期刊文献+
共找到32篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
REGULAR EXPRESSION OF DISCOIDIN DOMAIN RECEPTOR 2 IN THE IMPROVED ADJUVANT-INDUCED ANIMAL MODEL FOR RHEUMATOID ARTHRITIS 被引量:1
1
作者 WeiLi Yuan-qiangZhang +2 位作者 Xin-pingLiu Li-boYao LanSun 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2005年第2期133-137, ,共5页
Objective To investigate the expression of discoidin domain receptor 2 (DDR2) of fibroblast-like synovial cells in im- proved adjuvant-induced animal (AIA) model for rheumatoid arthritis (RA) and to provide evidence f... Objective To investigate the expression of discoidin domain receptor 2 (DDR2) of fibroblast-like synovial cells in im- proved adjuvant-induced animal (AIA) model for rheumatoid arthritis (RA) and to provide evidence for DDR2’s antagonist use clinically. Methods AIA was modified by administrating 0.1 mL of complete Freund’s adjuvant (CFA, mixed with 5 mg Bacillus Calmette-Guerin vaccine/mL) into rats’ right hind paws and 0.125 mL tumor necrosis factor-α (2 U/mL) into right ankles and subpatellar fatty tissue. The expression of DDR2 in fibroblast-like synovial cells was assessed using immunohistochemistry, immunofluorescence histochemistry, and in situ hybridization methods. Levels of anti-collagen II antibody were measured using enzyme-linked immunosorbent assay. Results Given the terms mentioned above, we found a more practical rat model, apparently decreasing immunization time (average 3-5 days). DDR2 can be detected upon the 15th day of immunization; expression gradually increased with time going on, and reaching a peak 35 days after immunization before gradually decreasing. Serum anti-collagen II antibody showed similar expression patterns as DDR2, but reached peak later than DDR2, about 40 days after immunization. Conclusion Regular expression of DDR2 in animal models infers its important role in the pathological process of RA. 展开更多
关键词 基因表达 动物模型 风湿性关节炎 临床表现
下载PDF
DDR2在肺癌中的研究进展
2
作者 李菁霞 金阳 《中国医药指南》 2024年第7期41-44,共4页
