杜仲叶多糖的提取、结构及抗氧化活性研究

【目的】探究微波辅助提取杜仲叶多糖的最佳条件,分析杜仲叶多糖的结构组成及抗氧化活性,为杜仲叶综合利用提供依据。【方法】采用微波辅助提取法,以杜仲叶多糖得率为指标,m(杜仲叶粉/g)∶V(H_(2)O/mL)(以下简称质量体积比)、微波时间、水浴温度、微波功率为影响因素设计单因素试验,在此基础上采用正交试验优化得到杜仲叶多糖最佳提取条件。根据该条件提取6个品种杜仲叶(华仲1号、华仲5号、华仲12号、华仲13号、华仲15号、华仲24号)多糖,使用气相色谱-质谱联用仪及红外光谱仪测定杜仲叶多糖结构组成,并通过电子顺磁共振波谱法测定杜仲叶多糖1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH)自由基清除率表征其抗氧化活性。【结果】杜仲叶多糖的最佳提取条件是质量体积比1∶30,微波时间1.5 min,水浴温度40℃,微波功率230 W。在该条件下6个品种杜仲叶得率分别为华仲1号6.90%±0.04%、华仲5号6.47%±0.13%、华仲12号6.68%±0.11%、华仲13号6.53%±0.07%、华仲15号7.21%±0.02%和华仲24号7.64%±0.05%。在结构组成方面,单糖组成结果显示,6个品种杜仲叶多糖均由L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖组成,其中D-葡萄糖和D-半乳糖含量最高,但其单糖组成比例存在差异;多糖红外光谱显示,不同杜仲叶多糖具有相似的多糖特征吸收峰。在抗氧化活性方面,6个品种杜仲叶多糖DPPH自由基清除能力顺序为华仲1号>华仲13号>华仲12号>华仲24号>华仲5号>华仲15号。【结论】微波辅助提取可以提高杜仲叶多糖得率,不同杜仲叶多糖均有良好的抗氧化活性,且以华仲1号的DPPH自由基清除能力最强。

用清除有机自由基DPPH法评价植物抗氧化能力

几种抗氧化剂的浓度与其清除 1,1 二苯基苦基苯肼 (DPPH)能力呈显著的线性相关 .不同抗氧化剂清除DPPH能力差异明显 .抗坏血酸与DPPH反应的灵敏性高于其抑制肾上腺素氧化的能力 .用DPPH法和亚油酸氧化法同时测定了生长在不同光强下植物叶片抗氧化能力的变化 ,两种方法所得结论相一致 .结果表明清除有机自由基法是一种快速、简便。

天然黄酮类化合物清除DPPH^＊的构效关系

应用DPPH.分光光度测定法研究了11种高纯度的天然黄酮类化合物清除二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)的构效关系。结果表明,这11种天然黄酮类化合物都能有效地清除DPPH.,其清除DPPH.作用大小顺序依次为:槲皮素>泽漆新苷>儿茶素>金丝桃苷>芸香苷>山奈素>桑色素>异槲皮苷>黄芩苷>石吊兰素>金雀异黄素。发现这11种天然黄酮类化合物有如下构效关系:1.B环上和/或A环上具有邻位羟基可大大增强清除DPPH.作用;2.B环上4′位羟基和A环上6位羟基清除DPPH.的活性都很强;3.异黄酮清除DPPH.的活性弱于相应的黄酮;4.黄酮醇清除DPPH.的活性强于相应的双氢黄酮醇,提示C环具有C2-C3双键结构可增强清除DPPH.作用;5.黄酮类化合物对DPPH.的清除能力与其酚羟基位置密切相关;6.C环3位上羟基被糖基化时,其清除DPPH.的作用减弱。所得结果为进一步开发利用黄酮类化合物提供了理论依据。

苦荞醋对二苯代苦味酰基(DPPH·)自由基的清除作用研究

用DPPH法测定了苦荞醋及其制备过程中各中间产物的抗氧化活性,并与叔丁基对苯二酚(TBHQ)进行比较。结果表明:苦荞醋对DPPH·具有较强的清除作用,其中起主要作用的不是醋酸,而是苦荞醋中的其他成分;苦荞醋各阶段产物对DPPH·清除作用的大小顺序依次为:苦荞醋>苦荞糖化液>苦荞液化液>TBHQ>苦荞酒醪。

