体外受精-胚胎移植在多囊卵巢综合征不孕患者的临床应用

【目的】探讨体外受精-胚胎移植(IVF-ET)或单精子卵胞浆内注射(ICSI)对多囊卵巢综合征(P-COS)合并不孕的治疗效果。【方法】对2003年5月至2006年5月在本院行IVF-ET或ICSI的PCOS不孕患者作回顾性分析。观察组(A组)PCOS不孕患者31例,对照组(B组)输卵管性不孕患者287例,对两组促性腺激素(Gn)使用的时间和剂量、HCG使用当日E2水平、获卵数、受精率、胚胎数以及临床妊娠率、流产率和卵巢过度刺激综合征(OHSS)的发生率作比较。【结果】观察组Gn使用时间和用药剂量、HCG日E2水平、获卵数、胚胎数、受精率、妊娠率与对照组差异均无显著性,观察组中流产率较高,而OHSS发生率较低。【结论】IVF-ET是PCOS不孕患者的一种有效治疗方法,但流产率较输卵管性不孕高,OHSS的发生经过积极预防处理后能得到有效控制。

多剂量促性腺激素释放激素拮抗剂在体外受精—胚胎移植促超排卵中的应用效果

目的探讨促性腺激素释放激素拮抗剂(GnRH-Ant)改良多剂量应用方案在体外受精-胚胎移植(IVF-ET)促超排卵中的使用效果。方法回顾性比较分析本中心2006年1～4月接受IVF-ET助孕治疗的患者中采用GnRH-Ant改良多剂量方案应用于26例年龄偏大的患者和采用促性腺激素释放激素激动剂(GnRH-a)长方案降调节方案应用于患者41例,观察其临床效果。结果两组促性腺激素的使用天数、受精率、优胚数、HCG日内膜厚度和E2值、流产率、妊娠率分别为(8.58±1.84)d和(7.71±2.06)d、88.17±17.96%和88.91±14.55%、(3.23±1.48)个和(3.78±2.31)个、(9.81±1.79)mm和(10.37±1.55)mm、(7060.27±4602.02)pmol/L和(7481.85±3852.84)pmol/L、11.54%和14.63%、50%和39.02%,两组之间比较无显著性差异;两组患者年龄、不孕年限、促性腺激素使用量、HCG日LH值、获卵数、MII卵子数分别为(34.73±15.46)和(28.76±3.08)岁、(6.54±4.11)和(4.2±2.08)年、(34.73±15.46)支和(19.32±10.45)支、(3.14±3.26)IU/L和(1.21±1.21)IU/L、(6.77±3.09)个和(9.66±3.58)个、6.23±2.79和8.88±3.60个,两组之间比较有显著性差异。结论GnRH-Ant联合促性腺激素促超排卵方案较GnRH-a长方案同样有效,尤其对于年龄较大患者比较适用,并可减轻患者的费用。

体外受精-胚胎移植前输卵管积水处理方式探讨

【目的】探讨输卵管积水不同处理方式对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)结局的影响。【方法】因输卵管积水致不孕147例,共治疗155个周期,按输卵管积水的处理方法分为5组。A组:22个周期,输卵管积水未处理,直接行IVF-ET;B组:21个周期,术前切除积水输卵管;C组:22个周期,术前行输卵管伞端造口术;D组:19个周期,IVF-ET开始后口服强力霉素100 mg,每日两次10 d,取卵日抽吸输卵管积水,胚胎移植前一日发现宫腔有积液者立即行宫腔积液抽吸;E组:对照组,71个周期,输卵管阻塞无积水。【结果】各组间受精率、卵裂率、优质胚胎率、移植胚胎数比较差异均无显著性(P>0.05)。获卵数、种植率及临床妊娠率A组最低,与其余组比较差异有统计学意义(P<0.05),而其余四组间差异无显著性(P>0.05)。异位妊娠率及流产率A组最高,其次为D组、C组;与B组、E组比较差异有显著性(P<0.05)。【结论】输卵管积水对IVF-ET的结局有负面影响,适当的处理有利于改善IVF-ET结局。