肺癌由于恶性程度高、易侵袭转移、治疗效果差、预后差,仍是全球致死率最高的癌症之一,至今还没有非常有效的诊断和治疗方法,阐明肺癌的潜在发病机制对于开发新的有效诊断及预后生物标志物和疗法至关重要。盘状蛋白结构域受体(DDRs),包... 肺癌由于恶性程度高、易侵袭转移、治疗效果差、预后差,仍是全球致死率最高的癌症之一,至今还没有非常有效的诊断和治疗方法,阐明肺癌的潜在发病机制对于开发新的有效诊断及预后生物标志物和疗法至关重要。盘状蛋白结构域受体(DDRs),包括DDR1和DDR2,是跨膜受体酪氨酸激酶超家族的特殊类型。DDR2的异常表达和突变已在多种癌症中报道,参与多种肿瘤生物学行为,因此DDR2是近年来的研究热点之一。本综述总结了目前对DDR2的研究进展,强调了DDR2在肺癌发生和进展中的关键作用以及靶向DDR2在肺癌中的潜在治疗价值。 展开更多
关键词 DDR2 肺癌 靶向治疗 综述
下载PDF
DDR2/Fc融合基因真核表达载体的构建及表达 被引量:2
3
作者 张燕 王保莉 +3 位作者 苏金 车红磊 于江天 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第3期197-200,共4页
目的:构建DDR2/Fc真核表达载体,使其在HEK293细胞中进行表达.方法:采用PCR技术,分别从大鼠脑组织、含人IgG1Fc全长互补DNA(cDNA)的质粒中扩增出盘状结构域受体2(DDR2)的DS区域、Fc段,以定向克隆的方法将其串联至真核表达载体pcDNA3.1(-)... 目的:构建DDR2/Fc真核表达载体,使其在HEK293细胞中进行表达.方法:采用PCR技术,分别从大鼠脑组织、含人IgG1Fc全长互补DNA(cDNA)的质粒中扩增出盘状结构域受体2(DDR2)的DS区域、Fc段,以定向克隆的方法将其串联至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,获得重组表达载体DDR2/Fc-pcDNA3.1(-);采用脂质体转染技术转染HEK293细胞;RT-PCR、免疫印迹检测融和蛋白的表达.结果:DNA测序和限制型酶切鉴定证明两段基因正确克隆至pcDNA3.1(-)的多克隆位点,细胞裂解物中检测到融合蛋白的表达,其分子质量与预期大小一致,该融合蛋白能正确表达于HEK293细胞中.结论:成功构建了DDR2/Fc融和表达载体,表达了融合蛋白. 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 FC DS区域 融合表达
下载PDF
盘状结构域受体2胞外区在酵母系统中的融合表达、纯化和功能鉴定 被引量:1
4
作者 陈健康 张伟 +3 位作者 刘楠楠 刘利兵 田菲 铁茹 《第四军医大学学报》 北大核心 2007年第14期1249-1252,共4页
目的:盘状结构域受体2(discoidin domain recep-tor2,DDR2)是一种与肿瘤细胞转移相关的蛋白酪氨酸激酶,研究DDR2在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)软骨破坏和肿瘤转移中的作用.方法:在毕赤酵母中表达DDR2胞外区片段(不含信号... 目的:盘状结构域受体2(discoidin domain recep-tor2,DDR2)是一种与肿瘤细胞转移相关的蛋白酪氨酸激酶,研究DDR2在类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)软骨破坏和肿瘤转移中的作用.方法:在毕赤酵母中表达DDR2胞外区片段(不含信号肽和跨膜区,命名为DR),并将所表达的蛋白进行纯化和功能鉴定,以备将来用作DDR2的特异性阻断剂.结果:获得了两株较高表达His-DR融合蛋白的毕赤酵母克隆;其表达的蛋白质中可溶性部分约占全部融合蛋白的18%;经Ni-NTA(nitric-tri-acetic acid)柱纯化后,获得了纯度约90%以上的可溶性His-DR融合蛋白;竞争结合抑制实验显示,His-DR具有阻断和细胞表面天然DDR2受体结合的功能.结论:所表达的融合蛋白His-DR具有抑制天然DDR2功能的作用. 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 胞外区 基因表达 阻断剂
下载PDF
绿色荧光蛋白与鼠盘状结构域受体2融合基因的构建与表达 被引量:1
5
作者 周洁 刘新平 张远强 《第四军医大学学报》 北大核心 2005年第6期481-483,共3页
目的: 构建以绿色荧光蛋白 (GFP)为报告基因的重组表达质粒DDR2 /pEGFP N3并分析该融合基因在活细胞中的表达.方法: 利用反转录PCR扩增鼠盘状结构域受体2(DDR2)cDNA,并重组于pEGFP N3载体.脂质体体外瞬时转染培养的COS 7细胞,RT PCR和We... 目的: 构建以绿色荧光蛋白 (GFP)为报告基因的重组表达质粒DDR2 /pEGFP N3并分析该融合基因在活细胞中的表达.方法: 利用反转录PCR扩增鼠盘状结构域受体2(DDR2)cDNA,并重组于pEGFP N3载体.脂质体体外瞬时转染培养的COS 7细胞,RT PCR和WesternBlot分析该融合基因的表达.结果: 从NIH3T3细胞中克隆到DDR2基因的cDNA,并成功构建DDR2 EGFP融合表达载体.以该质粒转染细胞 48h后,RT PCR和WesternBlot分析表明该融合基因能够在COS 7细胞中正确表达.结论: DDR2 /pEGFP N3融合基因真核表达载体构建成功.该融合蛋白具有DDR2和EGFP双重特性,为进一步研究DDR2的功能提供了工具. 展开更多
