18.24%。吉林省和黑龙江省烟草赤星病菌对菌核净和苯醚甲环唑产生了不同程度的抗性,不同地点抗性水平存在差异。本研究为烟草赤星病菌的抗药风险评估奠定了基础,为制定吉林和黑龙江两省烟草赤星病科学防治策略和科学用药提供了依据。

安徽省油菜菌核病菌对菌核净的抗药性测定

对分离自安徽省合肥、太湖、灵璧、肥西等10个地区的油菜菌核病菌(Sclerotiniasclerotiorum)对菌核净的敏感性进行了测定。结果显示,菌核净对安徽省各供试菌株的质量浓度EC50值分布范围为0.1957￣2.7665mg/L,平均值为0.9835mg/L,均小于5mg/L,表明各供试菌株均对菌核净敏感,但各供试菌株对菌核净的敏感程度不同地区间存在较大差异。上述结果提示,安徽省油菜菌核病菌目前尚未对菌核净产生抗药性。

时间分辨荧光免疫分析方法检测烟草中菌核净残留

建立了简便、灵敏地检测烟草中菌核净残留的时间分辨荧光免疫分析方法(TRFIA),及配套的无净化的快速前处理技术。采用镧系元素螯合物Eu-N1标记亲和纯化后的羊抗兔IgG示踪抗体。采用间接竞争TRFIA法建立了菌核净标准抑制曲线,方法的检出限I10为2.0μg/L;抑制终浓度I50为32.00μg/L;检测线性范围为4～128μg/L。考察了丙酮提取后33%,10%和1%的烟草基质对菌核净-TRFIA分析方法的影响,表明在1%烟叶基质条件下,建立的菌核净的抑制曲线的线性范围与标准抑制曲线趋于平行,确定烟草样品的前处理稀释倍数为100倍,计算得到基质影响因子(Im)为17.1。对烟叶样品中添加1,7和24mg/L的菌核净标样,连续3d的添加回收实验表明,方法的回收率为73%～128%,相对标准标准偏差(RSD)在4.3%～13.2%之间;烟草中菌核净的实际最低检出限为1mg/L。本方法可望用于烟草中菌核净残留的快速筛选检测。

江苏省油菜菌核病菌对多菌灵和菌核净的抗药性监测

2006—2010年从江苏省12个地级市的油菜产区采集油菜菌核,经分离纯化共获得6017株油菜菌核病菌。采用区分剂量法测定其对多菌灵和菌核净的抗药性。结果表明,2006—2010年间江苏省各地均有多菌灵抗性菌株的分布且抗药性水平较高,抗药性频率分别为63.9%、24.0%、17.1%、16.7%和9.8%,呈逐年下降的趋势。同时经室内研究发现,多菌灵抗性菌株与敏感菌株在菌丝生长、菌核产生、以及致病力等方面无显著差异。而2006—2010年间江苏省油菜菌核病菌对菌核净表现敏感,平均抗性频率仅为0.10%,5年内只在盐城、常州、连云港三地监测到共6株低抗菌株,且菌核净低抗菌株在菌丝生长、菌核产生等方面明显弱于敏感菌株。

超声波辅助分散液相微萃取-气相色谱联用分析菌核净

将超声波萃取（USE）与分散液-液微萃取（DLLME）联合,利用气相色谱-电子捕获检测（GC-ECD）,建立了一种高灵敏度检测水体中菌核净的新方法。对萃取的条件进行优化,选定萃取条件为：在5 mL样品中,注入1 mL丙酮和0.1 mL的四氯化碳混合液,20 Hz超声10 min,振荡混匀后高速离心5 min,移出下层溶剂低温吹干以丙酮定容自动进样分析。在优化条件下,样品的富集倍数可达50倍,检出限为0.001μg/mL,对采于蔬菜地边的水样进行加标回收率实验,平均回收率在81%以上,相对标准偏差在4.3%～7.6%之间,方法可满足水样中菌核净农药残留的检测要求。

