抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤细胞增殖作用的影响

目的研究抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞增殖作用的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测抑制eEF-2激酶后LN229细胞的增殖能力,台盼蓝染色法检测细胞的存活能力,相差显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期的分布,Western blot方法检测细胞phospho-eEF2和Cleaved Caspase-3、PARP蛋白表达水平的变化。结果抑制eEF-2激酶对人脑胶质瘤LN229细胞的增殖有显著抑制作用(P<0.05或0.01),呈现时间和剂量依赖性趋势;作用24 h后,随着给药浓度的增加,LN229细胞的活力逐渐降低(P<0.05或0.01),且细胞形态也逐渐发生明显改变;NH125(0.5μmol/L)作用24 h后,LN229在S期阻滞,且出现小凋亡峰,phospho-eEF2(Thr56)的表达明显下降,Cleaved Caspase-3、Cleaved PARP的表达显著增加(P<0.05)。结论抑制eEF-2激酶后,人脑胶质瘤LN229的细胞增殖作用明显被抑制,细胞活力降低,该作用可能与其诱导的细胞周期阻滞以及其诱导的Caspase-3、PARP激活相关细胞凋亡途径有关。