关键词 融合基因 盘状结构域受体2 EGFP 表达 RT-PCR COS-7细胞 体外 绿色荧光蛋白(GFP) DNA 活细胞
下载PDF
盘状结构域受体1与基质金属蛋白酶2在唾液腺腺样囊性癌中的表达及意义 被引量:2
6
作者 王智明 叶明 +5 位作者 张雨霏 杨东升 马颖 周卓 张力平 刘维贤 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2015年第3期326-330,共5页
目的:检测唾液腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)组织中盘状结构域受体1(discoidin domain receptor 1,DDR1)与基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达,探讨两者在SACC中的表达意义及相关... 目的:检测唾液腺腺样囊性癌(salivary gland adenoid cystic carcinoma,SACC)组织中盘状结构域受体1(discoidin domain receptor 1,DDR1)与基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP2)的表达,探讨两者在SACC中的表达意义及相关性。方法:应用SP免疫组织化学方法检测54例SACC标本和30例正常唾液腺组织中DDR1与MMP2的表达情况。采用SPSS13.0软件包对数据进行统计学分析。结果:DDR1在SACC中的阳性表达率为87.0%,显著高于正常唾液腺组织(10%,P<0.01)。DDR1的高表达与SACC的神经侵袭、淋巴结转移相关(P<0.05)。MMP2在SACC中的阳性表达率为68.5%,显著高于正常唾液腺组织(13.3%,P<0.01)。经Spearman等级相关分析,DDR1与MMP2呈现显著正相关(r=0.332,P<0.05)。结论:在SACC中,DDR1与MMP2共同高表达,与SACC的发生与发展相关。 展开更多
关键词 盘状结构域受体1 基质金属蛋白酶2 唾液腺 腺样囊性癌
下载PDF
DDR2血管内皮细胞条件性基因敲除小鼠的复制、鉴定及表型分析 被引量:1
7
作者 王婷婷 卜歆 +5 位作者 李金奎 王娜 邱意开 岳振生 苏金 张淑雅 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第21期1-6,共6页
目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚... 目的应用Cre/LoxP系统复制盘状结构域受体2(DDR2)在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),并分析其在肝脏中的表型。方法复制DDR2打靶载体,通过电转入小鼠胚胎干细胞(ES细胞)打靶,通过聚合酶链反应(PCR)+脱氧核糖核酸(DNA)印迹法鉴定筛选阳性ES细胞,将阳性的ES细胞注射到C57BL/6N小鼠囊胚,移植入受体小鼠子宫以获得嵌合体小鼠。将得到的嵌合体小鼠与C57BL/6N小鼠回交得到F0杂合子,F0代杂合小鼠自交筛选获得F1代DDR2flox/flox小鼠,该小鼠与Cdh5-Cre/ERT2小鼠杂交,通过子代自交获得DDR2在血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2)小鼠。他莫昔芬诱导血管内皮细胞上DDR2基因敲除,对小鼠进行表型分析。结果获得DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠DDR2i EC(DDR2flox/flox,Cdh5-Cre/ERT2),DDR2i EC小鼠出生时符合孟德尔遗传定律,发育良好,他莫昔芬诱导敲除小鼠血管内皮细胞DDR2基因表达后,小鼠出现自发性肝纤维化及黄体血管新生障碍等表型。结论成功复制DDR2血管内皮细胞可诱导性条件性基因敲除小鼠模型。血管内皮细胞DDR2缺失能导致自发性肝纤维化。 展开更多
关键词 肝纤维化 胶原盘状结构域受体2 血管内皮细胞 基因敲除技术 Cre/LoxP
下载PDF
DDR2与MMP2在酒精性肝病肝窦毛细血管化中的协同表达 被引量:3
8
作者 阎明 刘慧敏 +2 位作者 张喜红 张玉泉 罗争 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期1515-1520,共6页
