腹腔注射卵清白蛋白致大鼠内脏高敏感的研究

目的 :建立鸡卵清白蛋白致内脏高敏感大鼠模型 ,研究该模型内脏高敏感与肥大细胞的关联。 方法 :腹腔注射鸡卵清白蛋白使大鼠内脏致敏 ,分别在给药 3d及 2周后用特殊染色法观察结肠肥大细胞的形态学改变。用腹部撤离反射 (abdom -inal withdrawal reflex,AWR)评估致敏大鼠对直肠扩张刺激的内脏感觉改变。 结果 :甲苯胺蓝染色法显示 ,致敏大鼠肠黏膜及肠系膜肥大细胞数量明显增加 (P<0 .0 1)。阿尔辛蓝 -藏红染色法显示 ,对照组及致敏给药后 3d的肠系膜肥大细胞内主要为未成熟颗粒 ,而致敏后 2周肥大细胞内主要为成熟颗粒。直肠扩张显示内脏致敏大鼠 3m l及 5 m l气囊组 AWR评分显著高于对照组 (P<0 .0 1)。结论 :腹腔注射鸡卵清白蛋白致内脏高敏感的作用确切 ,内脏致敏作用很可能和肥大细胞的增生和脱颗粒状态相关。

虾蛋白过敏实验动物模型的建立

以卵白蛋白为阳性对照,以平衡盐溶液(PBS)为阴性对照,观察虾蛋白的全身过敏反应。同时,观察虾蛋白对致敏豚鼠离体回肠平滑肌过敏性收缩反应(Schultz-Dale反应)的影响,以建立虾蛋白过敏实验动物模型。结果显示,用0.01～2g/100mL卵白蛋白致敏并激发后,100%豚鼠呈全身过敏反应阳性,0.1g/100mL卵白蛋白组的豚鼠100%死亡。相似质量浓度虾蛋白(0.01～1g/100mL)的全身过敏反应与卵白蛋白相近(与卵白蛋白组比较,P>0.05);Schultz-Dale反应的实验结果与全身过敏反应结果相似。由此,初步建立虾蛋白过敏实验的动物模型。

蛋清白蛋白酶解工艺的研究

以蛋清白蛋白为底物,采用正交试验,确定了不同的酶对蛋清白蛋白水解的最佳工艺条件,通过反复实验比较,确定液体中性蛋白酶为水解的最佳用酶。通过对其水解条件的正交试验研究,得出在底物浓度为5%,反应温度为45℃,反应时间为5 h,pH值为7.0时,加入液体中性蛋白酶5 000 u/g(底物),水解度可达到81.3%。

鸡蛋清蛋白对微生物转谷氨酰胺酶诱导鲢鱼鱼糜凝胶形成的影响

通过对鲢鱼鱼糜凝胶特性和溶解率的测定及SDS-PAGE检测研究鸡蛋清蛋白改善鱼糜凝胶特性的机理及其对微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)诱导鱼糜凝胶形成的影响。结果表明:鸡蛋清蛋白(EA)和MTGase均能显著提高鱼糜凝胶特性。EA会降低MTGase诱导鱼糜凝胶的形成,显著降低MTGase诱导鱼糜凝胶的凝胶强度和破断强度,但不阻碍MTGase对肌球蛋白重链(MHC)的交联。

荧光猝灭法研究依诺沙星和蛋白质的相互作用

采用荧光光谱法、分光光度法研究了水溶液中依诺沙星与牛血清白蛋白 (BSA)和鸡蛋清白蛋白(CEA)的相互结合反应。依诺沙星与 2种蛋白质均以摩尔比 1∶1牢固结合 ,结合反应平衡常数分别为KBSA=8 0 2× 10 4L/mol和KCEA=4 5 1× 10 4L/mol。根据F rster非辐射能量转移机理 ,计算了依诺沙星与牛血清白蛋白和鸡蛋清白蛋白给体 受体间距离r分别为 2 5 2和 2 74nm ,能量转移效率E分别为 0 5 4和 0 5 2。证实了依诺沙星与牛血清白蛋白和鸡蛋清白蛋白的相互结合作用为单一的静态猝灭过程 。