D3选择性单胚新鲜移植可行性探讨

目的探讨新鲜周期第3d(D3)选择性单胚胎移植的可行性。方法回顾性分析2014年9月1日-2016年8月31日年龄<38岁在我院生殖中心予常规IVF/ICSI助孕治疗后至少有1个优质胚胎的D3新鲜移植患者。按移植胚胎数和胚胎质量分为单优质胚胎移植组(A组,268例)、双优质胚胎移植组(B组,3081例)和单优质胚胎搭配非优质胚胎移植组(C组,1435例)。分别比较A组与B组、A组与C组的临床妊娠结局。结果 A组较B组临床妊娠率显著降低(53.36%vs 73.64%,P<0.001);但A组胚胎种植率与B组相比无显著性差异(54.10%vs 55.13%,P>0.05);而A组多胎率却较B组显著降低(2.24%vs 43.06%,P<0.001)。与C组相比,A组临床妊娠率也显著降低(53.36%vs 69.83%,P<0.001);A组胚胎种植率较C组有所提高,但差异无统计学意义(54.10%vs 48.82%,P>0.05);A组多胎率较C组也显著降低(2.24%vs 34.93%,P<0.001)。结论选择D3优质胚胎进行单胚胎新鲜移植能获得与双胚胎移植类似的胚胎种植率,而且可以明显降低多胎发生率。D3选择性单胚新鲜移植是可行的。

抗氧化剂左卡尼汀在IVF中的应用

目的:探讨抗氧化剂左卡尼汀在IVF-ET治疗中的临床疗效。方法:选择2011年5月至2011年9月在我院生殖中心初次行IVF治疗者130例,随机分为两组。左卡尼汀(L-carnitine)用药组为研究组(57例),非用药组为对照组(73例)。比较两组的临床结局情况。结果:研究组在HCG日的E2水平、受精数、卵裂数、优质胚胎数、可移植胚胎数均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而获卵数、生化妊娠率、胚胎种植率、临床妊娠率、流产率无显著区别(P>0.05)。研究组中年龄<35岁者与对照组年龄相匹配者相比,HCG日的E2水平、受精数、卵裂数、优质胚胎数、可移植胚胎数差异均有统计学意义(P<0.05),年龄≥35岁者无差异(P>0.05)。结论:左卡尼汀在IVF治疗中能提高部分患者卵子质量,促进卵子成熟,有利于早期胚胎的形成及发育。年龄<35岁者明显。

大鼠胚胎下丘脑垂体部连续切片真彩色体重建

目的使用真实颜色体重建的方法,观察胚龄14.5d大鼠下丘脑垂体部各结构的三维形态及相互空间位置关系。方法在获得大鼠胚胎标本连续切片的数字化图像数据集后,于重建软件中对图像的色彩通道及亮度通道进行融合,对下丘脑垂体区域进行三维体重建。结果三维体重建结果为真实HE染色结果,无结构区域呈透明状,可自由观察下丘脑垂体部及周围结构的相互位置关系。结论对于下丘脑垂体部这样空间结构复杂的区域,应用真实颜色体重建的方法制作的三维图像更符合观察习惯,结构更加容易辨认。

D3选择性单胚胎移植的围产结局分析

目的探讨新鲜周期D3选择性单胚胎移植的围产结局。方法回顾性研究2014年1月-2016年12月年龄<38岁在我院生殖中心予常规IVF/ICSI助孕治疗后移植新鲜D3优质胚胎的的患者。按移植胚胎数分为单优胚移植组(A组,470例)与双优胚移植组(B组,4545例)。分析比较两组的临床妊娠结局及产科分娩结局。结果 A组临床妊娠率、活产率均较B组显著降低(52.98% vs 72.78%,41.28%vs 62.95%,P<0.001);而A组胚胎种植率与B组相比无统计学差异(52.98%vs 54.60%,P>0.05);A组较B组多胎妊娠率显著下降(3.61% vs 43.83%,P<0.001)。A组早产率和早期早产率分别为7.22%和0%,均显著低于B组23.59%和2.48%(P<0.001,P=0.026)。A组低体重儿出生率和极低体重儿出生率分别为6.50%和0%,均显著低于B组29.92%和2.71%(P<0.001,P=0.018)。结论 D3选择性单胚胎新鲜移植具有与双胚胎移植相似的胚胎种植率,而且可以明显降低多胎妊娠率,同时可以获得更好的产科分娩结局。

离体培养鸡胚脑神经细胞的超微结构研究

本文应用扫描电镜和透射电镜,观察离体培养鸡胚脑细胞的超微结构,侧重描述了神经细胞及其突起间突触连接的形态特征。培养4天后,分化发育成为双极和多极的神经细胞及其突起,彼此已连成网络,并出现初期的突触连接,还见有突触前袋样结构和桥粒样细胞连接。培养7天后,神经细胞之间的轴-树、轴-体和轴-轴等类型的突触连接数目增多,透明突触囊泡密集,结构更完善。培养10天和14天后,神经细胞之间的突触连接仍较多,但已出现神经细胞变性,纤维性神经胶质细胞明显增多。

