Evaluation of Disk Potentiation Test (DPT) and Double Disk Synergy Test (DDST) for The Detection of Metallo-β-Lactamases (MBLs) in Clinical Isolates of Bangladesh

Objective: Increasing the emergence of Metallo-β-lactamase (MBL) producing gram-negative bacteria and their dexterous horizontal transmission demands rapid and accurate detection. This study was conducted to determine a suitable method to promptly detect MBL-producing gram-negative bacteria. Methods: A total of 103 gram-negative bacteria were identified from various clinical samples at a tertiary care hospital in Dhaka city. MBL producers were detected by two phenotypic methods, the Disk Potentiation Test (DPT) and the Double Disk Synergy Test (DDST) based on β-lactam chelator combinations where EDTA/SMA has been used as an inhibitor and Imipenem, Ceftazidime as substrates. Results: 103 isolates which were identified as Escherichia coli spp, Klebsiella spp, Pseudomonas spp, Acinetobacter spp, Proteus spp, Providencia spp were found to be multidrug-resistant in antibiogram test. Isolates showed complete resistance (100%) to Imipenem, Meropenem, and Amoxiclav. The highest carbapenem-resistant etiological agents were Acinetobacter spp 40 (38.8%) followed by Pseudomonas spp 27 (26.2%), Klebsiella spp 26 (25.2%), Escherichia coli 8 (7.8%), Proteus spp 1 (1%) and Providencia spp 1 (1%). DPT method detected significantly (p = 0.000009) a higher number of MBL-producers (Imipenem with 0.5 M EDTA n = 61, 59.2% & Ceftazidime with 0.5 M EDTA n = 56, 54.4%) compared to the DDST method (Imipenem -0.5 M EDTA n = 43, 41.7%, Imipenem – SMA n = 38, 36.9% & Ceftazidime -0.5 M EDTA n = 15, 14.6%). Conclusion: Pieces of evidence suggest that DPT is a more sensitive method than DDST and could be recommended for identifying MBL-producing bacteria in Bangladeshi hospitals for the proper management of patients, to reduce time constraints and treatment costs.

大学体育课堂协同体测项群同源教学的实践探索

根据体测项群的运动性质即动作发力、技术促进、技能辅助、成绩提高等基础练习具有交叠之处,研究速度、耐力、力量、柔韧与灵敏素质等同源因子在教学中对身体素质的影响有重要意义.选取大学体育课选项班作为实验研究对象,查找体测成绩进行统计学分析,所得结果作为课题研究的参考值;实验课上匹配体测项群同源因子的对比教学,结果显示5项身体素质均有明显提高:对同源因子俯冲弹体、蜻蜓点水、乾坤大挪移能够有效提高仰卧起坐、坐位体前屈、立定跳远成绩(P<0.01),而对引体向上成绩无统计学意义上的提高(P>0.05);五向星形跑对短跑、耐力速度800 m、1000 m及肺活量成绩有非常显著(P<0.01)的影响;课上进行同源教学程序简易,便于把控运动强度及运动量,尤其在提高学生体测成绩方面发挥重要作用,同源教学可以激发练习热情,使学生自觉主动参与,适合在其他选项课推广应用.

基于Synergy加速器微光刀立体定向放射治疗系统的性能测试

目的测试基于Synergy加速器微光刀立体定向放射治疗系统(Dual Camera 2 mm Stereotactic Radiosurgery,D2SRS)的准确性和可靠性。方法对Synergy加速器机械性能进行测试,判断加速器现有状态是否满足D2SRS及相关放射治疗技术的使用条件。同时对D2SRS的多叶准直器系统、图像引导系统、治疗计划系统分别进行测试,确定其临床实施的可靠性和准确性。结果加速器性能测试各参数指标均符合相应标准,其中机架及小机头等中心旋转测试中,在150°机架时偏离基线最大(0.9 mm),在30°小机头角度时偏离基线最大(0.8 mm),且外挂多叶光栅(Multi-leaf Collimator,MLC)并未对其精度产生影响。D2SRS各参数精准度均在要求范围之内,MLC与加速器中心无偏差,位置精度验证中在(-5,-3)位置偏差最大为0.7 mm,具备了实施立体定向放射治疗技术的先决条件。结论对加速器现有状态及D2SRS各系统测试结果总体满足临床要求,在做好日常质量控制的基础上可用于患者治疗。

