Nutritional properties of Europen eel(Anguilla anguilla)bone peptide-calcium and its apoptosis effect on Caco-2 cells

The present study aimed at making a rational usage for European eel bone by-products by preparing Europen eel bone peptide chelated calcium(EBPC-Ca).Nutritional properties and bioactivity of EBPC-Ca were evaluated.Results showed that nutritional properties of calcium ions will cause intra-and inter-molecular folding and aggregation of peptide to uniformly form EBPC-Ca chelate.The chelated compound of EBPC and calcium ion triggered a strong apoptosis in heterogeneous human epithelial colorectal adenocarcinoma(Caco-2)in concentration-and time-dependent manners.Western blot analysis revealed that the EBPC-Ca induced apoptosis may be the result of a blocked autophagy flux through mitochondrial-dependent pathway.Additionally,the increase in FGF-23 protein expression inhibited the absorption of calcium ions and alleviated cell apoptosis.It was also found that the cell apoptosis occurs with significant increases in the levels of reactive oxygen species(ROS)and Ca^(2+)in the cells,indicating the anti-tumor potential of EBPC-Ca may involve multiple channels.

烤鳗加工废料鳗骨的综合利用

测定了烤鳗加工废弃物鳗骨的成分,系统研究了以鳗骨为原料提取鳗骨油,经盐形成法和尿素包合法制取鱼油多不饱和脂肪酸,喷雾干燥法制备鳗油微胶囊的工艺条件。结果表明,该工艺简便易行,鳗骨油提取完全率达76％以上;纯化后鳗骨油脂肪酸中EPA、DHA含量由7.4％提高至45％以上,总回收率为64％,微胶囊制品中PUFA含量达26.2％左右,其抗氧化稳定性远高于未经包囊的混合物。

GC／MS法分析鳗鱼骨油的脂肪酸

用乙醚／已烷混合溶剂抽提鳗鱼骨油，用ＫＯＨ－ＣＨ_３ＯＨ酯交换法甲酯化，以毛细管色谱／质谱方法测定脂肪酸的组成。共检出２７种脂肪酸，其中以棕榈油酸、棕榈酸、油酸、硬脂酸、花生烯酸为主。

综合利用烤鳗下脚料鳗骨的工艺研究

研究了酶水解提取烤鳗加工下脚料鳗骨中蛋白质与鳗油的最佳条件，分析了蛋白质提取物和鳗油的成分及性质，提出了采用酶法综合利用下脚料鳗骨的工艺路线。

鳗鱼骨矿物质脱除工艺的研究

[目的]研究鳗鱼骨矿物质的脱除工艺。[方法]以料液比、温度、盐酸浓度、换液频率、搅拌与否为因素,鳗鱼骨浸酸过程中矿物质钙的溶出速率为指标,研究各因素对鳗鱼骨矿物质脱除的影响,确定鳗鱼骨矿物质的脱除工艺。[结果]鳗鱼骨胶原蛋白提取过程中用盐酸溶液脱除其中的矿物质,可提高胶原蛋白质量。料液比为1∶8(g/ml)时,鳗鱼骨浸酸过程中钙离子可充分溶出。随着盐酸浓度的增加,鳗鱼骨浸酸过程中钙离子的溶出量增加。鳗鱼骨矿物质的最佳脱除工艺为:盐酸浓度0.5 mol/L,料液比1∶8(g/ml),温度15℃,静置,每1 h换液1次,共换3次。[结论]脱除矿物质后,鳗鱼骨的灰分含量由41.22%降低至0.03%,蛋白质含量由40.54%提高至81.47%。

微波萃取鳗骨油的研究

研究了鳗骨油的微波萃取条件 ,采取正交实验 ,探讨溶剂、水分以及微波辐照时间等因素对萃取效率的影响 .在微波作用下 ,实验所选的混合溶剂的萃取能力相近 ;试样中水分的影响极为显著 ,无水或水量过多均对鱼油萃取产生不利影响 ;微波辐照时间对萃取率影响也十分明显 .鳗骨油微波萃取的最佳条件为 :干样品加水 3mL ,以氯仿 丙酮 (体积比为 2∶1)为混合萃取溶剂 ,微波辐照时间 9min .

酸/碱预处理对美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)鱼骨明胶理化性质与凝胶特性的影响

以美洲鳗鲡(Anguilla rostrata)鱼骨为原料,采用酸或碱预处理结合热水浸提制备鱼骨明胶,并通过得率、凝胶强度测定、SDS-PAGE、紫外全波长扫描、红外光谱扫描、动态流变学测定以及扫描电镜等研究鱼骨明胶的理化性质和凝胶特性。结果表明:酸法预处理明胶(AG60)与碱法预处理明胶(BG60)得率分别为13.6%和6.88%,凝胶强度分别为101.95 g和78.74 g。AG60和BG60的羟脯氨酸含量为3.2 g/100 g和2.7 g/100 g。两种明胶均含有β和α;、α;链,其中AG60的α;+α;含量显著高于BG60。AG60与BG60均具有明胶的特征吸收峰,且无杂蛋白吸收峰。与BG60相比,AG60具有更高的凝胶温度与熔融温度,以及更短的胶凝时间。扫描电镜分析显示,AG60具有更致密、均一的凝胶网络结构。本研究表明,与碱法预处理相比,酸法预处理制备得到的鳗鱼骨明胶具有更高的得率与更好的凝胶特性。

鳗骨油微胶囊质量特性及固化时间对其的影响

对以复凝聚法制作的鳗骨油微胶囊湿囊的质量特性进行了研究 .结果表明 ,此微囊的耐冻性、耐磨性、酶解特性均良好 ,并有一定的耐热性 .固化时间对其质量特性有显著影响 .这种制作微囊的方法未对鳗骨油的酸价、过氧化值等品质指标产生显著的影响 .

