穿龙薯蓣总皂苷中甾体皂苷的分离与鉴定

目的 研究穿龙薯蓣总皂苷中水溶性甾体皂苷 ,寻找新的生物活性化合物。方法 用硅胶柱色谱、薄层色谱及高效液相色谱等进行分离 ,通过酸水解、理化常数和波谱学分析 (IR ,NMR ,MS ,HMQC ,HMBC)鉴定化合物结构。结果 从穿龙薯蓣总皂苷中分得 2个甾体皂苷 ( 1个水难溶性皂苷和 1个水溶性皂苷 ) ,其化学结构分别鉴定为薯蓣皂苷元 3 O {α L 鼠李糖 ( 1→ 2 ) [β D 葡萄糖 ( 1→ 3 ) ]} β D 葡糖皂苷 (I) ,薯蓣皂苷元 3 O [α L 鼠李糖 ( 1→ 3 ) α L 鼠李糖 ( 1→ 4 ) α L 鼠李糖 ( 1→ 4 ) ] β D 葡糖皂苷 (II)。 结论 II为首次从穿龙薯蓣中分离得到的新化合物 ,命名为穿龙薯蓣皂苷Dc。

甾体皂苷的选择性酸水解研究

甾体皂苷的药物活性不仅与苷元有关,而且与糖链部分有更为密切的联系.为了研究糖链结构对甾体皂苷生物活性的影响,从龙葵(Solanum nigrumL.)和穿龙薯蓣(Dioscorea nipponica Makino)中提取了3种甾体皂苷类化合物澳洲茄边碱、澳洲茄碱和薯蓣皂苷,通过选择性酸水解,制备了一系列糖链结构不同的产物.研究结果表明,澳洲茄边碱水解得到4种产物,澳洲茄碱水解得到3种产物,β1-澳洲茄碱无法分离得到.用浓度为2%的H2SO4水解薯蓣皂苷,90℃反应75 min,主要得到γ-薯蓣皂苷水解产物,此条件下具有很好的选择性;而用5%的H2SO4水解,75℃反应75 min,则主要得到β-薯蓣皂苷水解产物.

楮实子中总皂苷含量测定

目的:建立楮实子总皂苷的含量测定方法。方法:以薯蓣皂苷为对照品,采用分光光度法,高氯酸显色,在407nm处测定吸光度,计算楮实子中总皂苷的含量。结果:薯蓣皂苷的质量浓度在8.04～40.20μg.mL-1与吸光度呈良好的线性关系(r=0.999 8),平均回收率为99.8%(n=9),RSD=2.01%;楮实子中总皂苷平均含量为0.48%(n=10),RSD=1.88%。结论:建立了楮实子中总皂苷含量测定方法,此方法简便、准确,稳定性、重现性好,可用于楮实子的质量控制。

抗重楼皂苷类化合物溶血作用的研究

本研究以分离纯化所获得重楼总皂苷、偏诺皂苷(PSs)和薯蓣皂苷(Ds)为材料,用分光光度法测定样品对兔血红细胞的溶血度,探讨不同抗溶血剂对重楼皂苷类化合物溶血作用的影响。当Ds浓度大于75μg.mL-1时溶血率>5%,而重楼总皂苷和PSs浓度大于50μg.mL-1时溶血率>5%;在抗溶血剂存在的情况下,重楼皂苷类化合物的溶血作用被不同程度抑制,且表现为维生素E﹥甘露醇﹥葡萄糖。重楼皂苷中主要产生溶血作用的化合物为偏诺皂苷类化合物,而加入抗溶血剂维生素E对重楼皂苷类化合物的溶血作用具有良好的抑制效果。本实验提示添加抗溶血剂使重楼活性成分运用于静脉注射剂型具有一定的可能性。

重楼皂苷对微囊藻毒素致小鼠肾损伤保护作用的组织学研究

为了探讨重楼皂苷类化合物对微囊藻毒素(MC)所致小鼠肾脏损伤的保护作用,研究以重楼分离纯化获得的薯蓣皂苷(SY)和偏诺皂苷(PN)为材料,对微囊藻毒素浸染的小鼠进行连续灌胃试验.将小鼠肾脏进行组织制片和HE染色,观察小鼠肾组织的显微结构.结果显示,微囊藻毒素致肾单位结构异常,而重楼薯蓣皂苷和偏诺皂苷对微囊藻毒素所致的肾损伤均有保护作用,且薯蓣皂苷的保护作用优于偏诺皂苷.

重楼皂苷对微囊藻毒素致小鼠肝损伤保护作用的组织学研究

试验用重楼薯蓣皂苷(SY)和偏诺皂苷(PN)对微囊藻毒素浸染的小鼠进行连续灌胃,并通过对小鼠肝脏进行石蜡包埋、制片和HE染色,观察小鼠肝组织的显微结构,目的在于研究重楼皂苷类化合物对微囊藻毒素(MC)所致肝损伤的保护作用.结果显示,微囊藻毒素具有肝毒性,致肝小叶结构严重破坏,而重楼薯蓣皂苷和偏诺皂苷对微囊藻毒素所致的肝损伤均有保护作用.

