DL-扁桃酸的合成工艺研究

以苯乙酮为原料,和氯气发生取代反应制备得中间体二氯苯乙酮,再经过碱解和酸解合成DL-扁桃酸,收率>85%。研究了溶剂醋酸的含水量、水解碱浓度和溶剂套用次数等对合成DL-扁桃酸的影响,发现采用含水醋酸作溶剂会影响产品的纯度,但采用质量浓度90%的含水醋酸作溶剂,循环套用8次以上,收率仍可保持在83%以上;碱浓度对中间产物二氯苯乙酮的水解反应有很大的影响,高浓度碱会引起二氯苯乙酮在水解过程中聚合,合适的碱为质量浓度10%左右的NaOH溶液。

相转移催化剂催化合成DL-扁桃酸

分子结构为C8H20BrN的季铵盐四乙基溴化铵经实验证明是合成DL-扁桃酸的一种优良的相转移催化剂。研究以苯甲醛和三氯甲烷为原料，在氢氧化钠存在下，应用相转移催化法合成扁桃酸，并探讨反应条件如反应摩尔比、反应时间、催化剂用量对产率的影响。结果表明合成DL-扁桃酸的最佳反应条件为：反应温度65℃，反应时间60min，n（苯甲醛）：11（三氯甲烷）：n（四乙基溴化铵）=1：2：0．002，产品收率可达到72．41％。

dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性的研究

目的研究dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜的刺激性。方法将9只雌性小型猪按体质量随机分为空白胶组、讲．扁桃酸阴道热敏凝胶剂组和市售壬苯醇醚凝胶（N-9凝胶）组，肌肉注射苯甲酸雌二醇400μg／kg（促发情），12d后建立小型猪阴道刺激性试验模型，阴道给予5mL凝胶，每日一次，连续给药7d，在给药前和末次给药后的24h与72h，收集阴道灌流（CVL）液，流式细胞仪计数炎性细胞和中性粒细胞数目；末次给药72h后处死小型猪，取阴道组织，观察阴道黏膜组织病理学改变。结果dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞数目明显低于N-9凝胶组（P〈0．05）。小型猪阴道黏膜组织HE染色显示，dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂处理组阴道黏膜无明显上皮破损、血管充血以及炎症细胞浸润，其刺激性评分（5．10±0．47），与空白胶组（3．30±1．60）比较无显著性差异（P〉0．05），明显低于N-9凝胶组（20．50±3．50）（P〈0．05）。结论dl-扁桃酸阴道热敏凝胶剂对小型猪阴道黏膜刺激性较小。

相转移催化法合成dl-扁桃酸的研究

以季铵盐为相转移催化剂采取苯甲醛为原料合成dl-扁桃酸是一种新的合成方法。此方法反应速度快,收率高,操作简单。介绍了实验条件对合成dl-扁桃酸反应的具体影响,找到了合成试验的最佳条件。

dl-扁桃酸对人精子与阴道黏膜上皮VK2/E6E7细胞的毒性研究

目的探讨dl-扁桃酸对人阴道黏膜上皮细胞(VK2/E6E7)与精子的细胞毒性损伤。方法不同浓度的dl-扁桃酸处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪测定精子活率,扫描电子显微镜检测精子受损情况。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸和4.0 g·L?1壬苯醇醚(nonoxynol-9,N-9)处理VK2/E6E7细胞,MTT法检测细胞活性,ELISA试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)释放率,并用流式细胞法检测细胞凋亡率。结果 dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度约为1.25 g·L?1,最低有效浓度约为2.5 g·L?1。扫描电镜结果显示,dl-扁桃酸处理组精子表面结构与对照组形态相似,无明显受损特征,N-9组精子严重受损。MTT实验结果表明,1.25 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率>95%,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸组细胞存活率约为50%。1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组LDH释放量只有微量检出,远低于N-9组。流式细胞检测表明,1.25,2.5 g·L?1 dl-扁桃酸处理组中活细胞和晚期凋亡比例与对照组相近,早期凋亡细胞略少于对照组,死亡细胞稍多于对照组,N-9组大量细胞死亡。结论 dl-扁桃酸对VK2/E6E7细胞毒性远低于N-9,其对精子的抑制作用不是通过破坏精子质膜与鞭毛来实现。

dl-扁桃酸对精子质膜及顶体的完整性和线粒体膜电位的影响

目的：研究dl-扁桃酸（dl-mandelic acid）的抑精作用及其机制。方法：dl-扁桃酸0.5-10.0g·L^-1处理高活力精子20 s,计算机辅助精子分析仪（computer assistant spermanalysis,CASA）测定精子活率、精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）;流式细胞（SYBR-14/PI）检测精子质膜完整性,采用FITC标记的豌豆凝集素荧光染色观察精子顶体完整性;FITC-PSA/PI/JC-1荧光染色检测精子线粒体膜电位变化。结果：随着dl-扁桃酸浓度的升高,精子活率与精子直线运动速率（VSL）、曲线运动速率（VCL）、平均路径速率（VAP）、侧摆幅度（ALH）、精子运动向前性（STR）和精子运动直线性（LIN）显著降低,dl-扁桃酸抑制精子活率的半数有效浓度（EC50）约为1.25 g·L^-1,最低有效浓度（MEC）约为2.5 g·L^-1。流式细胞仪检测表明,dl-扁桃酸对精子质膜完整性无影响。荧光染色检测表明,dl-扁桃酸处理组精子顶体受损,精子线粒体膜电位降低。结论：dl-扁桃酸通过影响精子顶体和降低线粒体膜电位,对精子起到抑制作用。

