不同国家(地区)穿心莲的质量评价

目的:以不同国家(地区)穿心莲为研究对象,通过指纹图谱、化学模式识别和多成分含量测定的方法分析不同产地穿心莲质量。方法:建立26批穿心莲药材指纹图谱,进行相似度评价分析,采用化学模式识别方法对26批穿心莲药材进行主成分分析(PCA)和正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA),寻找各产地穿心莲的差异性成分,并进行含量测定。结果:穿心莲指纹图谱有15个共有峰,除S2、S4和S15外,其余23批相似度均大于0.8;PCA将26批穿心莲药材按产地划分为2类,OPLS-DA进一步筛选出3个差异性标志物,分别是穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯;含量测定结果显示,国外采集的穿心莲中二萜内酯成分普遍高于国内样品。结论:建立的指纹图谱方法结合化学模式识别能有效分析不同产地穿心莲药材质量的差异性,且国内外不同产地穿心莲中二萜内酯含量具有明显差异,为穿心莲药材质量及种植提供参考。

穿心莲二萜内酯类化合物的合成及抗肿瘤构效关系研究

目的合成穿心莲二萜内酯类化合物,并进行抗肿瘤活性研究。方法以穿心莲内酯为底物合成14-去氧-11,12-二去氢穿心莲内酯、14-去氧穿心莲内酯、异穿心莲内酯和穿心莲酸等穿心莲二萜内酯类化合物。以人白血病HL-60为体外模型,小鼠H22肝癌皮下移植肿瘤为体内模型观察其抗肿瘤活性,同时观察对小鼠迟发性变态反应及碳粒廓清功能的影响。结果目标物结构经红外、质谱、核磁共振氢谱确证。体外实验,异穿心莲内酯和穿心莲内酯对HL-60细胞的IC50分别为7.15和28.34μmol.L-1,其余化合物均大于50μmol.L-1;体内实验,筛选剂量为100mg.kg-1时,穿心莲内酯和异穿心莲内酯有明显的抗肿瘤活性,抑制率分别为64.4%和61.2%,其余化合物抗肿瘤活性不明显;相同剂量下,穿心莲内酯,穿心莲酸对迟发性变态反应有促进作用,穿心莲内酯,穿心莲酸,14-去氧穿心莲内酯,14-去氧-11,12-二去氢穿心莲内酯能降低小鼠碳粒廓清指数,而异穿心莲内酯对迟发性变态反应和炭粒廓清指数均无影响。结论初步生物活性实验表明,穿心莲二萜内酯类化合物的内酯环是抗肿瘤的必须活性基团;该类化合物的抗肿瘤作用可能与内酯环部分(包括C11和C12)双键的个数及位置和14-位羟基均有一定关系,具有环外12,13-位双键和14-位羟基的抗肿瘤活性较强;异穿心莲内酯的四氢呋喃环有增强抗肿瘤活性之作用。异穿心莲内酯有非常显著的抗肿瘤活性,且对小鼠免疫功能无影响,提示它可能是一类有发展前景的抗肿瘤药物。

穿心莲二萜内酯类成分的高效薄层色谱指纹图谱研究

目的:建立穿心莲二萜内酯类成分的高效薄层荧光色谱指纹图谱,并对不同种植基地穿心莲、不同部位及市售饮片等进行分析比较。方法:应用硅胶GF254高效预制薄层板(20 cm×10 cm),以氯仿-甲苯-甲醇(80∶10∶15)为展开剂,于相对湿度42%左右展开,5%硫酸乙醇溶液喷雾显色,105℃加热至斑点显色清晰,置紫外光灯(366 nm)下检视。将所得薄层荧光色谱指纹图谱经指纹图谱系统解决方案软件(CHROMA 1.5)生成共有模式。结果:穿心莲二萜内酯类成分指纹图谱由9个色谱峰(或特征荧光条斑)组成,并指认了其中的穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯及新穿心莲内酯3个峰。51批不同穿心莲药材样品的HPTLC考察结果显示,不同种植基地、不同商品穿心莲药材以及穿心莲不同部位等在二萜内酯类成分方面区别较大;干燥处理对穿心莲内酯和穿心莲总内酯含量变化的影响差别显著。结论:该方法简便、快速,可有效地对穿心莲药材进行鉴别及质量评价。

