腺病毒载体介导四环素调控的DT/VEGF体系的基因治疗

目的研究重组腺病毒在四环素调控下传递 DT_(390)-VEGF_(165)及DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因治疗肝癌的可行性.方法构建4种四环素 tet-off 调控的 DT_(39)-VEGF_(165)或 DT_(390)-VEGF_(exon7)融合基因重组腺病毒载体,用脂质体介导包装出4种重组腺病毒,分别感染肝细胞癌 HepG2细胞,在没有四环素的情况下观察肝癌细胞的形态变化,用2种粗制重组腺病毒治疗荷肝癌裸鼠,用免疫组化鉴定融合基因的表达.结果在培养液中加入 3mg·L^(-1)的四环素可包装出携带毒素融合基因的重组腺病毒,用噬斑分析法测定重组腺病毒滴度均为1×10^(10)pfu·L^(-1);粗制重组腺病毒感染 HepG2细胞8h 后换以无四环素的正常培养液,发现72h 后 HepG2细胞发生病变,细胞死亡率达95%;感染细胞经白喉抗毒素-FITC 免疫荧光抗体染色均呈现黄绿色荧光;用粗制重组腺病毒AdCA13-tTA-TRE-DT_(390)-VEGF_(165)和 AdCA13-tTA-VEGF_(165)-DT_(390)-TRE 注射肝癌瘤体可观察到瘤体生长明显得到抑制,AFP 值显著下调,免疫组化结果显示融合基因在瘤体内得到了表达.结论重组腺病毒可以提高转基因效率.

Vero细胞法检测白喉抗毒素的研究

参照Ｍｉｙａｍｕｒａ等报道，建立了微量细胞培养检测白喉抗毒素的方法。以家兔皮肤试验为参照，Ｖｅｒｏ细胞培养法敏感度为９８．１１％，特异度为８４．００％，符合率为９６．２０％，相关系数ｒ＝０．９３。

BA-ELISA法用于血清中白喉抗毒素检测的实验探讨

５６例精白类免疫前后配对血清，用ＢＡ－ＥＬＩＳＡ、常规ＥＬＩＳＡ和ＰＨＡ等三种方法作平行比较试验，其结果：ＰＨＡ法ＧＭＴ免疫前１．８３；免疫后６２．４３，抗体滴度升高３４．１倍；常规ＥＬＩＳＡ法ＧＭＴ免疫前４．８６；免疫后３４０．８，抗体滴度升高７０．０５倍；ＢＡ－ＥＬＩＳＡ法ＧＭＴ免疫前９．０５；免疫后１０３７．０５，抗体滴度升高１１４．６倍。以免疫后ＰＨＡ法ＧＭＴ６２．４３作为敏感度１。

杭州市1995～2006年健康人群百日咳 白喉 破伤风抗体水平监测分析

目的了解杭州市健康人群百日咳、白喉、破伤风抗体水平。方法1995～2006年,在不同区(县、市),分2～4岁、6～8岁、13～15岁、25～39岁4个年龄组开展百日咳、白喉、破伤风抗体监测。结果百日咳抗体共监测1942人,保护率为93.87%,几何平均摘度为1∶1037.36。其中农村2～4岁保护率低于其它三个年龄组,与6～8岁、13～15岁组保护率差异有非常显著的统计学意义(χ2=8.80、6.13;P均<0.01)。白喉抗体监测2141人,阳性率91.59%,几何平均浓度(GMC)为0.291国际单位/毫升(IU/ml)。破伤风抗体监测2141人,阳性率72.35%,GMC为0.095IU/ml。结论应加强农村地区的免疫规划管理及预防接种工作。