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太行八陉古道沿线的传统景观特征与景观体系研究 被引量:1
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作者 王子尧 林箐 王向荣 《中国园林》 CSCD 北大核心 2024年第6期28-34,共7页
太行八陉是中国古代陆路交通线路与线性文化遗产的典型代表,在漫长的历史进程中,人们在陉道沿线设置关隘驿站、营建聚落、发展农业,形成了自然环境与人工营建高度融合的传统景观体系。通过梳理太行八陉的历史脉络、空间落位和景观价值,... 太行八陉是中国古代陆路交通线路与线性文化遗产的典型代表,在漫长的历史进程中,人们在陉道沿线设置关隘驿站、营建聚落、发展农业,形成了自然环境与人工营建高度融合的传统景观体系。通过梳理太行八陉的历史脉络、空间落位和景观价值,从自然景观和人工景观2个维度系统性探究陉道沿线的传统景观特征,并在此基础上构建太行八陉沿线的传统景观体系,明确了自然景观与人工景观相互影响、耦合协调的陉道沿线传统景观营建逻辑与人居环境营建智慧,以期从新的视角为陉道沿线地区传统地域景观的转译复写和社会经济可持续发展提供有效助力。 展开更多
关键词 风景园林 古道 太行八陉 传统景观体系 景观特征
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面向未来,久久为功:新征程校园足球再出发——《关于加强和改进新时代青少年校园足球工作的实施意见》的新理念、新策略和新举措 被引量:4
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作者 毛振明 《西安体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2024年第2期141-149,共9页
教育部等七部委发布的《关于加强和改进新时代青少年校园足球工作的实施意见》标志着新征程校园足球的再出发,具有校园足球未来发展“方向舵”“加油站”和“路线图”的重要作用。主要从2015年提出校园足球“八大任务”的工作成效和校... 教育部等七部委发布的《关于加强和改进新时代青少年校园足球工作的实施意见》标志着新征程校园足球的再出发,具有校园足球未来发展“方向舵”“加油站”和“路线图”的重要作用。主要从2015年提出校园足球“八大任务”的工作成效和校园足球机制创新突破2个方面,对近10年校园足球的成绩与不足进行分析,指出校园足球取得了一定的成绩,具体表现在:校园足球助力落实立德树人根本任务;普及足球运动激发学生锻炼热潮并实现学生体质大幅度大面积的提升;以足球课改为突破口促进体育课教学改革;在国民教育体系中建立学生足球青训竞赛系统;通过校园足球训练竞赛新赛道推动国家足球人才培养和竞技水平提升。当然在取得进展的同时也存在不足,仍需要有深层次的改革推进与重大方法论突破。在认真研习《意见》的基础上,结合对校园足球发展中的问题认识,对新征程校园足球发展的新理念、新策略和颇有创新性的10个新举措进行了深入探讨。 展开更多
关键词 校园足球 体教融合 八大任务 立德树人 体育课程教学改革
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首席教师负责制在八年制医学生感染病学教学改革中的探索和实践
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作者 叶翩 郑昕 +5 位作者 杨东亮 赵雷 王宝菊 卢银平 季湘年 童巧霞 《中国高等医学教育》 2024年第1期21-22,25,共3页
目的:探讨首席教师负责制在八年制医学生感染病学教学改革中的探索和实践效果。方法:在2008-2011级临床医学八年制学生的感染病学临床教学及早期见习中实施。结果:试验组的学习兴趣和各方面学习综合能力均有所提高。结论:首席教师负责... 目的:探讨首席教师负责制在八年制医学生感染病学教学改革中的探索和实践效果。方法:在2008-2011级临床医学八年制学生的感染病学临床教学及早期见习中实施。结果:试验组的学习兴趣和各方面学习综合能力均有所提高。结论:首席教师负责制可增强学生的学习积极性,提高学生对医学知识的掌握程度,在今后的教学过程中值得推广。 展开更多
关键词 首席教师负责制 八年制医学生 感染病学 教学改革
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探析构建科教融合学院档案管理大厦的“四梁八柱”
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作者 王雪萍 《机电兵船档案》 2024年第4期95-97,共3页