目的:探讨盘状区域受体2(DDR2)与基质金属蛋白酶(MMP2)在酒精性肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化病理进程中的表达及可能发挥的作用。方法:橄榄油拌平衡饲料喂养大鼠的基础上给予60%(V/V)白酒胃内灌注制备酒精性肝纤维化模型,分别于4周、8周... 目的:探讨盘状区域受体2(DDR2)与基质金属蛋白酶(MMP2)在酒精性肝纤维化大鼠肝窦毛细血管化病理进程中的表达及可能发挥的作用。方法:橄榄油拌平衡饲料喂养大鼠的基础上给予60%(V/V)白酒胃内灌注制备酒精性肝纤维化模型,分别于4周、8周、12周和16周末观察肝组织网状纤维染色、免疫组化染色(Ⅰ、Ⅳ型胶原及层黏连蛋白),荧光定量-PCR和Western blotting检测肝组织DDR2及MMP2基因和蛋白表达并与肝窦毛细血管化各项评价指标进行相关性分析。结果:大鼠白酒灌胃4周出现肝脏脂肪变性,随灌胃时间延长逐渐加重为肝脏坏死、炎症及纤维化。酒精性肝病模型组大鼠DDR2 mRNA和蛋白表达量显著高于对照组,且随造模时间延长表达增加(P<0.01)。MMP2 mRNA和蛋白表达自造模4周开始升高,于12周达峰值,造模16周下降,各模型组MMP2 mRNA和蛋白表达较正常对照组明显升高(P<0.05)。相关性分析显示DDR2与MMP2、网状纤维、Ⅰ、Ⅳ型胶原及层黏连蛋白表达均呈显著正相关。结论:在酒精性肝病肝窦毛细血管化病程中DDR2表达呈时间依赖性,其可能通过效应蛋白MMP2在肝窦毛细血管化的发生和进展中发挥重要作用。 展开更多
关键词 肝硬化 酒精性 肝窦毛细血管化 受体 盘状区域 基质金属蛋白酶2
下载PDF
类风湿性关节炎滑膜细胞中DDR2相互作用蛋白的筛选 被引量:1
9
作者 赵薇 董晓薇 +2 位作者 舒震 徐玉金 张伟 《宁夏医科大学学报》 2015年第9期1000-1003,1012,封2,共6页
目的筛选盘状结构域受体(discoidin domain receptors 2,DDR2)的相互作用蛋白。方法原代培养类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)。用人DDR2过表达腺病毒(Ad5-DDR2)感染FLSs,... 目的筛选盘状结构域受体(discoidin domain receptors 2,DDR2)的相互作用蛋白。方法原代培养类风湿性关节炎(rheumatoid arthritis,RA)成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLSs)。用人DDR2过表达腺病毒(Ad5-DDR2)感染FLSs,上调DDR2的表达。采用Ⅱ型胶原诱导的方法活化FLSs细胞膜上的DDR2;提取细胞总蛋白,通过小鼠来源的DDR2抗体免疫沉淀FLSs中的DDR2蛋白复合物;双向电泳分离抗原抗体复合物,质谱分析确认DDR2活化前后的差异蛋白。结果 Ad5-DDR2感染RA FLSs后,Westernblot结果显示细胞中DDR2表达水平显著上调。双向电泳分离DDR2免疫沉淀复合物,考马斯亮蓝染色显示胶原刺激前后,DDR2免疫复合物存在7个差异蛋白点。质谱分析及生物信息学分析显示,DDR2相互作用蛋白主要包括波形蛋白(vimentin)、膜脂联蛋白A2(Annexin A2)、免疫球蛋白和肌动蛋白等。结论筛选获得了两个可能与RA病程相关的DDR2相互作用蛋白——波形蛋白和膜脂联蛋白2,为DDR2-MMPs通路作用机制的阐明奠定了基础。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 滑膜成纤维细胞 盘状结构域受体2 相互作用蛋白
下载PDF
类风湿性关节炎成纤维样滑膜(FLS)细胞中DDR2相互作用分子的筛选鉴定及其对FLS细胞侵袭能力的影响 被引量:1
10
作者 刘楠楠 赵薇 +4 位作者 穆楠 田菲 薛晓畅 颜真 张伟 《生物技术通讯》 CAS 2015年第3期305-310,共6页
目的:在类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜(FLS)细胞中筛选并鉴定盘状结构域受体2(DDR2)的相互作用蛋白,并研究其对FLS细胞侵袭能力的影响。方法:首先利用免疫沉淀结合SDS-PAGE分离鉴定DDR2互作蛋白波形蛋白,进而采用免疫沉淀和激光共聚... 目的:在类风湿性关节炎(RA)成纤维样滑膜(FLS)细胞中筛选并鉴定盘状结构域受体2(DDR2)的相互作用蛋白,并研究其对FLS细胞侵袭能力的影响。方法:首先利用免疫沉淀结合SDS-PAGE分离鉴定DDR2互作蛋白波形蛋白,进而采用免疫沉淀和激光共聚焦实验,进一步验证波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,最后采用Transwell实验考察波形蛋白对RA FLS细胞侵袭能力的影响。