组态视域下影响PPP项目落地的关键路径——基于fsQCA的实证研究

为揭示PPP项目落地背后多重条件间的复杂互动本质,选取国内2017—2020年838个PPP项目作为案例,采用模糊集定性比较方法进行组态分析,研究影响PPP项目落地必要性条件,通过对落地成功和落地失败案例进行对比分析,探索影响PPP项目落地的关键路径.研究结果表明:①社会资本融资能力是影响PPP项目落地的必要条件,验证了可融资性对于PPP模式的关键意义;②影响PPP项目落地成功的组态路径分为社会资本推动型和政府主导型,影响PPP项目落地失败的组态路径分为制度环境约束型和经济环境约束型,经济环境、制度环境、政府能力、企业能力是影响PPP项目落地的核心条件;③可结合环境特点和产业优势选择合适的PPP项目进行开发,构建符合地方发展规划的PPP+产业发展路径.

软件测试管理系统的研究与应用

提出了一种基于软件测试管理体系的管理系统,阐述了如何通过产品解决方案来实现工程企业数字化产品的测试管理,及如何在企业内部应用运作,旨在帮助产研团队,将质量活动管理起来并同时提升协同效率。通过对测试工作的数字化管理,实现了高质高效的软件生命周期管理。软件测试管理系统产品的大规模应用,在工程企业中,赋予了产品质量活动过程的标准化、数字化,具有重要的意义。在工程类产品的应用结果表明,该系统大大提高了工作效率与质量管理能力,具有广阔的应用前景。

半夏提取物与Bt对小菜蛾的联合毒力研究

为减缓小菜蛾对Bt的抗药性,提高防效,以半夏提取物为增效剂与Bt进行混配,通过室内毒力测定,筛选二者的最佳混配比例。结果显示,72 h内,半夏提取物和Bt对小菜蛾3龄幼虫的致死中浓度(LC_(50))分别为388.354 g/L和0.0687 g/L。半夏提取物和Bt分别按LC25致死浓度进行不同体积比混配,毒力测定结果显示,复配比例为2∶8和1∶9时,毒效比率分别为1.32和1.36,均大于1.25,共毒系数分别为231和275,均大于200。半夏提取物对Bt具有明显增效作用,具有开发为Bt混配制剂的潜力。

铜绿假单胞菌耐药性分析及金属酶基因检测

目的分析中南大学湘雅医院临床分离铜绿假单胞菌抗菌药物敏感性及金属酶流行情况,以期指导临床用药。方法收集2010年11月—2011年4月临床分离非重复铜绿假单胞菌200株,所有菌株均经VITEK-2全自动微生物鉴定与药敏试验分析系统进行鉴定和药敏试验。采用双纸片协同试验作为金属酶表型初筛试验,初筛阳性菌株采用聚合酶链反应(PCR)检测IMP、VIM、SPM和NDM4种金属酶基因型以及Ⅰ类整合酶基因。结果 200株铜绿假单胞菌分离自ICU患者55株,占27.5%。药敏试验结果显示,该菌对美罗培南耐药率最低(8.5%),对庆大霉素耐药率最高(38.5%)。6株铜绿假单胞菌金属酶初筛试验阳性,检出率3.0%,经基因检测发现IMP型阳性菌株2株(2株均产IMP-1菌株),未检出VIM、SPM及NDM型金属酶,且这6株铜绿假单胞菌Ⅰ类整合酶基因均为阳性。结论该院产金属β内酰胺酶的铜绿假单胞菌检出率较低,主要金属酶基因型为IMP-1。铜绿假单胞菌耐药仍较严重,但对碳青霉烯类抗生素耐药率低。

三种检测AmpC β-内酰胺酶方法的比较及其临床应用

目的:评价表型筛选法和双纸片协同试验检测产AmpC β-内酰胺酶肠杆菌的可靠性与临床应用。方法:采用表型筛选法、双纸片协同试验和三维试验同时对98株肠杆菌进行AmpC酶检测,将2种检测方法的结果分别与三维试验的结果加以比较,并调查了我院呼吸内科肠杆菌中AmpC酶的流行情况。结果:三维试验结果显示98株肠杆菌中高产AmpC酶的菌株共有19株(阴沟肠杆菌16株、弗劳地枸橼酸杆菌2株、产气肠杆菌1株),检出率为19.39％。2种检测方法的敏感性分别为84.2％,94.7％,特异性分别为98.6％,97.3％,与三维试验的总符合率分别为90.8％,91.8％。结论:表型筛选法和双纸片协同试验可以替代三维试验在各级医院常规应用,双纸片协同试验具有操作简便、结果可靠等优点。