本文通过文献和问卷调研等形式了解当前学术界对科教融合学院档案管理研究现状,从科教融合学院档案管理为出发点,结合科研院所与科教融合学院建设实际特殊情况,对科研院所与科教融合学院这种地方法人单元的关系问题进行理清,明确科教融... 本文通过文献和问卷调研等形式了解当前学术界对科教融合学院档案管理研究现状,从科教融合学院档案管理为出发点,结合科研院所与科教融合学院建设实际特殊情况,对科研院所与科教融合学院这种地方法人单元的关系问题进行理清,明确科教融合学院档案管理当前的瓶颈,急需科研院所和学院层面关注并解决的实际问题。本文提出从科教融合学院档案治理、利用、资源、安全等四个维度体系建设构建起科教融合学院档案管理大厦。 展开更多
关键词 “四梁八柱” 长效机制 档案治理体系 档案资源体系 档案利用体系 档案安全体系
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临床实验室传染病八项报告自动审核系统的建立和优化
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作者 周慧 顾万建 +1 位作者 季明德 梁鑫 《临床检验杂志》 CAS 2024年第10期778-784,共7页
目的建立和优化传染病八项报告的自动审核系统。方法依据美国临床和实验室标准协会(CLSI)发布的AUTO-15及国家卫健委发布的WS/T 616-2018,基于中间件(infinity)及实验室信息系统(LIS)建立传染病八项结果的自动审核规则体系。采用质量控... 目的建立和优化传染病八项报告的自动审核系统。方法依据美国临床和实验室标准协会(CLSI)发布的AUTO-15及国家卫健委发布的WS/T 616-2018,基于中间件(infinity)及实验室信息系统(LIS)建立传染病八项结果的自动审核规则体系。采用质量控制、标本状态、仪器报警、灰区范围、常规模式以及历史数据对比(Delta check)六大规则对传染病八项检测结果进行自动审核判断。通过人工审核与自动审核相互比对,验证自动审核系统的有效性,并对该系统进行再次优化和验证,以实现该项目的自动审核。结果建立包括质量控制、标本状态、仪器报警、灰区范围、常规模式以及历史数据对比共六部分的自动审核规则体系。自动审核的敏感性和特异性分别为87%和95%,阳性预测值和阴性预测值分别为88%和95%。调整审核规则后,2022年传染病八项报告审核通过率从39%上升至85%,周转时间(TAT)从原来的209(52,215)min缩短到141(83,149)min,审核人员由2名减至1名,将因仪器异常导致的两对半结果、HIV和TP阳性被误发等错误率降低至0.04%。结论传染病八项检测结果自动审核系统可减轻审核人员的工作强度,缩短TAT,降低报告差错风险。 展开更多
关键词 自动审核 规则体系 传染病八项报告
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八绳系统中起升钢丝绳调整方法
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作者 张浩星 杨军 徐灏 《港口装卸》 2024年第3期50-52,共3页
集装箱堆场自动化轨道式龙门起重机所采用八绳系统中,吊具上架为超静定结构,钢丝绳受吊具上架的刚度影响而受力不均匀,导致八绳系统的钢丝绳在运行中经常出现磨损断裂现象。在分析八绳系统钢丝绳悬挂特点、受力情况基础上,给出了均匀钢... 集装箱堆场自动化轨道式龙门起重机所采用八绳系统中,吊具上架为超静定结构,钢丝绳受吊具上架的刚度影响而受力不均匀,导致八绳系统的钢丝绳在运行中经常出现磨损断裂现象。在分析八绳系统钢丝绳悬挂特点、受力情况基础上,给出了均匀钢丝绳受力、延长钢丝寿命的调整方法。 展开更多
关键词 自动化 轨道式龙门起重机 钢丝绳 八绳系统 吊具上架
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论我国反腐败制度的建设和完善
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作者 孙新生 《犯罪研究》 2024年第2期88-96,共9页
反腐败制度执行不力是反腐败效果受限的重要原因。党的十八大之后,中共中央出台八项规定并严格推行落实,形成国内反腐与国外追逃追赃的闭环体系,完善巡视制度,尤其通过国家监察体制改革调整反腐败权力构造,解决反腐败“三大难题”,并加... 反腐败制度执行不力是反腐败效果受限的重要原因。党的十八大之后,中共中央出台八项规定并严格推行落实,形成国内反腐与国外追逃追赃的闭环体系,完善巡视制度,尤其通过国家监察体制改革调整反腐败权力构造,解决反腐败“三大难题”,并加强对监察委员会的赋权和限权,推动反腐败工作纳入法治轨道,全面建立起完善且有效运作的新时代反腐败制度体系,开创反腐败工作新局面。 展开更多
