Growth inhibitory effect of 4-phenyl butyric acid on human gastric cancer cells is associated with cell cycle arrest

AIM: To investigate the growth effects of 4-phenyl butyric acid (PBA) on human gastric carcinoma cells and their mechanisms. METHODS: Moderately-differentiated human gastric carcinoma SGC-7901 and lowly-differentiated MGC-803 cells were treated with 5, 10, 20, 40, and 60 μmol/L PBA for 1-4 d. Cell proliferation was detected using the MTT colorimetric assay. Cell cycle distributions were examined using flow cytometry.RESULTS: The proliferation of gastric carcinoma cells was inhibited by PBA in a doseand time-dependent fashion. Flow cytometry showed that SGC-7901 cells treated with low concentrations of PBA were arrested at the G0/G1 phase, whereas cells treated with high concentrations of PBA were arrested at the G2/M phase. Although MGC-803 cells treated with low concentrations of PBA were also arrested at the G0/G1 phase, cells treated with high concentrations of PBA were arrested at the S phase. CONCLUSION: The growth inhibitory effect of PBA on gastric cancer cells is associated with alteration of the cell cycle. For moderately-differentiated gastric cancer cells, the cell cycle was arrested at the G0/G1 and G2/M phases. For lowly-differentiated gastric cancer cells, the cell cycle was arrested at the G0/G1 and S phases.

共轭亚油酸诱导人胃腺癌细胞(SGC-7901)凋亡的作用

目的 研究共轭亚油酸单体 (c9,t11-CLA)诱导人体胃腺癌细胞 (SGC - 790 1)凋亡作用。方法 采用细胞生长曲线 ,凋亡细胞的荧光显微镜、电镜观察 ,流式细胞光度术的检测以及P5 3蛋白表达方法。结果 显示出c9,t11-CLA对SGC - 790 1细胞有明显的抑制作用 ,并可诱导SGC - 790 1细胞产生凋亡 ,并随着c9,t11-CLA浓度的增加 ,细胞凋亡率逐渐增加 ;而P5 3蛋白表达则随着c9,t11-CLA浓度的增加呈逐渐降低的趋势。结论 这可能是c9,t11-CLA抑制肿瘤细胞机制之一。

猫儿眼植物酸对人SGC-7901细胞增殖的影响及其机制探讨

目的探讨猫儿眼植物酸对人SGC7901细胞增殖影响及其机制。方法采用流式细胞仪、MTT法和台盼蓝染色法测定猫儿眼植物酸对人SGC7901细胞增殖的影响。结果分别给予猫儿眼植物酸10.0、1.0、0.1mg·L-1培养48h,MTT法测定结果显示,猫儿眼植物酸对人SGC7901细胞增殖的抑制率分别为82.9%、42.7%和24.6%;台盼蓝法计数结果显示,给予猫儿眼植物酸后,活细胞数随培养时间的延长而减少,到48h,对SGC7901细胞增殖抑制率分别为76.4%、56.9%、42.6%,凋亡率分别为26.8%,22.5%和15.6%。结论猫儿眼植物酸对人SGC7901细胞增殖具有明显的抑制作用,其抑制作用强度随给药浓度的增加和作用时间的延长而递增。

托芬那酸通过下调LOXL2表达抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭

目的:观察托芬那酸(TA)对人胃癌SGC-7901细胞侵袭能力的影响,并探讨其作用机制。方法:用不同剂量的TA(0、3、6、12、24、48、96μmol/L)处理SGC-7901细胞24 h或48 h,CCK-8法检测细胞活力,脂质体介导shRNA转染靶向沉默LOXL2基因,Transwell检测侵袭细胞数,RT-PCR检测LOXL2的mRNA水平,Western blot检测SP1、LOXL2、Snail、E-cad、MMP9蛋白水平。结果:TA可剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞活力(P<0.05),24 h和48 h的IC50分别为78.06μmol/L和50.72μmol/L;与对照组相比,0、3、6和12μmol/L TA作用24 h后,SGC-7901细胞侵袭数显著减少(P<0.05),Snail、MMP9、SP1和LOXL2蛋白水平均显著降低(P<0.05),E-cad蛋白水平显著升高(P<0.05),LOXL2的mRNA水平显著降低(P<0.05),且呈现剂量依赖性;敲除LOXL2基因可抑制SGC-7901细胞侵袭(P<0.05),下调Snail和MMP9(P<0.05)、上调E-cad蛋白水平(P<0.05)。结论:TA可能通过下调SP1和LOXL2蛋白表达,进而下调Snail和MMP9、上调E-cad蛋白水平,最终抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭。