桔核中柠檬苦素类物质最佳提取条件的探讨及清除DPPH活性的研究

文章对桔核中柠檬苦素类物质的提取条件及其清除DPPH活性进行研究。结果表明桔核粉碎物以85倍体积的混合溶液(A∶B=55∶45,其中A为极性溶剂,B为极性溶剂),温度在65℃下,提取3.5h,一次提取即达到最佳的提取效果。桔核中的柠檬苦素清除DPPH自由基的IC50值为20.7μg/mL。

油茶叶乙醇提取物清除DPPH自由基作用的研究

用二苯基苦基肼自由基(DPPH.)法测定了油茶叶乙醇提取物的抗氧化活性,并与芦丁、二丁基羟基甲苯(BHT)进行了比较,在波长517nm、反应时间40min的条件下测定了DPPH.的清除率为50%时抗氧化剂的质量浓度(EC50)值。结果表明,油茶叶乙醇提取物对DPPH.具有明显的清除作用,且随着油茶叶乙醇提取物纯化程度的提高,其清除能力也相应增强。测得油茶叶粗提物、油茶叶精提物、芦丁和BHT清除DPPH.的EC50值分别为12.19、6.765、9.481和37.53mg/L,清除DPPH.能力的大小顺序依次为油茶叶精提物>芦丁>油茶叶粗提物BHT。

细脚拟青霉不同菌株清除DPPH自由基活性研究

在初筛基础上选择不同地理来源的10株细脚拟青霉,用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法比较了不同提取部位的DPPH自由基清除率.结果表明在所有供试菌株中细脚拟青霉的两个菌株清除自由基活性均较高.10株细脚拟青霉间的清除自由基活性少数相似,多数差异显著;发酵液和菌丝体提取物清除自由基活性不同;菌丝体不同溶剂先后提取所得物清除率也不同,其中氯仿提后甲醇提取物无论提取量,还是活性均较高,5分钟时的清除率最少也有66.0%（Pt02菌株）,最高是Pt69菌株达到93.5%,Pt57菌株的清除率为92.8%;氯仿提取量极少,活性也不高;经氯仿和甲醇提取后的水提物,得率只有甲醇的一半左右,而活性与氯仿提取物相当,在14.11%～45.3%之间.

发酵轮叶党参提取物清除DPPH自由基的作用

目的:探讨发酵和未发酵轮叶党参提取物清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)自由基(DPPH·)的能力,阐明酵母菌发酵对轮叶党参清除自由基能力的影响。方法:实验用活性酵母发酵轮叶党参7d后用沸水提取,并用80%乙醇除去蛋白质和多糖,减压浓缩,采用清除DPPH·能力的方法比较发酵、未发酵轮叶党参提取物及抗坏血酸对DPPH.的清除能力。结果:发酵轮叶党参提取物对DPPH·清除能力的半数有效量(EC50)为0.12g·L-1,未发酵轮叶党参EC50为0.40g·L-1,发酵轮叶党参与未发酵轮叶党参组比较,清除DPPH·的能力明显增强(P<0.01)。轮叶党参发酵之后,齐墩果酸含量提高了1.41倍。结论:用活性酵母发酵轮叶党参后,清除DPPH·能力提高,且发酵后其化学成分发生变化。

槟榔提取物对DPPH自由基的清除作用研究

采用氯仿、乙醇、水作溶剂从槟榔中依次提取三种部位提取物,用清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH)能力的方法在两种溶剂系统(乙醇和乙酸乙酯)中评价了提取物的清除自由基作用。结果表明,在乙醇和乙酸乙酯溶剂中三种槟榔提取物都有清除DPPH自由基的能力,等浓度槟榔提取物清除DPPH的能力大小依次为:乙醇提取物>水提取物>氯仿提取物。