醋酸纤维素薄膜电泳分离禽卵蛋白质

醋酸纤维素薄膜电泳分离血清蛋白质的方法已基本成熟。本实验参考该电泳法对普通鸡卵、草鸡卵、乌鸡卵、山鸡卵、鸭卵、鹌鹑卵的蛋清、蛋黄进行了电泳分离和图谱分析。结果表明:四种禽卵蛋清、蛋黄的电泳图谱与鸡血清的图谱相似,呈现5条色带,并用吸光度对其进行了定量分析,为进一步探讨禽卵蛋白的含量提供了基础数据。

响应面法优化可食性鸡蛋清蛋白膜的磷酸化改性工艺

以鸡蛋清粉为成膜原料,制备可食性膜,研究磷酸化改性工艺对膜性能的影响。以三聚磷酸钠添加量、反应时间、反应温度及反应p H为因素,以断裂伸长率、拉伸强度、透油系数及水蒸气透过系数为响应值,采用响应面分析法,优化膜的磷酸化改性工艺。结果表明,以三聚磷酸钠添加量21.24 g/100 g蛋白、反应2 h、反应温度45℃、p H9.6的最佳工艺制备所得膜各性能指标的预测值分别是:断裂伸长率77.124%、拉伸强度4.911 MPa、透油系数0.868 g·mm/(m^2·d)、水蒸气透过系数3.458 g·mm/(m^2·d·k Pa),对应的验证值分别为:75.394%±5.276%、(4.887±0.119)MPa、(0.882±0.009)g·mm/(m^2·d)、(3.501±0.088)g·mm/(m^2·d·k Pa),所得的回归模型拟合度良好,并具有较好的预测性。

白蛋白与卵黄联合应用于人类精液冷冻保存的研究

目的:初步探讨白蛋白与卵黄两种蛋白联合应用于人类精液冷冻保存的效果,以期为人类精液冷冻提供一种更为有效的冷冻保护液。方法:以卵黄甘油柠檬酸钠作为对照组,其内加不同浓度的白蛋白(1、2、3、4、5 g/L)作为实验组,对人类精液进行冷冻保存,冷冻前后运用计算机辅助精液分析系统(CASA)进行精子运动参数分析;在实验组中选用冷冻复苏后精子运动参数最佳的加1 g/L白蛋白的卵黄甘油柠檬酸钠组及卵黄甘油柠檬酸钠对照组,进行精子存活率、膜功能、线粒体功能、超微结构比较分析。结果:加1 g/L白蛋白的卵黄甘油柠檬酸钠组,其精子活率、活力明显高于对照组及其他实验组(P<0.05);精子存活率、精子头部未着色率明显高于对照组(P<0.05);精子琥珀酸脱氢酶活性明显高于对照组(P<0.01);精子超微结构优于对照组。结论:白蛋白与卵黄两种蛋白联合应用冷冻保存人类精液的效果优于单用卵黄,且白蛋白的作用与其使用浓度有关;白蛋白与卵黄联合使用在人精液冷冻保存中可能具有相加和互补功能。

响应面法优化纳米SiO_x/鸡蛋清蛋白可食性膜的琥珀酰化改性工艺

目的:以鸡蛋清蛋白为原料,制备纳米SiOx/鸡蛋清蛋白可食性膜,研究琥珀酰化改性工艺对膜性能的影响。方法:以琥珀酸酐添加量、反应时间、反应温度及反应pH值为影响因素,以拉伸强度、断裂伸长率、水蒸气透过系数及透油系数为响应值,采用单因素试验和响应面分析法,优化可食性膜的琥珀酰化改性工艺。结果:建立了回归模型,优化琥珀酰化改性工艺为琥珀酸酐添加量0.70 g、反应时间40.35 min、反应温度34.87℃、反应pH 8.30,在此条件下可食性膜拉伸强度、断裂伸长率、水蒸气透过系数及透油系数的预测值分别为4.935 MPa、75.446%、3.499 g·mm/(m2·d·kPa)、0.874 g·mm/(m2·d),验证值为:(4.891±0.126)MPa、(73.560±4.329)%、(3.651±0.097)g·mm/(m2·d·kPa)、(0.914±0.008)g·mm/(m2·d),与之接近,优化结果可靠。结论:琥珀酸酐添加量和反应pH值是影响膜性能的主要因素。