五倍子酸对人胃癌SGC-7901细胞迁移能力的影响

目的:探讨五倍子酸(GA)对人胃癌SGC-7901细胞转移的影响,阐明其作用机制。方法:培养人胃癌SGC-7901细胞,将其分为对照组及3.125、6.250、12.500、25.000、50.000和100.000mg·L^(-1) GA组。MTT法检测各组SGC-7901细胞增殖抑制率,细胞划痕实验检测各组细胞转移能力,免疫细胞化学法检测各组SGC-7901细胞中血管内皮生长因子(VEGF)表达水平。结果:与对照组比较,不同剂量GA组SGC-7901细胞增殖抑制率明显升高,并呈剂量依赖性(F=59.451,P<0.01)。与对照组比较,不同剂量GA组SGC-7901细胞的划痕愈合率明显降低(P<0.01),12.500和25.000mg·L^(-1) GA组细胞中VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。结论:GA通过抑制人胃癌SGC-7901细胞中VEGF蛋白的表达来抑制SGC-7901细胞增殖及迁移。

猫儿眼植物酸对人SGC-7901细胞的抑制作用

目的分离提取猫儿眼植物酸并探讨其对人胃癌(SGC-7901)细胞抑制作用机制。方法采用色-质联用仪、流式细胞仪、MTT法和克隆形成法对猫儿眼植物酸组分及其对SGC-7901细胞的抑制作用进行分析检测。结果分别给予猫儿眼植物酸(浓度分别为10.0,1.0和0.1μg/mL)48h,用MTT法测定其对SGC-7901细胞的抑制率分别为86.9%,77.9%和70.6%;克隆形成抑制率分别为67.8%,55.7%和30.9%;凋亡率分别为39.4%,31.2%和20.2%。结论猫儿眼植物酸对SGC-7901细胞具有显著抑制作用,其效果随给药浓度的增加而递增。

DHA诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡及其作用机制研究

目的探究二十二碳六烯酸(DHA)对人胃癌细胞SGC-7901生长的影响及诱导细胞凋亡的作用机制。方法MTT法测定细胞存活率,Hoechst染色法进行细胞形态学观察,流式细胞仪检测细胞凋亡和活性氧(ROS)的变化,硫代巴比妥钠比色法(TBA法)测定细胞脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量变化,二硫代二硝基苯甲酸(DNTB)比色法测定谷胱甘肽(GSH)含量。结果MTT和流式细胞仪分析结果显示,细胞增殖率随DHA处理浓度的递增逐渐下降,呈现明显剂量效应关系。形态学观察显示凋亡细胞细胞质凝聚、浓染,凋亡小体出现。60,80,100μmol.L-1DHA作用细胞24 h后,MDA含量显著高于对照组(P<0.05);GSH含量下降(P<0.05)。80μmol.L-1DHA处理细胞5 h后,ROS出现峰值,且抗氧化剂NAC可以减弱ROS的变化。结论DHA可以诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡,脂质过氧化水平和ROS升高可能是DHA诱导细胞凋亡的重要机制。

近场光学显微镜结合量子点标记人胃腺癌SGC-7901细胞靶点的观察

扫描近场光学显微镜突破衍射极限,具有纳米量级的空间分辨率,量子点(QD s)标记有荧光强度高且抗光漂白能力强等优点。结合上述两种技术,对人胃腺癌SGC-7901细胞膜表面特异性结合的叶酸受体(FR)进行成像探测,获得了叶酸受体在SGC-7901细胞膜表面上的分布,以及细胞内化外源性叶酸过程中叶酸受体在细胞膜表面的分布变化,成像的光学分辨率达到120 nm。实验结果表明:特异性结合的叶酸受体在SGC-7901细胞膜表面的分布,绝大部分是以聚集体的形式存在。随着SGC-7901细胞内化叶酸量的增加,叶酸受体在细胞膜表面的分布密度逐渐降低,并在经过120 m in左右趋于稳定。上述方法和手段为实现单细胞水平上靶点分布和变化的长期监测,肿瘤细胞内化受体的机制研究提供了新的技术途径。