dl-扁桃酸热敏凝胶对家兔阴道黏膜刺激性的组织病理学研究

目的运用组织病理学方法评价dl-扁桃酸热敏凝胶(MA Gel)对家兔阴道黏膜的刺激性。方法 40只雌性日本大耳兔随机分为基质对照组、MA Gel低剂量组(10 mg/ml)、中剂量组(20 mg/ml)、高剂量组(40 mg/ml)和市售壬苯醇醚凝胶(40 mg/ml, N-9 Gel)组。阴道给予凝胶2.5 ml,1次/d,连续给药10 d。末次给药72 h后处死家兔,取阴道组织,观察阴道黏膜组织病理学改变;运用原位缺口末端标记法(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling, TUNEL)检测阴道黏膜上皮细胞凋亡;运用免疫组织化学法检测阴道黏膜内增殖细胞核抗原(Proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的阳性表达。结果家兔阴道黏膜组织苏木素-伊红(HE)染色显示,MA Gel的黏膜刺激性呈剂量依赖性,高剂量组可造成黏膜上皮轻度损伤、固有层毛细血管充血和炎症细胞浸润(病理学评分4.35±1.04),与N-9 Gel组7.88±1.67相比,差异有统计学意义(P<0.05)。TUNEL检测结果显示,MA Gel 3个剂量组均出现不同数量的凋亡细胞阳性表达,分布于上皮层和黏膜固有层。与基质对照组相比,MA Gel各组的阴道黏膜细胞凋亡细胞数目差异无统计学意义(P>0.05)。MA Gel 3个剂量组黏膜上皮固有层均出现PCNA阳性表达,且表达量与扁桃酸浓度呈正相关,提示MA Gel可诱发炎症细胞轻度的活化增殖,但较N-9 Gel组为轻。结论 MA Gel对家兔阴道黏膜有轻度的刺激性,但刺激性远低于市售N-9 Gel。MA Gel安全性较好,作为阴道外用避孕新药具有潜在开发前景。

dl-扁桃酸热敏凝胶对兔阴道黏膜炎症反应的研究

目的探讨dl-扁桃酸热敏凝胶(dl-mandelic acid thermosensitive in situ gel,MA Gel)对兔阴道黏膜的刺激性及炎症反应情况。方法将40只雌兔随机分为基质对照组、MA Gel低剂量组(10 g/L)、MA Gel中剂量组(20 g/L)、MA Gel高剂量组(40 g/L)和市售壬苯醇醚凝胶(nonoxynol 9,N-9 Gel)组,每组8只,阴道给药2.5 mL,qd,连续10 d。在给药前、给药第4日以及末次给药后24 h与72 h,收集基质对照组、MA Gel高剂量组和N-9 Gel组阴道灌流(cervicovaginal lavage,CVL)液,流式细胞仪计数CVL中炎性细胞和中性粒细胞数目,并对CD45^+细胞进行分析。取阴道组织做组织病理切片,免疫组织化学检测阴道黏膜内CD45的表达。结果 MA Gel高剂量组CVL液中炎性细胞、中性粒细胞以及CD45^+细胞数目显著低于N-9 Gel组(P=0.036)。MA Gel各剂量组与基质对照组相比,阴道黏膜CD45^+表达无显著上升,主要表达在黏膜上皮层。结论 dl-扁桃酸热敏凝胶仅引起家兔阴道黏膜较轻微的炎症反应,未诱导局部炎性细胞的明显活化,安全性较好,具有研发成为阴道外用避孕药的前景。

γ-环糊精对槲皮素和扁桃酸的包结

以γ-环糊精(γ-CD)为主体分子,研究γ-CD对槲皮素和DL-扁桃酸的包结。采用液-液法获得了γ-CD-槲皮素、γ-CD-扁桃酸两个包结物,由FT-IR、1H NMR表征。结果表明,γ-CD与槲皮素、扁桃酸包结比分别为1:1和2:3。25℃下,γ-CD对槲皮素的相溶解度研究证实γ-CD对槲皮素包结比为1:1,γ-CD对槲皮素的包结常数为574 L/mol;槲皮素在γ-CD中的溶解度提高到1.33 mg/m L。γ-CD-扁桃酸包结物的比旋光度研究表明γ-CD对左、右旋体扁桃酸的包结没有选择性。