鲤鱼脑垂体和HCG诱导雌性河鳗性腺成熟过程中钙磷变化的初步研究

将卵巢处于第Ⅱ期的雌性河鳗(Anguilla japonica)随机分成4组,即恒量注射激素组、梯度注射激素组、对照组(注射生理盐水)和空白组;恒量组和梯度组注射鲤鱼脑垂体和HCG,且激素总量一致.检测河鳗发育过程中性腺、骨骼、肝脏、肌肉和血液中钙和磷含量的变化.结果表明,注射激素的雌鳗卵巢中的钙、磷含量逐步升高,血清中钙、磷含量先降后升;骨骼中钙、磷含量明显低于对照组和空白组(P﹤0.05),肝脏中钙明显升高,磷含量无显著变化.当卵巢发育到第Ⅴ期时,恒量组和梯度组河鳗的性腺、骨骼、肝脏、肌肉和血液中钙磷含量无明显差异(P﹥0.05).血清钙、磷含量先下降,然后骨骼中钙、磷也开始下降同时血清和性腺钙、磷升高.表明河鳗的卵巢发育先动用血液中的钙、磷,然后骨骼中的钙、磷通过血液转移到性腺,为雌性河鳗的卵巢发育提供了物质基础.

盐酸溶液料液比及浓度对鳗鱼骨中钙溶出的影响

鳗鱼骨胶原蛋白提取过程中用盐酸溶液脱除鳗鱼骨中的矿物质,可以提高胶原蛋白的质量。本文研究了盐酸溶液料液比和浓度对鳗鱼骨中钙溶出的影响。结果表明:1∶8(g∶mL)的盐酸溶液料液比可满足鳗鱼骨浸酸过程中钙离子的充分溶出;0.5mol/L盐酸溶液浓度即可达到较好的钙脱除效果。

酶解法所获鳗骨油品质的研究

对以酶解法工艺提取鳗骨油时 ,不同阶段所获油脂的品质进行了比较研究。结果表明这些油脂的品质存在显著的差异。酶解法获得品质较高的鳗骨油。交酯化和冬化分离处理可使酶解鳗骨油的不饱和度显著提高 ,而氧气存在时可导致POV值的大幅度增加。

鳗钙片在儿童体内吸收、利用研究

用平衡代谢法在儿童体内对鳗钙片进行钙的吸收代谢试验。试验设每日３、６、９片三个剂量组。相当于分别摄入钙７５ｍｇ、１５０ｍｇ和２２５ｍｇ，为期３０ｄ，同时设空白对照组，结果表明，各鳗钙组钙的吸收量及存留量呈剂量效应关系，且高剂量组吸收量和存留量与对照组及实验前相比均是显著性差异（ｐ＜０，０５）。

肉骨粉代替不同水平的鱼粉对黄鳝生长的影响

以肉骨粉为蛋白源等氮替代0.0%、7.5%、15.0%、22.5%、30.0%、37.5%的鱼粉,对黄鳝(平均体重8.05g)进行生长试验。结果表明,随着饲料中肉骨粉的增加,黄鳝增重率下降,饵料系数增加,蛋白质利用率下降;对照组和试验组的增重率存在显著差异。综合考虑增重率、饵料系数和蛋白质利用率及经济因素,在黄鳝配合饲料中肉骨粉替代率在22.5%以内,且鱼粉含量不应低于30%,对黄鳝的生长不会造成明显的影响。

不同贮藏条件下鳗骨油氧化特性的研究

研究了室温下（15℃）鳗骨油在空气中的自氧化速度，以及温度和贮藏条件对鳗骨油氧化速度的影响。实验所设的温度梯度分别为6℃、15℃、35℃，贮藏条件分别是敞口，密封（蜡封）和用N2驱除氧气后密封保存。实验结果显示，室温下鳗骨油在空气中的自氧化速度，敞口存放4天，过氧化值就已超过0.15；温度和贮藏条件对鳗骨油的氧化速度有显著影响，驱除氧气低温贮藏可以有效地防止鳗骨油的氧化。

