A preliminary screening study on the associated proteins in human psoriasis vulgaris by serum proteomics technologies

Objective：To investigate the optimum screening conditions of associated proteins in human psoriasis vulgaris by serum proteomics technique, and to screen the different expression proteins related with psoriasis vulgaris. Methods：Serum samples of peripheral blood were collected from newly diagnosed psoriasis vulgaris patients in the clinic, and 20 matched healthy persons. Serum albumin IgG was removed by filtering with ProteoExtract Albumin/IgG. After comparative proteomics analysis the different protein spots were identified using 2-DE and MS. Results ：Electrophoresis figures with high resolution and reproducibility were obtained. Three different expression proteins were found only in the serum from psoriasis vulgaris patients, while nine other different proteins expressing from healthy volunteers. Conclusion：The protein expression was different in the serum between the psoriasis vulgaris patients and healthy volunteers. It was hoped that we could find the biomarkers related to psoriasis vulgaris by using proteomics.

血清蛋白组学技术筛选寻常性银屑病相关蛋白的初步研究

目的初步探讨应用血清蛋白组学技术建立寻常性银屑病相关蛋白的优化筛选方法,筛选寻常性银屑病的相关蛋白,期望从中发现有意义的寻常性银屑病血清标志物。方法取寻常性银屑病患者及正常对照血清,应用ProteoExtract Albumin/IgG Removal Kit纯化血清蛋白,去除白蛋白和IgG,采用固相pH梯度(IPG)、等电聚焦(IEF)为第一向、SDS-PAGE垂自电泳为第二向的双向凝胶电泳(2-DE)和质谱分析鉴定差异蛋白。结果获得重复性和分辨率较好的血清双向凝胶电泳图谱,鉴定得到3个仅在银屑病组血清中表达和9个与对照组血清表达有差异的蛋白质。结论在寻常性银屑病患者血清与健康人血清中存在差异表达蛋白质,利用蛋白质组学这一高通量的筛查技术可望从中发现与寻常性银屑病相关的标志物。

不稳定型心绞痛患者血浆蛋白标记物的蛋白质组学筛选

目的分析冠心病不稳定型心绞痛(UAP)与稳定型心绞痛(SAP)患者血浆中的差异蛋白质,筛选可能与UAP早期诊断密切相关的血浆蛋白标记物。方法分别收集2014年6月-2015年4月南方医科大学第三附属医院UAP及SAP血浆标本各60例,另收集体检科收集的血浆标本作为正常对照组(n=60)。随机取对照组(n=10)、UAP组(n=10)与SAP组(n=10)空腹血浆标本各100μl,分别等量混合成3组样本,去除血浆高丰度蛋白后,利用双向差异凝胶电泳(DIGE)技术进行蛋白分离,经差异软件分析后,采集UAP和SAP之间变化2倍以上的差异蛋白质点,利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间/飞行时间质谱(MALDI-TOF/TOF MS)对差异蛋白点进行鉴定。每组随机选取40份血浆样本,选取UAP特异性差异蛋白进行ELISA验证。结果 UAP与SAP组患者血浆相比较,共筛选出10个表达量差异2倍以上的差异蛋白点,包括9个上调蛋白点,1个下调蛋白点。经质谱鉴定后,表达上调的蛋白包括纤维蛋白原γ链(FGG)、补体C4-B(C4B)、免疫球蛋白κ链C结构域(IGKC)和血红蛋白α亚基(HBA1);表达下调的蛋白是结合珠蛋白(HP)。与对照组比较后,在这些差异蛋白中共找到2个UAP特异性相关蛋白,即IGKC和HP。选取IGKC进行ELISA验证,结果表明,与对照组和SAP组相比较,UAP组样本中IGKC特异性表达上调(P<0.05),与DIGE验证结果一致。结论筛选到UAP特异性相关蛋白IGKC和HP,IGKC有可能成为UAP早期筛查及诊断的特异性生物标记物。

血清蛋白质组学技术筛选豚鼠银屑病样模型血清蛋白质的实验研究

目的应用血清蛋白质组学技术筛选豚鼠银屑病样模型血清中的差异蛋白质,期望从中发现与银屑病相关的血清蛋白标志物。方法采用双向-差异凝胶电泳(2D-DIGE)和二级质谱分析鉴定豚鼠银屑病样模型血清中的差异蛋白质。结果获得重复性和分辨率较好的血清双向差异凝胶电泳图谱,通过二级质谱分析鉴定得到3个差异的蛋白质。结论豚鼠银屑病样模型血清与正常豚鼠血清比较存在差异表达蛋白质。