不同性别及去花对穿龙薯蓣中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷含量的影响

目的:探讨不同性别及去花对薯蓣皂苷和原薯蓣皂苷含量的影响。方法:采用高效液相色谱法和比色法,测定不同时期穿龙薯蓣根茎中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量。结果:雌性植株薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷和总皂苷的含量显著高于雄性,雌性去花后含量明显降低,与雄性植株接近。结论:三者具有相似的季节积累规律,各发育时期含量变化不大。

重楼皂苷类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

将重楼皂苷类化合物PHAC-A和PHAC-B配制为高、低质量浓度组,以灌胃方式连续给药7 d,测定小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬百分率和吞噬指数.结果显示,PHAC-A,PHAC-B高、低质量浓度组对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬百分率和吞噬指数的影响均高于对照组和阳性对照组(P<0.05);两组比较,PHAC-A对巨噬细胞吞噬功能的促进作用明显高于PHAC-B.结果表明,重楼皂苷类化合物对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能具有明显促进作用,并以PHAC-A的作用最强.

盾叶薯蓣中薯蓣皂苷酸水解工艺研究

[目的]优化盾叶薯蓣中薯蓣皂苷的酸水解工艺。[方法]以干燥盾叶薯蓣根为原料,利用已优化的皂苷提取工艺制备足量水解用皂苷。通过单因素及正交试验研究盐酸浓度、反应温度、反应时间3个工艺参数及其交互作用对薯蓣皂苷水解的影响,以薯蓣皂苷元的含量为指标,筛选酸水解工艺条件。[结果]盾叶薯蓣中薯蓣皂苷最佳酸水解工艺条件为水解时间4 h,水解温度85℃,酸浓度4mol/L。该条件下,皂苷的平均得率为3.51%,同时可分离得到淀粉。[结论]该研究得到薯蓣皂苷的酸水解工艺对资源的综合利用率明显提高,并可大幅度减少废水的生成,减少环境污染。

山药总皂苷提取工艺研究

目的:优化山药总皂苷提取工艺。方法:采用UV法和HPLC法测定山药总皂苷和薯蓣皂苷,以二1者的含量为指标,通过单因素循环试验和正交设计试验考察乙醇体积分数、溶剂倍量、提取时间和提取次数对提取过程的影响,优化提取工艺。结果:确定最佳提取工艺为30倍量60%的乙醇回流提取三次,每次2h,总皂苷的含量为2.174mg·g-1,薯蓣皂苷的含量为0.790mg·g-1。结论:优化后的提取工艺稳定、可行,适用于山药总皂苷的提取。

大孔吸附树脂分离富集水溶性薯蓣皂甙工艺研究

利用D-101型大孔吸附树脂,采用分光光度法,对分离富集水溶性薯蓣皂甙的工艺参数及洗脱率的影响因素进行研究.结果表明:当吸附时间为2 h,洗脱乙醇浓度为70%时具有很好的分离富集效果.分离前总固物中黄姜薯蓣水溶性皂甙含量为13.1%,分离后总固物中黄姜薯蓣水溶性皂甙含量为27.3%,D—101大孔吸附树脂具有较大的吸附容量.

七叶一枝花根茎和地上部分提取物镇痛抗炎作用研究

采用镇痛、抗炎实验对七叶一枝花根茎和地上部分提取物进行活性部位追踪。镇痛作用采用热板、热刺痛和醋酸扭体实验进行评价,抗炎作用采用二甲苯致小鼠耳肿胀模型进行评价,比较总提物各部位及呋甾皂苷、偏诺皂苷、薯蓣皂苷三类组分的抗炎作用强弱。结果表明七叶一枝花根茎提取物具有明显镇痛作用:在热板实验中,仅高剂量组(2.4 g生药·kg-1)表现出显著的镇痛作用,在热刺痛实验中,中、高剂量组(0.6 g生药·kg-1,2.4 g生药·kg-1)表现出显著的镇痛作用,在醋酸扭体实验中,所有剂量组均表现出极显著的镇痛效果并呈现剂量依赖性。抗炎作用评价中,总提物对二甲苯致小鼠耳肿胀抑制作用显著且表现出明显的剂量依赖关系。地上部分总提物表现出与根茎相似的镇痛抗炎作用。大孔吸附树脂50%、70%及95%乙醇洗脱部位富集的甾体皂苷类成分是抗炎主要活性部位,其中呋甾皂苷、偏诺皂苷和薯蓣皂苷三类组分均有显著的抗炎作用,尤其以偏诺皂苷组的作用最强。本研究为建立与传统功效相关的重楼药材和饮片的质量评价体系的指标成分选择提供了实验依据,同时,为七叶一枝花地上部分废弃资源的综合利用与开发提供了科学支撑。