桦木酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响

目的:利用不同浓度的桦木酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响。方法:桦木酸设4个不同浓度(0、10、20、30μg/ml),并采用常规化疗药物5-Fu处理作为阳性对照,以探究其对细胞增殖的影响。采用台盼蓝拒染法和吉姆萨染色法分别检测桦木酸对人胃癌SGC-7901细胞生长抑制率及克隆形成率;EdU法检测SGC-7901的细胞增殖;利用流式细胞术检测细胞周期,应用qRT-PCR和Western blot分别检测细胞周期蛋白cyclin D1,cyclin B1的mRNA和蛋白表达水平。结果:不同浓度的桦木酸处理人胃癌SGC-7901细胞48 h后,其细胞生长抑制率显著升高(P<0.05),克隆形成率和细胞增殖率均明显降低(P<0.01),且呈剂量和时间依赖性;人胃癌SGC-7901细胞被阻滞在G1/G0期,细胞周期蛋白cyclin D1和cyclin B1的mRNA和蛋白表达量也随桦木酸浓度升高而显著降低(P<0.01)。且与5-Fu对照组相比,桦木酸浓度为20μg/ml和30μg/ml时,细胞增殖能力明显降低,细胞周期被抑制,细胞周期蛋白表达量均明显降低(P <0.05)。结论:桦木酸通过下调cyclin B1和cyclin D1基因表达,将人胃癌SGC-7901细胞阻滞在G1/G0期,从而抑制细胞增殖。

桦木酸对胃癌SGC-7901细胞凋亡的影响

目的:以人胃癌SGC-7901细胞为研究对象,探究桦木酸对其凋亡的影响。方法:将人胃癌SGC-7901细胞分为4组,每组设置3个复孔,对照组未加入桦木酸,而三组实验组分别加入浓度为10 mg/L、20 mg/L及30 mg/L的桦木酸,将各组细胞放入5%的CO 2培养箱中培养48 h,激光共聚焦显微镜观察细胞形态变化;流式细胞术检测细胞凋亡率和线粒体膜电位变化;qRT-PCR和Western blot分别检测SGC-7901细胞凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3在mRNA和蛋白水平的表达。结果:与对照组相比,终浓度为10 mg/L、20 mg/L、30 mg/L的桦木酸处理组,细胞发生皱缩、细胞核裂解并出现凋亡小体;细胞早期凋亡与晚期凋亡率显著增加(P<0.05 or P<0.01),线粒体膜电位明显降低(P<0.05 or P<0.01);细胞凋亡相关基因Bax和Caspase-3的mRNA与蛋白表达水平均显著上升(P<0.01),而Bcl-2的mRNA与蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:在一定浓度范围内,桦木酸通过调节凋亡相关基因Bcl-2、Bax和Caspase-3的表达诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡。

阿魏酸诱导胃癌SGC-7901细胞凋亡及对COX-2、Survivin、XIAP和p53的影响

目的:探讨阿魏酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖的影响及其对凋亡相关基因表达的影响。方法:不同浓度(0、1.25、2.5、5、7.5、10、12.5 mg/mL)阿魏酸作用体外培养人胃癌SGC-7901细胞24、48、72小时后,MTT法检测细胞增殖;不同浓度(0、5、7.5、10 mg/mL)阿魏酸作用SGC-7901细胞48小时,流式细胞仪检测细胞凋亡,RT-q PCR和免疫印迹法(Western-blot)检测环氧化酶2(COX-2)、生存素(Survivin)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)和p53的mRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,7.5、10、12.5 mg/mL阿魏酸使SGC-7901细胞的OD值降低,5、7.5、10 mg/mL阿魏酸作用SGC-7901细胞48小时后均能诱导其凋亡,5、7.5、10 mg/mL阿魏酸均能上调p53的mRNA和蛋白表达,下调COX-2、Survivin和XIAP的mRNA和蛋白表达。结论:阿魏酸能有效抑制SGC-7901细胞增殖,并能诱导其凋亡,阿魏酸能上调胃癌细胞p53的mRNA和蛋白表达,下调COX-2、Survivin和XIAP的mRNA和蛋白表达,发挥抗肿瘤作用。