关键词 反腐败制度化 中央八项规定 追逃追赃 巡视制度 国家监察体制
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基于K-Means-NCS-ANOVA的八大民窑颜色聚类与应用偏好研究
8
作者 杨宇渊 莫雁婷 +2 位作者 黄超逸 冯娜娜 陈赟 《印刷与数字媒体技术研究》 CAS 北大核心 2024年第2期25-36,共12页
中华陶瓷文化源远流长,颜色作为陶瓷的一种装饰,可以表达不同的设计理念、情感意识、地域特征和服务对象。为了更好地传承陶瓷艺术文化,本研究提出了一种基于K-means-NCS-ANOVA的颜色分类研究方法。首先,采用K-means颜色聚类、NCS颜色... 中华陶瓷文化源远流长,颜色作为陶瓷的一种装饰,可以表达不同的设计理念、情感意识、地域特征和服务对象。为了更好地传承陶瓷艺术文化,本研究提出了一种基于K-means-NCS-ANOVA的颜色分类研究方法。首先,采用K-means颜色聚类、NCS颜色体系提取宋代八大民窑的颜色特征,分析八大瓷窑的区域特征及设计理念;基于上述分析结果制作问卷调查;并利用描述性分析、单因素方差分析(One-Way ANOVA),探究现代设计师对八大民窑颜色的应用偏好。由实验结果可知,设计师性别、专业、工龄也会对八大民窑颜色的应用偏好产生影响;景德镇窑的颜色最受现代设计师欢迎,而耀州窑、磁州窑、定窑的颜色已经不太符合现代审美。本研究采用现代人工智能技术识别八大民窑特征,调研现代设计师对八大民窑颜色的使用偏好,为文物识别、陶瓷文化传承及人才培养提供理论和技术支持。 展开更多
关键词 K-means颜色聚类 NCS颜色体系定位 描述性分析 单因素方差分析 八大民窑 颜色应用偏好
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智能钻机与传统钻机系统组成差异与发展分析 被引量:1
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作者 郑黎明 李彦霖 +4 位作者 张洋洋 王宇 王云飞 王浩 Ullah Fazl 《石油机械》 北大核心 2023年第11期41-50,共10页
智能钻井相比传统钻机在系统组成上具有显著进步,但整体水平仍有待提升。通过传统钻机系统组成介绍及智能钻机研发进展分析,对比智能钻机与传统钻机在八大系统组成中的具体改进之处,阐明了智能钻机不同系统及整体的发展方向。分析结果表... 智能钻井相比传统钻机在系统组成上具有显著进步,但整体水平仍有待提升。通过传统钻机系统组成介绍及智能钻机研发进展分析,对比智能钻机与传统钻机在八大系统组成中的具体改进之处,阐明了智能钻机不同系统及整体的发展方向。分析结果表明:起升系统、旋转系统(尤其是井下部分)、控制系统、井控系统、传动系统是钻机智能化、信息化改造的重点,钻机信息化、作业标准化、系统集成创新、运转高效化等方面需继续推进研发;基于功能裁剪方法,提出了侧重基础功能与结构简化的未来连续管智能钻机方案。分析结论可为智能钻机集成化发展与提高钻井效率提供创新思路。 展开更多
关键词 智能钻机 八大系统 组成差异 发展方向 智能连续管钻机
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OBE理念下粮油食品高水平专业群实践教学模式重构 被引量:1
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作者 裴朝东 《粮食科技与经济》 2023年第1期67-70,共4页
OBE理念下,粮油食品高水平专业群所属专业的实践教学体系的重构,以OBE成果目标为导向,通过分析3个专业实践教学所面临的问题,全面阐述OBE理念下的目标链、目标库的组成与作用,构建起“产学研赛训展创享”八位一体的实践教学模式,提出以... OBE理念下,粮油食品高水平专业群所属专业的实践教学体系的重构,以OBE成果目标为导向,通过分析3个专业实践教学所面临的问题,全面阐述OBE理念下的目标链、目标库的组成与作用,构建起“产学研赛训展创享”八位一体的实践教学模式,提出以OBE目标链为导向,以“八位一体”实践基地为载体,重构粮油食品高水平专业群主干核心课程实践教学模式,为同类型涉农涉粮职业院校推行该模式提供借鉴。 展开更多
关键词 OBE理念 高水平专业群 实践教学 八位一体