原油破乳剂的研究

研究影响破乳剂复配破乳因素.通过正交试验和单因素试验,优化并给出了TA-1031与RI-01复配破乳的最佳工艺条件:破乳温度65℃,复配比例为2∶1,复配破乳剂质量浓度为80mg·L-1,破乳时间90min.在此工艺条件下,原油破乳脱水率达98.5%,比单剂效率提高14%～16%.

纤维石膏填充墙–钢筋混凝土框架抗震性能试验研究

纤维石膏复合材料具有诸多良好的物理力学性能,但将其作为填充墙材料的研究却较少。为研究纤维石膏填充墙–钢筋混凝土框架的抗震性能和填充墙的连接构造措施对钢筋混凝土框架抗震性能的影响,采用1∶2的缩尺比例设计了4榀单层单跨的钢筋混凝土框架,其中,1榀空框架,1榀刚性连接的页岩砖填充墙框架,2榀纤维石膏填充墙框架,并且纤维石膏填充墙与框架的连接方式分别采用刚性连接和柔性连接。通过对4榀试件的低周反复荷载作用下的抗震性能进行试验,分析了各试件的破坏特征、滞回曲线、骨架曲线、刚度退化、承载能力、变形能力和耗能能力。结果表明:填充墙的存在能提高框架的承载力和耗能能力,与传统页岩砖钢筋混凝土填充墙框架相比,纤维石膏填充墙的框架具有更好的变形能力与耗能能力,而且柔性连接的纤维石膏填充墙框架比刚性连接的纤维石膏填充墙框架具有更好的抗震性能。因此,与传统的砌体填充墙相比,纤维石膏填充墙在实际的工程中具有更好的实用价值与应用前景。

三种AmpC酶表型检测方法比较

目的对革兰阴性菌产AmpC酶的检测方法进行评价，并寻找一种适合临床常规应用的AmpC酶检测方法。方法对39株耐头孢西丁的革兰阴性菌同时进行改良Hodge试验、三维试验、氯唑西林（CLO）双纸片协同试验和ampC基因聚合酶链反应（PCR）检测，比较4种方法的结果。结果39株革兰阴性杆菌中，改良Hodge试验、三维试验和CLO双纸片协同试验检出产AmpC酶的阳性率分别为38．5％、43．6％和28．2％，3种方法AmpC酶检出率的差异无统计学意义（P〉0．05）。与PCR结果比较，改良Hodge试验特异性为87％，敏感性为75％；三维试验的特异性为78％，敏感性为75％；CLO双纸片协同试验特异性为87％，敏感性为50％。PCR显示ampC基因阳性率为41％（16／39），对16株阳性菌进行ampC基因测序，测序结果与基因数据库内相应的ampC核酸序列比对发现，同源性均在98％～100％之间。结论改良Hodge试验可作为一种操作快速、简便的筛选试验检测革兰阴性菌产AmpC酶的情况，而CLO双纸片协同试验可作为一种操作简便的排除产AmpC酶试验应用于实验室，但在准确性上低于改良Hodge试验。

产ESBLs及AmpC酶细菌检测方法的探讨

目的 比较双纸片抑制协同法 (DDIST)、纸片扩散法与三维试验法检测临床分离革兰阴性肠杆菌产ESBLs及AmpC酶的可靠性。方法 用纸片扩散法从临床分离株中初筛出 88株产ESBLs与AmpC可疑菌株 ,再用DDIST和三维试验进行比较。结果 纸片扩散法检出产ESBLs菌 77株 ,可疑产AmpC菌 6株 ,另有 5株为不确定产酶株。DDIST检出产ESBLs菌 77株(87.5 % ) ,产AmpC菌 1 0株 (1 1 .4 % ) (包括纸片中心距离 2 0mm的 9株、1 5mm的 1株 ) ,产ESBLs+AmpC菌 1株 (1 .1 % )。三维试验检出AmpC 1 1株 ,ESBLs78株。DDIST ,三维试验总符合率达到 1 0 0 %。结论 DDIST可同时检测产ESBLs和AmpC的细菌 ,方法准确简便 。