穿心莲二萜内酯有效部位的化学成分研究

目的对穿心莲二萜内酯有效部位的化学成分进行研究;方法利用硅胶柱层析,制备薄层色谱进行分离纯化,通过理化性质结合波谱方法鉴定化合物结构;结果穿心莲二萜内酯有效部位中分离并鉴定了5个主要化合物,分别为:穿心莲内酯、异穿心莲内酯、新穿心莲内酯、14去氧穿心莲内酯和脱水穿心莲内酯;结论为探讨穿心莲有效部位的物质基础提供了依据。

载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒的制备

目的制备载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒。方法酰胺反应合成透明质酸-苯硼酸后,溶剂挥发法制备纳米粒,并进行表征。MTT法检测体外细胞毒性,HPLC法测定细胞摄取效率,UPLC-MS/MS法考察药动学行为。结果所得纳米粒呈球形,形态均一,平均粒径为(112.3±0.92)nm,Zeta电位为-48.4 mV,载药量为(47.50±0.62)%,包封率为(90.1±1.60)%,30 d内稳定性良好,24 h内累积释放度为90%。与原料药相比,纳米粒对HepG2、A549、MCF-7细胞的细胞毒性显著增强(P<0.05,P<0.01),摄取量显著升高(P<0.05),并呈时间依赖性。纳米粒体内消除缓慢,延长了药物循环时间。结论载穿心莲二萜内酯有效部位的透明质酸-苯硼酸纳米粒具有较强的体外抗肿瘤活性,并可促进大鼠体内药物吸收和生物利用度。

穿心莲等级与叶茎比、浸出物及内酯类成分之间的相关性

目的研究穿心莲等级与叶茎比、浸出物及内酯类成分之间的相关性。方法测定穿心莲叶茎比、醇溶性浸出物含有量,HPLC法测定穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含有量及其总和,simca-p软件进行主成分分析及相关性分析。结果36批穿心莲分为3个等级,其中一等10批,二等11批,三等15批;穿心莲等级与叶茎比,醇溶性浸出物、穿心莲内酯、新穿心莲内酯、去氧穿心莲内酯、脱水穿心莲内酯含有量及其总和之间的相关系数分别为-0.246、-0.629、-0.694、-0.804、-0.606、-0.444、-0.886;穿心莲叶茎比与醇溶性浸出物含有量之间呈正相关性(P<0.01),与4种内酯含有量及其总和之间的相关系数分别为0.030、0.048、0.005、0.109、0.067;同一批穿心莲中4种内酯含有量随着叶茎比的增大而增加;不同批穿心莲中,叶茎比高者所含4种内酯含有量并不一定高。结论穿心莲等级与叶茎比相关性不大,与醇溶性浸出物、穿心莲内酯类含有量之间呈极显著正相关。

穿心莲二萜内酯有效部位化学成分的液质联用法鉴定及其初步药效学研究

目的：建立HPLC-DAD-ESI-MS分析鉴定穿心莲二萜内酯有效部位的主要化学成分的方法,并对其药效学进行研究。方法：Agilent SB-C18色谱柱（2.1 mm×150 mm,5μm）;流动相A为乙腈,流动相B为水,60 min梯度洗脱;流速0.4 m L·min-1;进样5μL;检测波长205 nm。柱温为25℃;采用正离子模式,m/z扫描范围50~1 000;利用2种肿瘤细胞株造活体动物模型,对有效部位进行抗肿瘤方面的初步药效学研究。结果：穿心莲二萜内酯有效部位中有5种二萜内酯类化学成分获得了良好的分离与鉴定。药效学实验表明,穿心莲二萜内酯有效部位对肿瘤有一定的抑制作用。结论：建立了一种基于HPLC-DAD-ESI-MS技术对穿心莲二萜内酯有效部位的化学成分进行快速鉴别的方法,并进行了初步药效学研究,为穿心莲二萜内酯有效部位的质量控制及体内的深入研究奠定了基础。