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短短芽孢杆菌X23中edeB基因的克隆、原核表达及转录时相分析
被引量:
1
1
作者
杜杰
蔡海林
+8 位作者
黄彬彬
黄军
张翠央
龙青山
张亮
陈海荣
唐冰璇
陈武
刘清术
《激光生物学报》
CAS
2023年第2期146-152,共7页
短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)X23可产生非核糖体肽类抗生素伊短菌素,已被广泛用于植物病害的生物防治。伊短菌素合成基因簇中,edeB基因参与调控伊短菌素的合成积累。本研究利用基因同源重组技术,以edeB基因作为外源基因的重组片...
短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)X23可产生非核糖体肽类抗生素伊短菌素,已被广泛用于植物病害的生物防治。伊短菌素合成基因簇中,edeB基因参与调控伊短菌素的合成积累。本研究利用基因同源重组技术,以edeB基因作为外源基因的重组片段,构建了原核表达载体pET28a-edeB,转化至大肠杆菌BL21(DE)中进行诱导表达;通过转录组测序检测edeB基因在短短芽孢杆菌不同培养时间(12、18、24、30和36 h)的转录时相。结果表明:edeB基因全长为771 bp,编码256个氨基酸。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,在分子质量为30 kD处有一条特异条带,与生物信息学预测的EdeB蛋白的大小一致,且EdeB蛋白主要以包涵体的形式存在。转录时相分析结果表明,edeB基因在各个培养时间点均有表达,表达模式为先升高后降低,且在30 h时表达水平最高。这些结果为进一步研究edeB基因调控伊短菌素合成积累的分子机制奠定了基础,为短短芽孢杆菌高产伊短菌素菌株的构建提供了理论依据。
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关键词
短短芽孢杆菌
edeb基因
原核表达
转录时相
转录组
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职称材料
题名
短短芽孢杆菌X23中edeB基因的克隆、原核表达及转录时相分析
被引量:
1
1
作者
杜杰
蔡海林
黄彬彬
黄军
张翠央
龙青山
张亮
陈海荣
唐冰璇
陈武
刘清术
机构
湖南省农用微生物应用工程技术研究中心
湖南省烟草公司长沙市公司
湖南农业大学植物保护学院
出处
《激光生物学报》
CAS
2023年第2期146-152,共7页
基金
长沙市自然科学基金项目(kq2208130)
国家自然科学基金项目(32000047)
+1 种基金
湖南省技术攻关“揭榜挂帅”项目(2021NK1040)
湖南省烟草公司长沙市公司科技项目(CS2022KJ02)。
文摘
短短芽孢杆菌(Brevibacillus brevis)X23可产生非核糖体肽类抗生素伊短菌素,已被广泛用于植物病害的生物防治。伊短菌素合成基因簇中,edeB基因参与调控伊短菌素的合成积累。本研究利用基因同源重组技术,以edeB基因作为外源基因的重组片段,构建了原核表达载体pET28a-edeB,转化至大肠杆菌BL21(DE)中进行诱导表达;通过转录组测序检测edeB基因在短短芽孢杆菌不同培养时间(12、18、24、30和36 h)的转录时相。结果表明:edeB基因全长为771 bp,编码256个氨基酸。聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)显示,在分子质量为30 kD处有一条特异条带,与生物信息学预测的EdeB蛋白的大小一致,且EdeB蛋白主要以包涵体的形式存在。转录时相分析结果表明,edeB基因在各个培养时间点均有表达,表达模式为先升高后降低,且在30 h时表达水平最高。这些结果为进一步研究edeB基因调控伊短菌素合成积累的分子机制奠定了基础,为短短芽孢杆菌高产伊短菌素菌株的构建提供了理论依据。
关键词
短短芽孢杆菌
edeb基因
原核表达
转录时相
转录组
Keywords
Brevibacillus brevis
edeb
gene
prokaryotic expression
transcription profile
transcriptome
分类号
Q939.96 [生物学—微生物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
短短芽孢杆菌X23中edeB基因的克隆、原核表达及转录时相分析
杜杰
蔡海林
黄彬彬
黄军
张翠央
龙青山
张亮
陈海荣
唐冰璇
陈武
刘清术
《激光生物学报》
CAS
2023
1
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参考文献
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