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习近平生态文明思想的科学体系研究 被引量:5
11
作者 林智钦 《中国软科学》 CSSCI CSCD 北大核心 2023年第7期193-201,共9页
习近平生态文明思想是以习近平同志为核心的党中央治国理政实践创新和理论创新在生态文明建设领域的集中体现,是新时代我国生态文明建设的根本遵循和行动指南。本文是国家社科基金重大项目《习近平生态文明思想的科学体系研究》首席专家... 习近平生态文明思想是以习近平同志为核心的党中央治国理政实践创新和理论创新在生态文明建设领域的集中体现,是新时代我国生态文明建设的根本遵循和行动指南。本文是国家社科基金重大项目《习近平生态文明思想的科学体系研究》首席专家,在中国共产党第二十次全国代表大会之前撰写的文稿。该文以“一线三论八观”(简称138)创新引领未来为视角,深入研究了习近平生态文明思想的科学体系。同时,提出完善绿色生态的内涵和政策意涵、建构习近平生态文明思想之绿色生态度量标准、设立绿色生态学学科等观点。 展开更多
关键词 习近平生态文明思想 科学体系 一线三论八观 绿色生态
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仝小林院士治疗老年性痴呆验案1例
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作者 周凌 罗金丽 +1 位作者 唐程 张莉莉 《吉林中医药》 2023年第6期711-714,共4页
老年性痴呆是老年群体常见的进行性神经退行性病变,患者生活能力下降,心理和经济负担重大。现代医学对于该病采取药物、认知、体育锻炼等方法协同干预,但目前无法逆转其病程。仝小林院士从“态靶辨治”及“四焦八系”理论体系出发,围绕... 老年性痴呆是老年群体常见的进行性神经退行性病变,患者生活能力下降,心理和经济负担重大。现代医学对于该病采取药物、认知、体育锻炼等方法协同干预,但目前无法逆转其病程。仝小林院士从“态靶辨治”及“四焦八系”理论体系出发,围绕老年性痴呆伴脑萎缩病例,提出该病以虚态、老态以及瘀态复合态为主,核心病机是髓海不足,神机失用,病位在神系(脑)。治疗时以补虚、化瘀、通络法为主,并以麝香为靶药开通神系气络。本案将中医传统临床诊疗思路与现代医学中的疑难问题有机结合,把控疾病本质和病机关键,态靶同调,合理施量,展现了态靶理论指导下的疑难病辨治过程。 展开更多
关键词 老年性痴呆 态靶辨治 四焦八系 疑难病 仝小林
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八大体系背景下网络直播促进校园足球发展的策略研究
13
作者 杨华林 姚正芳 孙逊 《当代体育科技》 2023年第1期194-198,共5页
随着移动互联网技术的不断发展,网络直播在校园足球赛事中不断涌现。该文运用文献资料和逻辑分析等方法,结合实践经验,分析校园足球引进网络直播的可行性,并围绕《全国青少年校园足球八大体系建设行动计划》中八大体系内容,分析网络直... 随着移动互联网技术的不断发展,网络直播在校园足球赛事中不断涌现。该文运用文献资料和逻辑分析等方法,结合实践经验,分析校园足球引进网络直播的可行性,并围绕《全国青少年校园足球八大体系建设行动计划》中八大体系内容,分析网络直播对校园足球发展的作用,得出网络直播有助于做大做强校园足球竞赛体系和样板体系,做细做深教学体系和融合体系,做实做透推广体系和科研体系,做精做准舆论宣传引导体系和荣誉体系的结论,并提出网络直播促进校园足球发展的策略:构建校园足球赛事网络直播平台;培养校园足球赛事解说员,提高赛事直播黏性;专项拨款和社会赞助相结合确保直播经费保障;充分利用网络直播素材,加大短视频制作和宣传力度;加强赛事网络直播管理,避免直播“陷阱”出现。 展开更多
关键词 网络直播 校园足球 八大体系 策略
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民国社会对“八小时制”的认知与实践——基于天津宝成纱厂改行“三八制”的考察
14
作者 封磊 《工会理论研究》 2023年第5期53-66,共14页
学界对新形势下工时形态的研究渐成热点,但对作为新工时基础的八小时制在近代的认知形态与实施情况的研究还有待完善。本研究首先重点考察八小时标准工时在近代中国的认知形态,其次以民国时期天津宝成纱厂改行三八制为典型案例,论析实... 学界对新形势下工时形态的研究渐成热点,但对作为新工时基础的八小时制在近代的认知形态与实施情况的研究还有待完善。本研究首先重点考察八小时标准工时在近代中国的认知形态,其次以民国时期天津宝成纱厂改行三八制为典型案例,论析实践八小时制的具体过程,最后从作为社会文化事件的宝成纱厂改行三八制的失败之因,近代中国八小时制法制实践的差异性,以及作为政治文化遗产的“五一”等三个层面论析八小时制的全球价值。 展开更多
