宁夏汉族人群eNOS基因3个SNP位点与原发性高血压相关性的研究

目的:探讨在宁夏地区汉族人群中eNOS基因3个SNP位点与原发性高血压(EH)的相关性。方法:采用PCR-RFLP方法对204例EH患者及219例健康个体eNOS基因rs2070744(T>C)、rs1800780(A>G)和rs3918181(A>G)共3个SNP位点检测。用χ2检验比较病例组-对照组间基因型频率、等位基因频率的差异,用SHEsis在线分析软件分析单倍型。结果:EH组和对照组间,rs1800780位点基因型频率的分布存在显著性差异(P<0.05)。rs2070744位点及rs3918181位点基因型频率及等位基因频率的分布均无显著性差异(P>0.05)。3个SNP位点共检出8种单倍型,其中单倍型TGA在对照组及EH患者中有统计学差异(P<0.05),且OR(95%CI)为1.549(1.116～2.150)。结论:单倍型TGA的出现可能会增加汉族EH的患病风险。

eNOS基因G894T突变位点与缺血性脑卒中的关系

目的 为了了解内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS)基因G894T突变位点与中国人群缺血性脑卒中之间的关系。方法 我们利用PCR和分子杂交技术对北京地区 2 94例缺血性脑卒中患者及 2 80例非卒中对照的eNOS基因G894T突变位点进行了检测和分析。结果 G894T位点在两组人群中的分布均符合Hardy -Weinberg遗传平衡定律 ,但该位点基因型频率及等位基因频率在两组人群中分布无差异。结论 eNOS基因G894T突变不是中国人群缺血性脑卒中发病的遗传学危险因素。

宁夏回族人群eNOS基因多态性与原发性高血压关联性分析

目的探讨在宁夏地区回族人群中eNOS基因4个SNP位点与原发性高血压(EH)的关联性。方法采用PCR-RFLP方法对134例EH患者及115例健康个体eNOS基因rs2070744(T>C)、rs1799983(G>T)、rs1800780(A>G)和rs3918181(A>G)共4个SNP位点进行检测。EH组与对照组间基因型频率、等位基因频率的差异比较采用χ2检验,并采用SHEsis在线分析软件对单倍型进行分析。结果 EH组和健康对照组间,rs1800780位点和rs1799983位点基因型频率的分布差异有统计学意义(P<0.05)。rs1799983位点等位基因频率的分布差异有统计学意义(P<0.05),其等位基因G的频率在EH组低于健康对照组,且OR值为3.851(95%CI:2.236～6.631)。4个SNP位点共检出15种单倍型,其中单倍型CGAG、TTAG、TGGG、TTGG、TTGA在宁夏回族健康人群及EH患者中差异有统计学意义(P<0.05)。单倍型CGAG、TGGG的OR值为0.352、0.600,95%CI小于1;单倍型TTAG的OR为2.689,95%CI大于1。结论 rs1799983位点等位基因G为宁夏回族人群易患EH的危险因子,单倍型CGAG与TGGG可降低回族EH的患病风险,而单倍型TTAG可增加回族EH的患病风险。

中国人群eNOS基因内含子13微卫星多态性的初步研究

目的 :为研究eNOS基因内含子 13上的微卫星序列与妊高症的相关性。方法 :采用PCR-PAGE与银染相结合的方法 ,研究其多态性。结果 :得到含有该微卫星序列的DNA片段。结论 :证实在中国人群中eNOS基因内含子 13上的确存在一个CA重复的多态性微卫星序列 ,从而为研究该位点与妊高症的相关性提供了技术支持和理论依据。

利用PCR-RFLP分析eNOS基因exon7BanⅡ酶切位点的遗传多态性

目的 :探讨内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊高征的相关性。方法 :应用PCR -RFLP技术检测了 12例正常女性的内皮型一氧化氮合酶基因第 7外显子。结果 :发现 12例正常女性中有 4例的基因型是eNOS/GG ,有 8例的基因型是eNOS/GT ,未检测到eNOS/TT型的个体。等位基因A1(eNOS/G)的频率为 66 7% ,等位基因A2 (eNOS/T)的频率为 33 3%。结论 :广东女性人群存在内皮型一氧化氮合酶第 7外显子BanⅡ酶切位点遗传多态性。

