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百合ACC氧化酶基因全长cDNA的克隆及序列分析 被引量:12
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作者 刘鲜艳 刘雅莉 +1 位作者 王跃进 张宗勤 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期651-656,共6页
以亚洲百合‘Polyanna’(Lilium spp.)花瓣为材料,根据已报道的百合ACC氧化酶基因片段设计1对末端扩增特异引物,采用RACE方法,获得百合ACC氧化酶基因的全长eDNA(GenBank登录号为EU296623)。该eDNA全长1152bp,具有一个954bp的... 以亚洲百合‘Polyanna’(Lilium spp.)花瓣为材料,根据已报道的百合ACC氧化酶基因片段设计1对末端扩增特异引物,采用RACE方法,获得百合ACC氧化酶基因的全长eDNA(GenBank登录号为EU296623)。该eDNA全长1152bp,具有一个954bp的开放阅读框,编码318个氨基酸。Blast搜索结果显示,百合ACC氧化酶基因核苷酸序列与其它植物已报道的ACC氧化酶基因具有71%~82%的相似性,氨基酸序列有70%~87%的相似性,聚类分析表明,与单子叶植物百合科郁金香首先聚类,其次与双子叶植物聚类,最后与单子叶禾本科和兰科植物聚类。 展开更多
关键词 ACC氧化酶 edna克隆 百合 基因
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黄瓜花叶病毒卫星RNA XJs1侵染性cDNA克隆构建及其生物学功能初步研究
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作者 席德慧 林宏辉 向本春 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期219-222,共4页
利用RT_PCR的方法,获得了黄瓜花叶病毒卫星RNA XJs1的全长侵染性cDNA克隆pMSC20。序列分析显示,XJs1全长384nt(GenBank登录号:DQ070748),比较XJs1与具有代表性的CMV卫星RNA的序列结构表明,在XJs1核苷酸序列的325nt^350nt间,具有典型的... 利用RT_PCR的方法,获得了黄瓜花叶病毒卫星RNA XJs1的全长侵染性cDNA克隆pMSC20。序列分析显示,XJs1全长384nt(GenBank登录号:DQ070748),比较XJs1与具有代表性的CMV卫星RNA的序列结构表明,在XJs1核苷酸序列的325nt^350nt间,具有典型的坏死型卫星RNA保守序列。通过体外转录,将XJs1与不含卫星RNA的辅助病毒分离物CMV_AH组合接种普通烟和心叶烟并进行检测。初步研究结果表明,XJs1为一致弱卫星RNA。 展开更多
关键词 黄瓜花叶病毒 卫星RNA 侵染性edna克隆 生物学功能
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薤白EPSP合成酶基因cDNA的克隆与原核表达分析 被引量:3
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作者 周晓卉 黄丽华 +2 位作者 蒋向 李育强 张学文 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期2297-2304,共8页
【目的】揭示棉田杂草薤白(Allium macrostemon Bunge)抗草甘膦的分子机理,开发利用其草甘膦抗性特性。【方法】运用RT-PCR结合RACE技术,分离克隆了薤白中草甘膦作用的靶酶EPSP合成酶(EPSPs)基因cDNA,并将其构建成原核表达载体在大肠杆... 【目的】揭示棉田杂草薤白(Allium macrostemon Bunge)抗草甘膦的分子机理,开发利用其草甘膦抗性特性。【方法】运用RT-PCR结合RACE技术,分离克隆了薤白中草甘膦作用的靶酶EPSP合成酶(EPSPs)基因cDNA,并将其构建成原核表达载体在大肠杆菌中诱导表达和鉴定其抗性。【结果】薤白EPSP合成酶基因cDNA序列全长1821bp,编码一段522个氨基酸的推导蛋白质。经BLAST及蛋白质结构预测,蛋白具有EPSPs的特征序列,并与已报道的EPSPs序列有高同源性,确认克隆的cDNA序列即是薤白EPSPs基因序列,命名为EPSPsA。将该cDNA与原核表达载体pRSET-A重组后,构建成重组表达质粒pRSET-A-EPSPsA,并转化至大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导了目标蛋白的高效表达。经SDS-PAGE电泳分析显示,该蛋白的分子量约为55kD,与预期大小一致。通过草甘膦对表达细菌处理,表达菌对草甘膦的抗性显著提高。【结论】薤白EPSPs对草甘膦具有一定抗性。 展开更多
关键词 薤白 EPSP合成酶 edna克隆 原核表达
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Molecular Cloning and Expression Analysis of FTZ-F1 in the Half-smooth Tongue-sole, Cynoglossus semilaevis 被引量:9
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作者 邓思平 陈松林 刘本伟 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期592-598,共7页
To investigate the expression characteristics of sex related gene of FTZ-F 1 in the half-smooth tongue-sole (Cynoglossus semilaevis), the homologue FTZ-F1 (hsFTZ-F1) full-length cDNA was isolated from the testis b... To investigate the expression characteristics of sex related gene of FTZ-F 1 in the half-smooth tongue-sole (Cynoglossus semilaevis), the homologue FTZ-F1 (hsFTZ-F1) full-length cDNA was isolated from the testis by homologous cloning, and the cDNA included the open reading frame and a 66bp 5'-UTR, along with a 1619bp 3'-UTR, encoding a predicted 485 amino acid protein. Sequence, tissue distribution and phylogenic analyses of the FTZ-F1 showed that the hsFTZ-F1 belonged to SF-1/Ad4BP group. The hsFTZ-F1 transcripts were highly abundant in the gonads, kidneys, brain and head-kidneys, but weakly in other tissues. However, the expression level in the brain and head-kidney of female was highly abundant than in the male. The hsFTZ-F1 expression was highly abundant in the embryo than in the larvae, which suggested that the hsFTZ-F1 may be involved in the organogenesis in the tongue sole. 展开更多
关键词 Cynoglossus semilaevis FTZ-F1 cDNA cloning Expression
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景东湍蛙抗菌肽jindongenin-1d的分析和活性测定 被引量:1
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作者 陶双燕 邱雨莹 +2 位作者 杨黎江 杨叶秀 刘子超 《生物资源》 CAS 2017年第4期303-307,共5页
新型抗菌肽研究有助于解决细菌对抗生素的耐药性问题。本研究用SMART技术构建了景东湍蛙Amolops jingdongensis皮肤的全长cDNA文库。通过单克隆和测序获得一个抗菌肽cDNA序列,序列比对结果表明其属于jindongenin-1家族,命名为jindongeni... 新型抗菌肽研究有助于解决细菌对抗生素的耐药性问题。本研究用SMART技术构建了景东湍蛙Amolops jingdongensis皮肤的全长cDNA文库。通过单克隆和测序获得一个抗菌肽cDNA序列,序列比对结果表明其属于jindongenin-1家族,命名为jindongenin-1d。其cDNA序列全长321bp,编码含66个氨基酸残基的多肽。该多肽包括1个信号肽和1个前肽序列。成熟jindongenin-1d多肽包含24个氨基酸残基,理论分子量为2 709.38,等电点为9.24。对人工合成的jindongenin-1d蛋白进行了抗菌和溶血活性分析,结果表明jindongenin-1d对所选的革兰氏阴性菌、革兰氏阳性菌和真菌均有显著抑制作用,同时有弱溶血活性。本研究结果有助于进一步了解两栖动物皮肤分泌物活性物质的多态性和新型抗感染药物的设计。 展开更多
关键词 抗菌肽 jindongenin-ld 景东湍蛙 edna克隆 序列分析
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