关键词 工作时间 八小时工作制 三八制 宝成纱厂
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叶赫贝勒布扬古家族佐领承袭及宗族组织考察
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作者 张春阳 《吉林师范大学学报(人文社会科学版)》 2023年第1期61-69,共9页
努尔哈赤攻灭叶赫部后,将叶赫西城布扬古贝勒的部众编立为两牛录并授予其家族,入清后逐渐发展为五牛录,领有包括女真(满洲)、蒙古、锡伯等在内的32个宗族之众。叶赫西城统治家族逐步丧失了对牛录/佐领的领有权而转为实际管理者,在佐领... 努尔哈赤攻灭叶赫部后,将叶赫西城布扬古贝勒的部众编立为两牛录并授予其家族,入清后逐渐发展为五牛录,领有包括女真(满洲)、蒙古、锡伯等在内的32个宗族之众。叶赫西城统治家族逐步丧失了对牛录/佐领的领有权而转为实际管理者,在佐领承袭过程中,其子孙为了取得袭职利益互相争讼,清廷亦借机扶弱抑强以平衡其不同家支的势力。叶赫部最终彻底融入八旗系统,其兴衰伴随着清朝八旗制度的发展完善与中央集权的日益强化,而其佐领下不同种属的族群,成为这一时期多民族交往、交流、交融的实践者与历史见证人。 展开更多
关键词 叶赫部 蒙古 女真 八旗制度 满洲
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基于CIPP评价模型的混合式教学模式评价体系构建探究 被引量:8
16
作者 刘明鼎 张艳敏 《吉林省教育学院学报》 2023年第3期127-134,共8页
构建混合式教学模式的评价体系是提升教学质量的重要抓手。通过文献研究法、专家函询法和案例分析法对已有的混合式教学模式评价体系进行分析,发现存在的主要不足包括评价单元单一、缺少理论依据支撑、缺少课程开设环境与混合式教学模... 构建混合式教学模式的评价体系是提升教学质量的重要抓手。通过文献研究法、专家函询法和案例分析法对已有的混合式教学模式评价体系进行分析,发现存在的主要不足包括评价单元单一、缺少理论依据支撑、缺少课程开设环境与混合式教学模式背景的评价、缺少输入资源的适切性评价、缺少对输入策略的过程评价。针对存在的问题,依据CIPP评价模型的结构逻辑,结合“四梁八柱”的思维方法构建混合式教学模式的评价体系。首先从课程背景评价、资源输入评价、过程控制评价、结果评价四个维度对评价体系构建了“四梁”的4个一级指标,再构建“八柱”的8个二阶指标,最后构建29个三级指标。 展开更多
关键词 CIPP评价模型 混合式教学模式 评价体系 四梁八柱
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新冠感染疫情期间贯彻思政课“八个相统一”要求立体化在线教学体系的构建与探索
17
作者 高明 金小燕 《高教学刊》 2023年第28期124-127,共4页
因新冠感染疫情影响而在全国广泛开展的在线教学过程中,大量在线教学软件和工具应运而生,使得疫情期间的在线教学可谓“百花齐放”,表现出极为鲜明的“多样性”特征。基于各软件工具互不一致的自身特长,展开有针对性的多样化、立体化在... 因新冠感染疫情影响而在全国广泛开展的在线教学过程中,大量在线教学软件和工具应运而生,使得疫情期间的在线教学可谓“百花齐放”,表现出极为鲜明的“多样性”特征。基于各软件工具互不一致的自身特长,展开有针对性的多样化、立体化在线教学,最终对于不同软件不同优势的深入研究和充分挖掘,将能够使得思政课“八个相统一”要求在这一多元的立体化在线教学过程中,在不同角度、不同形式、不同内容上得到充分实现和升华,从而在新冠感染疫情这一突发而特殊的在线教学期间,有效实现思政课“立德树人”的根本目的,进一步推进高校思想政治理论课的改革创新。 展开更多
关键词 思政课 立体化在线教学 “八个相统一” 教学体系 立德树人
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区域防御视野下南宋钓鱼城空间形态特征研究
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作者 姜汉 宋团 《城市建筑》 2023年第11期112-116,共5页
