蚯蚓液体肥料中细菌的分离鉴定及多样性研究

采用高通量测序技术、细菌分离鉴定、16S rDNA序列分析鉴定及系统发育树的建立,对蚯蚓液体肥料中优势细菌种类在门及属水平上细菌相对丰度进行研究,最终分离得到脱氮假单胞菌(Pseudomonas denitrificans)、陶厄氏属(Thauera)、门多萨假单胞菌(Pseudomonas mendocina)、柯赫芽胞杆菌(Bacillus kochii)、地衣芽胞杆菌(Bacillus licheniformis)、高地芽胞杆菌(Bacillus altitudinis)、Rummeliibacillus pycnus、枯草芽胞杆菌(Bacillus subtilis)、Bacillus solani、黄海芽胞杆菌(Bacillus marisflavi)共10株不同特征的纯化菌株。结果表明:在细菌门水平上厚壁菌门为优势菌门,细菌属水平上芽胞杆菌属为优势菌属。分离出的10株细菌中6株为芽胞杆菌属。

叶面喷施蚯蚓氨基酸肥对黄瓜品质的影响

【目的】分析叶面喷施蚯蚓氨基酸液肥对黄瓜品质的影响,为蚯蚓氨基酸肥在蔬菜上推广应用提供参考依据。【方法】设H1(喷施0.3%KH_2PO_4)、H2(喷施蚯蚓氨基酸800倍液+0.3%KH_2PO_4)、H3(喷施蚯蚓氨基酸500倍液+0.3%KH_2PO_4)、H4(喷施蚯蚓氨基酸300倍液+0.3%KH_2PO_4)、H5(喷施蚯蚓氨基酸800倍液)、H6(喷施蚯蚓氨基酸500倍液)、H7(喷施蚯蚓氨基酸300倍液)及清水对照(CK)处理,在黄瓜挂果期进行叶面喷施,采收时测定各处理黄瓜果实的维生素C(Vc)、蛋白质、可溶性还原糖、有机酸、硝酸盐含量及糖酸比。【结果】与CK相比,采收时H2、H3和H6处理黄瓜的Vc含量分别显著增加40.0%、53.5%和38.0%(P<0.05,下同);H2、H3、H4、H6和H7处理的硝酸盐含量显著降低55.2%、85.3%、67.5%、31.6%和49.6%;H3处理的蛋白质含量显著增加31.2%;各施肥处理的可溶性还原糖含量均降低,其中H4、H5和H6处理显著低于CK;H2和H3处理的有机酸含量分别显著降低14.2%和22.8%,H5、H6和H7处理分别显著降低39.1%、44.8%和36.8%;分别与H5、H6和H7处理相比,H2、H3和H4处理黄瓜的Vc含量增加,糖酸比降低,有机酸含量较高且差异显著,硝酸盐含量显著降低60.8%、78.5%和35.5%。【结论】在黄瓜挂果期喷施适当浓度的蚯蚓氨基酸液肥有利于整体提升黄瓜果实品质,其中喷施蚯蚓氨基酸500倍+0.3%KH_2PO_4混合液的效果最佳。

蚯蚓体表液的组成及其减粘脱土机理分析

蚯蚓的体表液利于减粘脱土。本文利用现代测试仪器,结合生物化学分析技术,研究了蚯蚓体表液和泥鳅分泌液的组成;并应用土壤力学和生物化学等方面的理论,初步探讨了蚯蚓体表液减粘脱土的机理。

高效液相色谱法测定蚓粪中的植物激素

建立了高效液相色谱法 (HPLC)测定蚓粪中赤霉素 (GA3)和吲哚乙酸(IAA)的方法。蚓粪中植物激素可不经DEAE纤维素柱分离和薄层层析纯化 ,就可进行高效液相色谱测定。线性范围GA3为 1 9.3～ 0 .0 3μg,IAA为 6.4～ 0 0 1μg。标准曲线的相关系数均为 0 99999。GA3和IAA的最低检测量分别为 0 0 2μg和 0 0 0 4