结果:Ⅱ型胶原刺激引起RA FLS细胞中DDR2的磷酸化水平升高,DDR2被活化,活化前后共有8个DDR2相互作用蛋白发生变化,经质谱分析,其中变化最大的是波形蛋白和膜联蛋白A2;在HEK293T细胞中,免疫共沉淀结果显示Fc DDR2与波形蛋白存在相互作用;激光共聚焦结果显示在RA FLS细胞中,DDR2和波形蛋白存在共定位;下调RA FLS细胞中波形蛋白的表达后,细胞的侵袭能力较对照组显著下降。结论:波形蛋白是DDR2的相互作用蛋白,Ⅱ型胶原可引起RA FLS细胞的DDR2磷酸化水平升高,并通过波形蛋白促进RA FLS细胞的侵袭。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 盘状结构域受体2 波形蛋白 成纤维样滑膜细胞
下载PDF
促炎分子盘状结构域受体2在泛素化修饰过程中与泛素分子的偶联方式
11
作者 于江天 卜歆 +2 位作者 赵虎 李霞 苏金 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1077-1080,共4页
目的研究泛素分子中哪些位点的赖氨酸(Lys)残基参与了具有促炎效应的膜受体盘状结构域受体2(DDR2)的多聚泛素化修饰。方法将DDR2、Cbl-b及泛素分子不同位点Lys的突变体共转染HEK293T细胞,以胶原蛋白刺激细胞诱导DDR2发生活化。利用免疫... 目的研究泛素分子中哪些位点的赖氨酸(Lys)残基参与了具有促炎效应的膜受体盘状结构域受体2(DDR2)的多聚泛素化修饰。方法将DDR2、Cbl-b及泛素分子不同位点Lys的突变体共转染HEK293T细胞,以胶原蛋白刺激细胞诱导DDR2发生活化。利用免疫沉淀方法分离细胞中的DDR2,Western blot法检测DDR2与不同泛素分子的偶联情况。结果仅保留27位Lys的泛素分子偶联到DDR2分子上的能力与野生型泛素分子相接近,保留33位Lys的泛素分子有较微弱与DDR2偶联的能力。27位Lys突变可使泛素分子彻底丧失与DDR2相偶联的能力,而33位Lys突变使得泛素分子偶联DDR2的能力部分丧失。结论 Cbl-b介导的DDR2的多泛素化修饰主要是通过泛素分子的Lys27偶联的,Lys33可能也部分参与了DDR2的泛素化修饰。 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 泛素化 泛素 泛素连接酶 CBL-B
下载PDF
DDR1a在结肠癌细胞株中的表达及与基质金属蛋白酶2,9的关系 被引量:10
12
作者 何苗 傅仲学 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期161-163,共3页
目的:探讨结肠癌细胞中盘状结构域受体酪氨酸激酶1(Discoidin domain receptor tyrosine kinases1a,DDR1a)的表达和基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase9,MMP9)的活性及其相... 目的:探讨结肠癌细胞中盘状结构域受体酪氨酸激酶1(Discoidin domain receptor tyrosine kinases1a,DDR1a)的表达和基质金属蛋白酶2(Matrix metalloproteinase 2,MMP2)、基质金属蛋白酶9(Matrix metalloproteinase9,MMP9)的活性及其相互的关系。方法:用Westernblot检测结肠癌细胞株和人正常结肠平滑肌细胞株中DDR1a表达,明胶酶谱法检测各细胞株中的MMP2,MMP9的活性。结果:侵袭能力强的结肠癌细胞LOVO中,DDR1a呈显著高表达(P<0.01)及MMP2、MMP9呈显著高活性(P<0.01),此外在所测细胞中DDR1a表达与MMP2及MMP9活性呈显著正相关(P<0.05)。结论:本研究提示DDR1a可作为反映结肠癌细胞侵袭力生物学指标之一。 展开更多
关键词 盘状结构域受体酪氨酸激酶1a 结肠癌细胞 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9
下载PDF
盘状结构域受体2与EGFP融合载体的构建及细胞中的活性分析
13
作者 于江天 苏金 +1 位作者 任婷婷 刘新平 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第20期1825-1828,共4页