基于熵权模糊综合评价法的水润滑尾轴承性能评估

为合理评估水润滑尾轴承的性能,提出了基于熵权模糊综合评价法的水润滑尾轴承性能评估模型。从摩擦、磨损、减振、摩擦噪声性能4个维度选取6个关键参数建立评价体系,构建专家偏好系数选择模型,并基于该系数对经过Kendall协同系数检验的主观权重和客观权重进行线性加权组合得到综合权重,选取合适隶属度函数求解模糊评价矩阵,在综合权重和模糊评价矩阵的基础上获得评估结果。研究结果表明:该评价方法不仅考虑了专家偏好主观性,还考虑了数据客观性,可实现对所有水润滑尾轴承的相对优劣评估,且该评价方法具有较广泛的适用性。

磷霉素钠体外联合药敏研究

目的评价磷霉素钠体外单药及联合其他抗菌药物对我国临床分离金黄色葡萄球菌、肺炎克雷伯菌和铜绿假单胞菌的抗菌作用。方法联合药敏测定采用棋盘法,最低抑菌浓度(MIC)测定采用琼脂二倍稀释法,对来自全国18所医院近3年临床分离的金黄色葡萄球菌(113株)、肺炎克雷伯菌(108株)和铜绿假单胞菌(110株)进行单药及联合药敏测定。结果对所测菌株,不论其对其他抗菌药物是否耐药,磷霉素钠单药的MIC_(50)值均≤32 mg/L。与左氧氟沙星、米诺环素、苯唑西林、克林霉素联合均对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)有较好协同作用,协同率>43%。对于亚胺培南不敏感铜绿假单胞菌,磷霉素钠与左氧氟沙星、亚胺培南的协同率>35%,对于亚胺培南敏感铜绿假单胞菌,磷霉素钠与所测药物协同率均>35%。结论磷霉素钠对临床常见耐药菌,如MRSA、产超广谱β-内酰胺酶肺炎克雷伯菌等仍有较好的抗菌作用,与多种其他类抗菌药物可产生协同作用,提示针对耐药菌所致感染,在有限的治疗手段中,含磷霉素的联合用药不失为一种选择。

双抑制剂扩散协同法检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶

目的探讨双抑制剂扩散协同法(double inhibitors diffuse synergr test,DIDST)检测AmpC酶和超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的临床应用价值。方法氯唑西林作为AmpC酶的抑制剂,而克拉维酸作为ESBLs的抑制剂,采用DIDST同时检测56株革兰阴性杆菌的AmpC酶和ESBLs,并以改良酶提取物三维试验和纸片扩散法确证试验分别作为AmpC酶和ESBLs的确证试验。结果DIDST检出单产AmpC酶菌株16株(28.6%),单产ESBLs菌株20株(35.7%),同时产AmpC酶和ESBLs菌株5株(8.9%)与改良酶提取物三维试验检测AmpC酶符合率为100%,而与纸片扩散法确证试验检测ESBLs的符合率均为96.4%。结论DIDST可同时检测AmpC酶和ESBLs,方法准确、简便,适用于临床微生物实验室。

多底物协同-拮抗法同时检测超广谱β-内酰胺酶和AmpC β-内酰胺酶

目的 建立一种能同时检测超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)和AmpCβ 内酰胺酶 (AmpCs)的简便、实用的方法。方法 应用“多底物协同 拮抗法”(MSSAT)检测 30株阴沟杆菌 (E .cl)和 4 2株不动杆菌 (Aci)的ESBLs和AmpCs。结果 MSSAT法检出各种ESBLs产酶株 5 3株 (E .cl2 5株 ,Aci 2 8株 ) ;各种AmpCs产酶株 5 2株 (E .cl 1 9株 ,Aci 33株 ) ,其中高诱导型 1 0株 (E .cl8株 ,Aci2株 ) ,部分去阻遏型 1 2株 (E .cl5株 ,Aci 7株 ) ,完全去阻遏型 30株 (E .cl 6株 ,Aci 2 4株 ) ;同时产ESBLs+AmpCs产酶株 37株 (E .cl 1 5株 ,Aci 2 2株 ) ,其中ESBLs +高诱导型 4株(均为E .cl) ,ESBLs+部分去阻遏型 6株 (E .cl 5株 ,Aci 1株 ) ,ESBLs+完全去阻遏型 2 7株 (E .cl 6株 ,Aci 2 1株 )。结论 MSSAT法能同时检测ESBLs+AmpCs及其不同型 ,且准确、简便、实用。在同时产ESBLs +AmpCs的细菌中 ,E .cl以产诱导型AmpCs为主 ,Aci则以产非诱导型AmpCs为主。同时产ESBLs+AmpCs的细菌大部分取自痰标本。

