鸡Ii结合Rab5a和Rab7b分子的分析

本研究旨在探明鸡恒定链(invariant chain,Ii)与内吞体转运蛋白Rab5a和Rab7b结合的结构域和在细胞内共定位的特征。首先,用PCR和基因突变技术将Ii胞浆区与跨膜区[Ii_((Cyt-Tra))]、Ii CLIP(classⅡ-associated invariant chain peptide)-三聚体区[Ii_((CLIP-TRIM))]和Ii突变体[Ii(M81-87aa)、Ii_((M91-99aa))和Ii_((M81-99aa))]分别插入pET-32a和pEGFP-C1构建相应的原核和真核重组质粒。其次,将构建的含有绿色荧光蛋白的重组质粒与实验室保存的含有红色荧光Rab5a和Rab7b的重组质粒共转染至人胚胎肾细胞系293 T,观察它们的共定位。将构建的原核重组质粒进行表达和纯化,最后用拉下法和免疫印迹检测Ii与Rab5a和Rab7b的结合域。结果表明,成功构建Ii结构域及Ii突变体的重组质粒。Ii_((Cyt-Tra))及Ii突变体均能与Rab5a和Rab7b在细胞内共定位,而Ii_((CLIP-TRIM))与空载体却不能。Ii的胞浆区和跨膜区是与Rab5a和Rab7b结合的功能结构域,而不是CLIP与三聚体区。综上所述,鸡Ii与Rab5a和Rab7b共定位和结合的区域是其胞浆区和跨膜区,而不是内质网腔区。这些结果提示Rab分子参与了Ii在胞内细胞器的转运机制,为进一步研究Ii及其载体在细胞内的转运机制和功能提供了新的途径。

中药炮制学学科研究前沿、热点及发展趋势——基于知识图谱的“中药炮制”可视化研究

目的:整理中药炮制学学科的发展脉络,揭示该学科的研究前沿及发展趋势。方法:以"Chinese Materia Medica Processing/中药炮制"为主题词,分别利用Web of Science数据库(Wo S)及中国期刊全文数据库(CNKI)进行文献检索,使用Cite SpaceⅡ及Ucinet&Netdraw等软件对所得的中英文文献数据进行知识图谱的构建。结果:分别构建出"中药炮制"中英文文献的共引文献、来源期刊、作者、关键词等的知识图谱,得出"中药炮制"中英文文献的引文文献来源、代表作者、高频关键词及研究领域等信息。结论:本学科中文文献快速发表期早于英文文献近15年,且英文文献总数远小于中文文献总数。使用科学知识图谱分析软件可理清中药炮制学科的发展脉络、揭示中药炮制学科研究前沿及未来发展趋势。

鹅坦布苏病毒囊膜蛋白结构域Ⅱ在大肠杆菌中的表达及免疫学鉴定

为了实现鹅坦布苏病毒囊膜蛋白(E蛋白)结构域Ⅱ在大肠杆菌中的表达并对其进行免疫学鉴定,根据鹅坦布苏病毒JS804株囊膜蛋白基因序列,利用人工合成法获得鹅坦布苏病毒囊膜蛋白结构域Ⅱ编码基因并引入限制性酶切位点,片段大小为507 bp。将合成的基因片段克隆入pGEX-4t-1原核表达载体中,构建重组表达载体pGEX-EII并转化至BL21(DE3)中。通过优化表达条件获得重组蛋白质并进行免疫学鉴定。结果显示,重组蛋白质分子量约为4.4×104,Western-blot和间接免疫荧光检测结果表明重组蛋白质具有良好的免疫原性。

公司创业研究知识结构与前沿演进——基于Citespace Ⅱ的知识图谱计量研究

近年来,关于公司创业的研究文献大量涌现,探索公司创业的关键文献和研究趋势,对于公司创业理论研究和实践活动具有重要意义。利用引文分析工具CiteSpace Ⅱ,通过绘制科学知识图谱,采用定量和系统的文献综述方法,对各国学者发表的公司创业文献进行梳理,探寻领域内关键文献,展示研究主题演进轨迹,并分析研究前沿的重要文献,最后对公司创业未来研究方向进行展望。

我国高校学生事务管理研究热点及其演进的可视化分析

利用CiteSpaceⅡ软件为可视化分析工具,以中国期刊网全文数据库(CNKI)核心期刊收录的1996-2011年之间的137篇题名包含"学生事务"的文献为样本,通过关键词共现频率分布和中心度大小分析了我国高校学生事务管理的研究热点并将1996-2011年分为两个阶段进行了研究热点的演进分析。相关分析均给出了对应的知识图谱,可以为我国高校学生事务研究提供有益参考。