DPPH法研究聚烯烃抗氧剂的抗氧化能力及反应动力学

以DPPH法考察了4种聚烯烃抗氧剂对DPPH·的清除能力,并对聚烯烃抗氧剂清除DPPH.反应进行了动力学分析。结果表明,4种聚烯烃抗氧剂对DPPH·均具有良好的清除作用,清除能力随聚烯烃抗氧剂浓度的增加而升高,随清除反应时间的延长先增大后趋于稳定。抗氧化效率从大到小的4种聚烯烃抗氧剂顺序为抗氧剂1010、抗氧剂BHT、抗氧剂1076、抗氧剂1098。聚烯烃抗氧剂清除DPPH·反应属一级反应,反应温度对该清除反应的反应速率常数k及反应活化能Ea影响不显著;4种聚烯烃抗氧剂中清除能力最强的聚烯烃抗氧剂1010的反应活化能仅为7.49kJ/mol,说明这4种聚烯烃抗氧剂清除DPPH·在室温下即能快速进行。

玉米源活性肽的分离纯化及清除DPPH自由基的活性

以脱脂醇溶蛋白为底物进行酶水解反应,获得了玉米源活性肽组分,经葡聚糖凝胶和离子交换等方法对产物进一步分离纯化.以α-生育酚为阳性对照,研究了活性肽及其分离纯化组分对2,2-二苯基-1-苦基苯肼(DPPH)自由基的清除活性及其浓度的关系.结果表明:活性肽及其分离纯化组分均具有清除DPPH自由基的活性;经CM-纤维素弱阳离子交换层析分离所得组分2对DPPH自由基的清除活性最强,且清除效果与其浓度及作用时间呈正相关,分子量主要集中在400～700.

用DPPH·分析法研究野生植物的抗氧化活性

本文用分光法对二苯代苦味酰基自由基分析法进行了初步研究，发现该法稳定灵敏，操作简便，重现性好。并应用该法研究了野生植物对ＤＰＰＨ·的清除作用，结果表明，很多野生植物具有抗氧化活性，值得进一步深入研究。

一些单子叶木本植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性初探

研究用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法 ,对常见的三十余种单子叶木本植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较 ,发现不同科属、不同种植物鲜叶的 80 %甲醇提取物对DPPH自由基的清除活性有很大差异 ,其中供试的棕榈科 7种植物鲜叶提取物 ,在相当于鲜叶浓度为 2 5mg/ml于 3 7℃下孵育 2 0min时 ,对 0 5mmol/LDPPH自由基清除率平均可达 40 0 % ,而龙舌兰科 5种植物平均仅为 7 2 % ;刺葵、棕竹、筋头竹、蒲葵和棕榈等鲜叶有较强的自由基清除活性 ,它们在相当于鲜叶浓度为 2 5mg/ml时的自由基清除率分别可达 83 1%、79 2 %、64 9%、60 5 %和 5 1 3 %。

蔷薇科一些植物鲜叶提取物清除DPPH自由基活性的研究

用二苯基苦基苯肼自由基酶标仪法, 对亚热带蔷薇科常见的50种木本植物鲜叶的自由基清除活性进行了比较,发现不同属、不同种树木鲜叶的80%甲醇提取物的自由基清除活性有很大差异, 其中苹果属5种植物在相当于鲜叶浓度为0.5 mg/mL于37℃下孵育20 min时, 对0.5 mmol.L-1 DPPH自由基平均清除率达62.4%,而绣线菊属3种植物的平均自由基清除率仅11.6%。尖嘴林檎、棣棠、木瓜、三叶海棠、湖北海棠、木香花、小果蔷薇和黄山花楸等鲜叶有较强的自由基清除活性,它们在浓度为0.5 mg/mL时的自由基清除率分别可达85.0%、75.8%、70.7%、69.6%、64.5%、62.5%、61.8%和61.3%,显示其有较大的开发潜力。

酢浆草清除DPPH有机自由基活性研究

用二苯基苦基苯肼自由基薄层实验法(DPPH-TLC-ASSAY)和DPPH-Titerplate Assay的方法,对不同环境、不同生长势、不同种的酢浆草上不同部位鲜叶的甲醇提取物进行定性和定量分析。发现酢浆草鲜叶提取物的自由基清除能力与样品浓度呈正相关关系,样品浓度越高,其自由基消除率越高;同时发现不同种的酢浆草的自由基清除活性不同,其中红花酢浆草提取物的自由基清除活性较强,同一种酢浆草因为生长环境的不同其自由基清除活性也不同,试验发现盆栽样品的活性较强。薄层图谱中还可看到同一种的DPPH-HPTLC图谱较类似,而不同种的DPPH-HPTLC图谱有较大的差异。