蛋白质组学技术分析银屑病皮损组织中的蛋白质表达

目的:分析银屑病皮损组织中的蛋白质表达。方法:对研究蛋白质组学的关键技术二维凝胶电泳(2-DE)过程进行改良。结果:建立了寻常型银屑病皮损和非皮损组织的蛋白质组2-DE方法。结论:本实验为研究影响银屑病的表皮细胞增生差异蛋白质组学奠定了技术基础。

基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究进展

目前 ,蛋白质组技术被大量应用于临床和生物学研究各个领域 ,其中的大部分研究都在双向电泳技术的支持下展开。体液样品 (包括血浆、脑脊液、尿液等 )蛋白质的全面分析主要依赖于蛋白质组学分析。本文综述了基于双向电泳技术的体液蛋白质组学研究中样品制备、生物标志物探索。

寻常型银屑病不同证型蛋白组学表达的比较研究

目的对寻常型银屑病(血热证、血瘀证、血虚证)患者与正常人差异蛋白进行分析,探求三证之间差异性表达蛋白,从蛋白质组学角度揭示三证之间的差异。方法取寻常型银屑病血瘀证、血虚证、血热证患者的血清,应用蛋白提取、定量、双向电泳技术、质谱鉴定和数据库检索,寻找出三证之间的差异蛋白和共有蛋白,并将这些蛋白进行组间比较。结果发现了15种显著性差异蛋白(P<0.05),其中补体C3、凝聚素、血清转铁蛋白、间-α-胰蛋白酶抑制剂H4重链(片段)、载脂蛋白E、补体C4-B、甘露糖结合蛋白C及富亮氨酸-α-2-糖蛋白在血虚型银屑病患者血清表达水平高于血热型和血瘀型(P<0.05)。纤维蛋白原β链、血液接合素、纤维蛋白原γ链、HPX蛋白、α-抗胰蛋白酶、甲状腺素转运蛋白及载脂蛋白Ⅳ在血热型银屑病患者血清中的表达水平高于血瘀型患者(P<0.05)。共同蛋白有5种(P<0.05),分别为血液结合素、纤维蛋白原γ链、HPX蛋白、α-抗胰蛋白酶、载脂蛋白A-Ⅳ。结论寻常型银屑病(血热证、血瘀证、血虚证)血清中存在表达差异性蛋白质,可能与寻常型银屑病的发病机制和银屑病不同证型的物质基础有关。

利用血清蛋白质组学技术筛选银屑病相关蛋白

目的研究常见亚型银屑病患者血清中差异表达蛋白，筛选银屑病特异性蛋白质标记物。方法收集首次发病进展期寻常性银屑病6例、红皮病性银屑病5例及健康人6例的血清，分别将各组标本混合，并去除高丰度白蛋白和免疫球蛋白IgG后，应用双向电泳技术分离血清，比较差异蛋白点。利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱，对候选差异表达蛋白点进行肽质量指纹图谱分析，通过NCBI数据库搜索鉴定蛋白。结果获得了3组较好的血清双向电泳图谱。应用胶图分析软件分析，发现寻常性银屑病组、红皮病性银屑病组与健康对照组间差异蛋白点分别为33个和17个，寻常性银屑病组和红皮病性银屑病组之间差异蛋白点26个。共鉴定得到14种蛋白。在银屑病组中表达升高的有补体成分3、白介素16、维生素D结合蛋白、仅1抗胰蛋白酶等；红皮病组中补体成分3、补体因子H、仅1抗胰蛋白酶、血液结合素、触珠蛋白的表达量高于健康人对照，a1抗胰蛋白酶、补体因子H、补体成分4和触珠蛋白的表达量高于寻常性银屑病组。在红皮病性患者血清中表达下降的有血清淀粉样蛋白P。结论寻常性银屑病、红皮病性银屑病与健康人对照间血清蛋白表达谱存在差异。

蛋白质组学及其在肝癌诊疗中的研究进展

蛋白质组学是一门在大规模水平上研究某一类型细胞、组织或体液中的所有蛋白质组成及其功能的新兴学科。其以细胞或器官表达的所有蛋白质为研究对象,通过凝胶电泳、生物质谱及生物信息学等技术,达到分离、鉴定、分析蛋白质的目的。肝癌是世界上病死率较高的恶性肿瘤之一,运用蛋白质组学技术,可以了解肝癌的发生、发展机制,在诊断和治疗方面产生价值。本文将解释蛋白质组学的概念及主要技术,介绍蛋白质组学在肝癌研究中的意义,阐述蛋白质组学在肝癌的早期诊断,标记物的筛选以及药物靶标的选择中体现出的重要应用。随着蛋白质组学的逐步完善和现代生物技术的迅速发展,这项技术将在肝癌等生命科学领域发挥更显著的作用。