近20年我国舆论学研究进展的知识图谱分析——基于CSSCI数据库(1994-2013)

选择CSSCI数据库中1994-2013年间发表的舆论学论文为研究对象,使用CitespaceⅡ软件进行知识图谱分析,结果发现:论文数量逐年增长,形成了若干热点研究领域,涌现出一批核心著者和研究机构,突出了新闻传播学在舆论学研究中的基础性学科地位。存在的问题是:发文量大,高水平论文少;重实践,轻理论,选材范围窄;缺少研究团队和跨机构合作;新闻传播学科以外的研究视角少;缺少经典舆论学理论假设或观点等。未来我国的舆论学研究应该重视理论创新和学术合作,多吸收其他相关学科的理论精华,为正确地解释舆论现象,加强舆论引导、监督和管理提供科学的理论依据。

国外锻炼心理学研究的科学知识图谱分析

在Web of Science数据库中,以锻炼心理学作主题词进行检索,并对所得文献数据进行科学图谱分析,梳理国外锻炼心理学研究脉络,以呈现学科研究的热点与前沿。分析表明,国外锻炼心理学在研究者群体中尚未形成研究热点;引领学科研究的团队和机构集中在英美两国的著名大学;作为一门应用性学科,锻炼心理学的重要理论基础来源于社会认知心理学,而学科研究的信效度问题成为国外研究者们的焦点议题;锻炼心理学中质性研究和青少年问题成为当前的国外研究前沿。

国内外馆际互借研究进展分析

采用文献计量法和可视化分析软件CiteSpace II对国内外馆际互借研究文献进行统计分析,包括国家分布、时间分布、研究力量(机构、作者)分布以及研究热点分布等方面,总结国内馆际互借的研究进展。结果表明,国内外馆际互借研究都形成了一批具有影响力机构和作者,研究方向也大致相同,都是以馆际互借、文献传递、资源共享等为主;国内馆际互借研究的独特热点是各地区的图书馆联盟和共享平台。

蛋白酪氨酸磷酸酶SHP-2对AngⅡ刺激的心肌成纤维细胞增殖的影响

目的:探讨含有Src同源结构域2的蛋白酪氨酸磷酸酶2(Src homology 2 domain-containing pro-tein tyrosine phosphatase 2,SHP-2)对血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)刺激的心肌成纤维细胞(cardiac fi-broblasts,CFs)增殖的作用。方法:差速贴壁法体外培养心肌成纤维细胞,以波形蛋白(vimentin)鉴定CFs纯度;MTT法检测AngⅡ作用下心肌成纤维细胞增殖率,采用重组腺病毒过表达SHP-2和SHP-2抑制剂NSC-87877分别对AngⅡ作用下的细胞增殖的影响。结果:AngⅡ对CFs增殖的促进作用有剂量依赖性,其促进细胞增殖的最高浓度为10-7mol/L;在AngⅡ的刺激下,SHP-2可以促进心肌成纤维细胞增殖,并且突变体组比野生型组增殖更明显(P<0.01)。SHP-2抑制剂NSC-87877达到50μmol/L时可以明显抑制AngⅡ刺激下的CFs增殖。结论:AngⅡ的促CFs增殖作用是通过SHP-2调控的。

DNS服务应用于小型网络教学的研究

网络教学已成为世界各国教育改革和发展的重要趋势,小型网络的DNS服务因其可以在实验室中模拟互联网DNS服务的作用,使学生从全局上理解DNS服务,在网络教学中具有切实可行的意义。该系统已经实现了互联网上DNS服务器的基本功能,可以较好地工作,并可以比较方便地进行系统扩充。

一种ASP教学环境的构建方法

动态网页技术ASP的日益普及和方便易用的强大功能,为交互式网站的开发提供了良好的支撑环境。基于Windows2000Server内置的IIS服务及IIS对ASP技术的支持,结合Windows2000Server的DNS服务对泛域名技术的支持,为教学提供了一种切实可行的ASP教学环境。