藤黄酸通过核因子κB抑制剂激酶α/p65信号通路抑制人胃癌细胞系SGC-7901的侵袭

目的探讨藤黄酸(GA)对人胃癌SGC-7901细胞侵袭能力的影响及其机制。方法用不同浓度藤黄酸、核因子κB抑制剂激酶(IKK16)和阳性对照药物5-氟尿嘧啶作用人正常胃黏膜上皮GES-1细胞和人胃癌SGC-7901细胞48 h后,采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞活力,Transwell侵袭实验检测SGC-7901细胞的侵袭能力,免疫印迹法检测波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的蛋白表达水平以及IKKα和p65的蛋白磷酸化水平。结果藤黄酸可剂量依赖性地抑制SGC-7901细胞活力,半数抑制浓度(IC50)分别为1. 89μmol/L,但对GES-1细胞活力无显著影响;5-氟尿嘧啶对GES-1和SGC-7901细胞均有抑制作用,IC50分别为7. 36μmol/L和199. 57μmol/L。低剂量藤黄酸或IKK16可抑制SGC-7901细胞侵袭,下调MMP-2、MMP-9和vimentin的蛋白表达水平以及抑制IKKα和p65蛋白磷酸化,并且两者联合作用时抑制作用更强。结论低剂量藤黄酸可在体外抑制人胃癌SGC-7901细胞侵袭,其机制可能与抑制IKKα/p65信号通路,继而下调MMP-2、MMP-9和vimentin蛋白表达水平相关。

熊果酸对胃癌细胞株SGC-7901的抑制作用

目的:本文通过不同浓度的熊果酸(ursolic acid,UA)作用于人胃癌SGC-7901细胞,探讨UA对其生长的影响。方法:采用体外培养人胃癌细胞株SGC-7901,MTT法观察不同浓度UA对细胞生长的影响;用10μmoL/L,20μmoL/L,40μmoL/L和80μmoL/L不同浓度UA处理SGC-7901细胞12h后,倒置显微镜观察细胞形态变化以及MTT检测细胞的生长情况。结果:在细胞抑制实验中20～40μmoL/L UA可使SGC-7901细胞发生皱缩,40～80μmoL/L UA作用12 h后,SGC-7901细胞形态明显变圆,出现不同程度的漂浮;同时MTT实验结果表明,不同浓度的UA能抑制SGC-7901细胞的生长并呈浓度依赖性。结论:UA能够抑制SGC-7901细胞的生长,具有较强的抗肿瘤活性。

桦木酸对人胃癌SGC-7901细胞自噬的影响

通过不同梯度浓度的桦木酸处理SGC-7901细胞,研究桦木酸对细胞自噬相关基因表达的影响,从而确定桦木酸在胃癌细胞内与自噬的关联.将人胃癌SGC-7091细胞分为5组,其中3组设置桦木酸的浓度梯度分别为10,20,30mg/L,使用经典抗癌药物氟尿嘧啶(5-Fu)作为阳性对照组,使用0 mmol/L桦木酸为阴性对照组,每组3个复孔,处理细胞48 h,用q RT-PCR和Western blot方法检测桦木酸对人胃癌SGC-7091细胞自噬相关基因mRNA和蛋白表达的影响,使用免疫荧光法定位并检测SGC-7091细胞内的LC3蛋白.与阴性对照组相比,梯度桦木酸处理组的细胞中LC3-Ⅱ,Beclin 1mRNA和蛋白的表达均显著升高(P<0.01),LC3-Ⅰ蛋白的表达明显降低(P<0.05).同时激光共聚焦的结果显示高浓度桦木酸诱导LC3蛋白在细胞质内的聚集现象.在设置的梯度浓度范围内,桦木酸能诱导人胃癌SGC-7091细胞发生自噬,且呈剂量依赖性,浓度升高诱导效果也升高.

新藤黄酸对人胃癌SGC-7901细胞增殖抑制和诱导凋亡作用的研究

目的观察不同浓度新藤黄酸(gambogenic acid,GNA)对人胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响。方法倒置光学显微镜下观察不同浓度GNA处理SGC-7901细胞24h后细胞形态的变化;采用MTT法检测不同浓度(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0、16.0、32.0μmol/L)GNA处理24h后人胃癌SGC-7901细胞活力的变化;AnnexinⅤ-FITC/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白p53和Caspase-9的表达水平。结果 MTT检测结果表明,GNA对人胃癌SGC-7901细胞的生长和增殖有抑制作用,并随着GNA浓度的增加细胞活力明显下降。流式细胞仪检测结果提示,GNA诱导人胃癌SGC-7901细胞凋亡,随着GNA浓度增加,凋亡率逐渐增加。Western blot表明p53和Caspase-9蛋白表达水平呈浓度依赖性升高。结论 GNA能诱导人胃癌SGC-7901细胞的凋亡。