胚胎分割,分割胚的体外发育和移植

用玻璃微针徒手切割小鼠早期胚胎,分割的裸半胚在体外培养条件下对其体外发育率,发育阶段及胚泡大小进行观察。本实验徒手切割小鼠2细胞和8细胞阶段胚胎342枚,切割后成活的半胚为411枚,半胚成活率为60.08％(411/682)。2细胞和8细胞阶段切割的半胚成活率分别为86.3％(209/242)和45.7％(202/442),两者差异极显著(P<0.01),2细胞阶段切割成活率高于8细胞阶段。半胚体外培养24h,2细胞和8细胞切割的半胚发育率分别为78.14％(118/151)和90.14％(150/166)差异极显著(P<0.01),8细胞期半胚发育率明显高于2细胞期。半胚体外培养发育到胚泡期,由半胚发育成的胚泡其直径为80～100μm。与对照组相近。选择发育正常的胚泡,移植到假孕受体子宫,获得由半胚发育成的仔鼠8只。

IVF/ICSI-ET/FET后自然流产的胚胎染色体异常的相关因素分析

目的探讨体外受精(in vitro fertilization,IVF)、卵泡浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injection,ICSI)后新鲜胚胎移植(embryo-transfer,ET)及冷冻胚胎移植(frozen embryo transfer,FET)后自然流产的胚胎染色体异常的相关危险因素。方法选择2008年10月至2012年4月于南方医科大学南方医院生殖中心行IVF/ICSI-ET/FET后发生自然流产的夫妇115例,根据胚胎染色体结果分为异常组(74例)及正常组(41例),比较两组的一般资料及助孕相关指标间的差异并探讨胚胎染色体异常的相关危险因素。结果IVF/ICSI-ET/FET中自然流产绒毛染色体异常率为64.3%,以非整倍体率(91.9%)为主。胚胎染色体异常组的女性年龄显著高于正常组[(34.3±4.5)vs(32.2±4.5),P<0.05],促性腺激素(Gonadotrophin,Gn)总量显著高于后者[(2935.5±1418.5)vs(2398±1014.9),P<0.05],男性年龄亦高于后者[(37.1±4.9)vs(35.3±5.2),P>0.05],但差异无统计学意义。正常组的男女性别比为1∶2.4,女胎比例显著高于异常组(P<0.05)。IVF与ICSI的胚胎染色体异常类型差异无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析提示仅女性年龄为胚胎染色体异常的独立危险因素(OR:1.008~1.204)。结论胚胎染色体异常是IVF/ICS-ET/FET后自然流产的主要原因,但细胞培养法可能会降低胚胎染色体异常的检出率。女性年龄是胚胎染色体异常的独立危险因素,而IVF/ICS-ET/FET治疗并不增加胚胎染色体异常的风险。

三倍体葡萄胚培养、倍性鉴定及育种进展

综述了胚培养技术在三倍体育种上的应用 ,包括不同杂交组合、培养基的种类、培养时期及激素等的影响以及三倍体的鉴定方法和已育成三倍体无核葡萄新品种的特征特性。

卵母细胞质内单精子注射的胚胎形态与临床结局分析

目的 研究卵母细胞浆内单精子注射（ＩＣＳＩ）技术治疗不育症的胚胎结局。方洁 对我中心１９９９年１月至２００１年 ３月进行的２９１个ＩＣＳＩ治疗周期（实验组）和３５２个常规体外受精（ＩＶＦ）周期（对照组）进行回顾性分析。结果（１）实验 组和对照组的受精率分别为７５．７％和７３．２％，差异不显著（Ｐ＞０．０５）；两组的卵溶解率分别为１０．６％和７．９％，实验组稍 高，但差异不显著（Ｐ＝０．２３８）。（２）实验组和对照组超过２０％碎片的胚胎率分别为４１．２％和３５．６％，两组的差异不显著 （Ｐ＝０．１３７）；两组的囊胚形成率分别为４１．３％和５５．８％，实验组显著低于对照组（Ｐ＜０．００１）。（３）实验组的临床妊娠率为 ３４．７％，略低于对照组３９．９％的结果，但差异不具显著性（Ｐ＝１．７４４）；实验组的宫内胚胎停育和自然流产率，略低于对照 组，但差异亦不具显著性（８．９％ ｖｓ１３．４％，Ｐ＝０．０７９）。结论 实验组可获得较稳定的临床妊娠，是治疗男性不育症等的一 种有效的手段。