鲜地龙液外敷对兔耳增生性瘢痕组织形态学的影响

目的:观察鲜地龙液外敷对兔耳增生性瘢痕组织的影响。方法:选用成年新西兰大耳白兔,建立兔耳增生性瘢痕动物模型,造模术后随机分为空白组、模型组和地龙治疗组和积雪草甙组。各组进行相应的处理50天后,观察鲜地龙液对瘢痕形态及瘢痕增生指数的影响。结果:地龙治疗组与空白组、模型组及积雪草甙组之间相比较,瘢痕增生指数差异有显著性意义(P<0.05);光镜显示,明显抑制成纤维细胞增殖以及降低胶原纤维的含量。结论:鲜地龙液外敷可以对兔耳增生性瘢痕组织增生有抑制作用。

沼液在蚯蚓养殖中的资源化应用效果研究

为确定在蚯蚓规模养殖中使用沼液作保湿水对蚯蚓生长的影响,用赤子爱胜蚓作试验种,在经有效微生物(EM)处理过的牛粪养殖床(75 m2)中进行试验,每隔5 m交替投加沼液,每次施加量约为5 m3,间隔时间为7 d,并设投加清水为对照组。结果表明,在1个月的试验期后,与施用清水比较,沼液的添加对蚯蚓生长有促进作用,使蚯蚓质量增加12%;施加沼液组还促使蚯蚓的形态变粗,长度变化不明显。说明蚯蚓养殖中使用沼液作保湿水可行,对蚯蚓养殖生产具有正效益,同时使沼液废物资源化利用。

沼液对蚯蚓生长和繁殖的影响

[目的]研究在蚯蚓养殖过程中使用沼液作保湿液对蚯蚓生长的影响,为沼液废物资源化利用、蚯蚓养殖使用沼液提供参考。[方法]用赤子爱胜蚓为试验种,在经发酵处理的和未经发酵处理的牛粪2个组中养殖,定期施加沼液保持湿度,以施加清水作对照,分别就沼液对蚯蚓生长、繁殖及孵化的影响进行研究。[结果]在经发酵处理的牛粪组中施加沼液,蚯蚓的日增重倍数增加明显;再用挑出的蚓茧试验,发现施加沼液对其孵化有负影响。表明在蚯蚓的生长阶段,沼液的添加对于成蚓和幼蚓的生长都有明显的促进作用;但在蚯蚓的繁殖阶段,沼液的添加不利于其繁殖以及蚓茧的孵化。[结论]在实际应用沼液养殖蚯蚓时,应将沼液的使用范围限制在蚯蚓的生长阶段,繁殖与孵化阶段不宜使用。

加速溶剂-固相萃取-高效液相色谱法测定土壤及蚯蚓样品中多环芳烃

研究了加速溶剂萃取（ASE）、固相萃取柱净化（SPE）、高效液相色谱（HPLC）联合（ASE-SPE-HPLC）测定土壤及蚯蚓样品中7种多环芳烃（PAHs）的分析方法,确定了以正己烷-丙酮（4∶1,V/V）作为萃取剂,用ASE对土壤及蚯蚓进行萃取,提取液经SPE柱净化（土壤样品用硅胶柱净化,蚯蚓样品用Al_2O_3-硅胶柱净化）,正己烷-二氯甲烷（9∶1,V/V）进行洗脱,洗脱体积为10 m L,旋转浓缩蒸干后,乙腈定容,过0.22μm有机滤膜,最后用HPLC对提取液中7种PAHs进行定量的分析方法。土壤样品方法回收率在83.5%~110.2%之间,相对标准偏差为1.0%~4.6%;蚯蚓样品回收率在81.2%~97.1%之间,相对标准偏差为1.6%~4.2%。方法检出限为0.15~0.85μg/kg,且重现性好。可满足样品分析的质量控制要求,表明本分析方法具有良好的准确性与可靠性。

关于生物质固废资源化技术研发及应用的研究

该项目研究了秸秆、园林绿化垃圾、厨余垃圾等生物质固废的结构特征,利用微生物降解技术结合蚯蚓养殖技术、新型离子液体催化转化技术,将上述生物质固废资源化生产有机肥、饲料以及平台化合物。

