利用PCR-RFLP分析eNOS基因exon7BanⅡ酶切位点的遗传多态性

目的 :探讨内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊高征的相关性。方法 :应用PCR -RFLP技术检测了 12例正常女性的内皮型一氧化氮合酶基因第 7外显子。结果 :发现 12例正常女性中有 4例的基因型是eNOS/GG ,有 8例的基因型是eNOS/GT ,未检测到eNOS/TT型的个体。等位基因A1(eNOS/G)的频率为 66 7% ,等位基因A2 (eNOS/T)的频率为 33 3%。结论 :广东女性人群存在内皮型一氧化氮合酶第 7外显子BanⅡ酶切位点遗传多态性。

eNOS-894G/T基因多态性与佳木斯地区原发性高血压的相关性研究

原发性高血压(EH)在中国的发病率呈逐年递增趋势[1-2]。内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因第七外显子G894T发生基因突变可使其合成的eNOS结构发生改变,影响其功能,导致一氧化氮(NO)合成减低[3],进而影响血压[4]。但该基因突变与EH相关性在不同人群中结果存在争议[5]。因此本研究通过对佳木斯地区老年人群进行eNOS-894G/T基因多态性与EH的相关性研究,报道如下。

p53抑癌基因第七外显子突变在涎腺多形性涎瘤分化中的PCR-SSCP对比分析

目的 :分析、探讨p5 3第七外显子突变与涎腺多形性腺瘤分化程度的关系。方法 :对两组各 8例肿瘤组织进行PCR -SSCP。结果 :两组阳性率分别为 1 2 .5 %和 5 0 %。结论 :p5 3第 7外显子突变率在两组中无明显差异 (χ2检验 ,P >0 .0 5 ) ,p5 3抑癌基因第七外显子突变与多形性腺瘤的分化程度可能有关 。

我国成年人HERG基因EXON7-1692位点基因多态性与QT间期关系研究

目的在一特定中国人群中,探讨心肌钾通道基因HERG基因EXON7-1692位点多态性与成年期QT间期的关系。方法对该人群344人进行临床检测,记录标准12导联心电图,计算校正的QT间期(QTc);用聚合酶链反应(PCR)扩增QT间期相关基因HERG第七外显子(EXON7),其扩增产物直接进行单核苷酸序列分析。结果QTc≤0.41s者(健康对照组)为267人,占调查人群的77.6%;QTc>0.41s者(QT间期延长组)为77人,占调查人群的22.4%。在EXON7-1692位点测得单核苷酸多态性,其中,纯合GG基因型241人,占70.1%,基因频率为0.839;纯合AA基因型8人,占2.3%,基因频率为0.161;杂合GA基因型95人,占27.6%,符合Hardy-Weinburg平衡(χ=0.158,2ν=3-2=1,0.5<P<0.75)。三种基因型在健康对照组和QT间期延长组的分布频率差异没有统计学意义(χ=0.9,P=20.6)。结论该人群HERG基因EXON7-1692位点的多态性与临床QT间期无明显直接相关。

免疫球蛋白基因

免疫球蛋白(Ig)是一组非常异质性的、具有统一结构模式的蛋白质分子,它们在有机体中担负着防止外来因子入侵的重要生物学作用。在脊椎动物进化过程中,形成了一种独特的遗传机制,产生大量具有不同活性中心的Ig分子(2·10~7)。了解这个组装机制的唯一方法是研究编码合成Ig的基因结构。近年来,这方面取得了很大的进展,一方面积累了关于Ig多肽链一级结构的资料;

肝癌非高发区安徽省肝细胞癌p53基249密码子点突变的研究

目的： 研究 p53基因 249密码子在肝癌非高发区安徽省的点突变的发生率。方法：应用 PCR- RFLP技术分析肝细胞癌 p53基因 249密码子突变的频率。结果：所检测的 38例肝细胞癌均无出现 p53基因第七外显子纯合性缺失， 4例有 p53基因 249密码子的点突变，且均为杂合型突变，突变率为 10.53％ (4/38)。结论：本资料说明，在肝细胞癌非高发区中 ,肝细胞癌中 p53基因第七外显子发生的点突变并非为高发事件。提示 p53基因第七外显子的点突变在肝癌非高发区肝细胞癌的形成过程中可能不起主导作用。

一氧化氮合酶基因多态性与妊娠高血压综合征的关系

目的 探讨一氧化氮合酶基因(eNOS)第7外显子G894T点突变与妊娠高血压综合征(妊高征)的关系。 方法 应用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性(PCR RFLP)技术检测了 66例妊娠晚期妊高征患者(妊高征组)和91例正常晚期妊娠妇女(对照组)的 eNOS基因多态性位点频率。 结果 妊高征组 eNOS 基因型频率:野生型(GG)、杂合子(GT)、突变纯合子(TT)分别为62.1%,34.8%和3.1%;对照组分别为 79.1%,20.9%和 0.0%,两组比较差异有统计学意义(P<0.05)。妊高征组eNOS等位基因频率G、T分别为79.5%和20.5%;对照组分别为 89.6%和10.4%,两组比较差异有统计学意义(P< 0. 05)。妊高征病情轻重与 eNOS 基因变异频率无相关性(P>0.05)。 结论 eNOS基因894位点变异与妊高征发病有关,但与病情轻重程度无关。T等位基因可能是妊高征的易感基因。

一种新的干扰素调节因子拼接异构体IRF-3b的结构及功能

目的 干扰素调节因子 (interferonregulatoryfactors ,IRF) 3是病毒感染后调节干扰素基因转录重要的转录因子 ,寻找IRF 3新的基因拼接异构体 ,研究其结构及功能。方法 抽提人类细胞RNA ,用IRF 3已发表序列设计引物 ,作cDNA末端快速放大 (RACE)及RT PCR ,生物信息学方法比较新序列 ,亚克隆IRF 3b至 pcDNA3.1 flag ,转染人胚胎肾上皮 2 93细胞 ,用抗flag抗体作Westernblot分析 ,用荧光素酶功能分析的方法观测IRF 3b对病毒诱导的干扰素 β启动子荧光素酶活性的影响。结果 发现了一种新的IRF 3拼接异构体IRF 3b ,IRF 3b用了紧接第七外显子前的 1 6个第六内含子的碱基 ,导致阅读框架移位 ,相应蛋白质的C端第 32 8～ 4 52位为不同于IRF 3的新C末端。Westernblot出现预期的相对分子质量 (Mr)为 57.75× 1 0 3的IRF 3b蛋白强阳性条带。新的外显子序列可在小鼠的表达序列标签 (EST)表达库中找到同源序列 ,提示这种新的异构体在生物演进中有其保守功能 ,IRF 3b荧光素酶功能分析显示 ,该同分异构体能抑制病毒诱导的干扰素 β启动子活性至对照组的 4 0 %～ 50 %。结论 新的异构体的发现为IRF 3这一重要分子的功能调节提供了新的线索 ,它可能是病毒感染通路中干扰素的显性负性抑制剂 ,提示其功能为干扰素产生的?