eNOS基因第7外显子894G→T多态与糖尿病肾病合并高血压的相关性研究

目的 探讨内皮细胞型一氧化氮合酶 (eNOS)基因第 7外显子 894位点多态性与糖尿病肾病合并高血压的相关性。方法 随机选择研究对象为单纯糖尿病 (DM )患者 5 2例 ,平均年龄 (6 6 .3± 7.9)岁 ,单纯糖尿病肾病 (DN)患者 4 5例 ,平均年龄 (6 5 .9± 6 .7)岁 ,糖尿病肾病合并高血压 (DN +HP)患者 5 0例 ,平均年龄 (6 5 .9± 6 .8)岁。运用聚合酶链反应限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术扩增eNOS基因第 7外显子的DNA片段 (2 4 8bp) ,以限制性内切酶BanⅡ进行酶切消化 ,2 %的琼脂糖电泳分离PCR产物。各组间等位基因频率及基因型频率的比较用 χ2 检验 ,危险因素分析用Logistic回归分析。结果 DN组T等位基因和TG基因型频率显著高于单纯DM组 (χ2 =7.2 0 ,P <0 .0 5 ;χ2 =9.17,P <0 .0 5 ) ,DN合并高血压组T等位基因及TG基因型频率高于DN组 ,但差异无显著性 (χ2 =0 .4 4 ,P >0 .0 5 ;χ2 =0 .6 1,P >0 .0 5 )。多因素Logistic回归分析发现 :收缩压 (SBP)、糖化血红蛋白 (HbA1c)、甘油三酯 (TG)、总胆固醇 (TC)、eNOS基因第 7外显子 894G→T突变是DN的独立危险因素。结论 eNOS基因第 7外显子 894G→T多态与糖尿病肾病有关。T等位基因可能是中国人 2型糖尿病患者易患DN的独立危险因素。eNOS基因第 7外显?

eNOS基因转染预防静脉移植血管再狭窄

目的 应用含牛内皮型一氧化氮合成酶 (e NOS)基因重组腺病毒 (Ad5 CMVNOS )转染静脉移植血管 ,观察 e NOS基因预防静脉移植血管再狭窄的作用。 方法 将 2 1只杂种犬分为 3组 ,手术对照组、Ad5 CMVL ac- Z(含大肠杆菌 β半乳糖苷酶基因重组腺病毒 )对照组和 Ad5 CMVNOS 干预组。在犬颈静脉、颈动脉旁路血管移植术中分别应用 Ad5 CMVNOS 病毒液或 Ad5 CMVL ac- Z病毒液常温浸泡法感染静脉移植血管 30分钟 ,术后 2 8天病理切片观测移植血管新内膜增生状况。 结果 与正常犬颈外静脉相比 ,手术对照组、Ad5 CMVL ac- Z对照组和Ad5 CMVNOS 干预组颈外静脉移植血管内膜 /中膜比较均有不同程度增加 (P<0 .0 5 ) ,但 Ad5 CMVNOS 组内膜 /中膜比显著低于另外 2个对照组 (P<0 .0 5 ) ,新内膜增生明显减轻。 结论 Ad5 CMVNOS 感染静脉旁路移植血管对预防再狭窄有一定作用。

eNOS基因治疗对肝硬化大鼠肝窦容积的影响

目的:观察以eNOS基因导入肝硬化门静脉高压症大鼠后,肝内eNOS表达和肝窦容积的变化;探讨eNOS基因转染对肝窦容积的影响。方法:①建立CC14肝内型肝硬化大鼠模型,分别取10只肝硬化大鼠和10只正常大鼠肝组织,用免疫组化、图像分析系统测定eNOS含量和肝窦容积;②取30只肝硬化大鼠,随机分成3组:内eNOS治疗组(n=10)、Tris对照组(n=10)和空质粒对照组(n=10)。分别经门静脉注射脂质体-eNOS质粒、Tris缓冲液脂质体-空质粒5d后,用RT-PCR和免疫组化方法检测3组大鼠肝内eNOSmRNA、eNOS含量和肝窦容积;结果:①硬化肝内eNOS含量和肝窦容积分别为(3.81±1.09)%和(3.51±0.72)%,均显著低于正常对照组的(14.78±3.06)%和(9.32±1.05)%(P<0.01);两组大鼠肝内eNOS含量与肝窦容积之间均呈显著正相关,相关系数r分别为0.676(P<0.05)和0.703(P<0.05)。②经门静脉注射各组之规定内容5d后,eNOS基因治疗组大鼠肝内eNOSmRNA、eNOS含量和肝窦容积分别为(1.22±0.14)U、(17.38±4.62)%和(5.77±1.49)%,均显著高于Tris处理组或空质粒处理组(P<0.01);3组的eNOS含量与肝窦容积之间均呈显著正相关,r分别为0.799(P<0.01)、0.767(P<0.01)和0.748(P<0.05)。结论:肝硬化时,因肝窦内皮细胞受损,肝内eNOS含量减少,肝内NO产量减少。