手性高效液相色谱-同位素稀释串联质谱法测定土壤及蚯蚓中的六溴环十二烷对映体

采用高效液相色谱-同位素稀释串联质谱法（LC-ID-MS/MS）建立了土壤和蚯蚓中手性α-,β-,γ-六溴环十二烷（HBCD）的分离分析方法。样品添加d18-HBCDs作为同位素内标后提取,土壤样品采用正己烷-二氯甲烷（1∶1,V/V）作萃取剂,加速溶剂萃取（ASE）,硅胶固相萃取小柱净化;蚯蚓样品采用乙酸乙酯涡旋超声提取,浓硫酸磺化后过硅胶小柱净化。α-,β-,γ-HBCD各对映体的线性范围为0.25~50 ng/m L;土壤中检出限为0.00544~0.00766 ng/g,定量限为0.0173~0.0244 ng/g,在0.05和2.5 ng/g添加浓度的回收率为80.0%~95.9%,相对标准偏差RSD为5.7%~11.9%;在蚯蚓中,检出限为0.0103~0.0148 ng/g,定量限为0.0328~0.0471 ng/g,在0.1和5.0 ng/g添加浓度的回收率为78.0%~94.4%,相对标准偏差RSD为6.1%~12.2%。可满足实际样品的测定要求。

微生物菌肥与蚯蚓液体肥对设施连作番茄生长和土壤肥力的影响

针对连作设施番茄产量降低、土壤肥力下降问题,以传统施肥为对照(CK),设置微生物有机固体肥+微生物菌剂灌根(T1)、微生物有机固体肥+微生物菌剂灌根+蚯蚓液体追肥(T2)处理,探究微生物菌肥与蚯蚓液体肥对连作番茄生长和土壤肥力修复效果研究。结果表明,相对CK,T1、T2处理显著增加了叶片相对生长速率、土壤速效钾含量和总生物量,分别为5.14%、3.12%,25.77%、34.02%和18.10%、14.65%。相对CK和T2处理,T1处理显著增加了株高生长速率和果实产量,分别为3.77%、4.46%和18.37%、19.90%;相对CK,T1处理显著增加植株地上和地下部干重、土壤有机质和全氮含量,分别为17.06%、35.19%、37.57%和22.44%。综合肥力指数表明,T1>CK>T2,T1综合肥力指数SFI显著高于CK和T2处理,分别为11.21%及19.03%。相关性分析表明,产量与综合肥力指数、地下部鲜重、地下部干重呈极显著正相关,与速效氮呈极显著负相关,与全氮呈显著性正相关。总之,相对CK,T2处理显著促进植株生物量增加,T1处理对促进番茄植株生长和增加土壤肥力效果最佳。

蚯蚓堆肥和蚯蚓液体肥对设施葡萄生长及土壤特性的影响

以设施栽培的"红地球"葡萄为试验材料,采用单因素完全随机设计,研究了蚯蚓堆肥与蚯蚓液体肥对葡萄叶片光合能力、植株生长情况、土壤状况和果实品质及产量的影响。结果表明,利用蚯蚓堆肥与蚯蚓液体肥,可提高叶绿素相对含量与净光合速率11.12%、15.31%,促进葡萄的生长,提高叶片面积、茎粗和新梢生长量7.58%、6.42%、18.86%,开花期促进茎叶磷素的吸收,成熟期促进茎叶钾素的吸收;改善土壤理化性质,降低土壤容重30.43%,显著增加总孔隙度8.63%,增加土壤EC值38.24%,pH值降低8.32%,提高速效氮、磷、钾10.56%、11.11%、12.67%,提升有机质3.15g·kg-1;活化土壤微生物,提高脲酶、磷酸酶和蔗糖酶66.86%、54.60%、82.03%,细菌、放线菌、真菌数量是对照的3.20倍、0.43倍、3.28倍,提高微生物碳氮14.98%、20.23%,增加可溶性蛋白、维生素C、可溶性固形物、糖酸比24.31%、9.74%、5.49%、23.46%,降低可滴定酸13.51%;产量增加了21.73%。试验结果表明,土壤理化性质以及土壤微生物关系密切。

饲喂蚯蚓液对公番鸭肌肉品质的影响

试验旨在探索蚯蚓液对公番鸭肌肉品质的影响。选用180只1日龄公番鸭,用单因子试验设计,随机分成3组,每组3个重复,每个重复20只,各组分别饲喂添加蚯蚓液0%、1.5%、2.5%的基础饲粮,试验期70 d。结果表明:(1)添加蚯蚓液对番鸭胸肌肉水分、粗灰分、粗蛋白、粗脂肪均没有显著影响(P>0.05);但2.5%蚯蚓液组水分、粗脂肪含量要低于空白对照组(P>0.05);(2) 2.5%蚯蚓液组胸肌肉18种氨基酸总量、8种必需氨基酸、7种风味氨基酸含量均高于空白对照组(P>0.05);(3) 2.5%蚯蚓液能够明显提高亚麻酸(P<0.01)、二十碳二烯酸(P<0.05)、二十碳三烯酸(P<0.05)、花生四烯酸(P<0.05)的含量,降低十四碳酸的含量(P <0. 05),其中多不饱和脂肪酸是空白组的1. 89倍(P>0.05),必需脂肪酸是空白组的1.76倍;(4) 2.5%蚯蚓液饲喂番鸭后番鸭胸肌肉重金属含量符合食品安全标准;(5) 1.5%蚯蚓液组对番鸭胸肌肉品质没有显著影响。因此,2.5%蚯蚓液饲喂番鸭能够改善肉质。