干扰素调节因子2结合蛋白2在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达谱分析

目的·探究干扰素调节因子2结合蛋白2(interferon regulatory factor 2 binding protein 2,irf2bp2)基因的2个横向同源物(irf2bp2a和irf2bp2b)在斑马鱼胚胎早期发育过程中的表达异同。方法·选取发育不同时间点(胚胎期和幼虫期)的斑马鱼胚胎,通过mRNA全胚胎原位杂交技术明确irf2bp2a和irf2bp2b的时空表达谱,并通过实时定量PCR检测其表达水平。结果·irf2bp2a和irf2bp2b在神经系统、眼及胸鳍等部位都有着类似的高表达,而各自在肝脏或斯坦尼小体出现特异性表达,提示其在斑马鱼胚胎早期发育过程中具有独特的表达模式。实时定量PCR检测结果显示irf2bp2a和irf2bp2b在胚胎发育早期都有表达,但表达水平有所不同。结论·尽管斑马鱼irf2bp2a和irf2bp2b这2个横向同源物具有高度保守的功能结构域,但二者在胚胎早期发育过程中的表达谱不尽相同,提示其功能并不完全冗余。

磷酸化-JNK1/2在高温处理后的鼠胚心脏的表达变化

目的探讨p-JNK1/2高温处理后金黄地鼠胚胎心脏之表达变化。方法将金黄地鼠孕鼠在受孕8d时置42℃水浴20min,在高温处理后12h,24h,36h,48h剖腹取胎,制备为石蜡切片。利用免疫荧光染色技术,观察心脏正常发育与异常分化过程中磷酸化JNK(p-JNK)的表达。结果 高温处理后12h,24h,36h,48h,实验组鼠胚心脏p-JNK1/2的表达较对照组均减弱,其中36h和48h两个时间点差异显著。结论 高温可致金黄地鼠胚胎心脏磷酸化JNK1/2(p-JNK1/2)表达减低,p-JNK1/2对心脏正常发育具有重要作用。

第七周人胚主要结构发育的研究

以组织学、组织化学PAS法、ATP酶法观察7周人胚标本的连续切片。7周胚胎体表可见脑泡、骨骼,头皮下可见皮下毛细血管丛。头、心脏、肝脏相对体积最大。软骨、消化和呼吸道上皮,血管上皮和平滑肌、心肌PAS阳性,肝细胞弱阳性。ATP酶除神经管周围间充质细胞阳性外,其余均阴性。

稻米胚重相关性状QTL分析

利用米粒胚重差异显著的广东早籼品种窄叶青 8号 (ZYQ8)和北方粳稻品种京系 17(JX17) ,以及由它们构建的加倍单倍体 (DH)群体 12 7个株系 ,对糙米重、胚乳重、胚重和胚重率 4个性状进行了评价与QTL分析。 4个性状表现型均为连续分布 ,且都存在一定数量的双向超亲遗传类型 ,受多基因控制。共检测到 13个影响 4个性状的QTL ,分布于第 2、3、4、6、9、10和 12染色体上 ,其中糙米重 4个、胚乳重 5个、胚重 2个和胚重率 2个。控制糙米重的 4个QTL与控制胚乳重的QTL位于相同的区间 ,说明糙米重与胚乳重之间存在着密切的遗传关系。胚重qEW 3和qEW 4的LOD值分别为2 89和 3 34,对表型变异的贡献率为 13 8%和 14 1%。qEW 3上来自JX17的等位基因使胚重增加 ,而qEW 4的增效等位基因来自ZYQ 8。在第 4、9染色体上 ,各检测到胚重率的QTL ,其LOD值分别为 2 92和 2 6 3,贡献率为 10 6 %和11 2 % ,它们的增效等位基因均来自ZYQ 8。分析表明 ,这些QTL与控制巨大胚ge基因不在同一条染色体上。