山药总皂苷体外抗氧化活性及质量控制方法考察

目的:考察山药总皂苷体外抗氧化活性,建立HPLC法同时测定山药总皂苷中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷含量,为山药总皂苷成分研究提供参考。方法:采用DPPH自由基、邻苯三酚超氧阴离子反应体系,以维生素C作为参照物,检测山药总皂苷的抗氧化活性。色谱柱:Kromasil-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱0~10 min,30%→40%A;10~14 min,40%→54%A;流速:1.0 ml·min^-1;检测波长:203 nm;柱温:30℃进行含量测定。结果:当山药总皂苷浓度为0.5mg·ml^-1时对超氧阴离子的抑制率为39.4%;对DPPH自由基清除率为31.6%。总皂苷中薯蓣皂苷、原薯蓣皂苷的色谱峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围分别为52.40~838.00μg·ml^-1(r=0.9997),58.40~934.00μg·ml^-1(r=0.9998);平均回收率分别为96.1%、96.3%,RSD分别为1.8%,1.9%(n=9)。结论:表明山药总皂苷具有一定的清除DPPH自由基和超氧阴离子的活性,对其所建立的质量控制方法简便可行、重现性好,为山药总皂苷的质量评价提供方法。

黄精炮制过程中甾体皂苷的变化研究

目的甾体皂苷在炮制过程中发生的化学变化,目前很少有研究。本研究为进一步开发利用药用植物中的甾体皂苷提供思路。方法从黄精中分离原料化合物薯蓣皂苷,用水合反应釜模拟炮制过程对单体进行转化,TLC确定完全转化时的温度与时间,运用正向和反向硅胶柱层析,分离2个主要化合物。结果通过LC-MS、NMR等波谱解析法,确定薯蓣皂苷在炮制过程中转化为延龄草苷和薯蓣皂苷元。结论现代炮制研究对比了黄精炮制前后薯蓣皂苷的变化,本研究与以往黄精炮制不同,发现炮制过程中甾体皂苷确实发生了很重要的变化,生成次级苷和苷元。

粉萆薢总皂苷提取及总皂苷、薯蓣皂苷含量分析

目的建立粉萆薢总皂苷(Total saponin of Dioscorea,TSD)提取工艺,测定TSD和薯蓣皂苷的含量。方法乙醇回流法提取TSD,以薯蓣皂苷元为对照品,高氯酸为显色剂,紫外-可见分光光度法测定TSD含量(测定波长409±1 nm);以薯蓣皂苷为对照品,HPLC法测定其中薯蓣皂苷含量(C18色谱柱4.6 mm×250 mm,5μm,流动相为甲醇和水,梯度洗脱,检测波长为208 nm)。结果 TSD提取工艺为10倍量95%乙醇回流提取3次,每次1 h;等量石油醚脱脂,水饱和正丁醇萃取2次,薯蓣皂苷元线性范围为25.4～152.4μg(r=0.999 2),平均回收率为99.39%(RSD=1.62%)。薯蓣皂苷与其他成分分离良好,峰面积与浓度呈良好的线性关系,线性范围为1.0～8.0μg(r=0.999 4),平均回收率为99.22%(RSD=1.56%)。三批粉萆薢药材提取物中的总皂苷的含量分别为61.74%、58.78%和60.47%,薯蓣皂苷的含量分别为33.9%、33.15%、32.26%。结论该提取方法合理,含量测定方法简便、快速、准确、重复性好,可作为TSD和薯蓣皂苷的定量分析。提取物总皂苷及薯蓣皂苷含量能满足药效学实验的要求。

长药隔重楼中甾体皂苷成分的分离与结构鉴定

目的研究长药隔重楼Paris polyphylla Smith var.pseudothibetica的化学成分。方法采用硅胶柱层析、大孔吸附树脂、葡聚糖凝胶Sephadex LH-20、预装硅胶中压柱层析及半制备RP-HPLC等技术分离纯化单体化合物,根据理化性质及波谱数据鉴定其结构。结果从长药隔重楼乙醇提取物中分离并鉴定了8个甾体皂苷类单体化合物,分别是偏诺皂苷元-3-O-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅰ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基(1→4)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅱ)、薯蓣皂苷元-3-O-α-D-葡萄吡喃糖基(1→3)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅲ)、偏诺皂苷元-3-α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅳ)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-阿拉伯呋喃糖基(1→4)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅴ)、偏诺皂苷元-3-O-α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-α-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅵ)、偏诺皂苷元-3-O-β-L-鼠李吡喃糖基(1→4)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅶ)、偏诺皂苷元-3-O-β-D-木呋喃糖基(1→5)-α-L-阿拉伯呋喃糖基(1→4)-[α-L-鼠李吡喃糖基(1→2)]-β-D-葡萄吡喃糖苷(Ⅷ)。结论首次从长药隔重楼中分离并鉴定出化合物Ⅰ～Ⅷ。

