羽绒在乳酸/半胱氨酸低共熔溶剂中的溶解行为及其机制

为开发羽绒角蛋白的绿色提取工艺,提高羽绒一次溶解率,制备了乳酸/半胱氨酸低共熔溶剂,研究了羽绒的溶解历程及工作机制。采用高效液相色谱仪、傅里叶变换红外光谱仪、X射线衍射仪测试了羽绒角蛋白的分子质量分布、化学及聚集态结构。结果表明:羽绒在105℃下经7 h可完全溶解于乳酸/半胱氨酸低共熔溶剂中,溶解历程包括纤维膨化、原纤剥离、纤维断裂溶解;提取的羽绒角蛋白由小分子蛋白、多肽和寡肽组成;与羽绒相比,羽绒角蛋白未出现二硫键特征红外吸收峰,其β折叠衍射峰强度增强,α螺旋结构衍射峰强度降低;乳酸/半胱氨酸低共熔溶剂对羽绒的溶解主要源于乳酸对角质层的软化和渗透,半胱氨酸对二硫键的还原断键,以及溶剂强极性对角蛋白分子链作用力的破坏。

白血病相关蛋白16与角蛋白18相互作用的鉴定

目的:验证白血病相关蛋白(LRP)16与角蛋白(KRT)家族成员KRT18之间的相互作用关系。方法:PCR扩增KRT18及其结构域缺失体基因片段,构建KRT18全长及其结构域真核表达载体,通过体外GST pull down实验和体内免疫共沉淀实验验证LRP16/KRT18的相互作用,并鉴定其作用的结构域。结果:构建了KRT18及其结构域重组子,GST pull down实验证明LRP16与KRT18在体外存在相互作用,它们的特异结合区域位于KRT18的C端,KRT18能够与LRP16的C端结构域相互作用;免疫共沉淀实验表明内源性LRP16与KRT18的C端在体内存在特异结合。结论:KRT18与LRP16存在相互作用,为进一步研究KRT18影响LRP16的亚细胞分布及调控LRP16核功能执行的作用机制奠定了基础。