Screening of Serum Dilution and Determination of Normal Range of Antibodies against Rabies Viruses in Dog Sera

[ Objective] To screen a suitable serum dilution and determine the normal range of antibodies against rabies viruses （RV） in dog serum. [Method]A sensitive, specific and suitable serum dilution was screened. A total of 812 dog serum samples were collected from Changchun, Nanning and Uuzhou regions, and then they were diluted with above screened serum dilution and evaluated by indirect enzyme-linked immunosorbont assay （ELISA）. The positive and negative standard dog sara from the World Organization for Animal Health （OIE） were used as controls. The serum samples with different A450 were randomly selected and the anti-RV serum titers were detected by rapid fluorescent focus inhibition test （RFFIT）. According to the A450 of dog sera, the normal A450 range of negative serum and 95% confidence intervals were calculated with SPSS 10.0 software, and the regression equation of OIE standards was established. [ Result] The screened serum dilution was sensitive and specific; at least 756 negative serum samples were obtained; the normal range and 95% confidence interval of negative serum were 0.127 3 ± 0.059 8 and 0.078 1 -0.172 3, respectively; and the regression equation was A450 = 1.139 serum titer （IU） ±0.470. [ Conclusion] These results lay a foundation for thecontrolling of dog rabies endemic and the development of ELISA kits of dog antibodies against RV.

血清稀释液的筛选及犬抗狂犬病病毒血清抗体正常值范围的确定

应用间接ELISA法进行抗体检测是评价狂犬疫苗免疫效果的一种快捷有效手段。首先筛选得到一种灵敏、特异的血清稀释液;然后应用其对采集自不同地区的812份未免疫犬血清稀释并进行间接ELISA检测;以OIE标准阴、阳性犬血清为对照,随机选取不同A450范围的犬血清应用RFFIT进行检测;以RFFIT效价低于0.1 IU/ml的犬血清,计算阴性血清正常值范围和95%的可信区间,并建立标准品的回归方程。结果显示：所筛选到的血清稀释液灵敏、特异,有756份血清样品的效价低于0.1 IU/ml,犬抗狂犬病抗体阴性血清的正常值范围为0.127 3±0.059 8,95%的可信区间为0.078 1-0.172 3。应用OIE犬阳性血清标准品建立了A450和抗血清效价的回归方程：A=1.139 IU＋0.470。该试验结果为犬狂犬病防制以及犬狂犬病抗体ELISA检测试剂的研制奠定了基础。

2007年北京市丰台区犬只狂犬病病毒抗体效价调查分析

采集北京市丰台区城区和4个乡镇家养犬血清样品1 299份,采用免疫荧光中和试验法检测血清狂犬病病毒抗体效价。结果显示,被调查犬中有59.7%接种过狂犬疫苗,城区和乡镇接种率分别为75.9%和30.1%;有32.1%未接种过狂犬疫苗,城区和乡镇分别占16.1%和61.4%;有8.2%不清楚是否接种过狂犬疫苗,城区和乡镇分别占8%和8.5%。免疫犬狂犬病中和抗体效价d 0.5的占疫苗接种犬的57.1%,城区和乡镇分别为60.7%和40.6%。未免疫犬狂犬病中和抗体效价d>0的占未接种疫苗犬的27.6%,城区和乡镇分别为42.6%和20.3%。106只免疫不详犬均有狂犬病中和抗体。本次调查发现,犬群中仅有39%的犬只具有有效的狂犬病保护性抗体,疫苗接种率和狂犬病毒抗体效价城区均好于乡镇,但总体免疫水平仍不能有效控制群体中狂犬病的爆发和流行。

2006—2009年北京市丰台区犬只狂犬病病毒抗体效价调查分析

为了摸清当前社会犬只的狂犬病免疫状况,我们从2006年起连续4年对北京市丰台区城区和4个乡镇社会犬只的狂犬病病毒抗体效价进行了抽样调查。所采集的犬只血清样品共4 776份,采用免疫荧光中和试验法检测其血清狂犬病病毒抗体效价并做统计分析。结果显示,有68.1%的免疫接种犬的抗体滴度为阳性,未免疫犬有16.4%为阳性(P<0.01);在城区和乡镇间,免疫接种覆盖率分别为81.7%和27.6%(P<0.01);在大型犬和小型犬间,免疫接种率有较大差异,分别为69.5%和39.3%(P<0.01)。虽然北京市狂犬病的发生率和病死率多年来都控制在0.02/100 000以下,但从犬只免疫接种率来看,4年中任何1年的接种率都没有超过WHO规定的70%的标准,分别为55.0%、53.8%、67.4%和54.4%,提示免疫接种率较低,存在狂犬病发作的风险。调查结果还显示城区免疫阳性犬数量是乡镇的2.5倍;在疫苗的接种率和狂犬病痛毒抗体效价方面,城区也好于乡镇,说明加强农村地区犬只免疫接种率是今后狂犬病预防的重要工作内容。调查还发现,免疫过的小型犬数量是大型犬的1.68倍,究其原因,一方面是因为城区绝大多数犬都是小型犬,普遍接受免疫接种;而在乡镇,大多数犬是中大型犬,而且漏免率较高。调查结果提示:北京市应加强对农村地区犬只的免疫接种,尤其要提高对中大型犬的免疫接种率。

40032例狂犬病暴露者特点和血清抗体分析

目的了解狂犬病暴露人群的情况及接种人用狂犬病疫苗效果。方法对2015~2017年40 032例受动物致伤就诊的可疑狂犬病暴露者,分析暴露人群特点、暴露级别、暴露部位和暴露时间,并对暴露者进行一般处置和采集2 844例就诊者全程接种人用狂犬病疫苗者的血样,采用ELASA方法检测狂犬病毒抗体。结果 40 032例狂犬病暴露者中,男性20 180例,占50.41%;女性19852例,占49.59%;0~10岁儿童11 169例,占总暴露人群的27.90%;5~8月份受伤者18 101例,占总暴露人群的45.22%。伤口部位主要为上肢20 616例,占51.50%;II级暴露人群24 300例,占60.70%。所有暴露者经正确处理伤口,全程规范接种狂犬病疫苗,2 844例就诊者全程接种狂犬疫苗后14~21 d血清狂犬病毒抗体阳性率96.87%。所有接种者没有发生狂犬病。结论 5~8月份是狂犬病暴露者多发季节,暴露人群以0~10岁儿童为主,暴露部位主要为上肢。暴露后及时正确处置,能够有效防止狂犬病的发生。