地奥心血康中薯蓣皂苷及伪原薯蓣皂苷的分离与鉴定

目的:分离鉴定地奥心血康中主要甾体皂苷成分。方法:应用常压及加压硅胶柱色谱技术进行分离与纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定其结构。结果:分离并鉴定了2个化合物:薯蓣皂苷(Dioscin)(1)和伪原薯蓣皂苷(Pseudoprodioscin)(2)。结论:化合物1和2为地奥心血康中含量较高的2种主要成分,对控制和评价中药地奥心血康的品质有重要意义。

HPLC-ELSD法同时测定盾叶薯蓣根茎中5个皂苷的含量

目的:建立同时测定盾叶薯蓣根茎中黄姜素A、盾叶新苷、三角叶薯蓣皂苷、薯蓣皂苷及纤细皂苷5个成分含量的HPLC-ELSD分析方法,并测定不同产地盾叶薯蓣根茎中上述5个成分的含量。方法:采用Welchrom C18(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱;流动相:乙腈(A)-水(B),梯度洗脱(0～5 min,25%A→30%A;5～20 min,30%A;20→35 min,30%A→35%A;35→45 min,35%A→47%A;45→47 min,47%A→60%A;47→60 min,60%A);体积流速:1.0 mL.min-1;柱温:23℃;蒸发光散射检测器(漂移管温度:90.0℃,气体流速:2.8 L.min-1)。结果:黄姜素A、盾叶新苷、三角叶薯蓣皂苷、薯蓣皂苷和纤细皂苷5个皂苷均有良好的线性关系,平均加样回收率(n=6)分别为99.4%(RSD=2.8%),100.2%(RSD=2.0%),101.4%(RSD=1.2%),97.2%(RSD=2.1%),103.2%(RSD=2.4%)。结论:本方法简单、快速、结果可靠,可用于同时测定盾叶薯蓣根茎中上述5个成分的含量。

重楼皂苷类化合物体外抗生育功效研究

目的筛选并确证重楼皂苷类化合物的抗生育功效。方法以重楼分离纯化获得的偏诺皂苷(PHAC-A)和薯蓣皂苷(PHAC-B)为实验材料,运用体外孵育小鼠精子测定其活性,研究其对体外精子活性的影响。结果PHAC-A,PHAC-B体外均具抗生育活性,与阳性对照醋酸棉酚比较,能显著抑制精子活力和精子成活率,且PHAC-B抗生育效果优于PHAC-A,其抗生育活性存在剂量依存关系。结论PHAC-A,PHAC-B抑制精子活力和精子成活率的功效显著,为高活性抗生育物质,其中PHAC-B为重楼中具抗生育能力的主要活性物质。

UPLC法同时测定云南重楼栽培品中11种皂苷的含量

目的:建立超高效液相色谱法同时测定云南重楼栽培品中伪原薯蓣皂苷、伪原纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷D、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅴ共11种甾体皂苷的含量。方法:采用CORTECS UPLC C_(18)(2.1 mm×100 mm,1.6μm)色谱柱,以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~18 min,30%A→50%A;18~28 min,50%A),流速0.3 mL·min^(-1),检测波长203 nm,柱温30℃,进样量1μL。结果:伪原薯蓣皂苷、伪原纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅶ、重楼皂苷D、重楼皂苷H、重楼皂苷Ⅵ、重楼皂苷Ⅱ、薯蓣皂苷、纤细薯蓣皂苷、重楼皂苷Ⅰ、重楼皂苷Ⅴ线性范围分别为2.006~401.2、2.024~404.8、1.972~394.4、1.912~382.4、1.896~379.2、1.772~354.4、2.056~411.2、2.016~403.2、1.970~394.0、1.736~347.2、1.756~351.2μg·mL^(-1);平均回收率(n=6)分别为98.73%、100.30%、101.90%、99.52%、98.33%、100.25%、98.57%、97.70%、101.63%、100.16%和98.80%,RSD分别为2.09%、2.41%、1.77%、2.74%、1.50%、2.35%、2.06%、1.76%、2.82%、2.05%和1.86%。云南重楼栽培品中上述11种甾体皂苷的含量分别为0~0.874、0~0.764、1.066~5.144、0~0.327、1.192~1.952、0~0.455、2.442~6.182、0.394~0.954、0~0.681、2.182~10.105、0~0.674 mg·g^(-1)。结论:该方法可用于同时测定云南重楼栽培品中11种甾体皂苷的含量,为云南重楼药材的质量评价提供参考。