MenA PS-EA偶联物的制备及其在多糖抗体检测中的应用

目的制备MenA PS-EA偶联物及以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂。方法培养A群脑膜炎奈瑟菌,提取多糖(MenA PS),与卵清蛋白(EA)以还原氨基法偶联,Sepharose CL-4B纯化。制备以MenA PS-EA为包被抗原的A群脑膜炎奈瑟菌多糖IgG抗体的ELISA检测试剂,考察试剂的精密性和稳定性,并与血清杀菌力试验(SBA)比较。结果纯化的MenA PS-EA经高效液相色谱检测,纯度为81.50%;以MenA PS-EA为包被抗原的ELISA检测试剂精密性和稳定性良好;将该试剂与SBA法比较,其敏感性为96.91%,特异性为90.00%,一致性为95.83%。两种检测方法之间差异无显著意义。结论以纯化MenA PS-EA作为包被抗原建立的A群脑膜炎奈瑟菌多糖特异性IgG抗体ELISA检测试剂可用于检测多糖IgG抗体,为进一步研究及开发细菌多糖类抗体诊断试剂提供参考。

不同类型蛋白质水溶液的介电特性

为了解不同类型蛋白质水溶液的介电特性,为液态食品的蛋白质掺假提供新的检测方法,本实验采用同轴探头技术,研究了室温25℃、20~4 500 MHz频率范围内不同质量分数(0%~4.63%)的蛋白质(大豆蛋白、乳清蛋白和卵蛋白)水溶液的相对介电常数ε’和介质损耗因数ε"的变化规律。结果表明,随着频率的增大ε’逐渐减小,而ε"先减小后增大;当蛋白质质量分数相同时,大豆和乳清蛋白水溶液的ε’和ε"值均比较接近,与卵蛋白水溶液之间存在明显差异;在特定的频率段内,蛋白质水溶液的ε’(160~600 MHz和1 400~4 500 MHz)和ε"(20~1 400 MHz)与蛋白质质量分数间存在较好的线性相关性,其相关系数分别达到0.90和0.99。研究表明,不同类型和质量分数的蛋白质水溶液介电特性的变化规律不同,这使得基于介电特性检测蛋白饮料中蛋白质的类型及其质量分数成为可能。

蛋清发酵饮料的研究

以蛋清为主要原料 ,加入牛乳、糖类 ,进行乳酸发酵 ,确定了蛋清液的杀菌条件 ;通过正交实验和品评实验 ,确定了发酵时混合菌的配比、接种量、牛乳的添加量、发酵的最佳时间及温度 ;探讨了发酵品的调制 ,提出了生产的最佳工艺流程 ;为防止乳清分离及凝絮沉淀 ,用黄原胶作稳定剂 。

固-液两相管式膜清洗系统的研究

本文主要研究了用海绵橡胶球(固)-水(液)两相清洗系统对淀粉溶液污染的管式膜的清洗效果。通过海绵橡胶球清洗与传统大量水冲洗方法对水通量恢复率和蛋清截留率的比较,得出了海绵橡胶球清洗方法具有良好的清洗效果,并且对膜孔径无明显影响的结论。

豆浆污染管式膜清洗系统的实验研究

开发海绵橡胶球(固) 水(液)两相清洗系统,用于豆浆污染的管式膜的清洗.通过海绵橡胶球清洗与传统大量水冲清洗方法对水通量恢复率和蛋清截留率的比较,确认了前者具有良好的清洗效果.前者恢复率比后者高约1000,蛋清截留率基本不受影响,对膜孔径无明显影响.

鹌鹑蛋蛋清与蛋黄类靶向代谢组学分析

为分析鹌鹑蛋蛋清与蛋黄中差异表达的代谢物,随机选取蛋重大小基本一致的鹌鹑蛋6个进行测定,采用液质联用(LC-MS)的类靶向代谢组学方法对鹌鹑蛋蛋清和蛋黄中的差异表达代谢物进行分析。结果显示:在鹌鹑蛋蛋清和蛋黄中共获得差异代谢物304种,其中262种代谢物显著上调,42种代谢物显著下调;共找到相关代谢通路62条,其中4条通路表现为差异显著,分别为氨酰-tRNA生物合成,甘氨酸、丝氨酸和苏氨酸代谢,蛋白消化吸收,赖氨酸降解。研究表明蛋清和蛋黄中的差异代谢物主要通过上述4条通路发挥作用;与蛋清相比,L-赖氨酸、溶血卵磷脂酰胆碱14∶0在蛋黄中上调倍数最大,尿酸在蛋黄中下调倍数最大,说明上述三种物质是鹌鹑蛋蛋黄和蛋白中的重要差异代谢物。