一类新药尖吻蝮蛇凝血酶对SD大鼠生育力和早期胚胎发育的影响

目的观察尖吻蝮蛇凝血酶对SD大鼠生育力与早期胚胎发育的影响,为临床用药提供依据。方法对雌雄动物由交配前到交配期直至胚胎着床,经静脉注射给予不同剂量尖吻蝮蛇凝血酶(0.1、0.2、0.4 U·kg^(-1))。结果尖吻蝮蛇凝血酶对雌性、雄性SD大鼠生育力与早期胚胎发育无明显毒性和干扰作用。结论尖吻蝮蛇凝血酶SD大鼠生育力与早期胚胎发育毒性试验的安全剂量为0.4 U·kg^(-1)。

全胚冷冻后首次冻融胚胎移植与新鲜胚胎移植的临床结局分析

目的:探讨全胚冷冻后首次冻融胚胎移植(FET)与新鲜胚胎移植周期的临床结局及应用价值。方法:回顾性分析2011年1月~2013年12月在本中心行体外受精/卵胞浆内单精子注射-胚胎移植(IVF/ICSI-ET)患者的临床资料,比较刺激周期行新鲜胚胎移植(鲜胚移植组,324例)和全部胚胎冷冻后再行FET(FET组,179例)的临床妊娠率、种植率、活产率、异位妊娠发生率、流产率以及卵巢过度刺激综合征(OHSS)发生率。结果:两组患者的年龄、不孕年限、基础(月经第3天)卵泡刺激素(FSH)水平、促性腺激素(Gn)用药起始量、促排卵时间、受精率、2PN率、卵裂率、优质胚胎率及移植胚胎数均无统计学差异(P>0.05);FET组Gn用药总量低于鲜胚移植组(P<0.05),hCG注射日雌二醇(E2)水平、孕酮(P)水平、卵泡数和获卵数均较鲜胚移植组显著升高(P<0.05);FET组的胚胎种植率(37.23%)和临床妊娠率(59.22%)均高于鲜胚移植组(29.56%,49.07%),差异有统计学意义(P<0.05);两组的活产率、多胎妊娠率、异位妊娠率和流产率差异无统计学意义(P>0.05);FET组具有较低的OHSS发生率(0.56%,P<0.05)。结论:对于OHSS高危患者,全胚冷冻后行FET可提高临床妊娠率和胚胎种植率,且能有效避免OHSS发生,获得较满意的临床结局。

农区绵羊春秋两季超数排卵及胚胎移植效果分析

为探明农区绵羊春秋两季母羊同期发情超数排卵及胚胎移植效果,采用2种超排方案(方案1:海绵栓+FSH+PMSG+A_(3);方案2:海绵栓+FSH+PMSG+LH)对萨福克母羊进行同期发情和超数排卵处理,筛选出较优方案,再用较优方案在春秋两季对萨福克羊和杜泊羊进行超排,并比较鲜胚和冻胚的胚胎移植效果。结果表明,方案1母羊只均冲胚数(6.30枚±4.75枚)显著优于方案2(4.98枚±3.97枚)(P<0.05)。通过优选方案1进行超数排卵,春季萨福克羊只均生产可用胚胎3.48枚±3.50枚,黑头杜泊羊2.58枚±2.36枚,白头杜泊羊2.37枚±2.01枚,两品种间差异不显著(P>0.05);而秋季萨福克羊只均生产可用胚胎5.57枚±4.21枚,黑头杜泊羊7.25枚±5.02枚,白头杜泊羊8.05枚±3.58枚,两品种间差异显著(P<0.05)。春秋两季鲜胚移植受胎率分别为63.64%和67.48%,冷冻胚胎春秋季移植受胎率分别为56.09%和48.35%,鲜胚或冷冻胚胎移植受胎率在春秋季无显著差异(P>0.05)。综上所述,在本试验条件下,母羊秋季的超数排卵效果优于春季;杜泊羊生产的可用胚胎数高于萨福克羊;鲜胚和冷冻胚胎的移植效果不受季节影响。

繁殖季节胚胎移植技术在规模化羊场的应用研究

为评价繁殖季节胚胎移植技术在规模化羊场的应用效果,对萨福克羊和杜泊羊2个品种在繁殖季节超数排卵和胚胎移植情况进行了统计分析。结果表明,试验羊经过同期发情、超数排卵后,黑头杜泊羊生产可用胚胎数极显著高于萨福克羊(P<0.01),但其不可用胚胎占比较高(22.72%);秋季胚胎移植母羊受胎率极显著高于冬季(P<0.01),2056只受体母羊的平均受胎率达59.19%。综上所述,黑头杜泊羊超数排卵后的胚胎生产量高于萨福克羊,但可用胚胎比例还有待于提高,同时,秋季胚胎移植可提高母羊受胎率。