南宋时期,在抗击北方异族的历程中,南宋朝廷提出“以步制骑”的战术方针,以地形地势来制约灵活机动的北方游牧骑兵,因地制宜地布局山城堡垒,衍生了有地域特色的山地军事城镇防御体系。文章从区域防御格局视野出发,叙述了余玠《经理四蜀... 南宋时期,在抗击北方异族的历程中,南宋朝廷提出“以步制骑”的战术方针,以地形地势来制约灵活机动的北方游牧骑兵,因地制宜地布局山城堡垒,衍生了有地域特色的山地军事城镇防御体系。文章从区域防御格局视野出发,叙述了余玠《经理四蜀图》防御布局下形成的“川中八柱”山城防御体系与防御空间格局,并探究了钓鱼城在区域防御中的山水选址特征。通过剖析山水选址特征与钓鱼城布局的关联性,总结其防御空间形态特征。 展开更多
关键词 区域防御 川中八柱防御体系 选址特征 空间形态 钓鱼城
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用8质粒病毒拯救系统产生H9N2/WSN重组A型流行性感冒病毒 被引量:9
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作者 卢建红 邵卫星 +4 位作者 刘玉良 贾立军 韦栋平 石火英 刘秀梵 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期48-53,共6页
把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠpolⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因cDNA的质粒组合(6+2重... 把禽流行性感冒(流感)病毒A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)的血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因cDNA克隆至polⅠpolⅡ双向转录和表达载体pHW2000,用这两种质粒与8质粒病毒拯救系统中流感病毒A/WSN/33(H1N1)6个内部基因cDNA的质粒组合(6+2重排),共转染COS 1细胞,产生了能在鸡胚中高滴度增殖的H9N2/WSN重组病毒。用A/WSN/33的8个基因cDNA质粒作对照,也产生了转染子病毒。经过EID50测定和MDCK感染实验,新基因型H9N2/WSN病毒感染鸡胚的能力强(EID50为10-11/0.2ml),而且对鸡胚的毒力弱,在不加胰酶的情况下不使MDCK细胞产生病变。经电镜观察,两个转染子病毒的形态与野生型流感病毒相似。反向遗传操作技术的建立,为对禽流感病毒基因功能和疫苗构建等方面的研究提供了新的手段。 展开更多
关键词 A型流行性感冒病毒 H9N2亚型禽流感病毒 共转染 8质粒系统 反向遗传操作技术 血凝素 神经氨酸酶
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H5N1亚型禽流感病毒拯救体系的建立 被引量:10
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作者 龙进学 吴艳涛 +2 位作者 张小荣 王曲直 刘秀梵 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期55-59,共5页
选择鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成了全基因组序列测定基础上,设计合成的11对引物对病毒的8个基因分11段进行扩增。通过与转录载体PHW2000连接,构建A/SD/04的8个基因的拯救... 选择鸡胚高产的鸭源H5N1亚型禽流感病毒A/Duck/Shandong/093/2004株作为骨架病毒,在完成了全基因组序列测定基础上,设计合成的11对引物对病毒的8个基因分11段进行扩增。通过与转录载体PHW2000连接,构建A/SD/04的8个基因的拯救载体,经测序获得序列准确的拯救质粒:241、242、243、244、245、246、247和248。A/SD/04的8质粒与PR8(H1N1)进行不同组合的拯救,获得8个均含A/SD/04HA基因的H5重组流感病毒。鸡胚尿囊液中重组病毒的血凝效价在2^8-2^10,EID50在10^-8.5 - 10^-9之间,MDT在34~46h之间,均与野生A/SD/04(wt A/SD/04)相似。重组病毒对6周龄的SPF鸡的静脉接种指数(IVPI)与wt A/SD/04却有明显的差异,说明不同组合的内部基因影响病毒对鸡的致病力,但不影响病毒的鸡胚致死能力、对鸡胚的感染能力和病毒在鸡胚中的繁殖能力。构建的A/SD/04的8个质粒拯救系统,为H5NI的基因功能研究和新型疫苗开发奠定基础。 展开更多
关键词 H5N1亚型禽流感病毒 8质粒拯救系统 病毒拯救 重组病毒
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