STUDIES ON A SPECIFIC ELECTROFUSION METHOD TO PRODUCE McAbs

The positive rate of hybridomas is low in routine McAb(monoclonal antibody)preparation because of non-selective cell fusion,thus bringing about a lot of heavy work load in screening. Meanwhile, it is not easy to obtain McAbs with high affinities to the administered antigen. These years, M.S. Lo et al. and Don M. Wojchowski et al. established two specific elec-

利用改良电融合法制备杂交瘤细胞的试验探索

目的:运用改良电融合法提高杂交瘤的融合效率,以获得更多的杂交瘤克隆。方法:将SP2/0细胞和脾细胞分别用NHS-d-PEG24-biotin孵育30 min,再将脾细胞用avidin孵育30 min,然后将SP2/0细胞和脾细胞按1∶5混合孵育15 min后进行电融合,融合后的细胞用半固体培养基筛选单克隆。结果显示:用2×105个SP2/0细胞和1×106个脾细胞进行正常电融合,经半固体培养基筛选共获得6个单克隆,而用改良电融合法获得了20个单克隆。结论:利用改良电融合法能够增加异种细胞相互配对的几率,从而提高杂交瘤的融合效率,最终获得更多的杂交瘤细胞。

细胞电融合法生产杂交瘤

细胞电融合过程包括使用交流电场使悬浮在缓冲液中的细胞排列成串,然后高压脉冲电流作用使细胞膜发生瞬时破裂,相邻细胞的细胞膜融合,继续受交流电场作用完成细胞融合。已经证明细胞电融合技术可用于杂交瘤生产,单克隆抗体生产以及细胞表面标记物细胞间的传递过程。

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法

一种改进的杂交瘤细胞电融合方法邹翔（南京大学医学院南京２１０００８）刘琴芝，裴红英，郁文芳，安节，陈伯权（中国预防医学科学院病毒学研究所北京１０００５２）陈刚，赵南明（清华大学生物科学与技术系生物膜与膜生物工程国家重点实验室北京１０００８４）我们对国...

电场诱导细胞融合产生杂交瘤

摸索和探讨了HPES-1型高级基因转移仪在BALB/C小鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP2/0电融合中的应用,获得了一组选择参数,采用短脉冲输出方式,脉冲幅度6kV,脉冲宽度50μs,脉冲数2~9,循环数50×2及脉冲休止时间2s的电融合参数,纳合高细胞密度(10~5cell/200μl)增加细胞间聚集的方法,可较容易地获得杂交瘤,并应用该技术成功地制备了分泌人血清白蛋白单克隆抗体的杂交瘤。

细胞杂交的电融合法与PEG融合法的比较研究

采用细胞电融合仪和自制的融合小室，从细胞融合率、细胞存活情况以及直接观察等，比较了细胞杂交技术中的电融合法和PEG促融合剂的化学方法。结果表明，电融合法比PEG促融合法有明显的优点：细胞融合率高（65．54％±7．93），有利于杂交瘤的选择；电脉冲击穿对细胞的损伤小，有利于融合细胞的生长繁殖；可直接观察融合过程，便于有目的地控制选择融合条件。此外，还观察到杂交瘤克隆出现较早，分泌抗体功能较强等。这些优点表明，电融合法可以提高克隆形成率，有利于杂交瘤的选择，在单克隆抗体的制备和研究上有良好的应用价值。