DUOX2对结直肠癌细胞氟尿嘧啶敏感性的影响

目的:探讨双氧化酶2(dual oxidase 2,DUOX2)对结直肠癌(colorectal cancer,CRC)细胞5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil,5-FU)药物敏感性的影响。方法:选用CRC细胞系DLD-1、SW480、HCT116、SW620与正常肠上皮细胞株NCM460,用qPCR法检测细胞中DUOX2的表达水平。利用慢病毒感染技术,稳定敲降HT-29与HCT116细胞中DUOX2表达,qPCR法和WB法检测敲降效率。用不同浓度(0、5、10、20、40、80、120μg/ml)5-FU处理sh-Control组与sh-DUOX2组细胞,用CCK-8法、流式细胞术分别检测5-FU对细胞增殖、细胞凋亡和细胞周期的影响。构建裸鼠HT29细胞移植瘤模型,观察DUOX2基因对5-FU疗效的影响。结果:DUOX2 mRNA在CRC细胞中的表达水平显著高于NCM460细胞(P<0.05或P<0.01)。敲降DUOX2基因后,与sh-Control组相比,sh-DUOX2组HT29和HCT116细胞中DUOX2 mRNA和蛋白表达水平明显下降(均P<0.01);细胞对5-FU的敏感性增强,细胞凋亡率明显升高(均P<0.01),G0/G1期比例显著升高、G2期与S期比例显著下降(均P<0.01)。未经5-FU治疗的sh-Control组与sh-DUOX2组裸鼠移植瘤体积及质量比较差异均无统计学意义(均P>0.05),经5-FU治疗的sh-DUOX2+5-FU组移植瘤体积及质量明显低于sh-Control+5-FU组(均P<0.01)。结论:敲降DUOX2基因可显著增强CRC细胞对5-FU的敏感性。

用新色原双试剂结合速率法测定血清葡萄糖浓度

利用新色原建立测定血清葡萄糖浓度的方法．以葡萄糖氧化酶为基础用双试剂结合速率法进行定量分析．结果：葡萄糖浓度达50．0mmol／L反应仍呈良好的线性；回收率为99．9％，日内CV为0．88％，日间CV为2．03％，除高浓度的血红蛋白外，能有效地避免血清中氧化物、浊度、色素等物质的干扰，测定结果与葡萄糖氧化酶／酚法和葡萄糖激酶法有良好的相关性，参考值范围为3．88～5．56（4．72±0．43）mmol／L．结论：该方法由于试剂稳定，成本低，测定方法可靠，适合在具有双试剂分析功能的自动生化分析仪上使用．