蚯蚓仿生注液沃土装置设计与试验

蚯蚓吞噬土壤,构建洞穴,发挥了肥沃土壤的重要作用。该文借助工程仿生技术手段,运用计算机图像处理技术对蚯蚓头部、体节轮廓图像进行量化分析,提取并拟合蚯蚓头部和体节的轮廓曲线,构建注液沃土装置的仿生几何结构表面。仿蚯蚓背孔排布方式设计了3孔和6孔注液型沃土装置,以UHMWPE为材料制备样机,并采用农机土槽试验系统开展注液沃土装置样机选型试验,考察孔数、是否注液、材料、表面结构4个参数对工作阻力和土壤粘附量的影响。试验结果表明,各参数对工作阻力的影响程度依次为:注液>孔数>材料>表面结构;对土壤粘附量的影响程度依次为:表面结构>孔数>材料>注液。从8类样机中确定的优选类型为:有6个注液孔、UHMWPE材质且具有仿生几何结构表面的仿生注液沃土装置。对选定的样机进行验证,结果表明:在相同试验条件下,该样机的平均工作阻力为283.48 N,平均土壤粘附量值为10.93 g,均低于其他类型样机。该研究工作可为实施机械化沃土工程提供技术参考。

仿生注液沃土装置工作参数的优化与试验

为探索仿生注液沃土装置在土壤内部作业时工作参数对工作阻力和土壤粘附量的影响规律,优化作业参数,以保障并提高注液沃土装置作业质量,同时降低工作阻力和土壤粘附。该研究采用Box-Behnken试验优化设计方法,通过搭建农机土槽台车试验系统以模拟田间作业环境,开展注液沃土装置样机工作参数优化试验,将入土深度、注液量、土槽台车速度3个工作参数设为自变量,将工作阻力和土壤粘附量设为响应值,建立多元二次多项式回归方程,根据自变量与响应值之间的关系,优化仿生注液沃土装置的工作参数。结果表明:以土壤粘附量和工作阻力为响应值建立的回归方程模型拟合度良好;入土深度、液肥流量和工作速度对降低工作阻力和减小土壤粘附量的影响均显著,且入土深度和速度存在交互效应;试验因素对注液沃土装置降低工作阻力和减小土壤粘附量的影响程度为:入土深度>速度>流量,得到最优的工作参数为:入土深度11 cm、速度1.0 m/s、流量350 g/s。在最优工作参数条件下,注液沃土装置的工作阻力为260.01 N,土壤粘附量为8.73 g。该研究工作为注液沃土技术的应用和推广提供了参考依据。

饲粮中添加蚯蚓液对樱桃谷鸭生产性能、肌肉品质及血清生化指标的影响

试验旨在研究饲粮中添加蚯蚓液对樱桃谷鸭生产性能、肌肉品质及血液生化指标的影响。选用1日龄樱桃谷鸭240只,随机分成4组,每组3个重复,每个重复20只,各组分别饲喂添加蚯蚓液0(对照组)、1%、1.5%、2%的基础饲粮,试验期为42 d。结果表明:肌肉品质方面:胸肌粗蛋白含量2%组显著高于对照组和1.5%组(P<0.01),粗脂肪含量1.5%组显著高于其他各组(P<0.05)。胸肌缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)含量对照组高于2%组和1.5%组(P<0.05);酪氨酸(Tyr)含量2%组显著高于对照组和1%组(P<0.05);血清生化指标:与对照组相比,1.5%和2%组谷草转氨酶显著降低(P<0.05)。蚯蚓液对樱桃谷鸭其他指标均没有显著影响(P>0.05)。由此可见,饲粮中添加蚯蚓液2%以下不能显著提高樱桃谷鸭生产性能,对免疫器官发育、胸肌脂肪酸含量和血清生化指标没有显著影响,不会影响动物的正常机能;但当饲料中蚯蚓液添加量为2%时对樱桃谷鸭肌肉蛋白质含量、肉质营养水平的提高效果较好;当蚯蚓液添加量为1.5%时可促进肌肉脂肪的沉积,改善肉质的嫩度和风味。

