鳗鱼皮胶原蛋白水解物对结肠炎的改善作用

溃疡性结肠炎(UC)是一种特发性肠道疾病,发病率不断上升,且治疗药物都存在不同程度的副作用。研究发现胶原蛋白肽可缓解UC症状,并且安全、健康。然而,目前研究主要局限于UC的预防作用,缺少对其治疗作用的研究。鳗鱼皮富含胶原蛋白,而鳗鱼头一般在加工中被丢弃,造成资源浪费,目前缺少对鳗鱼皮胶原蛋白水解物的研究。本研究尝试利用鳗鱼头中的鱼皮提取胶原蛋白并进行水解,希望得到对UC具有治疗作用的鳗鱼皮胶原蛋白水解物(CH),提高鳗鱼加工副产物的利用价值。研究发现鳗鱼皮所含胶原蛋白丰富,占鱼皮湿重的27.87%,纯度较高且主要为Ⅰ型胶原蛋白,可作为胶原蛋白的优质来源。对胶原蛋白进行酶解,得到具有抗氧化活性的CH,并给药UC模型小鼠,结果显示:与阳性对照和模型组相比,CH可以安全健康地降低UC模型小鼠的DAI评分至0,并改善结肠状态;结肠组织病理切片表明CH可以恢复黏膜上皮完整性,减轻炎性细胞浸润;结肠组织氧化应激指标表明CH可以降低结肠组织MDA含量(0.75 nmol/mg pro)和MPO活性(0.11 U/g tissue),并通过提高GSH含量(22.92 umol/g pro)和SOD(693.61 U/g pro)、CAT(1.69 U/g pro)、GPx(141.29U/g pro)3种抗氧化酶活性来提高结肠组织抗氧化能力,降低氧化应激水平,从而治疗UC。

日本鳗鲡腐皮病病原菌的分离及鉴定

从患腐皮病的日本鳗鲡（Anguilla japonica）体表溃烂处分离到1株病原菌（322A）,对其进行了人工感染实验和生理生化分析,测定了该菌株的16S rRNA基因序列和促旋酶（gyrase）B亚单位gyrB基因序列,并分别构建系统发育树。结果显示：感染实验证实菌株322A具有致病性;生理生化分析鉴定该菌株属于气单胞菌属（Aero-monassp.）;16S rRNA基因分析显示,该菌株与气单胞菌属细菌的同源性均在99%-100%,构建的系统树显示,菌株322A与嗜水气单胞菌（A.hydrophila（FJ462702））亲缘关系最近;gyrB基因分析表明,该菌株与A.hydrophila种内序列的相似性为96%-98%,种间序列的相似性为94%-95%,构建的系统树结果显示,该菌株与A.hydrophila（FJ608553、FJ608552、AF208259）聚为一个分支。综合上述实验结果,菌株322A可鉴定为嗜水气单胞菌（A.hydrophila）。

嗜水气单胞菌外膜蛋白ISCOM疫苗免疫欧洲鳗鲡后抗体分泌细胞变化

制备嗜水气单胞菌MOMP-ISCOMs疫苗,使用该疫苗口服和注射免疫欧洲鳗鲡,分别于口服或注射免疫后第14、28d分离欧洲鳗鲡的皮肤和肾脏细胞,使用ELISPOT技术分析其中抗体分泌细胞ASC的数量变化。结果显示:2种免疫方式均能不同程度增加皮肤和肾脏中免疫细胞的数量;其中口服免疫组非特异性免疫细胞数量增加速度较快,注射免疫组特异性免疫细胞数量增加更多。

日本鳗鲡腐皮病组织病理学研究

本文报告了以原绵霉为原发病原、继发嗜水气单胞菌的日本鳗鲡腐皮病组织病理学的研究。外观症状:病鱼体表粘液斑块状脱落,皮肤坏死、溃烂,有出血和炎性渗出物。组织病理变化:烂鳃,鳃丝固有结构崩解;皮肤坏死,肌纤维融解、消失;心肌纤维紊乱、坏死,肌间炎性细胞浸润,血栓;肝脏肿大、空泡、坏死;脾出血,淋巴细胞数量减少;肠道粘膜上皮脱落、坏死,固有膜炎性白细胞浸润;肾脏受损严重,广泛充血、出血,炎性细胞浸润,肾小管肿胀、坏死,肾小球萎缩,囊腔内出现血球。

鳝鱼皮胶原蛋白肽的制备及其抗氧化性能的研究

以新鲜鳝鱼皮为原料,将鳝鱼皮处理成干燥的粉末,采用酶解法提取胶原蛋白肽。在考察酶的种类、pH、酶解温度和酶解时间4个因素提取效果的基础上,进行了实验。优化实验分析结果表明,从鳝鱼皮中提取胶原蛋白肽的最佳工艺条件为:选用碱性蛋白酶,提取酸度为pH=9,提取时间为4h,提取温度为45℃。在上述条件下,冷冻干燥制得的胶原蛋白肽成品为白色粉末,胶原蛋白含量为77.70%。在对胶原蛋白肽的提取工艺进行优化的同时,也对所得的胶原蛋白肽成品进行抗氧化性能的测定,在DPPH·清除能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、还原能力、抗脂质过氧化能力和金属离子的螯合能力等方面的实验结果表明,鳝鱼皮胶原蛋白肽表现出良好的抗氧化活性。