52%的菌核·锰锌对烟草赤星病菌的室内及田间毒力测定

室内采用孢子萌发抑制法测定菌核净、代森锰锌以及它们的复配剂 5 2 %菌核·锰锌对烟草赤星病菌的毒力 ,结果表明 ,菌核净和代森锰锌以适当的比例复配 ,可明显提高其对烟草赤星病菌孢子萌发的抑制率。计算复配剂共毒系数为 385 .0 819,表现出增效作用。田间防治试验亦表明 。

卷烟滤嘴上菌核净农药的残留分析

建立了卷烟滤嘴中菌核净农药气相色谱-电子捕获检测器检测方法。并对前处理条件的优化进行了探讨。样品用苯提取,DB-1701弹性石英毛细管柱分离,GC-ECD检测。实验表明：方法的检出限为0.018 mg/kg,回收率在81.5%-93.7%之间,相对标准偏差为5.4%-9.7%。方法已用于环境样品中菌核净的测定。

油菜菌核病菌对扑海因和菌核净敏感基线的建立及交互抗药性分析

在实验室条件下，对分离自安徽省凤阳、宣城、望江、肥西、旌德、太湖、合肥、蒙城、灵璧和巢湖等10个地区的油菜菌核病菌（Sclerotinia sclerotiorum）对扑海因和菌核净的敏感性进行测定。结果显示，扑海因对各供试菌株的抑制中浓度EC50值分布范围为0．0962—0．4381mg·L^-1，平均为0．2176mg·L^-1；菌核净对各供试菌株的抑制中浓度EC50值分布范围为0．0527—2．2365mg·L^-1，平均为1．0227mg·L^-1，各供试菌株对扑海因和菌核净仍较敏感，但各供试菌株对扑海因和菌核净的敏感程度地区间存在较大差异。扑海因和菌核净对各供试菌株的质量浓度EC50值相关性分析表明，油菜菌核病菌对扑海因和菌核净的抗性或敏感性之间不存在交互作用。

戊唑醇和菌核净复配对油菜菌核病的田间防效及抗性风险研究

本实验研究了戊唑醇·菌核净复配制剂对油菜菌核病的田间防效及抗药性风险,结果表明,戊唑醇·菌核净50%可湿性粉剂复配制剂20.0～25.0g（a.i.）/667m^2对油菜菌核病的防效达到67.1%～88.7%,优于对照药剂菌核净40%可湿性粉剂20g（a.i.）/667m^2的64.9%防效,且在试验浓度范围内无药害发生,对油菜安全。在室内利用含药PDA培养基对复配药剂和菌核净单剂的抗药性进行了连续20代的筛选,结果表明菌核净单剂和戊唑醇·菌核净复配药剂对油菜病菌核病的抑制率均有明显的下降,复配后与菌核净单剂相比抗药性风险没有降低。

烟叶及土壤中菌核净残留分析方法及消解规律

提取样品中的菌核净,硅胶层析柱净化,气相色谱配电子捕获检测器(ECD)测定。结果表明:鲜烟叶、土壤中菌核净平均回收率分别为96.80%～98.96%、93.87%～100.78%;相对标准偏差分别为7.77%～8.22%、5.48%～6.69%。菌核净在鲜烟叶中的消解较快,半衰期为7.75d;在土壤中相对较慢,半衰期为15.71d。

菌核净、代森锰锌及其混剂对烟草赤星病菌毒力测定

运用Horsfall毒力试验设计方案和孢子萌发抑制法分别测定菌核净、代森锰锌及其混剂对烟草赤星病菌(Alternariaalteranta)的毒力,并分别用Wadley方法、Gowing方法、Abbott方法和孙云沛方法等多种评价方法评价所配混剂的增效作用,结果表明,当它们按EC50剂量7:3的比例混配时所得混剂表现明显的增效作用,4种增效作用评价方法所得结果一致,田间防治结果也证明该混剂可有效防治赤星病。