高血压患者eNOS基因变异与饮酒间交互作用

目的 探讨内皮型一氧化氮合成酶 (eNOS)基因第 7外显子G894T(Glu2 98Asp)变异与饮酒之间交互作用在高血压患病中的意义。方法 以某工厂人群中筛检出的、未经药物系统治疗的 116名高血压患者及 136名血压正常者为研究对象 ;运用PCR -限制性片段长度多态性检测G894T变异 ;用相加模型分析G894T变异与饮酒之间的交互作用 ;用人群归因危险度百分比计算人群中的病因分值。结果 G894T变异与饮酒之间对高血压患病具有正交互作用 ;归因交互效应为 3 6 9;归因交互效应百分比为 4 8 6 8% ;纯因子间归因交互效应百分比为 5 6 0 8%。用多元Logistic回归调整年龄、性别、吸烟、体重指数后 ,G894T变异与饮酒之间对高血压患病仍具有正交互作用。调整上述混杂因素后 ,归因交互效应为 1 13;归因交互效应百分比为 19 0 9% ;纯因子间归因交互效应百分比为 2 2 97%。在给定条件下计算的人群归因危险度百分比约为 10 %～ 15 %。结论 eNOS基因G894T变异与饮酒之间交互作用在该研究人群高血压患病中具有重要意义 ;在仅仅对具有G894T变异与饮酒同时存在的这一小部分人群中控制饮酒可明显降低一般人群高血压患病危险。

eNOS基因在大鼠动脉硬化模型中的表达及意义

目的建立大鼠动脉硬化模型并研究内皮-氧化氮合酶基因(eNOS)在模型鼠股-腘动脉中的表达。方法在大鼠股-腘动脉内注入蒸馏水,通过低渗造成动脉内膜非机械性、浅表性损伤,联合高脂、高胆固醇等饲料饲养的方法,建立大鼠动脉硬化闭塞模型。术后15,30,90d,应用免疫组化技术观察动脉闭塞的程度,应用SYBR染料法荧光定量PCR技术分别检测模型鼠下肢股-腘动脉中eNOS基因的表达。结果术后大鼠血管内膜增厚、部分管腔闭塞。高脂+损伤后15d、30d和90d的大鼠股-腘动脉中eNOS基因的相对表达量分别为0.7219±0.0417、0.6444±0.0129和0.4601±0.0276(P<0.05)。结论成功建立大鼠动脉硬化闭塞模型。eNOS基因在模型鼠的下肢股-腘动脉中表达下调。

低氧性肺动脉高压与eNOS基因的转录及表达

近来研究证明,内皮型一氧化氮合酶（eNOS）基因转录及其表达水平的改变与肺动脉高压（PH）的发病有着密切的关系。低氧性PH大鼠肺中eNOS基因及蛋白表达水平明显上调,其机制包括PH的血液动力学作用和暴露缺氧的非血液动力学作用。由于肺动脉壁切应力增加、肺血管重构、红细胞增多及eNOS转录速率或mRNA/蛋白稳定性的增加,慢性缺氧的大鼠在恢复到正常环境后,其肺中eNOSmRNA和蛋白表达持续上调。NO有舒张血管和抑制血管平滑肌细胞有丝分裂的作用,因此在PH发展过程中eNOS表达增加可能对PH有调节作用,其潜在病原学作用将值得进一步研究。