目的:寻找使盘状结构域受体2(DDR2)在细胞内的表达情况易于检测并能动态追踪其蛋白表达分布的途径方法:采用PCR技术扩增获得DDR2编码区无终止码序列通过限制性酶切将DDR2片段亚克隆入pEGFP-N3载体中,转染293T细胞后通过倒置显微镜观察... 目的:寻找使盘状结构域受体2(DDR2)在细胞内的表达情况易于检测并能动态追踪其蛋白表达分布的途径方法:采用PCR技术扩增获得DDR2编码区无终止码序列通过限制性酶切将DDR2片段亚克隆入pEGFP-N3载体中,转染293T细胞后通过倒置显微镜观察绿色荧光蛋白的表达,并用免疫印迹技术检测融合载体的表达及胶原刺激后活化状况.结果:成功构建了DDR2/EGFP融合表达载体,进一步的分析也证明此融合表达载体能在细胞中正确表达并可以被配体所激活.结论:DDR2/EGFP的成功构建及可进一步检测磷酸化,为深入研究DDR2的功能奠定了基础. 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 融合载体 EGFP 磷酰化
下载PDF
Ⅰ型胶原对缺氧状态下RPE细胞DDR2和HIF-1_α及VEGF表达的影响 被引量:1
14
作者 张煜 朱洁 +1 位作者 储昭节 王雨生 《国际眼科杂志》 CAS 2012年第10期1830-1835,共6页
目的:观察缺氧状态下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中盘状结构域受体2(discoidindomain receptor2,DDR2)的表达,观察Ⅰ型胶原缺氧刺激下RPE细胞中DDR2,缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α... 目的:观察缺氧状态下人视网膜色素上皮(retinal pigment epithelium,RPE)细胞中盘状结构域受体2(discoidindomain receptor2,DDR2)的表达,观察Ⅰ型胶原缺氧刺激下RPE细胞中DDR2,缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达,探讨Ⅰ型胶原和DDR2在脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)发生中的作用。方法:对照实验研究。将体外培养的人RPE细胞置于含终浓度为200μmol/L CoCl2的培养液中培养以建立RPE细胞化学缺氧模型。在缺氧后即刻(即常氧状态下)、2,6,12和24h终止缺氧,用免疫荧光、逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)和免疫蛋白印迹法(Western blotting)检测RPE细胞中DDR2的表达。缺氧条件下以Ⅰ型胶原(10μg/mL,50℃孵箱内孵育)刺激,在刺激后即刻(即常氧状态下)、2,6,12,24h终止缺氧,用RT-PCR和Western blotting检测RPE细胞中DDR2和HIF-1α的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法观察RPE细胞培养上清中VEGF的表达。结果:随着缺氧时间延长,RPE细胞中DDR2mRNA和蛋白表达降低。在缺氧状态下Ⅰ型胶原仍可以随时间迁移使得DDR2mRNA和蛋白表达增加,激活DDR2。缺氧胶原刺激组相对于缺氧组HIF-1αmRNA和蛋白表达减少,VEGF蛋白表达减少。结论:缺氧条件下,RPE细胞中DDR2表达随时间推移逐渐降低。Ⅰ型胶原仍可以随时间迁移激活DDR2,缺氧胶原刺激可以抑制缺氧诱导的RPE细胞HIF-1α和VEGF表达上调。 展开更多
关键词 胶原 盘状结构域受体2 缺氧 视网膜色素上皮细胞 缺氧诱导因子-1α 血管内皮生长因子 脉络膜新生血管
下载PDF
miR-198通过调控盘状结构域受体2影响肺癌细胞放疗抵抗的分子机制 被引量:2
15
作者 田映国 金勇 +7 位作者 陈丽 陈洪明 粟芙蓉 何裕 许琴 蒋成英 田雨 万小亚 《中国医药生物技术》 2019年第5期430-435,共6页
目的旨在探讨 miR-198 通过调控盘状结构域受体 2(DDR2)影响肺癌细胞放疗抵抗的分子机制。方法培养人正常胚肺细胞与肺癌细胞,通过克隆形成实验比较各种细胞对放疗的敏感性。双荧光素酶报告基因实验检测 DDR2 与 miR-198 的关系。RT-PCR... 目的旨在探讨 miR-198 通过调控盘状结构域受体 2(DDR2)影响肺癌细胞放疗抵抗的分子机制。方法培养人正常胚肺细胞与肺癌细胞,通过克隆形成实验比较各种细胞对放疗的敏感性。双荧光素酶报告基因实验检测 DDR2 与 miR-198 的关系。RT-PCR 和 Western blot 实验检测相关基因的表达水平。Transwell 实验检测细胞迁移能力。结果人肺癌细胞株 A549 对放疗最不敏感,放疗抵抗细胞株 A549-R 中 miR-198 表达显著低于其他细胞且 DDR2 表达显著高于其他细胞。DDR2 是 miR-198 的直接靶基因,过表达 miR-198 显著抑制 A549-R 细胞中 DDR2 蛋白的表达水平,增强细胞对放疗的敏感性,同时显著抑制了细胞的迁移能力。结论 miR-198 通过直接靶向 DDR2 调控肺癌细胞对放疗的抵抗作用。 展开更多