田间烟草赤星病菌繁殖代数与其对杀菌剂敏感性的关系

为合理用药、提高防效,探讨了田间烟草赤星病菌繁殖代数与其对杀菌剂敏感性的关系。室内进行了在田间烟草不同生长时期采集的6个赤星病菌株对杀菌剂敏感性测定,并用聚类分析方法比较了各菌株对杀菌剂敏感性差异。结果表明,不同时期采集的不同繁殖代数烟草赤星病菌株对"菌核净"的敏感性差异显著,其中4号菌株对"菌核净"最不敏感,EC50为193 3644mg/L,已产生一定的抗药性,其次为1号菌株,EC50为102 3738mg/L,对"菌核净"最敏感的是2号和3号菌株,EC50分别为42 0390和58 4109mg/L。表明不论前期还是后期采集的菌株都有对"菌核净"敏感和不敏感的,烟草赤星病菌株的繁殖代数与其对"菌核净"的敏感性无一定规律性。从聚类分析树状图也可以看出这种敏感性的差异情况。

菌核净在生菜和土壤中的残留动态

建立了菌核净残留的气相色谱分析法,并采用该方法测定了菌核净在生菜和土壤中的残留量。结果显示,菌核净在生菜、土壤中的最小检出浓度为0.002 mg/kg,平均添加回收率为96.0%～101.0%,变异系数为1.3%～2.8%。残留动态研究表明,菌核净在生菜、土壤中半衰期为6.2、11.4d。40%(质量分数)菌核净可湿性粉剂在生菜定植初期以低剂量(600g/hm2)和高剂量(1 200g/hm2)施药3～4次,距最后一次施药21d后菌核净的残留量小于0.70mg/kg。

气相色谱法测定菌核净原粉

本文研究了以５％ＯＶ－１０１／ＣｈｒｏｍｏｓｏｒｂＷ－ＡＷＤＭＣＳ（６０～８０目）为固定相，以邻苯二甲酸二戊酯为内标物，气相色谱法测定菌核净原粉。该方法操作简便快速、准确度和精密度均较好，可作为产品质量控制和检测方法。

田间防治向日葵菌核盘腐病的药剂筛选

选用不同化学杀菌剂和无公害药剂,对向日葵始花期、盛花期进行田间接种,调查病情指数计算防效。试验结果表明:混剂中甲托︰咪鲜胺(4︰6)配比效果最好,防效可达61.2%;单剂中防效较高的是40%菌核净WP,无公害药剂中6%低聚糖素、5%氨基寡糖素、液体地膜的防效较好。田间防治向日葵盘腐防治以初花期防治效果好于盛花期防治。

香荚兰白绢病土表施药防治试验

白绢病病区土表喷施加量的３００倍波尔多液处理后，发病率（７５％）和病情（部分腐烂）都明显低于一般处理的发病率（１００％）和病情（全部腐烂，长满菌丝，产生菌核）。土表施用菌核净、土菌消、波尔多液、波尔多液＋苯莱特的试验表明，４种农药对防治白绢病，抑制基腐、蔓腐都有明显效果。其中土菌消效果最好，其次为菌核净；波尔多液和波尔多液＋苯莱特效果相近，较差。

菌核净对鲫鱼的雌激素效应研究

目的研究菌核净对鲫鱼的雌激素效应。方法每隔5d腹腔注射给予鲫鱼不同剂量菌核净(50mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg)诱导卵黄蛋白原(vitellogenin,VTG)的产生,同时设置阳性对照组17β-雌二醇(E2)和花生油对照组,2W后收集雄性鲫鱼血浆和肝脏进行VTG检测(ELISA法),并测定血钙离子和血、肝总蛋白含量。结果100 mg/kg和200 mg/kg菌核净能诱导雄性鲫鱼血VTG产生,200 mg/kg菌核净能刺激雄性鲫鱼肝脏产生VTG,与阴性对照组相比,VTG含量均具有显著性差异;各剂量组菌核净对雄性鲫鱼血钙离子、血和肝总蛋白含量均无影响;但阳性对照E2能增高血钙离子水平,差异具有显著性。结论菌核净具有雌激素样作用。