珠芽蓼黄酮类化合物清除DPPH·的作用

以六盘水市本地野生的珠芽蓼为原料,利用70%乙醇作为提取介质提取黄酮类化合物,并以抗坏血酸(VC)和维生素E(VE)为对照物,采用DPPH法研究珠芽蓼黄酮提取物对二苯代苦味肼基自由基(DPPH.)的清除作用。结果表明:珠芽蓼黄酮对DPPH.有较强的清除作用,在其质量浓度为368.94μg/mL时,其清除效果最好,清除率达88.96%,显著高于相同浓度下的VC和VE的清除率。珠芽蓼黄酮提取物是一种有前途的抗氧化剂。

中草药对DPPH·自由基的清除作用的研究

本文研究了16种中草药提取液对自由基的清除作用。通过提取液与DPPH·的作用进行筛选。最终选出:骨碎补、大黄和麦冬等三种中草药他们对DPPH·的清除作用分别为:98.51%、95.72%和,94.35%结果令人满意。

银杏花粉黄酮组分分离纯化及其清除DPPH自由基能力

为了分离纯化银杏花粉中具有潜在抗氧化活性的黄酮组分及研究其潜在抗氧化活性,该文对银杏花粉的总黄酮进行提取和分步萃取,采用1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl(DPPH)自由基清除率检测和组分分析锁定待纯化萃取相。通过DPPH-HPLC-PAD技术筛选目标清除自由基组分,并采用制备型液相色谱技术分离纯化这些组分,然后采用紫外可见吸收光谱、质谱、核磁共振氢谱、碳谱等技术进行结构鉴定,最后通过测定DPPH自由基清除率初步研究其潜在抗氧化活性。结果显示,银杏花粉粗提物具有清除DPPH自由基活性,对DPPH的半抑制率(IC50值)为1.32 mg/m L,乙酸乙酯相和正丁醇相的IC50值为0.46、0.84 mg/m L,分别是粗提物的34.85%和63.64%。可见,乙酸乙酯相的清除DPPH活性最高。进一步研究显示,乙酸乙酯相富集了6种主要银杏花粉黄酮,而且均具有清除DPPH活性。经纯化和结构鉴定分别为山奈酚-3,4’-双-O-β-D-葡萄糖苷(1)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖基-7-O-α-L-鼠李糖苷(2)、山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(3)、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(4)、柚皮素(5)和山奈酚(6)。其清除DPPH自由基的活性由高到低依次为:化合物6>化合物2>化合物3>化合物4>化合物1>化合物5。其中山奈酚清除DPPH的IC50值为0.017 mg/m L,与维生素C及芦丁相比没有显著性差异(P>0.05)。上述研究为银杏花粉功能成分的深入研究奠定了基础。

玫瑰黄酮的提取及其清除DPPH自由基活性研究

采用正交试验研究玫瑰黄酮的最佳提取条件,同时以VC和VE为对照,评价玫瑰黄酮清除1,1-二苯基苦基苯肼(DPPH自由基)的能力。结果表明玫瑰黄酮最佳的提取条件为:乙醇体积分数60%、液料比15:1、浸提温度40℃、提取时间1.5h,此时玫瑰黄酮提取率为40.87%、DPPH自由基清除率为88.28%。玫瑰黄酮对DPPH自由基有明显的清除作用,其对DPPH自由基的清除能力小于VC大于VE。玫瑰黄酮、VC和VE清除DPPH自由基的半数抑制浓度IC50分别为12.50、7.00mg/L和13.95mg/L。

草果总黄酮的提取及DPPH自由基清除活性研究

采用超声波辅助法提取草果总黄酮,通过单因素试验和正交试验优化草果黄酮的最佳提取条件,同时以VC为对照,评价草果黄酮清除1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-Diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基的能力。结果表明草果黄酮的最佳提取条件为:乙醇体积分数60%、料液比1∶50(g/mL)、提取温度40℃、超声功率为160 W,提取时间60 min,此时草果黄酮提取量是24.2 mg/g。草果黄酮有较强的DPPH自由基清除力,且草果黄酮抗氧化性高于VC,其IC50分别为:IC50草果黄酮12.89 mg/L,IC50VC为6.94 mg/L,草果黄酮的DPPH自由基清除率为80.5%。