关键词 miR-198 盘状结构域受体 2 肺癌细胞 放疗抵抗
下载PDF
全身免疫炎症指数及酪氨酸激酶2水平预测脑胶质瘤术后患者预后的临床价值 被引量:2
16
作者 朱奕儒 白西民 +2 位作者 姚胜 冯毅 鲍刚 《国际检验医学杂志》 CAS 2021年第16期1958-1960,1965,共4页
目的探讨血清全身免疫炎症指数(SII)、酪氨酸激酶2(DDR2)水平预测脑胶质瘤术后患者预后的临床价值。方法选取2015年3月至2017年10月在该院进行脑胶质瘤术的73例术后患者作为研究组,另选取同期54例健康者作为对照组,分析两组及研究组不... 目的探讨血清全身免疫炎症指数(SII)、酪氨酸激酶2(DDR2)水平预测脑胶质瘤术后患者预后的临床价值。方法选取2015年3月至2017年10月在该院进行脑胶质瘤术的73例术后患者作为研究组,另选取同期54例健康者作为对照组,分析两组及研究组不同临床特点及预后情况的患者血清SII、DDR2水平差异。结果研究组患者血清SII、DDR2水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);世界卫生组织脑肿瘤分级Ⅲ~Ⅳ级患者血清SII、DDR2水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ级患者,差异均有统计学意义(P<0.05);73例研究组患者随访3年,存活率为47.95%(35/73);生存组患者血清SII、DDR2水平均低于死亡组,差异均有统计学意义(P<0.05);血清SII、DDR2水平与预后情况均呈正相关(P<0.05)。结论血清SII、DDR2水平可预测脑胶质瘤术后患者预后状况,患者预后越差,血清SII、DDR2水平越高。 展开更多
关键词 全身免疫炎症指数 酪氨酸激酶2 脑胶质瘤 预后
下载PDF
miR-122-5p对类风湿关节炎滑膜细胞增殖与凋亡的影响及其机制 被引量:1
17
作者 郭占非 吴洁 +3 位作者 杨学华 许振丹 范文强 高晓 《青岛大学学报(医学版)》 2022年第2期289-293,共5页
目的 研究miR-122-5p对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测正常关节滑膜细胞、RA滑膜细胞中miR-122-5p以及盘状结构域受体激酶(DDR2)的表达。实验分为阴性对照(miR... 目的 研究miR-122-5p对类风湿关节炎(RA)滑膜细胞增殖、凋亡的影响及其机制。方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)分别检测正常关节滑膜细胞、RA滑膜细胞中miR-122-5p以及盘状结构域受体激酶(DDR2)的表达。实验分为阴性对照(miR-NC)组(转染mimic NC序列)、miR-122-5p寡核苷酸模拟物(miR-122-5p)组(转染miR-122-5p模拟物mimics)、miR-122-5p特异性寡核苷酸抑制剂阴性对照(anti-miR-NC)组、miR-122-5p特异性寡核苷酸抑制剂(anti-miR-122-5p)组、miR-122-5p+pcDNA组(共转染miR-122-5p mimics和空载体(pcDNA))、miR-122-5p+pcDNA-DDR2组(共转染miR-122-5p mimics和DDR2过表达载体(pcDNA-DDR2)),用脂质体法转染至RA滑膜细胞。采用Western blot方法检测细胞中DDR2、P21和Survival的蛋白表达,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞中miR-122-5p与DDR2的结合力。结果 与正常滑膜细胞相比较,RA滑膜细胞中miR-122-5p的表达显著降低,DDR2的表达显著升高(t=27.714~48.853,P<0.001)。过表达miR-122-5p可抑制RA滑膜细胞增殖,促进其凋亡(t=16.716~121.500,P<0.001)。miR-122-5p可抑制野生型DDR2细胞的荧光活性。过表达DDR2可以逆转miR-122-5p对RA滑膜细胞的增殖抑制和凋亡促进作用(t=106.335~327.990,P<0.001)。结论 miR-122-5p可抑制RA滑膜细胞的增殖,促进其凋亡,其机制可能与靶向DDR2有关。 展开更多
关键词 关节炎 类风湿 微RNAS 盘状结构域受体2 细胞增殖 细胞凋亡
下载PDF
鼠盘状结构域受体真核表达载体的构建与表达
18
作者 周洁 刘新平 +1 位作者 贺小舟 张远强 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期599-602,共4页