急性胰腺炎患者血清可溶性Tim-3、炎症因子及RAAS分子检测的临床意义

目的探讨不同病情急性胰腺炎(AP)患者血清可溶性Tim-3(s-Tim-3)、炎症因子及RAAS分子检测的临床意义。方法选取2016年1月—2019年1月内江市第二人民医院收治的AP患者90例,按APACHEⅡ系统评分分为轻度AP组和中重度AP组。另取同期该院健康体检者50例作为对照组。测定所有研究对象血清s-Tim-3、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素10(IL-10)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、群体反应性抗体(PRA)、血管紧张素Ⅱ受体(AngⅡ)及醛固酮(ALD)水平,采用Pearson法分析血清s-Tim-3水平、APACHEⅡ系统评分、RAAS分子及炎症因子间的相关性。结果中重度AP组血清IL-6、TNF-α表达水平较轻度AP组高(P<0.05),IL-10水平较轻度AP组低(P<0.05),轻度AP组血清较对照组高(P<0.05),对照组较中重度AP组低(P<0.05)。中重度AP组PRA、AngⅡ及ALD表达水平较轻度AP组高(P<0.05),轻度AP组较对照组高(P<0.05),对照组较中重度AP组低(P<0.05)。中重度AP组血清s-Tim-3表达水平较对照组高(P<0.05),轻度AP组较对照组高(P<0.05),对照组较中重度AP组低(P<0.05),中重度AP组较轻度AP组高(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,AP患者血清IL-6、TNF-α、PRA、AngⅡ、ALD及s-Tim-3水平与APACHEⅡ评分呈正相关(r=0.671、0.502、0.521、0.633、0.521和0.753,均P<0.05),IL-10与APACHEⅡ评分呈负相关(r=-0.567,P<0.05);AP患者血清IL-6、TNF-α、PRA、AngⅡ及ALD与s-Tim-3水平呈正相关(r=0.642、0.512、0.521、0.623和0.535,均P<0.05),IL-10与s-Tim-3水平呈负相关(r=-0.532,P<0.05)。结论AP患者血清s-Tim-3、炎症因子及RAAS分子与病情有关,且s-Tim-3与炎症因子、RAAS分子也存在相关性,检测上述指标有助于临床上AP患者病情严重程度的评估及早期治疗。

时域法及频域法在往复式压缩机抗振中的应用

介绍了往复式压缩机管道振动分析中时域法和频域法的计算原理,分析了两种方法的优缺点。最后结合实例对两种方法计算结果进行对比,分析两种方法的适用范围以及计算中需要注意的问题,为往复式压缩机管道抗振分析提供参考。

两种国产聚丙烯催化剂在NOVOLEN工艺中的应用

文章介绍了两种国产聚丙烯催化剂在神华宁夏煤业集团烯烃公司50万吨/年聚丙烯装置上的应用情况。通过试用,两种国产催化剂对反应器的温度影响较小,PG催化剂活性、三剂消耗量与进口催化剂一致;BCND-II催化剂与进口催化剂相比,活性较低,氢调敏感性相对要差,在今后的应用过程中,需要催化剂厂家进行相应的调整。

二维极性材料的理论设计

最近几年,实验上已经获得了稳定的本征二维铁磁、铁电材料。二维铁性材料由于其新奇的物理性质和在纳米器件中潜在的应用价值而广受关注。随着第一性原理计算方法的发展,从理论角度预测和设计新材料加速了对二维铁性材料的研究。文章重点介绍了课题组在二维极性材料的理论设计方面的若干工作,其中包括:1)在单层过渡金属卤化物中引入点缺陷破坏体系空间反演对称性,可以有效提高磁转变温度,实现磁电共存;2)设计了一种强磁电耦合且转变温度可达室温的二维第二类多铁材料;3)预测了由铁电模式和反铁电模式竞争导致的二维非共线本征亚铁电,研究了其新奇的Z2×Z2铁电畴壁和负压电性质。这些工作对之后的二维极性材料的理论设计和实验探索具有一定的参考价值。

人eRF3a与survivin相互作用的结构域分析

第二类肽链释放因子eRF3(eukaryotic polypeptide release factor)是一种GTPase,它促进第一类肽链释放因子eRF1的释放活性,并与细胞周期调控、细胞骨架组装、细胞凋亡和肿瘤形成等过程相关。哺乳动物细胞中eRF3有两种——eRF3a和eRF3b,分别由GSPT1和GSPT2(G1 to S phase transition 1/2)基因编码。生存素(survivin)是迄今发现的最强有力的凋亡抑制因子,具有独特的结构和复杂的功能,不仅可以抑制细胞凋亡,还参与细胞有丝分裂、血管的生成等过程。eRF3和survivin都与细胞周期和细胞凋亡的调控相关。该实验室的前期研究表明,eRF3和survivin具有相互作用关系。该研究进一步对eRF3a进行截短突变,采用酵母双杂交和pull-down两种分析方法依次验证eRF3a(1-72aa)和eRF3a(1-36aa)与survivin的相互作用关系。结果表明,eRF3a(1-72aa)和eRF3a(1-36aa)均可以与survivin相互作用,由此确定eRF3a与survivin相互作用的最小结构域位于其N末端1-36aa之间,从而为进一步证实eRF3a的N端结构域与survivin协同作用参与细胞周期和细胞凋亡的调控提供了数据支持。