eNOS基因转染前后兔股动脉血管壁收缩性变化的实验研究

为探讨eNOS基因转染对动脉血管收缩性的影响,用家兔30只作实验研究。随机分为3组,各组10只:①转染并移植组:股动脉eNOS基因转染,并行股动脉-总颈动脉替换移植;②转染未移植组;③对照组,股动脉空载eNOS基因的腺病毒转染,并行移植。应用Organ-Bath技术,观察去氧肾上腺素对血管环收缩性的影响;比较KCl作用下3组血管环的最大静息张力;比较维拉帕米硝酸甘油混合液对3组血管痉挛的缓解率。结果表明,去氧肾上腺素使对照组收缩力最强,转染未移植组最弱,转染移植组介于两者之间;KCl作用下对照组静息张力最大,转染未移植组最小,转染移植组介于两者之间;混合液使转染未移植组舒张最快,对照组最慢,转染移植组介于两者之间。结论:eNOS基因转染可改善动脉血管壁的收缩性,提高血管壁舒张性。

eNOS基因在JAR细胞中的表达

本研究应用脂质体介导转染技术将人内皮型一氧化氮合酶 (eNOS)基因转入绒癌细胞系JAR细胞 ,获得转染阳性细胞。用RT PCR和Westernblot技术从基因及蛋白水平对表达产物进行鉴定 ,结果显示 :有较高水平的mRNA转录和特异目的蛋白表达 ;通过免疫细胞化学方法证实 ,转染eNOS基因的阳性JAR细胞与对照组相比 ,有外源eNOS蛋白高表达 ;但是一氧化氮合酶 (NOS)活性及其催化产物NO并没有直接升高 ;使用A2 3187处理则能增加NOS的活性 ,说明在转染的JAR细胞中 。

藏绵羊eNOS基因外显子8多态位点检测及高原适应性分析

本研究旨在研究内皮型一氧化氮合酶(eNOS)外显子多态性与藏绵羊高原(高海拔低氧)适应的相关性。以藏绵羊、宁夏滩羊、内蒙古羊为研究对象,利用PCR测序法检测eNOS基因exon8序列多态位点和基因型。结果发现,绵羊eNOS基因exon8序列中存在2个SNPs位点,分别是exon8-A335C和exon8-G419A;其中exon8-A335C位点有3种基因型,高、低海拔绵羊群体间基因型分布差异显著,藏羊群体中A等位基因频率较高,可能对其高原适应具有调控作用。

eNOS基因转染对大鼠颈总动脉损伤后再狭窄程度的影响

为了研究eNOS基因转染对大鼠颈总动脉损伤后再狭窄程度的影响,以2F导管制作球囊损伤的大鼠颈总动脉内膜剥脱模型。用重组真核表达载体pcDNA3.1-eNOS经Fugene6介导体内转染大鼠的损伤后血管平滑肌细胞,2w、1m、2m后处死大鼠,取出大鼠的左侧颈总动脉及对侧正常的颈总动脉,分别应用HE染色和Verhoeff铁苏木精染色,观察血管再狭窄的程度,结果发现:体内eNOS转染组的血管内膜增生明显减弱,再狭窄程度显著低于体内空白对照组和空载pcDNA3.1(-)转染组(P<0.01)。而后二者之间无显著差异(P>0.05)。

妊娠期高血压疾病血管紧张素系统基因、eNOS基因及瘦素及其受体基因的研究进展

妊娠期高血压疾病（HDCP）是妊娠期特有的严重危害母儿安危疾病。随着现代分子生物学及遗传学的发展,妊娠期高血压疾病的病因在分子领域及遗传学上有了很大进展,易感基因的逐步发现使得多基因遗传可能成为其病因之一。

健康管理对eNOS基因G894T突变人群高血压病发病风险的作用

目的：探讨健康管理对内皮型一氧化氮合成酶（eNOS）基因G894T突变人群高血压病发病风险的作用。方法：从2010年6月～2013年6月在山东省青岛疗养院体检和休养的人员以及青岛大学医学院附属医院就诊的病人中，通过基因芯片检测的方法，筛选360例45～60岁，eNOS基因G894T突变无高血压病人群为研究对象，根据依从性好坏分为健康管理组（163例）和对照组（197例，延续原有的生活方式）进行临床观察。两组均跟踪随访2年，对比高血压发生率以判断近期效果。结果：经过两年的跟踪随访，健康管理组163人中有17人（10．43％）被诊断患有高血压病；对照组197人中有49人（24．87％）被诊断为高血压病。健康管理组高血压发病率显著低于对照组（X^2=12．43，P=0．001）。结论：科学的健康管理能有效降低eNOS基因G894T突变人群的高血压发病率。