用鸡蛋清中的卵清蛋白测定常用超滤膜的切割分子量

提出了一种测定超滤膜切割分子量的简便方法，该法以鸡蛋清代替生化试剂作为标准分子量蛋白质，以卵清蛋白的截留率而不是截留率一分子量曲线作为判据来确定膜的切割分子量，切割分子量的确定范围为1万～6万．讨论了配制卵清蛋白溶液的适宜pH范围为10～11，实际使用质量分数为0．03％NaOH溶液即可；证明了用生化试剂和鸡蛋清配制的卵清蛋白溶液具有相同的分光光度性质，共享同一条浓度-吸光度工作曲线；阐明了比尔定律的适用范围，只需控制超滤前溶液的起始吸光度E。＝0．200左右就可用吸光度代替浓度计算膜对蛋白质的截留率；测定了不同鸡蛋中的卵清蛋白含量在10％～15％之间，同一只鸡蛋的蛋清中卵清蛋白的含量分布是相当均匀的；用已知切割分子量的膜测定了对卵清蛋白的截留率，并据此提出了确定切割分子量的判据；用细胞色素C的截留率证明了本法的适用性；还证明了用0．03％NaOH溶液配制的卵清蛋白溶液可在4～5℃下存放2～3周．

鸡蛋清蛋白酶解肽的抗氧化活性

分别采用胃蛋白酶和碱性蛋白酶对鸡蛋清蛋白进行单酶和双酶水解,筛选得到水解度较高的鸡蛋清蛋白酶解产物Ⅰ(P-A)H,并对上述酶解产物依次进行超滤和树脂分离,得到高活性的组分ⅠF2。通过总还原力、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)自由基和羟自由基(·OH)抗氧化评价体系,分析酶解产物Ⅰ(P-A)H和组分ⅠF2的抗氧化能力。结果表明:Ⅰ(P-A)H具有较强的总还原力和DPPH清除力以及显著的·OH清除能力;组分ⅠF2与酶解产物Ⅰ(P-A)H的抗氧化活性相比,其活性显著性提高。

鹌鹑蛋蛋清蛋白酶解工艺条件的研究

以鹌鹑蛋蛋清蛋白作为原料,探讨酶解鹌鹑蛋蛋清蛋白生成小分子活性肽的加工工艺。采用单因素和响应面分析试验,优化出蛋清蛋白酶解的最佳工艺条件为:选用胰蛋白酶,固液比1∶3,加酶量187.5 U/g底物,水解时间5 h,pH 8.07,酶解温度51.76℃,水解度可达到91.37%,且得到的酶解液风味良好。采用高效液相色谱法分析酶解液中游离氨基酸的组成及含量,结果表明:酶解液含有7种人体必需氨基酸,其中赖氨酸含量达16.22%,是1种天然优质的水解制品,可精制成富含多种氨基酸的蛋白溶液,应用于新型产业的开发。

蛋白酶水解蛋清的工艺研究

选用木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶和复合风味蛋白酶3种酶分别对鸡蛋蛋清进行水解,研究了酶水解鸡蛋蛋清的工艺。结果表明:用复合风味蛋白酶水解蛋清效果最好,其水解最佳条件为:温度50℃,pH6.0,底物浓度25%,酶用量0.8mL/g(5200U/g)水解12h,水解度可达61.66%。

咳尔康口服液对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响

目的:研究咳尔康口服液对蛋清所致大鼠足趾肿胀的影响。方法:Wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分成5组,每组8只,即0.9%氯化钠溶液组;醋酸泼尼松组(4.00mL.kg-1);咳尔康口服液高、中、低剂量组(剂量分别为5.04,4.05,2.70mL.kg-1)。观察蛋清所致大鼠足趾肿胀。结果:咳尔康口服液在不同时间段里高、中剂量均能有效减轻蛋清所致大鼠足趾肿胀。结论:咳尔康口服液能有效减轻蛋清所致大鼠足趾肿胀。