肉骨粉、豆粕替代鱼粉水平对黄鳝生长的影响

分别用肉骨粉和豆粕为蛋白源等氮替代0%、7.5%、15.0%、22.5%、30.0%、37.5%的鱼粉,对平均体重8.05g的黄鳝(Monopterus albus),进行生长试验,结果表明:随着肉骨粉和豆粕在饲料中含量的增加,黄鳝增重率下降,饵料系数增加,蛋白质利用率下降;在肉骨粉替代试验中,增重率在对照组和试验组中存在显著差异,在豆粕替代试验中,对照组与7.5%的替代组之间增重率无显著差异。考虑到增重率、饵料系数和蛋白质的利用率及经济因素,在黄鳝配合饲料中肉骨粉替代在22.5%以内,豆粕替代在15.0%以内对黄鳝的生长不会造成明显的影响,且黄鳝配合饲料中鱼粉含量不应低于30%。

利用重组胰蛋白酶对鳗鱼下脚料酶解生产复合氨基酸及产品中钙的测定

采用鳗鱼带肉骨作为原料,原料预处理后用胰蛋白酶水解法生产富含钙的复合氨基酸液及粉料。研究了酶解的最佳工艺条件,实验结果表明:酶解的最佳条件是在pH为8.0、温度为45℃、加酶量为2%、酶解时间为3h的条件下进行实验。利用紫外分光光度法在215nm和225nm的差值下测定产品中蛋白质的含量,用石墨炉原子吸收法测定产品中钙的含量,产品中蛋白质含量可达29.7%,钙的含量为4.79%。该方法工艺简单,产品可以作为食品鲜味剂原料,也可以作为高级酱油原料,同时对废物进行利用,减少企业环境污染。

干细胞治疗骨质疏松症的可行性研究

目的研究干细胞治疗骨质疏松症的可行性。方法从体外输入同种异体骨髓间充质干细胞(BMSCs)治疗大鼠骨质疏松症,测定大鼠的骨密度变化。结果骨质疏松大鼠通过BMSCs治疗后,骨密度明显增加。结论 BMSCs能有效治疗骨质疏松症,增加骨密度。

鳗鱼骨胶原肽钙螯合物的制备及其稳定性和Caco-2吸收特性

结合胃蛋白酶、胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶制备具有高钙结合能力的鳗鱼胶原蛋白肽(eel bone collagen peptide,EBCP)。通过优化确定制备EBCP-Ca的最佳条件为40℃、pH 7.5、40 min、多肽与钙质量比5∶1,此条件下钙螯合率达80%以上。荧光光谱、傅里叶变换红外光谱和扫描电子显微镜检测结果表明,胶原蛋白肽的羧基和氨基氮原子可能会螯合钙,从而形成EBCP-Ca。EBCP-Ca可在不同温度、pH值条件下保持稳定性并进行模拟胃肠道消化,同时EBCP-Ca对Caco-2细胞呈现低毒性作用。另外,使用Caco-2细胞单层模型验证EBCP-Ca在体外的钙摄取率,研究EBCP-Ca浓度和培养时间对Caco-2细胞钙离子质量浓度和碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)活性的影响。结果表明,EBCP-Ca能提高AKP活性,进而有利于促进人体胃肠道中钙的吸收。该研究为开发新的钙补充剂和鳗鱼骨的高价值利用提供了一定科学依据。

盐酸法提取鳗鱼骨钙的工艺研究

研究了盐酸浓度(A)、盐酸用量(B)、提取温度(C)、提取时间(D)对鳗鱼骨钙的溶出率的影响。在此基础上进行了正交试验,确定了鳗鱼骨钙提取的最优组合是A2B3C2D3,即盐酸浓度为3 mol/L、盐酸用量4 mL、提取温度50℃、提取时间150 min。在最优组合条件下,鳗鱼骨钙的溶出率为81.31%。影响鳗鱼骨钙的溶出率的因素主次顺序为:盐酸浓度>盐酸用量>提取温度>提取时间。

不同鱼类肌间骨的骨化模式研究

为研究鱼类肌间骨的骨化模式,采用整体骨骼染色方法,对黄鳝(Monopterus albus)和泥鳅(Misgurnus anguillicaudatus)2种处于不同进化地位且游动模式不同的鱼类肌间骨发生发育进行了系统观察。结果显示合鳃鱼目合鳃鱼科且游动模式属于鳗鲡模式的黄鳝在孵出后30d(体长40 mm)时,其头部开始出现椎体小骨;随后依次向尾部骨化,在孵出后55d(体长约100 mm)时,肌间骨相继出现完毕,所有椎体小骨均为"I"形。鲤形目鳅科且游动模式为鲹科模式的泥鳅在孵出后27d(体长17 mm)时,肌间骨开始在尾部出现,包括髓弓小骨和脉弓小骨;随后依次向头部骨化,在孵出后40d(体长35 mm)时,肌间骨全部出现,形态包括"I"、"Y"和"卜"形。此外,研究利用成骨细胞特异性转录因子绿色转基因荧光蛋白(Osterix GFP)斑马鱼品系,通过观察此osterix GFP活体斑马鱼,可发现斑马鱼肌间骨从尾部向头部依次骨化的过程。研究结果揭示鱼类肌间骨的骨化规律与其游动模式密切相关,且肌间骨的形态种类的多态性与其游动模式和体型有一定的关系。