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞的抑制作用

采用体外细胞培养方法，研究共轭亚油酸（ＣＬＡ）对人胃腺癌细胞（ＳＧＣ－７９０１）生长的影响。ＣＬＡ的剂量分别为２５、５０、１００和２００μｍ ｏｌ／Ｌ，以乙醇为溶剂对照。结果表明：ＣＬＡ 能抑制ＳＧＣ－７９０１细胞的增殖、细胞核分裂、集落形成和细胞ＤＮＡ的合成。

共轭亚油酸对人胃腺癌细胞侵袭能力的影响及其作用机制

研究c9,t11-共轭亚油酸 (CLA)对人胃腺癌细胞 (SGC 790 1)侵袭能力的影响 ,探讨其抑制肿瘤转移的可能机理。用 0、2 5、5 0、10 0和 2 0 0 μmol LCLA处理细胞 2 4h后 ,分别用重组基底膜侵袭实验评价癌细胞侵袭能力 ;PAGE底物酶谱方法检测Ⅳ型胶原酶活性 ;RT PCR方法检测SGC 790 1细胞TIMP 1和TIMP 2mR NA表达。研究结果表明 :c9,t11 CLA处理后 ,SGC 790 1细胞侵袭重组基底膜的能力下降、SGC 790 1细胞培养上清中的Ⅳ型胶原酶活性降低、SGC 790 1细胞中TIMP 1和TIMP 2mRNA的表达增加。因此 ,c9,t11 CLA抑制SGC 790 1细胞侵袭重组基底膜 ,并且c9,t11 CLA的抗侵袭活性与降低肿瘤细胞培养上清中Ⅳ型胶原酶活性和诱导肿瘤细胞TIMP 1和TIMP

NF-kBP_(65)及Bcl-2蛋白在植酸诱导人胃癌细胞凋亡中的作用

目的:研究植酸对人胃癌SGC-7901细胞的凋亡诱导作用及其机制。方法:采用AO/EB荧光染色法、彗星实验观察植酸对SGC-7901细胞的凋亡诱导作用,Western blot法检测凋亡调控基因Bcl-2及NF-kBP65的表达。结果:荧光染色可见植酸组细胞核染色质成固缩状、串珠状或出现凋亡小体等典型的凋亡细胞形态;植酸组细胞出现了具有凋亡特征的彗星样改变,彗星细胞拖尾率随着植酸浓度的增加呈递增趋势。植酸组细胞中Bcl-2、NF-kB蛋白比对照组表达下降,且呈现剂量-反应关系。结论:植酸对SGC-7901细胞具有诱导凋亡作用,对NF-kB途径的抑制作用可能是其抗癌的机制之一。

全反式维甲酸增加胃癌细胞对放射的敏感性

目的:研究全反式维甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)对胃癌细胞SGC-7901存活率与放射敏感性的影响,并讨论其可能的机制。方法:MTT法检测细胞存活率;平板克隆形成实验和流式细胞术分别检测细胞的放射敏感性和细胞周期;实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测细胞中Bax、Bcl-2、survivin与NF-κB的m RNA表达。结果:ATRA可降低SGC-7901细胞存活率,当浓度到达8μmol/L时,抑制作用达到最大;ATRA联合X射线处理后,与单纯放射处理相比,平均致死剂量(D0)和准阈剂量(Dq)显著变小(P<0.05),且拟合的生存曲线明显下移;ATRA能显著降低放射诱导的细胞G_2/M期阻滞,下调SGC-7901细胞Bcl-2与survivin的m RNA表达(P<0.05),上调Bax与NF-κB的m RNA表达(P<0.05)。结论:ATRA能够增加胃癌细胞SGC-7901的凋亡及放射敏感性,可能与抑制细胞周期G_2/M期的阻滞作用、下调Bcl-2与survivin m RNA表达和上调NF-κB与Bax mRNA表达有关。

植酸对人胃癌细胞增殖抑制作用的体外实验

目的:研究植酸对人胃癌细胞的生长抑制作用及机制。方法:采用MTT实验、Hoechst33342荧光染色法观察不同剂量植酸对SGC-7901细胞增殖的影响,免疫组化法检测Bcl-2蛋白的表达。结果:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用,且存在剂量-效应关系。荧光染色可见,植酸作用组细胞出现典型的细胞核浓缩、边集、裂解的凋亡特征。植酸处理组细胞中Bcl-2蛋白表达较对照组降低。结论:植酸对SGC-7901细胞增殖具有抑制作用和诱导凋亡作用。