日本鳗鱼皮胶原蛋白提取工艺优化及理化性质分析

利用响应面法对日本鳗鱼(Anguilla japonica)皮胶原蛋白的提取工艺进行优化,并对其理化性质和致敏性进行研究。采用酸酶浸提法提取鱼皮胶原蛋白,基于单因素试验,以料液比、提取液浓度和提取时间作为考察因素,以胶原蛋白得率为指标,得到最佳提取工艺:料液比1∶30 g/mL,提取液浓度0.6 mol/L,提取时间48 h,胶原蛋白得率为32.89%。将优化后得到的胶原蛋白进行理化性质表征分析,SDS-PAGE结果表明,胶原蛋白含有5个条带,属于Ⅰ型胶原蛋白;必需氨基酸和药用氨基酸占比分别为19.61%和11.04%;傅里叶红外光谱(FTIR)光谱显示其保留了完整的三螺旋结构;在230 nm处有最大的紫外吸收峰;由扫描电镜(SEM)显示胶原蛋白的微观结构呈现出纤维状结构;胶原蛋白的热转变温度和热变性温度分别为38.5和28.3℃;酶联免疫吸附反应(ELISA)和模拟胃肠液实验可知胶原蛋白具有一定的致敏原性,为鳗鱼皮胶原蛋白的进一步研究提供理论基础。

五种养殖鳗鲡鱼皮的氨基酸组成分析及评价

鳗鲡是鳗鲡属鱼类（BredEel）的统称，为繁殖洄游性鱼类，广泛分布于全球的热带、亚热带和温带地区。鳗鲡营养丰富，经济价值高，是世界性最重要的水产养殖种类之一。20世纪80年代以来，我国养鳗业发展迅速，现己超越日本成为最大的鳗鲡养殖国。我国鳗鲡养殖种类主要包括日本鳗鲡.

海鳗鱼皮胶原蛋白改善缺铁性贫血活性研究

为寻找一种新型的补血食品,研究了海鳗鱼皮胶原蛋白(PEC)改善大鼠缺铁性贫血活性。采用热提法制备PEC,分析其氨基酸组成、矿物质含量等理化性质。采用传统的饲喂低铁饲料并辅助尾静脉放血的方法建立缺铁性贫血(IDA)模型。将IDA大鼠随机分成模型组、胶原高低剂量组、铁剂组、铁剂+胶原高低剂量组,通过测定大鼠的血红蛋白(Hb)、血清铁和可溶性转铁蛋白受体(s Tf R)浓度,红细胞数(RBC)和网织红细胞数等指标评价其补血效果。结果表明,PEC具有较高的纯度,其药效氨基酸含量占40.29%,Fe、Cu等矿物质元素含量丰富。PEC能够显著地提高IDA大鼠的Hb(P<0.01)、血清铁含量(P<0.05)和红细胞数(P<0.01),降低网织红细胞数(P<0.05)和血清中可溶性转铁蛋白受体含量(P<0.01),缓解骨髓异常增生,较好地改善缺铁性贫血,还可以促进铁剂的吸收。结论:海鳗鱼皮胶原蛋白能够有效改善缺铁性贫血。

复方海鳗鱼皮明胶改善缺铁性贫血活性的研究

本文研究了复方海鳗鱼皮明胶(Fufang Pike Eel Skin Gelatin,FEG)对大鼠缺铁性贫血的改善作用,旨在找到一种新型的复方补血品。本文采用热提法制备海鳗鱼皮明胶,配合当归、白芍、川芎、黄芪、炒山楂、制首乌和熟地黄七种中药材熬制得到FEG。采用传统的低铁饮食辅助尾静脉放血的方法建立缺铁性贫血(Iron Deficiency Anemia,IDA)模型,将IDA大鼠随机分成模型组、FEG和复方阿胶高低剂量组。灌胃30 d,通过测定大鼠的血红蛋白(Hb)、红细胞数(RBC)、血清中的铁(SI)、铁蛋白(SF)和可溶性转铁蛋白受体(Soluble Transferrin Receptor,s Tf R)浓度等指标以及肝脏HE染色和骨髓涂片评价其补血效果。结果表明,FEG高剂量组能够显著提高IDA大鼠的RBC(p<0.01),降低网织红细胞数(p<0.05)、肝脏(p<0.01)、脾脏(p<0.05)和肾脏系数(p<0.01),缓解骨髓异常增生和肝组织紊乱;使Hb浓度由77.21 g/L提高到175.86 g/L;使SI和SF浓度分别升高了2.9和0.6倍,s Tf R浓度降低了19.42%。复方海鳗鱼皮明胶能够有效地改善缺铁性贫血。