银杏黄酮的体外葡醛酸反应及其药物相互作用

目的 :获得银杏黄酮体外代谢情况 ,预测银杏叶制剂与常用心血管类药物之间的代谢性相互作用的可能性。方法 :银杏黄酮与普罗帕酮、硝苯地平、地非三唑和依普黄酮在经 β-萘黄酮诱导的鼠肝微粒体中共孵育 ,以HPLC法测定孵育液中剩余银杏黄酮的浓度 ,观察共孵育药物对银杏黄酮葡醛酸结合反应的影响 ,并计算银杏黄酮 3个苷元的酶动力学参数。结果 :测得银杏黄酮槲皮素、异鼠李素和山奈酚的 Vmax值分别为 (6 0± 0 .2 1)、(48±0 .0 2 )、(34± 0 .0 2 )μmol· g-1· min-1,Km 值分别为 (2 4± 0 .0 5 )、(14 8± 0 .0 9)、(110± 0 .0 3)μmol/ L ;当银杏黄酮浓度一定时 ,共孵育药物硝苯地平、普罗帕酮、依普黄酮和地非三唑对银杏黄酮的 IC50 分别为 5 4～ 70、6 9～ 12 2、85～98和 2 10～ 36 2 μmol。测得地非三唑对银杏黄酮 3种苷元的抑制常数 Ki值分别为 5 7.6、5 0 .5和 33.1mg/ L;普罗帕酮的 Ki值分别为 33.6、5 9.5和 4 5 .2 mg/ L;依普黄酮的 Ki值分别为 13.7、2 4 .0和 15 .7mg/ L。普罗帕酮的 [I]/[Ki]比值为 0 .0 0 2～ 0 .0 0 3。结论 :在银杏黄酮的 3种苷元中槲皮素的代谢能力最强 ;硝苯地平、依普黄酮和普罗帕酮等对槲皮素、异鼠李素和山奈酚的葡醛酸反应均有不同程度的抑制作用 ;

地非三唑的RP-HPLC法测定及其体外代谢研究

目的 为研究抗早孕新药地非三唑 (DL111 IT)的代谢作用机理和进一步开发利用 ,建立其体外代谢的RP HPLC测定法。方法 以LichrospherODS C1 8为色谱柱 ,甲醇 pH 7 5磷酸盐缓冲液 ( 70∶3 0 )为流动相 ,检测波长 :2 3 5nm ,流速 1 0mL·min- 1 ,地西泮为内标 ,对鼠肝微粒体孵育液中DL111 IT的RP HPLC法进行方法学研究。应用建立的方法对DL111 IT在不同来源的鼠肝微粒体中的体外代谢进行试验。结果 DL111 IT浓度在 1 0 1～ 10 1 0 μg·mL- 1呈良好的线性关系 ,在不同浓度下测得平均绝对回收率和相对回收率分别为 ( 92± 4 ) %和 ( 10 0 3± 1 9) % (n =5 ) ;DL111 IT在鼠肝微粒体中的代谢 ,β 萘黄酮组明显快于其他组。 结论 本法简便、准确 ,可用于DL111

地非三唑在鼠肝微粒体中的体外代谢

目的 为了解地非三唑 (Dip)在不同预处理的鼠肝微粒体中主要受何种酶代谢影响 ,为其临床合理应用和进一步开发利用提供科学依据。方法 将Dip与 6种不同诱导剂〔苯巴比妥 (PB)、地塞米松(Dex)、β 萘黄酮 (BNF)、Dip、吡啶和空白对照〕诱导的鼠肝微粒体进行体外共孵育 ,用氯仿终止反应 ,以地西泮为内标 ,采用反相高效液相色谱 (RP HPLC)法测定孵育后剩余的Dip的含量。结果 BNF诱导的鼠肝微粒体对Dip代谢具有强烈的催化活性 ,Dip诱导的微粒体的催化能力次之 ,PB诱导组也有一定的催化能力 ,其他几种诱导剂诱导的微粒体对Dip代谢能力与对照组无明显差别。测得Dip在BNF诱导的鼠肝微粒体中的Km 为 (6 0 .5± 1.3) μmol·L- 1,vm 为 (5 .6± 0 .4 )mmol·g- 1·min- 1。结论 由BNF诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 1A)和PB诱导的鼠肝微粒体 (主要为细胞色素P4 5 0 2B)在Dip的体外代谢中可能起主导作用 ;Dip诱导的鼠肝微粒体对其自身的代谢也起了重要作用。

地非三唑与甾体激素类药物的体外相互作用

目的观察地非三唑与甾体激素类药物的代谢性相互作用,为临床合理用药提供科学依据。方法选择在临床上可能与地非三唑合用的甾体激素类药物,如米非司酮、雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮和炔诺酮等进行试验。分别将它们与地非三唑在鼠肝微粒体中共孵育,采用反相高效液相色谱法测定孵育液中地非三唑和共孵育药物的剩余浓度或代谢产物浓度,计算代谢抑制常数值。结果地非三唑对米非司酮、雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮以及炔诺酮的代谢抑制常数Ki分别为(201·3±1·0),(94±4),(128·7±2·2),(64±5)和(80±4)μmol·L-1;雌二醇、醋酸甲羟孕酮、黄体酮以及炔诺酮对地非三唑的代谢抑制常数Ki分别为(66·9±2·2),(60·0±2·3),(163±10)和(88±5)μmol·L-1。结论地非三唑与甾体激素类药物之间均有不同程度的代谢相互抑制作用。