高效液相色谱串联质谱法检测蚯蚓体内硒代氨基酸

建立了高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI-MS)检测蚯蚓体内硒代氨基酸的分析方法.采用振荡超声辅助酶解法提取蚯蚓(赤子爱胜蚓(Eisenia fetida))体内的硒代蛋氨酸(SeMet)和甲基硒代半胱氨酸(MeSeCys).用HPLC-ESI-MS正离子多反应离子监测模式(MRM)对这两种硒代氨基酸进行分离检测,外标法定量.SeMet和MeSeCys在4-600 ng·mL^-1有良好的线性关系,线性相关系数R^2均大于0.9999.SeMet和MeSeCys的方法检出限分别为0.49μg·g^-1和0.67μg·g^-1.样品加标回收率在81.1%-112.4%之间,并且相对标准偏差RSD均小于3.1%.本方法不需要柱前衍生化,增加反向气等繁琐操作,简单快速的实现对两种硒代氨基酸的分离检测.

饲喂蚯蚓液对番鸭血清生化指标的影响

在番鸭的基础饲粮中分别添加蚯蚓液0%、1.5%、2.5%,研究了不同蚯蚓液添加量对番鸭血清生化指标的影响。结果表明:添加2.5%蚯蚓液能够显著提高公番鸭的脂质代谢指标TC、TG、LDL,而对母番鸭没有显著影响;添加2.5%蚯蚓液能够显著提高公番鸭的肝脏功能指标ALB含量、白球比、ALP活性,而对母番鸭只能显著提高ALP活性;添加1.5%蚯蚓液可以显著提高公番鸭的TP、ALB、GLB含量,显著降低白球比、ALP活性,而对母番鸭则没有显著影响;添加1.5%蚯蚓液能够明显提高公番鸭的肾脏功能指标UA,而对母番鸭则没有影响。因此,用2.5%蚯蚓液饲喂番鸭能够提高公番鸭的代谢水平,且不会损伤肝脏、肾脏。

饲粮中添加蚯蚓液对樱桃谷鸭肌肉品质的影响

试验旨在探索蚯蚓液对42日龄樱桃谷鸭肌肉品质的影响。选用240只1日龄樱桃谷鸭,用单因子试验设计,随机分成4组,每组3个重复,每个重复20只,各组分别饲喂添加蚯蚓液0%、1%、1.5%、2%的基础饲粮。试验期42 d。结果表明:1)胸肌肉粗蛋白含量2%组明显高于0%组和1.5%组(P<0.01),粗脂肪含量蚯蚓液1.5%组高于其他各组(P<0.05)。2)胸肌肉缬氨酸(Val)、异亮氨酸(Ile)含量0%组高于2%组和1.5%组(P<0.05);酪氨酸(Tyr)含量2%组高于0%组(P<0.05),明显高于1%组(P<0.01);色氨酸(Trp)含量2%组高于1%组(P<0.05);8种必需氨基酸含量2%组高于1.5%组(P<0.05)。3)其他指标均差异不显著(P>0.05),因此,樱桃谷鸭饲粮中添加2%蚯蚓液能改善肉的品质。

蚯蚓发酵液体肥对小麦生长及病害预防效果的影响

在宁夏中部引黄灌区小麦主产区进行大田试验,以小麦宁春50号为试验材料,采用单因素完全随机设计,设置300、450、600 kg/hm^23个蚯蚓发酵液体肥施用量,探讨不同施用量蚯蚓发酵液体肥对小麦株高、叶面积系数、干物质、产量构成因素、纹枯病和根腐病发生的影响.结果表明:施用蚯蚓发酵液体肥提高株高3.02%~55.95%,增加叶面积指数12.79%~69.68%,促进茎秆、籽粒、颖壳和叶等器官干物质积累,成熟期纹枯病和根腐病防效分别74.58%~83.81%、70.08%~77.88%,增产7.34%~28.94%.不同蚯蚓发酵液体肥施用量对各指标的影响存在显著差异,峰值出现在600 kg/hm^2处理.