双纸片协同试验检测产ESBLs方法的探讨

目的 选择检测产超广谱 β 内酰胺酶 (ESBLs)双纸片协同试验最佳条件。 方法 30株临床分离经基因法确定的产ESBLs菌 ,用CTX、CAZ、ATM、FEP药敏纸片与AMC药敏纸片做协同试验 ,纸片之间距离分别选择 10mm、15mm、2 0mm、2 5mm、30mm和 35mm。结果 FEP和ATM与AMC协同试验结果最佳 ,纸片之间距离在 10mm～ 2 5mm时阳性检出率是 10 0 % ;CTX与AMC协同试验结果次之 ,距离在 10mm～ 2 0mm之间时阳性检出率是 96 7% ;CAZ与AMC协同试验结果较差 ,距离在 10mm～ 15mm之间时阳性检出率是 86 7% ,距离在 2 0mm时检测率是 83 3%。结论 双纸片协同试验检测产ESBLs最佳底物是FEP和ATM ,最佳距离是 15mm。

PAE-MHT法检测铜绿假单胞菌金属β-内酰胺酶的临床适用性的评估

目的评估铜绿假单胞菌-改良Hodge(PAE-MHT)法对铜绿假单胞菌(PAE)金属β-内酰胺酶(MBLs)检测的临床适用性。方法收集82株临床分离的耐亚胺培南的PAE,通过双纸片协同法、E-test法及PAE-MHT法作为MBLs表型初筛试验,并对几种方法进行比较。聚合酶链反应(PCR)法检测IMP型和VIM型MBLs基因并测序。结果 PAE-MHT法的敏感性、特异性和准确率分别为84.6%,97.2%,97.6%.PAE-MHT法和双纸片协同法、Etest法有非常好的一致性。结论 PAE-MHT法简便、快捷,不失为临床快速筛查非发酵菌产MBLs的一种新方法。

应用EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶的研究

目的探讨应用EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产金属β-内酰胺酶(MBL)的准确性,为临床快速筛查产MBL的肠杆菌科细菌提供简便的方法。方法对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的27株肠杆菌科细菌在M-H琼脂平板上用双纸片协同法检测其MBL,以EDTA.Na2为酶抑制剂,美罗培南为底物。同时利用聚合酶链反应(PCR)检测MBL的基因NDM-1A、NDM-1B、IMP、VIM和SIM,PCR扩增阳性的产物测序结果与GenBank数据库进行比对分析。结果对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的27株肠杆菌科细菌运用EDTA协同法检测MBL的阳性菌株为4株,与PCR检测MBL结果一致。且PCR产物测序结果经比对分析后证实均为IMP-4型MBL。结论 EDTA协同法检测肠杆菌科细菌产MBL方法简便、结果可靠,适用于临床对碳青霉烯类抗生素敏感性降低的肠杆菌科细菌产MBL的快速筛查。

大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱β-内酰胺酶的检测及耐药性分析

目的 :进行大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌超广谱 β -内酰胺酶 (ESBLs)的检测和耐药性测定 ,为产ESBLs细菌的监控和治疗提供依据。方法 :用双纸片协同试验检测 145株大肠埃希菌和 76株肺炎克雷伯菌ESBLs的产生情况 ,并用VITEK6 0型全自动药敏分析系统和K -B纸片扩散法 ,检测其对多种抗生素的耐药性。结果 :双纸片协同试验检测出所试大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌的ESBLs阳性株分别为 80株 (占 5 5 .2 % )和 35株 (占 46 .1% ) ,其中以头孢三嗪和头孢噻肟为底物检测效果最好。ESBLs阳性株除对亚胺培南高度敏感外 ,对多种抗生素的耐药性明显高于ESBLs阴性株。结论 :头孢三嗪、头孢噻肟可作为本地区检测ESBLs的最佳底物。ESBLs阳性菌对多种抗生素耐药 。