地非三唑及其注射液的质量控制

目的:采用高效液相色谱法测定地非三唑及其注射液的含量,为其质量控制提供快速、有效的分析手段。方法:采用汉邦公司Lichrosper ODS色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以甲醇-10 mmol·L-1磷酸二氢钾(pH 7.5)缓冲液(6.5:3.5)为流动相;流速1.0 mL·min-1,应用二极管阵列检测器(DAD),检测波长:235 nm,进样量:20μL。结果:地非三唑浓度在0.02～0.20 mg·mL-1范围内线性关系良好(r:0.9996),平均回收率为99.98%,日内RSD为0.43%,日间RSD为1.3%,最低检测量为15 ng;样品中有关物质与主成分基线分离,中间体和降解产物不干扰测定。结论:该法专属性强,结果准确,重现性好,可用作地非三唑及其注射液含量测定和有关杂质控制的方法。

地非三唑与黄酮类化合物的代谢相互作用

目的:研究地非三唑与黄酮类化合物槲皮素、山奈酚、异鼠李素和四方蒿提取物的代谢相互作用。方法:选取山奈酚、异鼠李素和四方蒿提取物作为二相代谢葡醛酸结合反应的底物,分别在空白、β-萘黄酮和地非三唑诱导的微粒体中进行体外二相代谢,采用HPLC法测定各底物的剩余量。选取槲皮素、山奈酚对地非三唑体外一相代谢进行抑制试验,采用HPLC法测定地非三唑的剩余量。结果:地非三唑诱导的鼠肝微粒体对山奈酚、异鼠李素和四方蒿提取物的二相代谢均强于BNF诱导的鼠肝微粒体(P<0.01)。槲皮素或山奈酚对地非三唑的一相代谢有较强抑制作用,抑制常数分别为(12.41±0.26)μg.m-l 1和(7.97±0.08)μg.m-l 1。结论:地非三唑与上述黄酮类化合物在体外会发生代谢性药物相互作用。

兔血浆中地非三唑(DL111-IT)高效液相色谱荧光检测方法(英文)

目的 建立兔血浆中DL111 IT的高效液相色谱荧光检测法。方法 血浆样品和内标格列本脲经氯仿提取后 ,选用DiamonsilODS C18柱 (15 0mm× 4 . 6mm ,5 μm) ,乙腈 - 0 . 0 2 5mol·L-1磷酸氢二铵缓冲溶液 (磷酸调pH 5 .0 ) (6 0 .4 0 ,V/V)为流动相 ,流速 1 0mL·min-1,荧光检测 (λex=2 5 0nm ,λem=332nm)。结果 DL111 IT在浓度 1 .0 0～ 2 0. 0 0ng·mL-1范围内呈良好线性 ,r=0. 9996 ,n =5。高 (2 0 . 0 0ng·mL-1)、中 (10 . 0 0ng·mL-1)、低 (1 .0 0ng·mL-1) 3个质控样本平均提取回收率分别为85 . 3%± 1 .3% ,84 .9%± 2 . 7% ,85 . 8%± 1 .8% ,方法回收率分别为 99 .5 %± 0 . 4 % ,10 2 . 1%± 1. 8% ,10 .1 3%± 2 .4 % ;日内(n =5 )和日间 (n =5 )RSD分别低于 3 .0 %和 7. 0 %。血浆样品检测限为 0 3ng·mL-1(S/N =3) ,定量限为 1ng·mL-1(S/N =10 ,RSD <7 .0 % )。结论 本法准确、灵敏、操作简便 ,为DL111 IT药代动力学研究提供了方法学基础。

地非三唑对大鼠肝细胞细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导作用

目的试从mRNA表达水平阐明地非三唑对鼠肝微粒体中细胞色素P450 CYP1A1/2的诱导机制。方法给SD大鼠腹腔注射地非三唑,采用Tr-izol法提取大鼠肝脏RNA,用RT-PCR测定经地非三唑处理1,2及4d的鼠肝中细胞色素P450 CYP1A1,CYP1A2 mRNA的表达水平。结果地非三唑处理不同时间的鼠肝细胞中细胞色素P450CYP1A1,CYP1A2 mRNA的表达水平比空白对照组明显增加,空白对照组CYP1A1吸光度比值为0.270±0.040,诱导1,2及4d的吸光度比值分别为0.343±0.055,0.417±0.045及0.603±0.083;空白对照组的CYP1A2吸光度比值为0.613±0.189,而诱导1,2及4d的吸光度比值分别为1.510±0.226,3.057±0.518及4.120±0.458。随着诱导时间的增加,细胞色素P450 CYP1A1及CYP1A2 mRNA的表达也逐步增加,诱导时间与表达水平之间存在一定的线性关系,相关系数分别为0.9984和0.9563。结论地非三唑对细胞色素P450 CYP1A1/2 mRNA表达具有诱导作用。