目的分别构建DDR2的野生型(FLDDR2)、嵌和体(FcDDR2)和截短体(ttDDR2)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞表达,为进一步研究DDR2与类风湿性关节炎发病机制的关系奠定基础。方法FLDDR2和ttDDR2通过RTPCR的方法获得,测序正确后亚克隆入pCDNA... 目的分别构建DDR2的野生型(FLDDR2)、嵌和体(FcDDR2)和截短体(ttDDR2)的真核表达载体,并在哺乳动物细胞表达,为进一步研究DDR2与类风湿性关节炎发病机制的关系奠定基础。方法FLDDR2和ttDDR2通过RTPCR的方法获得,测序正确后亚克隆入pCDNA3.1(+)。FcDDR2是利用人IgG1的Fc段替代部分胞浆区,测序正确后亚克隆入pMKITNeo。重组产物经脂质体2000介导瞬时转入COS7细胞,48h后收取蛋白,分别利用蛋白印迹法和免疫沉淀法检测重组产物的表达。转入重组质粒的细胞经胶原刺激3h后收取蛋白,利用免疫印迹和免疫沉淀法检测磷酸化水平的变化。结果所构建的三种真核表达载体均可在COS7细胞中正确表达。将ttDDR2和FLDDR2共转染COS7细胞并给予胶原刺激后FLDDR2的磷酸化水平有所下降,而FcDDR2在无胶原刺激时也可自身活化,其程度与FLDDR2经胶原刺激后的活化程度相仿。结论成功构建了FLDDR2、ttDDR2和FcDDR2三种真核表达载体,其中FcDDR2可以作为一种激活剂,而ttDDR2在一定程度上具有负性竞争的作用。 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 类风湿性关节炎
下载PDF
盘状结构域受体2在肿瘤微环境中的作用研究进展
19
作者 李倩倩 李小丽 +4 位作者 王变丽 窦文杉 张雯 程龙 张德奎 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2023年第10期773-779,共7页
盘状结构域受体2(DDR2)是一种被胶原纤维激活的受体酪氨酸激酶(RTK),近年来研究发现,DDR2在多种肿瘤及其宿主肿瘤环境细胞中表达升高并且能够影响肿瘤的转移。肿瘤微环境(TME)作为肿瘤赖以生存的环境,在肿瘤的发生及进展过程中发挥着重... 盘状结构域受体2(DDR2)是一种被胶原纤维激活的受体酪氨酸激酶(RTK),近年来研究发现,DDR2在多种肿瘤及其宿主肿瘤环境细胞中表达升高并且能够影响肿瘤的转移。肿瘤微环境(TME)作为肿瘤赖以生存的环境,在肿瘤的发生及进展过程中发挥着重要的作用。研究表明,DDR2通过与TME中的细胞及非细胞成分相互作用促进肿瘤的生长、增殖、侵袭及转移。全文对DDR2在TME中的作用进行综述,以探讨DDR2作为肿瘤基因治疗这一潜在治疗靶点的应用前景。 展开更多
关键词 盘状结构域受体2 肿瘤微环境 肿瘤
原文传递
DDR1促进胰腺癌细胞AsPC-1的迁移及侵袭能力 被引量:4
20
作者 杨佳纯 张毅 +1 位作者 曹佳 徐雷鸣 《海南医学》 CAS 2016年第2期173-176,共4页
目的探讨盘状结构域受体1(DDR1)对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法利用q RT-PCR检测DDR1在胰腺癌旁组织及癌组织中的表达水平。通过脂质体转染DDR1表达质粒至胰腺癌细胞As PC-1中,应用Western blot验证其转染效果。通过划痕实验及... 目的探讨盘状结构域受体1(DDR1)对胰腺癌细胞迁移及侵袭能力的影响。方法利用q RT-PCR检测DDR1在胰腺癌旁组织及癌组织中的表达水平。通过脂质体转染DDR1表达质粒至胰腺癌细胞As PC-1中,应用Western blot验证其转染效果。通过划痕实验及Transwell法检测转染DDR1表达质粒后细胞迁移及侵袭能力的变化情况。Western blot检测转染后基质金属蛋白酶2(MMP2)和基质金属蛋白酶9(MMP9)的表达水平。结果与癌旁组织比较,胰腺癌组织的DDR1 m RNA表达水平显著升高(P<0.05)。转染质粒后,As PC-1细胞DDR1蛋白表达量显著升高(P<0.05)。应用划痕试验及Transwell试验结果显示,与对照组比较,As PC-1/DDR1迁移力上调(51.11±11.51)%,侵袭力上调(77.25±10.64)%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。过表达DDR1后,As PC-1细胞中MMP2和MMP9表达水平显著升高(P<0.05)。结论 DDR1通过改变MMP2和MMP9的表达水平,促进胰腺癌细胞的迁移及侵袭,有望成为靶向治疗的新方向。 展开更多
关键词 盘状结构域受体1 胰腺癌 迁移 侵袭 基质金属蛋白酶2 基质金属蛋白酶9
下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部