应用DispaseⅡ与淋巴细胞分层液获取高纯度基底细胞

目的 尝试应用DispaseⅡ分离酶获得含有完整基底细胞的表皮 ,再经淋巴细胞分层液收集活性强、生长快的基底细胞。探讨这样的细胞能否加快生长 ,缩短培养周期。方法 取植皮术后所剩中厚皮 ,经Dis paseⅡ处理后 ,用镊子分开表皮与真皮 ,表皮经胰酶进一步消化后 ,把细胞悬液通过淋巴细胞分层液将收集到的细胞作为实验组。以Tr法分离的表皮细胞作为对照组 ,两组间就细胞数、生长速度 ,克隆形成率与成膜时间进行比较。结果 所得数据经统计学处理显示 :实验组细胞的生长速度、克隆形成率与成膜时间比对照组明显加快。两组间有显著差异 (P <0 0 0 1)。结论 应用DispaseⅡ与淋巴细胞分层液能获得纯度高、活性强、增殖快的基底细胞。可以缩短培养周期 ,具有重要的临床意义。

猪真皮脱细胞基质制备方法的实验研究

目的研究猪真皮脱细胞基质的制备方法。方法实验组使用0.125%胰蛋白酶和2.5 U/mL DispaseⅡ溶液,对照组使用PBS溶液,在4℃下,经过24 h脱去猪真皮细胞,配合0.5%SDS对脱细胞后基质振荡洗涤3 h和0.5%Triton X-100振荡洗涤24 h清除细胞碎片制备出猪真皮脱细胞基质。结果实验组制备的4种基质及对照组制备的2种基质进行病理切片,HE染色,显微镜下观察脱细胞效果。结论实验组制备的4种基质均符合脱细胞技术要求。